药物的杂质检查.pptx

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1、第一节第一节 杂质及其限量杂质及其限量一、药物的纯度一、药物的纯度二、杂质的来源二、杂质的来源三、杂质的分类三、杂质的分类四、杂质的限量四、杂质的限量第1页/共112页一、药物的纯度一、药物的纯度1.1.药物纯度：药物的纯度是指药物的纯净程度，药物纯度：药物的纯度是指药物的纯净程度，反映了药物质量的优劣。反映了药物质量的优劣。2.2.杂质：药物中存在的无治疗作用的或影响药物杂质：药物中存在的无治疗作用的或影响药物稳定性和疗效、甚至对人体健康有害的物质。稳定性和疗效、甚至对人体健康有害的物质。3.3.药物纯度的评价：药物纯度的评价：应把药物的性状、理化常数、应把药物的性状、理化常数、杂质检查杂质

2、检查、含量、含量测定等作为一个有联系的整体来评价药物的纯测定等作为一个有联系的整体来评价药物的纯度。度。第2页/共112页4.4.药物的纯度与化学试剂的纯度药物的纯度与化学试剂的纯度化学试剂的杂质限量是从试剂使用时杂质可能引起的化学变化对试剂使用目的的化学试剂的杂质限量是从试剂使用时杂质可能引起的化学变化对试剂使用目的的影响加以规定，一步影响实际的适用范围和目的确定；试剂有很多等级，如基准影响加以规定，一步影响实际的适用范围和目的确定；试剂有很多等级，如基准试剂、优级纯（试剂、优级纯（GRGR）、分析纯（）、分析纯（ARAR）、化学纯（）、化学纯（CPCP）、色谱纯、光谱纯。）、色谱纯、光谱纯

3、。药物的纯度主要从药物安全、有效角度考虑，杂质限量的确定要考虑杂质的生理药物的纯度主要从药物安全、有效角度考虑，杂质限量的确定要考虑杂质的生理作用核对药物稳定性的影响，药品只有两个等级：合格或不合格。作用核对药物稳定性的影响，药品只有两个等级：合格或不合格。第3页/共112页二、杂质的来源二、杂质的来源生产过程生产过程:贮存运输过程：贮存运输过程：（1 1）原料、反应中间体及副产物）原料、反应中间体及副产物 （2 2）试剂、溶剂、催化剂类）试剂、溶剂、催化剂类 （3 3）生产中所用金属器皿、装置以）生产中所用金属器皿、装置以及其他不耐酸、碱的金属工具所带来及其他不耐酸、碱的金属工具所带来的杂质

4、的杂质水解、氧化、分解、异构化、晶形转变、水解、氧化、分解、异构化、晶形转变、聚合、潮解和发霉等聚合、潮解和发霉等第4页/共112页三、杂质的分类三、杂质的分类1.按来源分为按来源分为：杂质杂质一般杂质：自然界广泛存在，在多数药物一般杂质：自然界广泛存在，在多数药物的生产贮存中易引入的杂质，如的生产贮存中易引入的杂质，如ClCl-、SOSO4 4 2-2-、水份、砷盐、重金属、有机溶剂等。、水份、砷盐、重金属、有机溶剂等。一般杂质其检查方法收载在药典的附录中。一般杂质其检查方法收载在药典的附录中。特殊杂质：指在特定药物的生产和贮存中特殊杂质：指在特定药物的生产和贮存中引入的杂质，这类杂质随药物

5、不同而不同，引入的杂质，这类杂质随药物不同而不同，如阿斯匹林中游离的水杨酸。如阿斯匹林中游离的水杨酸。第5页/共112页按来源还可将杂质分为：工艺杂质工艺杂质降解产物降解产物从反应物和试剂中带入的杂质从反应物和试剂中带入的杂质第6页/共112页2.按理化性质分：按理化性质分：SFDA、ICH、FDA采用这种分类采用这种分类无机杂质无机杂质有机杂质有机杂质溶剂残留溶剂残留第7页/共112页无机杂质：可能来源于生产过程，如使用的仪器、无机杂质：可能来源于生产过程，如使用的仪器、原料（如砷、铅等）、干燥剂和过滤辅助器等，原料（如砷、铅等）、干燥剂和过滤辅助器等，反应试剂、配位体、催化剂、重金属、其他

6、残反应试剂、配位体、催化剂、重金属、其他残留的金属、无机盐、助滤剂、活性炭等。一般留的金属、无机盐、助滤剂、活性炭等。一般是已知的和确定的。主要影响药物稳定性并能是已知的和确定的。主要影响药物稳定性并能反映工艺本身的情况。反映工艺本身的情况。有机杂质：可能在生产或贮存中引入，这些杂质有机杂质：可能在生产或贮存中引入，这些杂质可能是确定的或不确定的、挥发性或非挥发性可能是确定的或不确定的、挥发性或非挥发性的，包括起始物、副产物、中间体、降解产物、的，包括起始物、副产物、中间体、降解产物、试剂、配位体、催化剂；由于化学结构与活性试剂、配位体、催化剂；由于化学结构与活性成分类似或有渊源关系，又可称之

7、为有关物质。成分类似或有渊源关系，又可称之为有关物质。溶剂残留：来源于生产过程，一般具有已知毒性。溶剂残留：来源于生产过程，一般具有已知毒性。第8页/共112页3.按毒性可分为：按毒性可分为：信号杂质信号杂质 指本身一般无害指本身一般无害,但其含量多少可反映药但其含量多少可反映药物纯度水平物纯度水平,指示生产工艺是否合理指示生产工艺是否合理.如：氯化物、硫酸盐等如：氯化物、硫酸盐等.毒性毒性杂质杂质 对人体有毒害的杂质。在质量标准中严加对人体有毒害的杂质。在质量标准中严加控制控制,以保证用药安全以保证用药安全.如：重金属、砷盐、氰化物等如：重金属、砷盐、氰化物等.第9页/共112页四、杂质的限

8、量四、杂质的限量在不对人体有害、不影响疗效的情况下，允许在不对人体有害、不影响疗效的情况下，允许药物中存在一定量的杂质。药物中存在一定量的杂质。1 1、杂质限量：药物中含杂质的最大允许量，、杂质限量：药物中含杂质的最大允许量，用用“%”或或“ppmppm”表示。表示。2 2、杂质限量的控制法：、杂质限量的控制法：药物中的杂质大多不测含量，只是检查杂质是药物中的杂质大多不测含量，只是检查杂质是否超标，这种方法叫否超标，这种方法叫杂质限量检查法杂质限量检查法。多采。多采用对照法，灵敏度法，比较法。用对照法，灵敏度法，比较法。第10页/共112页限量检查法限量检查法定量测量法定量测量法对照法对照法灵

9、敏度法灵敏度法比较法比较法即：即：第11页/共112页 （1 1）对照法：用已知杂质对照品按）对照法：用已知杂质对照品按最大限量最大限量要求配成对照液，与供试品溶液要求配成对照液，与供试品溶液平行平行试验试验，比较结果，判定是否杂质超标。，比较结果，判定是否杂质超标。供试液 供试液 对照液 相同条件 反应 反应 下反应 比较 供试液 对照液 对照液 反应 反应 合格不合格第12页/共112页单位：单位：C Cg/mlg/ml V V mlml S Sg g有关计算第13页/共112页例例1 1：检检查查葡葡萄萄糖糖中中的的重重金金属属。取取葡葡萄萄糖糖4.0g4.0g，加加 水水 23ml23

10、ml溶溶 解解 后后，加加 醋醋 酸酸 盐盐 缓缓 冲冲 液液(pH3.5)2ml(pH3.5)2ml，依依法法检检查查重重金金属属，含含重重金金属属量量不不得得过过5ppm5ppm。问问应应取取标标准准铅铅溶溶液液多多少少升升（每每1ml1ml相当于相当于10g10g的的pbpb）?因为因为所以，应取标准铅溶液的毫升数为：第14页/共112页例例2:2:中国药典中国药典规定检查砷盐时，应取标准砷溶液规定检查砷盐时，应取标准砷溶液2.0ml(2.0ml(每每1ml1ml相当于相当于1g1g的的As)As)制备标准砷斑制备标准砷斑,今依法检查溴化钠中的砷盐今依法检查溴化钠中的砷盐,规定含砷量不得

11、超过规定含砷量不得超过0.0004%0.0004%。问应取供试品多少克？。问应取供试品多少克？解：应取供试品的克数为：解：应取供试品的克数为：第15页/共112页例例3 3：检检查查磷磷酸酸可可待待因因中中的的吗吗啡啡，方方法法为为取取供供试试品品0.10g0.10g，加加盐盐酸酸溶溶液液（9100091000）使使溶溶解解成成5 5 mlml，加加亚亚硝硝酸酸钠钠试试液液2 2 mlml，放放置置1515分分钟钟，加加氨氨试试液液3 3 mlml，所所显显颜颜色色与与吗吗啡啡溶溶液液取取无无水水吗吗啡啡2.0 2.0 mg,mg,加加盐盐酸酸溶溶液液（9100091000）使使溶溶解解成成1

12、00 100 mlml5.0 5.0 mlml用用同同一一方方法法制制成成的的对对照照液比较液比较,不得更深。问限量为多少不得更深。问限量为多少?第16页/共112页（2 2）灵敏度法）灵敏度法 指在供试品溶液中加入一定量的试剂，在一定条件下，不得有正反应出现，指在供试品溶液中加入一定量的试剂，在一定条件下，不得有正反应出现，从而判断供试品中所含杂质是否符合限度规定的方法。从而判断供试品中所含杂质是否符合限度规定的方法。特点：不需对照品特点：不需对照品第17页/共112页 指取供试品一定量依法检查，测定待检杂质的参数（如吸光度）与规定的限量指取供试品一定量依法检查，测定待检杂质的参数（如吸光度

13、）与规定的限量比较，不得更大。比较，不得更大。如胰岛素中蛋白激素的检查，规定用如胰岛素中蛋白激素的检查，规定用0.01mol/L0.01mol/L的盐酸配成的盐酸配成0.5mg/ml0.5mg/ml的供试品溶液，的供试品溶液，在在276nm276nm波长处的吸收度应为波长处的吸收度应为0.480.480.550.55。特点：准确测定杂质的量，不需对照品特点：准确测定杂质的量，不需对照品 （3）比较法第18页/共112页比较法杂质限量计算例1.某药物进行中间体杂质检查：取该药，加稀盐酸制成每毫升含2mg的溶液，置1cm比色池中，于310nm处（杂质有吸收，药物无吸收）测吸收度，不得超过0.05。

14、另取中间体对照品，用相同溶剂配成每毫升含10g的溶液，在相同条件下测得吸收度为0.435，试问该药品中间体杂质的限量是多少？第19页/共112页例2.2.卡比马唑片（每片含卡比马唑5mg）中甲巯咪唑的检查:取本品2020片，研细，加三氯甲烷适量，研磨使卡比马唑溶解，滤过，用三氯甲烷洗涤滤器，合并滤液与洗液，置10ml10ml量瓶中，加三氯甲烷稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另取甲流咪唑对照品，加三氯甲烷制成每1ml1ml中含100g100g的溶液，作为对照品溶液。分别取上述两种溶液10L10L，分别点于同一硅胶G G薄层板上，展开，晾干，喷以稀碘化铋钾试液显色，供试品如显与对照品相应的杂质斑

15、点，其颜色与对照品比较，不得更深。求杂质限量。第20页/共112页第二节第二节 一般杂质检查一般杂质检查本节介绍：本节介绍：ClCl-SO SO2-2-Fe Fe3 3 +信号杂质信号杂质 PbPb2 2 +As As有害杂质有害杂质 溶液颜色溶液颜色有色杂质有色杂质易碳化物易碳化物易碳化杂质（微量有机杂质）易碳化杂质（微量有机杂质）澄清度澄清度不溶性杂质不溶性杂质炽灼残渣炽灼残渣无机杂质（如金属氧化物和盐）无机杂质（如金属氧化物和盐）干燥失重干燥失重挥发性杂质和水挥发性杂质和水有机溶剂的检查有机溶剂的检查有害杂质有害杂质 第21页/共112页药品检验操作标准药品检验操作标准规定：规定：1.1

16、.遵循平行操作原则遵循平行操作原则（1 1）仪器的配对性）仪器的配对性 如纳氏比色管应配对，刻度线高低如纳氏比色管应配对，刻度线高低相差不超过相差不超过2mm2mm，砷盐检查时导气管长度及孔的大小要一致，砷盐检查时导气管长度及孔的大小要一致（2 2）对照品与供试品的同步操作）对照品与供试品的同步操作2.2.正确的取样及供试品的称量范围正确的取样及供试品的称量范围 1g1g不超过不超过2%2%，1g1g不超过不超过1%1%3.3.正确的比色、比浊方法正确的比色、比浊方法 4.4.检查结果不符合规定或在限度边缘时应对供试管和对照管检查结果不符合规定或在限度边缘时应对供试管和对照管各复查二份。各复查

17、二份。一般杂质检查一般杂质检查(对照法对照法)规则规则第22页/共112页一、氯化物的检查（一）原理标准储备液（NaCl）供试品溶液AgCl 目视比较混浊程度、判断是否超过限量第23页/共112页（二）检查方法（二）检查方法 药典附录药典附录 除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成溶解使成25ml25ml（溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中性），（溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸再加稀硝酸10m110m1；溶液如不澄清，应滤过；置；溶液如不澄清，应滤过；置50ml50ml纳纳氏比色管中，加水使成约氏比色管中，加水使成约40

18、m140m1，摇匀，即得供试溶液。，摇匀，即得供试溶液。另取各药品项下规定量的标准氯化钠溶液，置另取各药品项下规定量的标准氯化钠溶液，置50ml50ml纳氏纳氏比色管中，加稀硝酸比色管中，加稀硝酸10m110m1，加水使成，加水使成40m140m1，摇匀，即，摇匀，即得对照浴液。于供试溶液与对照溶液中，分别加入硝酸得对照浴液。于供试溶液与对照溶液中，分别加入硝酸银试液银试液1.0m11.0m1，用水稀释使成，用水稀释使成50m150m1，摇匀，在暗处放置，摇匀，在暗处放置5 5分钟，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察，比分钟，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察，比较，即得较，即得第24页/

19、共112页（三）操作水溶解稀HNO310mlH2O供试品：25ml 40ml水溶解稀HNO310mlH2O标准NaCL：25ml 40ml1mlAgNO31mlAgNO3AgCLAgCL暗处黑色背景比较50ml50ml水水第25页/共112页（四）测定条件（四）测定条件 标准标准NaClNaCl溶液溶液 1010 gClgCl/ml/ml，50ml50ml溶液中含溶液中含50508080 g g的的ClCl 所显浑浊梯度明显，相当于标准所显浑浊梯度明显，相当于标准NaClNaCl溶溶液液5 58ml8ml。反应需在硝酸酸性条件下进行，且以反应需在硝酸酸性条件下进行，且以50ml50ml供试溶液

20、供试溶液中含稀硝酸中含稀硝酸10ml10ml为宜。为宜。加加速速AgClAgCl浑浑浊浊的的形形成成；产产生生较较好好的的乳乳浊浊；避避免免弱弱酸银盐如碳酸银、磷酸银以及氧化银沉淀的形成。酸银盐如碳酸银、磷酸银以及氧化银沉淀的形成。3.3.试剂：硝酸银试剂：硝酸银4.4.供试液和对照液稀释后，再加硝酸银溶液，使生成白供试液和对照液稀释后，再加硝酸银溶液，使生成白色浑浊而不是白色沉淀色浑浊而不是白色沉淀 5.5.避光、暗处放置避光、暗处放置5 5分钟后比浊，因氯化银见光易分解。分钟后比浊，因氯化银见光易分解。6.6.比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观

21、察。7.7.平行操作原则平行操作原则 第26页/共112页（五）干扰及排除（五）干扰及排除若供试品有色，需经处理后方可检查。若供试品有色，需经处理后方可检查。（1 1）内消色法：倍量法，如枸橼酸铁铵中氯化）内消色法：倍量法，如枸橼酸铁铵中氯化物的检查。物的检查。（2 2）外消色法：如高锰酸钾中氯化物的检查，）外消色法：如高锰酸钾中氯化物的检查，可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。(六）意义六）意义反映药物的纯度和生产过程是否正常。反映药物的纯度和生产过程是否正常。第27页/共112页练练习习1.1.药药物物中中氯氯化化物物杂杂质质检检查查，是是使

22、使该该杂杂质质在在酸酸性性溶溶液液中中与与硝硝酸银作用生成氯化物浑浊，所用的稀酸是（）酸银作用生成氯化物浑浊，所用的稀酸是（）A.A.硫酸硫酸 B.B.硝酸硝酸 C.C.盐酸盐酸 D.D.醋酸醋酸 E.E.磷酸磷酸 练习练习2.2.中国药典（中国药典（20052005年版）规定，检查氯化物杂质时，一般年版）规定，检查氯化物杂质时，一般取用标准氯化钠溶液（取用标准氯化钠溶液（1010gClgCl/ml/ml）5 58ml8ml的原因是（）的原因是（）A.A.使检查反应完全使检查反应完全B.B.药物中含氯化物的量均在此范围药物中含氯化物的量均在此范围C.C.加速反应加速反应D.D.所产生的浊度梯度

23、明显所产生的浊度梯度明显E.E.避免干扰避免干扰 第28页/共112页练练习习3.3.采采用用硝硝酸酸银银试试液液检检查查氯氯化化物物时时，加加入入硝硝酸使溶液酸化的目的是（）酸使溶液酸化的目的是（）A A加速生成氯化银浑浊反应加速生成氯化银浑浊反应B B消除某些弱酸盐的干扰消除某些弱酸盐的干扰C C消除碳酸盐干扰消除碳酸盐干扰D D消除磷酸盐干扰消除磷酸盐干扰E E避免氧化银沉淀生成避免氧化银沉淀生成第29页/共112页练练习习4 4.当采用比浊法检查氯化物杂质时，若药物本身有颜色而干扰检查的话，应该选用的处理方法为（）A内消色法B外消色法C比色法D差示比浊法 E差示可见分光法 第30页/共

24、112页练习练习5 5.若要进行高锰酸钾中氯化物的检查，最佳方法是（）A.加入一定量氯仿提取后测定B.氧瓶燃烧C.倍量法D.加入一定量乙醇E.以上都不对第31页/共112页练习练习6 6.下列哪些条件为药物中氯化物检查的必要条件（）A.所用比色管需配套B.稀硝酸酸性下(10ml/50ml)C.避光放置5分钟D.用硝酸银标准溶液做对照E.在白色背景下观察 第32页/共112页二、硫酸盐的检查（一）原理K2SO4对照溶液 BaSO4（限量）BaCL2样 品 溶 液 BaSO4BaCL2H+判别：目视比较混浊程度判断是否超限硫酸盐为信号杂质，反映药物的纯度和生产过程是否正常。第33页/共112页（二

25、）操作：样 品 H2O溶解40ml稀HCl 2ml比色管5mlBaCl2(25%)标准K2SO4 H2O溶解40ml比色管5mlBaCl2(25%)稀HCl 2ml摇匀，放置10min摇匀，放置10min50ml水比浊第34页/共112页（三）测定条件（三）测定条件1.1.标准标准K K2 2SOSO4 4溶液溶液0.1mg/ml0.1mg/ml，50ml50ml溶液中含溶液中含0.10.10.5mg0.5mg的所显浑的所显浑浊梯度明显，相当于标准浊梯度明显，相当于标准K K2 2SOSO4 4溶液溶液1 15ml5ml。2.2.反应需在盐酸酸性条件下进行，且以反应需在盐酸酸性条件下进行，且以

26、50ml50ml供试溶液中含稀盐供试溶液中含稀盐酸酸2ml2ml为宜。（防止碳酸钡和磷酸钡的形成，但酸度过大可是硫为宜。（防止碳酸钡和磷酸钡的形成，但酸度过大可是硫酸钡溶解而降低灵敏度）酸钡溶解而降低灵敏度）3.3.供试液和对照液稀释后，再加氯化钡溶液，使生成白色浑浊供试液和对照液稀释后，再加氯化钡溶液，使生成白色浑浊而不是白色沉淀而不是白色沉淀4.4.比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。第35页/共112页 若供试品有色，也可用内消色法即倍量法处理。若供试品有色，也可用内消色法即倍量法处理。例：药物中硫酸盐检查时，所用的标准对照液是（）例：药物

27、中硫酸盐检查时，所用的标准对照液是（）A.A.标准氯化钡标准氯化钡B.B.标准醋酸铅溶液标准醋酸铅溶液C.C.标准硝酸银溶液标准硝酸银溶液D.D.标准硫酸钾溶液标准硫酸钾溶液E.E.以上都不对以上都不对 （四）干扰及排除第36页/共112页（一）原理：Fe3+6SCN-Fe(SCN)63-红色红色供试品溶液（含Fe3+）Fe 标准液（用Fe(NH4)(SO4)2配制）硫氰酸铵硫氰酸铵目视比色三、铁盐检查法三、铁盐检查法药物中微量铁盐的存在可能会加速药物的氧化和降解，药物中微量铁盐的存在可能会加速药物的氧化和降解，因此需要控制其存在量，常用以下两种方法检查。因此需要控制其存在量，常用以下两种方法

28、检查。第37页/共112页供试品 H2O25ml稀HCl4ml过硫酸铵50mg水到35ml30%NH4SCN3ml比色管中50mlH2O白背景比色标准品 4mlH2O25ml稀HCl4ml过硫酸铵50mg水35ml30%NH4SCN3ml比色管中H2O50ml白背景比色（二）操作：第38页/共112页 （三）测定条件（三）测定条件（1 1）用）用FeNHFeNH4 4(SO(SO4 4)2 212H12H2 2O O（硫酸铁铵）配制标准铁贮备液（硫酸铁铵）配制标准铁贮备液（加入硫酸防止（加入硫酸防止FeFe3+3+的水解），标准铁溶液临用前稀释而成，的水解），标准铁溶液临用前稀释而成，标准铁溶

29、液标准铁溶液1010 g Feg Fe3+3+/ml/ml，50ml50ml溶液中含溶液中含10105050 g g的的FeFe3+3+显色显色梯度明显，一般取标准铁溶液梯度明显，一般取标准铁溶液1.01.05.0ml 5.0ml（2 2）反应需在盐酸酸性条件下进行，且以）反应需在盐酸酸性条件下进行，且以50ml50ml供试溶液中含稀供试溶液中含稀盐酸盐酸4ml4ml为宜。为宜。第39页/共112页（3 3）试剂：硫氰酸铵。加过量硫氰酸铵，使反应向正反）试剂：硫氰酸铵。加过量硫氰酸铵，使反应向正反应方向进行应方向进行 （4 4）检查）检查FeFe2+2+和和FeFe3+3+（5 5）铁盐检查时

30、，加氧化剂氧化）铁盐检查时，加氧化剂氧化FeFe2+2+为为FeFe3+3+。加过硫酸。加过硫酸铵可氧化铵可氧化FeFe2+2+为为FeFe3+3+，同时可防止光线使硫氰酸铁还原，同时可防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色。或分解褪色。（6 6）比色方法：同置于白色背景上，自上向下观察。）比色方法：同置于白色背景上，自上向下观察。第40页/共112页4.干扰及排除 （2）具环状结构的有机药物，需经700800炽灼破坏处理后再依法检查。（3）干扰离子的影响（四）干扰及排除（1 1）为了提高灵敏度或供试管与对照管色调不）为了提高灵敏度或供试管与对照管色调不一致时，可用正丁醇提取后，分取正丁醇层比色。一

31、致时，可用正丁醇提取后，分取正丁醇层比色。（2 2）具环状结构的有机药物，需经）具环状结构的有机药物，需经700700800800炽灼破坏处理后再依法检查。炽灼破坏处理后再依法检查。（3 3）某些药物）某些药物(如葡萄糖、糊精和硫酸镁等如葡萄糖、糊精和硫酸镁等)在检在检查过程中需加硝酸处理，则不再加过硫酸铵，但必查过程中需加硝酸处理，则不再加过硫酸铵，但必须加热煮沸除去一氧化氮，因硝酸中可能含亚硝酸，须加热煮沸除去一氧化氮，因硝酸中可能含亚硝酸，它能与硫氰酸根离子作用，生成红色亚硝酰硫氰化它能与硫氰酸根离子作用，生成红色亚硝酰硫氰化物，影响比色。物，影响比色。第41页/共112页例1.中国药典

32、（2005年版）规定铁盐的检查方法为（）A.硫氰酸盐法B.巯基醋酸法C.普鲁士蓝法D 邻二氮菲法E.水杨酸显色法第42页/共112页例2.中国药典（2005年版）规定，硫氰酸铵法检查铁盐时，加入过硫酸铵的目的是（）A.使药物中铁盐都转变为Fe3+B.防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色 C.使产生的红色产物颜色更深 D消除Cl-,SO42+,PO33-和枸橼酸根离子 等与铁盐形成配位化合物而引起的干扰 E便于观察、比较 第43页/共112页例3.中国药典收载的铁盐检查，主要是检查（）A.FeB.Fe2+C.Fe3+D.Fe2+和Fe3+E.以上都不对 第44页/共112页四、重金属检查法四、重金属

33、检查法重金属：指在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质。重金属：指在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质。以铅为代表。以铅为代表。重金属影响药物的安全性和有效性。重金属影响药物的安全性和有效性。中国药典（中国药典（20002000年版）共收载四法。年版）共收载四法。（一）第一法（一）第一法 硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法（二）第二法（二）第二法 炽灼残渣法炽灼残渣法（三）第三法（三）第三法 硫化钠法硫化钠法（四）第四法（四）第四法 微孔滤膜法微孔滤膜法 第45页/共112页（一）第一法 硫代乙酰胺法1.原理：对照法 适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物。第46页/共112页 2

34、.测定条件 （1 1）用硝酸铅配制标准铅贮备液（加硝酸防止）用硝酸铅配制标准铅贮备液（加硝酸防止PbPb2+2+水解），标准铅溶液临用前稀水解），标准铅溶液临用前稀释而成，标准硝酸铅溶液释而成，标准硝酸铅溶液1010 g Pbg Pb2+2+/ml/ml，适宜比色范围为，适宜比色范围为27ml27ml溶液中含溶液中含10102020 g g的的PbPb2+2+。（2 2）本法用）本法用2ml pH3.52ml pH3.5的醋酸盐缓冲液控制溶液的醋酸盐缓冲液控制溶液pHpH值为值为3 33.53.5。（3 3）显色剂：从）显色剂：从ChPChP（19901990）开始改用硫代乙酰胺做显色剂）开始

35、改用硫代乙酰胺做显色剂 第47页/共112页（1 1）供试品如有色，需经处理后方可检查。）供试品如有色，需经处理后方可检查。A.A.外消色法：在对照管中加稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液。外消色法：在对照管中加稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液。B.B.内消色法内消色法C.C.改用第四法，微孔滤膜过滤法改用第四法，微孔滤膜过滤法 3.干扰及排除第48页/共112页（2 2）若供试品中有微量）若供试品中有微量FeFe3+3+存在，会氧化硫化氢生成单质硫，干扰比色，加入抗存在，会氧化硫化氢生成单质硫，干扰比色，加入抗坏血酸或盐酸羟胺（坏血酸或盐酸羟胺（0.50.51.0g1.0g）还原）还原Fe3+

36、为为FeFe2+2+，可消除干扰。，可消除干扰。（3 3）若药物本身能生成不溶性硫化物时，可加入掩蔽剂消除干扰。如）若药物本身能生成不溶性硫化物时，可加入掩蔽剂消除干扰。如ZnSO4ZnSO4中重中重金属的检查，要在碱性下加金属的检查，要在碱性下加KCNKCN掩蔽掩蔽ZnZn2+2+后，依第三法检查后，依第三法检查第49页/共112页（二）第二法 炽灼残渣法 适用于含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸、乙醇及碱的有适用于含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸、乙醇及碱的有机药物。机药物。含含钠钠及及氟氟的的有有机机药药物物应应用用铂铂坩坩埚埚（因因可可腐腐蚀蚀瓷瓷坩坩埚埚，带带入入大量重金属）大量重金属）1

37、.1.原理原理 对照法对照法500500600600炽灼后的残渣，经处理后，依一法检查。炽灼后的残渣，经处理后，依一法检查。第50页/共112页2.操作方法第51页/共112页3.3.注意事项注意事项（1 1）炽灼温度对重金属检查影响较大，温度越高，重金）炽灼温度对重金属检查影响较大，温度越高，重金属损失越多，例如铅在属损失越多，例如铅在700700经经6h6h炽灼，回收率仅为炽灼，回收率仅为3232；同时温度太低灰化不完全。因此，应控制炽灼温度；同时温度太低灰化不完全。因此，应控制炽灼温度在在500500600600。（2 2）炽灼残渣加硝酸加热处理后，使有机物进一步分解）炽灼残渣加硝酸加热

38、处理后，使有机物进一步分解破坏完全，必须蒸干、除尽氧化氮，否则亚硝酸可氧化破坏完全，必须蒸干、除尽氧化氮，否则亚硝酸可氧化硫化氢析出硫，影响比色。硫化氢析出硫，影响比色。（3 3）蒸干后残渣加盐酸，是使重金属成为氯化物。为了）蒸干后残渣加盐酸，是使重金属成为氯化物。为了消除盐酸或其他试剂中可能夹杂重金属的影响，在配制消除盐酸或其他试剂中可能夹杂重金属的影响，在配制供试品溶液时，如使用盐酸超过供试品溶液时，如使用盐酸超过1ml(1ml(或与盐酸或与盐酸1ml1ml相当相当的稀盐酸的稀盐酸)，使用氨试液超过，使用氨试液超过2ml2ml，以及用硫酸与硝酸进，以及用硫酸与硝酸进行有机破坏或其他试剂处理

39、者，除另有规定外，对照品行有机破坏或其他试剂处理者，除另有规定外，对照品溶液应取同样量试剂在瓷皿中蒸干后，依法检查。溶液应取同样量试剂在瓷皿中蒸干后，依法检查。第52页/共112页（三）第三法 硫化钠法 适用于溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的药物。适用于溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的药物。如磺胺类、巴比妥类。如磺胺类、巴比妥类。1.1.原理原理 对照法对照法 2.2.测定条件测定条件（1 1）NaOHNaOH碱性条件下碱性条件下（2 2）显色剂：硫化钠）显色剂：硫化钠 。硫化钠试液对玻璃有一定的腐。硫化钠试液对玻璃有一定的腐蚀性，且久置后会产生絮状物，应临用新制蚀性，且久置后会产

40、生絮状物，应临用新制第53页/共112页（四）第四法 微孔滤膜法 适适用用于于重重金金属属限限量量低低（2 25 5 g g）药药物物及及有有色色供供试试液液的的检查。检查。1.1.原理：原理：使重金属生成的硫化物富集于微孔滤膜上，比较供试使重金属生成的硫化物富集于微孔滤膜上，比较供试品和一定量的标准铅溶液同法处理后产生的色斑深浅，确定重品和一定量的标准铅溶液同法处理后产生的色斑深浅，确定重金属是否超过限量。金属是否超过限量。我国我国药品检验操作标准药品检验操作标准中规定，检查新产品中重金属中规定，检查新产品中重金属时，应用该法。时，应用该法。第54页/共112页2试验装置试验装置第55页/共

41、112页3.方法1.1.标准铅斑的制备：精密量取标准铅溶液一定量，用水标准铅斑的制备：精密量取标准铅溶液一定量，用水或规定溶剂稀释成或规定溶剂稀释成10ml10ml，加入醋酸盐缓冲液，加入醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml(pH3.5)2ml与硫代乙酰胺试液与硫代乙酰胺试液1.0ml1.0ml，摇匀，放置，摇匀，放置10min10min，用，用50ml50ml注射器转移至滤器中滤过注射器转移至滤器中滤过(滤速约滤速约1ml1mlmin)min)，滤毕，取下滤膜，放在滤纸上干燥，即得。，滤毕，取下滤膜，放在滤纸上干燥，即得。2.2.另取供试溶液另取供试溶液10ml10ml，照标准铅斑的制备法，自，

42、照标准铅斑的制备法，自“加入加入醋酸盐缓冲液醋酸盐缓冲液(pH3(pH35)2m15)2m1”起，依法操作，生成的铅起，依法操作，生成的铅斑与标准铅斑比较，不得更深。斑与标准铅斑比较，不得更深。第56页/共112页例例1.1.重重金金属属检检查查中中，加加入入硫硫代代乙乙酰酰胺胺时时溶溶液液控控制制最最佳佳的的pHpH值值是是（B B）A.1.5 B.3.5 CA.1.5 B.3.5 C7.5 D.9.5 E.11.57.5 D.9.5 E.11.5例例2.2.微孔滤膜法是用来检查（微孔滤膜法是用来检查（C C）A.A.氯化物氯化物 B.B.砷盐砷盐C.C.重金属重金属 D.D.硫化物硫化物E

43、.E.氰化物氰化物第57页/共112页例例3.3.中中国国药药典典(2005(2005年年版版)重重金金属属检检查查法法中中，所所使使用用的的显显色色剂剂是（是（BCBC）A.A.硫化氢试液硫化氢试液 B.B.硫代乙酰胺试液硫代乙酰胺试液 C.C.硫化钠试液硫化钠试液 D.D.氰化钾试液氰化钾试液 E.E.硫氰酸铵试液硫氰酸铵试液例例4.4.葡萄糖中进行重金属检查时，适宜的条件是（葡萄糖中进行重金属检查时，适宜的条件是（C C）A.A.用硫代乙酰胺为标准对照液用硫代乙酰胺为标准对照液 B.B.用用10ml10ml稀硝酸稀硝酸/50ml/50ml酸化酸化 C.C.在在pH3.5pH3.5醋酸盐缓

44、冲溶液中醋酸盐缓冲溶液中 D.D.用硫化钠为试液用硫化钠为试液 E.E.结果需在黑色背景下观察结果需在黑色背景下观察第58页/共112页例例5.5.现现有有一一药药物物为为苯苯巴巴比比妥妥，欲欲进进行行重重金金属属检检查查，应应采采用用中国药典中国药典上收载的重金属检查的哪种方法（上收载的重金属检查的哪种方法（C C）A.A.一法一法 B.B.二法二法 C.C.三法三法 D.D.四法四法 E.E.以上都不对以上都不对例例6.6.下面哪些方法为下面哪些方法为中国药典中国药典收载的重金属检查方法收载的重金属检查方法（ACDACD）A.500A.500600600炽灼残渣后炽灼残渣后,按一法操作按一

45、法操作 B.pH3B.pH33.53.5条件下，加入硫化氢试液条件下，加入硫化氢试液 C.C.碱性下，加入硫化钠试液碱性下，加入硫化钠试液 D.D.按一法操作，结果用微孔滤膜过滤后观察色斑按一法操作，结果用微孔滤膜过滤后观察色斑 E.E.以上都对以上都对第59页/共112页（一）古蔡氏法：1.原理：AsO33-+3Zn+9H+AsH3+3Zn 2+3H20 AsH3+2HgBr22HBr+AsH(HgBr)2黄色AsH3+3HgBr23HBr+As(HgBr)3棕色五、砷盐的检查五、砷盐的检查Zn与盐酸作用产生新生态的氢，与药物作用生成挥发性的砷化氢，遇溴化汞试纸，产生黄色到棕色的砷斑。第60

46、页/共112页标准砷斑标准砷溶液2ml 盐酸5ml 水21ml，KI试液5ml SnCl2试液5d Zn(2g)25-40水溶液45min取出溴化汞试纸 样品砷斑 药物（含AS）盐酸、水适量 KI试液5ml SnCl2试液5d Zn(2g)25-40水溶液45min取出溴化汞试纸 比较砷斑深浅2.操作：第61页/共112页3.标准砷溶液的制备：称取三氧化二砷0.132g，置1000ml量瓶中，加20%的氢氧化钠溶液5ml溶解后，用适量的稀硫酸中和，再加稀硫酸10ml，用水稀释至刻度，摇匀，作为储备液。临用前，精密量取储备液10ml，置1000ml量瓶中，加稀硫酸10ml，用水稀释至刻度，摇匀，

47、即得。（每1ml相当于1g的As）第62页/共112页导管C中装有醋酸铅棉花，旋塞D上端有HgBr2试液 A、坤化氢发生瓶 B、中空磨口塞 C、导气管 D、具孔有机玻璃旋塞 E、具孔有机玻璃塞盖4.装置第63页/共112页5.5.注意：注意：a a、醋酸铅棉花是为了防止、醋酸铅棉花是为了防止s s2-2-干扰。干扰。b b、KIKI和和SnClSnCl2 2是还原剂，将是还原剂，将As()As()还原为还原为As(As()，同时可抑制锑化氢的生成，同时可抑制锑化氢的生成，SnCl2SnCl2还能与还能与ZnZn作用，在作用，在ZnZn粒表面形成锌锡齐，其去极化作用，使氢气均匀而连续的粒表面形成

48、锌锡齐，其去极化作用，使氢气均匀而连续的发生。发生。AsO AsO4 43-3-+2I+2I-+2H+2H+AsOAsO3 33-3-+I+I2 2+H+H2 2O O AsO AsO4 43-3-+Sn+Sn2+2+2H+2H+AAS SO O3 33-3-+Sn+Sn4+4+H+H2 2O O I I2 2+Sn+Sn2+2+2I2I-+Sn+Sn4+4+第64页/共112页c c、SnClSnCl2 2可使可使ZnZn与与HClHCl反应快而均匀。反应快而均匀。d d、标准砷斑不能过深过浅，中国药典规定标准、标准砷斑不能过深过浅，中国药典规定标准砷溶液含砷砷溶液含砷1ug/ml1ug/m

49、l取取2ml2ml制标准坤斑。制标准坤斑。e e、砷斑生成后应立即比色。、砷斑生成后应立即比色。f f、供供试试品品若若为为低低价价态态硫硫酸酸盐盐时时，在在酸酸性性溶溶液液中中会会产产生生硫硫化化氢氢或或二二氧氧化化硫硫，与与溴溴化化汞汞作作用用干干扰扰检检查查，应应先先用用硝硝酸酸处处理理，使使之之生生成成硫硫酸酸盐盐以以排排除干扰。除干扰。G G、环环状状结结构构的的药药物物，砷砷以以共共价价键键结结合合，与与干干法法破坏后检查。破坏后检查。第65页/共112页含锑药物的砷盐检查含锑药物的砷盐检查-白田道夫法白田道夫法原理：氯化亚锡在酸性条件下将砷盐还原为棕褐色的胶态砷，与同法处理原理：

50、氯化亚锡在酸性条件下将砷盐还原为棕褐色的胶态砷，与同法处理后的标准砷溶液比色，判断药物的砷含量。后的标准砷溶液比色，判断药物的砷含量。第66页/共112页（二）二乙基二硫代氨基甲酸银法（Ag-DDC法)SC2H5 N C SAg C2H5原理：H3AS+6Ag（DDC）+3N(C2H5)36Ag+As(DDC)3+3(C2H5)3NHDDC第67页/共112页A、砷化氢发生瓶 B、中空磨口塞C、导气 管D平底玻璃管 Ag（DDC）法检坤装置第68页/共112页操作：在试坤瓶中 对照标准液砷标准液盐酸，水 2mlKI 5dSnCl2 5ml Zn(2g)25-40水浴45min导入比色管（Ag-