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1、消化道平滑肌第1页,共28页,编辑于2022年,星期一【实验目的实验目的】v观察哺乳动物胃肠平滑肌的生理特性以及影响观察哺乳动物胃肠平滑肌的生理特性以及影响因素。因素。v药物量效关系及拮抗药物特性。药物量效关系及拮抗药物特性。v学习离体平滑肌基本实验方法。学习离体平滑肌基本实验方法。第2页,共28页,编辑于2022年,星期一1.消化道平滑肌的特性消化道平滑肌的特性 兴奋性较低,收缩缓慢;兴奋性较低,收缩缓慢;具有一定紧张性;具有一定紧张性;自动节律性、较大的伸展性;自动节律性、较大的伸展性;对牵张、温度和化学刺激比较敏感。对牵张、温度和化学刺激比较敏感。离体离体灌流:仍保持节律性活动,灌流:仍
2、保持节律性活动,经典模型:神经经典模型:神经-体液调节、刺激的影响。体液调节、刺激的影响。【实验原理实验原理】第3页,共28页,编辑于2022年,星期一2.药物对消化道平滑肌的影响:药物对消化道平滑肌的影响:ACh M受体受体 兴奋,收缩;兴奋,收缩;量量-效关系:剂量依赖性。效关系:剂量依赖性。阿托品阻断阿托品阻断M受体受体 平滑肌舒张;平滑肌舒张;解除痉挛,缓解腹痛等。(拮抗效应)解除痉挛,缓解腹痛等。(拮抗效应)第4页,共28页,编辑于2022年,星期一【离体小肠平滑肌的实验条件离体小肠平滑肌的实验条件】v恒温恒温:38 v台式液台式液:适于哺乳类小肠:适于哺乳类小肠v氧气氧气:气泡单一
3、连续气泡单一连续实验中必须时刻满足这实验中必须时刻满足这3个条件个条件第5页,共28页,编辑于2022年,星期一【实验动物实验动物】兔兔:十二指肠十二指肠,豚鼠:豚鼠:回肠回肠第6页,共28页,编辑于2022年,星期一【实验器材实验器材】BL-420E实验系统;离体平滑肌灌流装置;实验系统;离体平滑肌灌流装置;台氏液、无钙台氏液,台氏液、无钙台氏液,HCl,Ach,肾上腺素肾上腺素(Adr)、阿托品阿托品(atr)。第7页,共28页,编辑于2022年,星期一恒温平滑肌灌流装置恒温平滑肌灌流装置麦氏浴槽麦氏浴槽第8页,共28页,编辑于2022年,星期一第9页,共28页,编辑于2022年,星期一家
4、兔十二指肠家兔十二指肠(2cm)第10页,共28页,编辑于2022年,星期一实验一实验一 消化道平滑肌生理特性观察消化道平滑肌生理特性观察一一.恒温平滑肌灌流装置恒温平滑肌灌流装置 1.恒温、台式液恒温、台式液15ml、通空气。、通空气。2.十二指肠固定,连接换能器,预张力。十二指肠固定,连接换能器,预张力。3.BL-420E系统:系统:实验项目实验项目/消化实验消化实验/消化道平滑肌生理特性。消化道平滑肌生理特性。4.稳定灌流。稳定灌流。第11页,共28页,编辑于2022年,星期一二二.实验项目实验项目 1.温度作用温度作用换换15ml室温台氏液室温台氏液 38台氏液台氏液正常平滑肌收缩曲线
5、(正常平滑肌收缩曲线(38)。实验一实验一 消化道平滑肌生理特性观察消化道平滑肌生理特性观察第12页,共28页,编辑于2022年,星期一2.1:100,000 Ach 2滴滴,观察记录,冲洗,观察记录,冲洗3次。次。3.1:10,000 Adr 2滴滴,观察记录,冲洗,观察记录,冲洗3次。次。4.1N HCl 2滴滴,观察记录,冲洗,观察记录,冲洗3次。次。无钙液冲洗无钙液冲洗3次,次,无钙液,观察记录,不冲。无钙液,观察记录,不冲。6.1:100,000 Ach 2滴滴,观察,观察1min后,含钙台氏液冲后,含钙台氏液冲洗洗3次。次。7.1:100,000 Ach 2滴滴,观察对,观察对Ac
6、h的恢复。的恢复。实验一实验一 消化道平滑肌生理特性观察消化道平滑肌生理特性观察第13页,共28页,编辑于2022年,星期一 观察项目 收缩幅度 温度改变 ACh Adr HCl 无钙液 无钙液ACh 台氏液(复钙)台氏液ACh表表1.影响小肠平滑肌活动的因素影响小肠平滑肌活动的因素实验一实验一 消化道平滑肌生理特性观察消化道平滑肌生理特性观察收缩频率收缩频率第14页,共28页,编辑于2022年,星期一 观察项目 收缩频率 收缩幅度38台氏液正常 正常室温台氏液减少 降低乙酰胆碱增加 增加肾上腺素减少 降低无钙台氏液消失 消失无钙液ACh无/很弱 无/很弱台氏液(复钙)恢复 恢复台氏液ACh增
7、加 增加表表2.预期实验结果预期实验结果实验一实验一 消化道平滑肌生理特性观察消化道平滑肌生理特性观察第15页,共28页,编辑于2022年,星期一实验一实验一 消化道平滑肌生理特性观察消化道平滑肌生理特性观察第16页,共28页,编辑于2022年,星期一实验一实验一 消化道平滑肌生理特性观察消化道平滑肌生理特性观察第17页,共28页,编辑于2022年,星期一实验一实验一 消化道平滑肌生理特性观察消化道平滑肌生理特性观察第18页,共28页,编辑于2022年,星期一实验二实验二 药物量药物量-效关系效关系 1.豚鼠处死、取一段豚鼠处死、取一段2cm回肠,台氏液冲洗,回肠,台氏液冲洗,2.固定,固定,
8、38,台氏液,台氏液15ml,通气。,通气。3.BL-420E系统:系统:实验项目实验项目/消化实验消化实验/消化道平滑肌生理特性。消化道平滑肌生理特性。4.平稳灌流平稳灌流5-10分钟,分钟,一一.恒温平滑肌灌流装置恒温平滑肌灌流装置二二.ACh量量-效曲线:效曲线:5.按表按表3顺序加顺序加ACh。6.记录每次记录每次ACh浓度,对应张力。浓度,对应张力。第19页,共28页,编辑于2022年,星期一三三.阿托品对阿托品对ACh的拮抗效应:的拮抗效应:6.加入加入10-4M 阿托品阿托品 0.05ml,作用,作用2min。7.重复步骤重复步骤5、6。实验二实验二 药物量药物量-效关系效关系第
9、20页,共28页,编辑于2022年,星期一 次序次序 浓度浓度 剂量剂量(ml)终浓度终浓度(mol/L)1 10-6 0.15 10-82 10-5 0.15 10-73 10-4 0.15 10-64 10-3 0.15 10-55 10-2 0.15 10-4表表3.ACh的给药剂量和累积浓度的给药剂量和累积浓度实验二实验二 药物量药物量-效关系效关系第21页,共28页,编辑于2022年,星期一【注意事项注意事项】v固定时尽量减少小肠平滑肌的损伤固定时尽量减少小肠平滑肌的损伤v每每次次实实验验效效果果明明显显后后,立立即即更更换换浴浴槽槽内内的台氏液,并冲洗的台氏液,并冲洗23次次v浴槽
10、内温度应保持在浴槽内温度应保持在38v量量效效关关系系中中依依次次递递加加Ach时时必必须须保保证证在在高高峰下降前峰下降前第22页,共28页,编辑于2022年,星期一第23页,共28页,编辑于2022年,星期一第24页,共28页,编辑于2022年,星期一1.温度改变对小肠平滑肌的影响?为什么?温度改变对小肠平滑肌的影响?为什么?2.ACh 对小肠平滑肌活动的影响?为什么?对小肠平滑肌活动的影响?为什么?3.Adr 对小肠平滑肌活动的影响?为什么?对小肠平滑肌活动的影响?为什么?4.HCl 对小肠平滑肌活动的影响?为什么?对小肠平滑肌活动的影响?为什么?5.无无Ca2+台氏液的作用?台氏液的作
11、用?6.ACh作用的量作用的量-效关系特点?效关系特点?7.阿托品对阿托品对ACh的拮抗效应有什么特点?的拮抗效应有什么特点?讨论分析讨论分析第25页,共28页,编辑于2022年,星期一 CM(钙调蛋白)(钙调蛋白)Ca2+内流放内流放 细胞内细胞内Ca2+激活激活 4Ca2+-CM MLCK(肌球蛋白轻链激酶肌球蛋白轻链激酶)MLC-磷酸化磷酸化 横桥横桥-肌丝滑动肌丝滑动 肌肉收缩。肌肉收缩。平滑肌兴奋平滑肌兴奋-收缩作用收缩作用第26页,共28页,编辑于2022年,星期一竞争性拮抗作用竞争性拮抗作用拮抗药对激动药量效曲线的影响拮抗药对激动药量效曲线的影响0.10.110101001001.01.00.50.5Emax率率(%)A0.10.110101001001.01.00.50.5A非竞争性拮抗作用非竞争性拮抗作用第27页,共28页,编辑于2022年,星期一受体占领学说受体占领学说第28页,共28页,编辑于2022年,星期一
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