转基因食品及其安全性评价技术精.pptx

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1、内内 容容一一.转基因食品概念转基因食品概念二二.转基因食品分类转基因食品分类三三.转基因作物现状转基因作物现状四四.转基因食品安全性及其评价转基因食品安全性及其评价五五.转基因食品管理现状转基因食品管理现状六六.转基因成分的检测转基因成分的检测第1页/共46页基因基因:是一个特定的是一个特定的DNADNA片段片段 ，编码一种特定的多肽或蛋白质，编码一种特定的多肽或蛋白质，是遗传信息的功能单位是遗传信息的功能单位第2页/共46页一般说来，从细菌到哺乳动物的全部生命有机体，它们的基因都是由一般说来，从细菌到哺乳动物的全部生命有机体，它们的基因都是由DNADNA构成的。由于所有生物的构成的。由于所

2、有生物的DNADNA的基的基本结构是一致的，因此，来自两种生命形态的基因可以融为一体。本结构是一致的，因此，来自两种生命形态的基因可以融为一体。由此可见，基因的由此可见，基因的DNADNA共性，是进行基因工程的重要理论基础之一。共性，是进行基因工程的重要理论基础之一。第3页/共46页DNADNA分子是遗传物质和基因的载体。基因是细胞中所有的分子是遗传物质和基因的载体。基因是细胞中所有的RNARNA及蛋白质分子的及蛋白质分子的“蓝图蓝图”。一旦基因发生突变，那么由它指导合成的蛋白质也将随之发生变化，甚至可能导致活性的丧失。为了能更一旦基因发生突变，那么由它指导合成的蛋白质也将随之发生变化，甚至可

3、能导致活性的丧失。为了能更加准确地反映事物的本质，提出加准确地反映事物的本质，提出“一种基因一种多肽链一种基因一种多肽链”的假说。的假说。第4页/共46页基因工程技术特征基因工程技术特征1.1.利用载体系统的重组利用载体系统的重组DNADNA技术；技术；2.2.利用物理、化学和生物等方法把重组利用物理、化学和生物等方法把重组DNADNA导入有机体的技术。导入有机体的技术。使产品的基因组构成发生改变并存在外源使产品的基因组构成发生改变并存在外源DNADNA，或者产品的成分中存在外源，或者产品的成分中存在外源DNADNA的表达产物及其生物的表达产物及其生物活性，获得基因工程所设计的性状和功能。活性

4、，获得基因工程所设计的性状和功能。第5页/共46页一一.概念概念转基因食品转基因食品(genetically modified food,(genetically modified food,GMF):GMF):利用分子生物学技术利用分子生物学技术,将某些生物的一种或将某些生物的一种或几种外源性基因转移到其他的生物细胞中去几种外源性基因转移到其他的生物细胞中去,从而改变其遗传物质从而改变其遗传物质(DNA)(DNA)并有效地表达特有并有效地表达特有的性状的产物。以转基因生物为原料加工成的的性状的产物。以转基因生物为原料加工成的食品就是转基因食品。食品就是转基因食品。第6页/共46页BT玉米的开

5、发玉米的开发苏云氏杆菌产生毒害剂的基因除害剂基因与质粒结合 BT玉米含转基因的幼苗植物细胞与重组基因重组基因在细菌中细菌共同培养培养扩增细菌基因重组第7页/共46页转基因与杂交有区别转基因与杂交有区别转基因技术可以将基因在不同生物间转移，转基因技术可以将基因在不同生物间转移，杂交技术只能在同种和近亲种间进行。杂交技术只能在同种和近亲种间进行。转基因生物（转基因生物（transgenic organismtransgenic organism或或 genetically modified genetically modified organism,GMOorganism,GMO）转基因植物（转基

6、因植物（transgenic planttransgenic plant或或 genetically modified genetically modified plant,GMPplant,GMP）转基因作物（转基因作物（transgenic croptransgenic crop或或 genetically modified crop,genetically modified crop,GMCGMC）第8页/共46页二二.转基因食品分类转基因食品分类(一一)按原料分类按原料分类 1.1.植物性转基因食品植物性转基因食品 2.2.动物性转基因食品动物性转基因食品 3.3.微生物转基因食品微生

7、物转基因食品 4.4.特殊转基因食品特殊转基因食品第9页/共46页 利用利用DNADNA重组技术将多聚半乳糖醛酸酶重组技术将多聚半乳糖醛酸酶(PG)(PG)的的抗敏基因导入蕃茄，抗敏基因导入蕃茄，PGPG抗敏基因可抑制抗敏基因可抑制PGPG的产的产生，使蕃茄中的果胶不易分解，从而延迟了蕃生，使蕃茄中的果胶不易分解，从而延迟了蕃茄的软化，有利于蕃茄的运输、贮藏。茄的软化，有利于蕃茄的运输、贮藏。将大豆中编码蛋白质的基因导入水稻，从而将大豆中编码蛋白质的基因导入水稻，从而获得获得“高蛋白高蛋白”大米。大米。把表达胡萝卜素的基因植入水稻，产生高胡把表达胡萝卜素的基因植入水稻，产生高胡萝卜素的萝卜素的

8、“黄金水稻黄金水稻”第10页/共46页如含有人生长激素基因的转基因猪生长期明显如含有人生长激素基因的转基因猪生长期明显缩短，且饲料利用率及瘦肉比重大幅度提高缩短，且饲料利用率及瘦肉比重大幅度提高 提高肉鸡和蛋鸡的抗感染能力是转基因鸡研提高肉鸡和蛋鸡的抗感染能力是转基因鸡研究的主要目标究的主要目标 随着天然鱼种的大批灭种，利用转基因技术随着天然鱼种的大批灭种，利用转基因技术改良食用鱼品质的研究日益显示其重要性。改良食用鱼品质的研究日益显示其重要性。第11页/共46页(二二)按功能分类按功能分类1 1、增产型、增产型 转移或修饰生长分化、肥料、抗逆、抗虫害等基因达到增产效转移或修饰生长分化、肥料、

9、抗逆、抗虫害等基因达到增产效果。果。2 2、控熟型、控熟型 转移或修饰与控制成熟期有关的基因使转移或修饰与控制成熟期有关的基因使GMO成熟期延迟、提成熟期延迟、提前、前、不易腐烂不易腐烂,好贮存。好贮存。3 3、高营养型、高营养型 改造贮藏蛋白质基因改造贮藏蛋白质基因,使其表达的蛋白质具有合理的氨基酸组成。使其表达的蛋白质具有合理的氨基酸组成。4 4、保健型、保健型 转移病原体抗原基因或毒素基因至转移病原体抗原基因或毒素基因至GMO,既补充营养又起到预既补充营养又起到预防防 疫病的作用。疫病的作用。5 5、新品种型、新品种型 不同品种间的基因重组形成新品种不同品种间的基因重组形成新品种,GMO

10、在品质、口味和色香方在品质、口味和色香方 面具有新的特点。面具有新的特点。6 6、加工型：由转基因产物作原料加工制成、加工型：由转基因产物作原料加工制成,花样最为繁多。花样最为繁多。第12页/共46页三三.转基因作物现状转基因作物现状19831983年年:英国培育出世界上第一种含有抗生素药类英国培育出世界上第一种含有抗生素药类抗体的基因移植烟草抗体的基因移植烟草 19931993年年:美国将世界第美国将世界第1 1例例GMCGMC投入市场投入市场-保鲜延熟保鲜延熟型西红柿型西红柿目前商业种植的目前商业种植的GMC:大豆、玉米、棉花、油菜、大豆、玉米、棉花、油菜、南瓜、木瓜、马铃薯、番茄、甜菜等

11、几十种。南瓜、木瓜、马铃薯、番茄、甜菜等几十种。世界世界GMC市场份额市场份额:美国孟山都（美国孟山都（MonsantoMonsanto）农）农产品公司占产品公司占8080,德国安万特公司占德国安万特公司占7 7,德国巴斯德国巴斯夫公司和瑞士先正达公司各占夫公司和瑞士先正达公司各占5 5,美国杜邦公司占美国杜邦公司占3 3。第13页/共46页GMC在全球市场的价在全球市场的价值值1995年年 0.75亿美元亿美元1996年年 2.35亿美元亿美元1997年年 6.70亿美元亿美元2000年年 30亿美元亿美元2004年年 47.0亿美元亿美元2005年年 预计超过预计超过50亿美元亿美元 20

12、10年年 可望增至可望增至200亿美亿美元元 第14页/共46页全球全球GMC种植情况种植情况1996-20041996-2004年年,全球全球GMCGMC种植面积从种植面积从170170万公顷发展到万公顷发展到81008100万公顷万公顷,增长超过增长超过4747倍倍,连续以约连续以约20%20%增长率持续增长。增长率持续增长。1996-20041996-2004年年,全球全球GMCGMC种植面积累积种植面积累积3.853.85亿公顷亿公顷,相当于相当于美国或中国土地总面积的美国或中国土地总面积的40%,40%,是英国土地总面积的是英国土地总面积的1515倍。倍。20042004年年,全球全

13、球GMCGMC种植面积占全球耕地总面积种植面积占全球耕地总面积1515亿公顷的亿公顷的5%5%。2003-20042003-2004年年,发展中国家发展中国家GMCGMC种植面积增长种植面积增长720720万公顷万公顷(35%),(35%),发达国家的为发达国家的为610610万公顷万公顷(13%),(13%),增长率第一次超出。增长率第一次超出。20042004年年,对除草剂有耐性的转基因大豆、玉米、油菜和棉对除草剂有耐性的转基因大豆、玉米、油菜和棉花花,占全球占全球GMCGMC种植面积种植面积8,1008,100万公顷的万公顷的72%72%。第15页/共46页第16页/共46页第17页/共

14、46页20042004年生物技术大国转基因作物种植情况年生物技术大国转基因作物种植情况排序排序国家国家主要作物主要作物面积（万面积（万公顷）公顷）占全球百分占全球百分比（）比（）年增长率年增长率（）（）备注备注1美国美国玉米、大豆、油菜、棉花玉米、大豆、油菜、棉花476059112阿根廷阿根廷大豆大豆162020173加拿大加拿大玉米、大豆、油菜玉米、大豆、油菜5406234巴西巴西大豆大豆5006665中国中国棉花棉花3705326巴拉圭巴拉圭大豆大豆1202新增新增7印度印度棉花棉花5014008南非南非玉米、大豆、棉花玉米、大豆、棉花501259乌拉圭乌拉圭大豆、玉米大豆、玉米30120

15、010澳大利亚澳大利亚棉花棉花20110011罗马尼亚罗马尼亚大豆大豆10112墨西哥墨西哥棉花、大豆棉花、大豆101新增新增13西班牙西班牙玉米玉米101新增新增14菲律宾菲律宾玉米玉米101新增新增第18页/共46页我国转基因作物种植情我国转基因作物种植情况况19971997年至今年至今,农业部批准安全评价申请环境释放农业部批准安全评价申请环境释放243243项项,生产性生产性试验试验108108项项,生产用安全证书生产用安全证书7979个。个。已进入环境释放阶段的已进入环境释放阶段的GMPGMP有有:水稻、玉米、小麦、马铃薯、河水稻、玉米、小麦、马铃薯、河套密瓜、番木瓜、大豆、油菜、杨树

16、、烟草、高羊茅、黑麦草。套密瓜、番木瓜、大豆、油菜、杨树、烟草、高羊茅、黑麦草。已商业化的已商业化的GMCGMC有有:棉花棉花(46(46项项)、线辣椒、线辣椒(1(1项项)、甜椒、甜椒(4(4项项)、矮、矮牵牛牵牛(1(1项项)、番茄、番茄(6(6项项)，共，共5858项。项。转基因棉花是我国主要的转基因棉花是我国主要的GMCGMC。中国自。中国自19991999年进行转基因棉花年进行转基因棉花的商业化种植之后的商业化种植之后,没有再批准任何一种没有再批准任何一种GMCGMC进入商业种植。进入商业种植。20042004年年1212月、月、20052005年年6 6月月,农业部先后召开专门会议

17、讨论转基因农业部先后召开专门会议讨论转基因水稻的安全性及商业化种植。今年水稻的安全性及商业化种植。今年1111月再次召开类似专门会议月再次召开类似专门会议,若议题获得通过若议题获得通过,中国可能是世界上第一个通过转基因水稻种植中国可能是世界上第一个通过转基因水稻种植的国家。的国家。第19页/共46页19981998年起年起,我国从美国和加拿大进口了较大数量的我国从美国和加拿大进口了较大数量的GMGM粮油。粮油。20022002年以后年以后,我国进口的转基因大豆基本维持在我国进口的转基因大豆基本维持在20002000万吨左万吨左右。其主要用做加工原料右。其主要用做加工原料,生产豆油、豆腐、豆奶等

18、制品。生产豆油、豆腐、豆奶等制品。其中其中,在国内用转基因大豆生产的大豆色拉油比例高达约在国内用转基因大豆生产的大豆色拉油比例高达约8080。目前我国对进口转基因食品原料已发放的转基因生物安全证目前我国对进口转基因食品原料已发放的转基因生物安全证书的有转基因大豆、转基因油菜、转基因棉花和转基因玉米。书的有转基因大豆、转基因油菜、转基因棉花和转基因玉米。在美国在美国,已经有超过已经有超过6060的加工食品含有转基因成分的加工食品含有转基因成分,涉及食涉及食品原料的转基因植物种类有大豆、玉米、油菜、马铃薯、番品原料的转基因植物种类有大豆、玉米、油菜、马铃薯、番茄、甜椒、番木瓜、西葫芦等。茄、甜椒、

19、番木瓜、西葫芦等。在英国在英国,与转基因有关的食品达与转基因有关的食品达70007000种种,包括婴儿食品、巧克包括婴儿食品、巧克力、冷冻甜品、面包、人造奶油、香肠、肉类及代肉类产品力、冷冻甜品、面包、人造奶油、香肠、肉类及代肉类产品等。等。第20页/共46页1 1、19891989年美国用微生物基因工程生产的色氨酸年美国用微生物基因工程生产的色氨酸虽然经分析其纯度高达虽然经分析其纯度高达99.6%99.6%，当作为营养素补，当作为营养素补充剂投放市场后，造成充剂投放市场后，造成15001500人永久性伤残和人永久性伤残和3737人死亡。人死亡。2 2、19981998年年8 8月，英国罗威特

20、研究所发现老鼠食用月，英国罗威特研究所发现老鼠食用转基因土豆后免疫系统受到破坏。转基因土豆后免疫系统受到破坏。3 3、20002000年德国耶拿大学研究人员发现，用转基年德国耶拿大学研究人员发现，用转基因玉米制成饲料喂养鸡群，结果鸡肉里存在玉因玉米制成饲料喂养鸡群，结果鸡肉里存在玉米的变异基因片段。进一步研究认为，基因可米的变异基因片段。进一步研究认为，基因可能通过食物链在不同物种之间转移。能通过食物链在不同物种之间转移。四四.GMF安全性及其评价安全性及其评价第21页/共46页（一）（一）GMFGMF的安全性的安全性1.GMC1.GMC对生态环境的可能影响对生态环境的可能影响 具有除草剂耐性

21、因子的转基因作物的遗传因子可具有除草剂耐性因子的转基因作物的遗传因子可能通过授粉和种子迁移传播给野生植物。获得这些耐性能通过授粉和种子迁移传播给野生植物。获得这些耐性后的野生植物有可能会变成对一般除草剂有耐性的后的野生植物有可能会变成对一般除草剂有耐性的“超超级级”杂草。为了清除这些杂草杂草。为了清除这些杂草,将不得不使用更强大的，将不得不使用更强大的，浓度更大的除草剂，这必然会引起土壤板结、土质变坏、浓度更大的除草剂，这必然会引起土壤板结、土质变坏、药物残留等药物残留等,从而对生态环境造成破坏。从而对生态环境造成破坏。2.2.标记基因的传递可能引起的抗生素耐性标记基因的传递可能引起的抗生素耐

22、性 基因工程技术中应用的标记基因通常是一类抗生基因工程技术中应用的标记基因通常是一类抗生素基因素基因,人们担心食用含有此类标记基因的食品后人们担心食用含有此类标记基因的食品后,是否是否对肠道微生物产生影响或者抗生素类药物产生耐药性。对肠道微生物产生影响或者抗生素类药物产生耐药性。第22页/共46页3.3.转基因食品引起食物过敏的可能性转基因食品引起食物过敏的可能性 转基因食品引起食物过敏的可能性是人们关注的焦转基因食品引起食物过敏的可能性是人们关注的焦点之一。特别是如果转基因食品转入的蛋白质是新蛋白时点之一。特别是如果转基因食品转入的蛋白质是新蛋白时,这些异种蛋白有可能引起食物过敏。这些异种蛋

23、白有可能引起食物过敏。4.4.毒性方面毒性方面 许多食品原料生物本身会产生大量的毒性物质，如蛋许多食品原料生物本身会产生大量的毒性物质，如蛋白酶抑制剂、溶血剂和神经毒素等，白酶抑制剂、溶血剂和神经毒素等，GMCGMC中是否有毒素以及中是否有毒素以及毒素的含量就成为争议的重要内容之一。毒素的含量就成为争议的重要内容之一。5.5.伦理方面伦理方面 许多民族都有其独特的饮食习惯和制约，某些宗教团许多民族都有其独特的饮食习惯和制约，某些宗教团体禁止食用的动物基因转入他们通常食用的动物中（如将体禁止食用的动物基因转入他们通常食用的动物中（如将猪的基因转入绵羊中）猪的基因转入绵羊中）,这可能触犯某些民族的

24、饮食戒律这可能触犯某些民族的饮食戒律;另外将动物基因转入植物中可能使素食者感到困惑。另外将动物基因转入植物中可能使素食者感到困惑。6.6.其他其他 第23页/共46页(二二)GMF)GMF的安全性评价的安全性评价1.1.实质等同性原则实质等同性原则(GMF与传统食品比较分析与传统食品比较分析)该原则该原则19931993年由国际经济互助开发组织（年由国际经济互助开发组织（OECDOECD）提出提出,并已被大多数国家采用。并已被大多数国家采用。该原则认为如果导入基因后产生的该原则认为如果导入基因后产生的蛋白质蛋白质经确认经确认是安全的是安全的,或者是转基因作物和原作物在或者是转基因作物和原作物在

25、主要营养成分主要营养成分（脂肪、蛋白质、碳水化合物等）、（脂肪、蛋白质、碳水化合物等）、形态形态和是否产生和是否产生抗营养因子抗营养因子、毒性物质毒性物质、过敏性蛋白过敏性蛋白等方面没有发生等方面没有发生特殊的变化的话，则可以认为转基因作物在安全性上特殊的变化的话，则可以认为转基因作物在安全性上和原作物是同等的和原作物是同等的,对人类的影响是相似的对人类的影响是相似的,则无需对则无需对它的安全性再作进一步的分析。它的安全性再作进一步的分析。第24页/共46页评价内容及步骤评价内容及步骤根据根据“实质同等实质同等”原则细分原则细分GMFGMF的安全性评估的安全性评估(1)(1)实质完全同等的食品

26、实质完全同等的食品(2)(2)除引入特性其他实质同等的食品除引入特性其他实质同等的食品(3)(3)非实质同等的食品非实质同等的食品这三类的安全评估的其他方式还有这三类的安全评估的其他方式还有:基因特性研究、基因特性研究、蛋白质安全性研究、蛋白质安全性研究、营养研究及营养研究及 特别安全研究特别安全研究第25页/共46页第26页/共46页基因特性鉴定基因特性鉴定 必须在注册档案中提供如下基本数据必须在注册档案中提供如下基本数据:基因转移术的描述基因转移术的描述(微微量进样枪、电泳量进样枪、电泳),),插入插入DNADNA序列的位置和种类序列的位置和种类,插入数量插入数量,复制数复制数,插插入基因

27、的表达水平及基因繁殖几代后的稳定性。入基因的表达水平及基因繁殖几代后的稳定性。蛋白质安全评估蛋白质安全评估 插入蛋白质的安全评估是转基因食品安全评估的一个基石插入蛋白质的安全评估是转基因食品安全评估的一个基石,它包括对已存在的蛋白质的鉴定及种族确定它包括对已存在的蛋白质的鉴定及种族确定,毒性及过敏性测定。毒性及过敏性测定。营养研究（健康研究）营养研究（健康研究）主要是检测转基因食品的营养价值的变化主要是检测转基因食品的营养价值的变化,可作为与原料作可作为与原料作物实质同等的一个补充化验方式。不作为亚剧毒研究。物实质同等的一个补充化验方式。不作为亚剧毒研究。进一步安全评估研究进一步安全评估研究

28、对于第三类转基因作物要求比另外两种更多的测试。这些测对于第三类转基因作物要求比另外两种更多的测试。这些测试包括生物利用度和啮齿类动物中蛋白质的亚慢性毒性测试。试包括生物利用度和啮齿类动物中蛋白质的亚慢性毒性测试。第27页/共46页2.2.综合评价综合评价 有有关关新新食食品品的的安安全全性性考考虑虑应应与与那那些些存存在在着着消消费费者者健健康康危危险险因因素素的的其其他他食食品（如：可能受到有毒金属、致病菌、兽药和农药残留等污染的食品）相同。品（如：可能受到有毒金属、致病菌、兽药和农药残留等污染的食品）相同。在安全性评估时应考虑新食品的消费者类型、人们对潜在危害的暴露程在安全性评估时应考虑新

29、食品的消费者类型、人们对潜在危害的暴露程度以及与新食品加工有关的潜在危害影响。度以及与新食品加工有关的潜在危害影响。第28页/共46页五五.GMF.GMF管理现状管理现状1.1.国际组织国际组织 19931993年年 “实质等同实质等同”原则原则 国际经济互助开发组织国际经济互助开发组织(OECD)(OECD)提出提出 20002000年年卡塔赫纳生物安全协定书卡塔赫纳生物安全协定书,62,62个国家签署个国家签署 20012001年年生物安全议定书生物安全议定书,130,130多个国家签署多个国家签署 20032003年年生物技术食品的风险评估草案生物技术食品的风险评估草案,226,226个

30、国家个国家欢迎欢迎 20042004年年 FAOFAO颁布颁布植物生物风险防范纲要植物生物风险防范纲要,约约130130个个国家国家 已经采纳了这个独特的转基因生物风险评估标已经采纳了这个独特的转基因生物风险评估标准。准。第29页/共46页2.2.美国美国GMO上市须通过食品与药品管理局上市须通过食品与药品管理局(FDA)(FDA)、农业部、农业部(USDA)(USDA)和环境保护局和环境保护局(EPA)3(EPA)3个部门中的个部门中的1 1个或个或1 1个以个以上的部门批准。上的部门批准。FDAFDA负责审批所有食品的安全性负责审批所有食品的安全性,并要求生产厂并要求生产厂家保证上市食品的

31、安全和质量家保证上市食品的安全和质量,转基因品种上市前必转基因品种上市前必须经过严格的检验和监督。转基因食品上市前必须经须经过严格的检验和监督。转基因食品上市前必须经过检验并用商标注明。过检验并用商标注明。USDAUSDA和和EPAEPA负责开发农药、除草剂和转基因实负责开发农药、除草剂和转基因实验农作物的安全保障和实施标准。验农作物的安全保障和实施标准。EPAEPA负责审批检验抗病虫害农作物和动物疫苗、负责审批检验抗病虫害农作物和动物疫苗、生物技术农作物的大田实验。生物技术农作物的大田实验。第30页/共46页19921992年美国年美国FDAFDA公布了转基因作物不需由公布了转基因作物不需由

32、FDAFDA作市作市场前评价场前评价,除非它引起新的安全性问题。除非它引起新的安全性问题。20002000年年1 1月月美国政府对转基因玉米的种植颁布限美国政府对转基因玉米的种植颁布限令令,以防止害虫对转基因玉米中毒素形成抗药性以防止害虫对转基因玉米中毒素形成抗药性。20012001年年7 7月出台了月出台了转基因食品管理草案转基因食品管理草案规定。规定。第31页/共46页3.3.欧盟欧盟欧盟法律明确向世界宣布它对转基因产品是不欢迎的欧盟法律明确向世界宣布它对转基因产品是不欢迎的,同时，欧盟在国际上极力主张对转基因产品采取同时，欧盟在国际上极力主张对转基因产品采取“预预先预防态度先预防态度”。

33、欧盟食品工业要经政府主管部门审批。欧盟食品工业要经政府主管部门审批,管理非常严格管理非常严格,在没有得到官方授权的情况下在没有得到官方授权的情况下,转基因转基因产品不能投放到欧盟市场。产品不能投放到欧盟市场。欧洲议会欧洲议会20032003年年9 9月月2222日通过世界最严格的转基因食品日通过世界最严格的转基因食品立法立法转基因食品及饲料管理条例转基因食品及饲料管理条例和和转基因生物转基因生物追溯性及标识办法以及含转基因生物物质的食品及饲追溯性及标识办法以及含转基因生物物质的食品及饲料产品的追溯性管理条例料产品的追溯性管理条例,并于并于20032003年年1010月月1818日实施。日实施。

34、欧盟对有关欧盟对有关GMOGMO和和GMGM食品评估和审批的法规十分清晰食品评估和审批的法规十分清晰,但各成员国和欧盟的职责却是相互分离的。但各成员国和欧盟的职责却是相互分离的。第32页/共46页4.4.其他国家其他国家日本、澳大利亚、俄罗斯、加拿大、韩国、泰国、日本、澳大利亚、俄罗斯、加拿大、韩国、泰国、巴西的政策基本与国际组织的相同巴西的政策基本与国际组织的相同,但是巴西最近但是巴西最近宣布在未查清转基因作物对环境的影响之前宣布在未查清转基因作物对环境的影响之前,暂时暂时停止种植转基因大豆。停止种植转基因大豆。发展中国家迫切需要解决粮食问题发展中国家迫切需要解决粮食问题,对于高产的转对于高

35、产的转基因产品表示欢迎基因产品表示欢迎,这些国家技术落后这些国家技术落后,没有相关的没有相关的转基因成分的检测条件转基因成分的检测条件,对于标识问题也只能处于对于标识问题也只能处于被动地位被动地位,基本是按国际组织的要求和基本是按国际组织的要求和生物安全生物安全议定书议定书要求执行。要求执行。第33页/共46页我国对我国对GMOGMO的管理的管理19931993年年1212月国家科委月国家科委基因工程安全管理办法基因工程安全管理办法19961996年年7 7月农业部月农业部农业生物基因工程安全管理实施办法农业生物基因工程安全管理实施办法20012001年年5 5月国务院月国务院农业转基因生物安

36、全管理条例农业转基因生物安全管理条例20022002年年1 1月农业部月农业部农业转基因生物安全评价管理办法农业转基因生物安全评价管理办法、农业转基因生物进口安全管理办法农业转基因生物进口安全管理办法和和农业转基因生农业转基因生物标识管理办法物标识管理办法三个配套规章。三个配套规章。20022002年年3 3月农业部月农业部转基因农产品安全管理临时措施公告转基因农产品安全管理临时措施公告20022002年年4 4月卫生部月卫生部转基因食品卫生管理办法转基因食品卫生管理办法,要求生产要求生产或进口转基因食品必须向卫生部提出申请。或进口转基因食品必须向卫生部提出申请。20042004年年5 5月国

37、家质量监督检验检疫总局月国家质量监督检验检疫总局进出境转基因产品进出境转基因产品检验检疫管理办法检验检疫管理办法第34页/共46页六六.转基因成分的检测转基因成分的检测主要有两种方法主要有两种方法:1.蛋白质检测方法蛋白质检测方法:以外源结构基因表达出蛋白质为目的。以外源结构基因表达出蛋白质为目的。2.DNADNA检测方法检测方法:以非转基因植物所不拥有的启动子、以非转基因植物所不拥有的启动子、终止终止 子、标记基因等为目的。子、标记基因等为目的。蛋白质检测方法对含量低及深加工的转基因产品无法检测，蛋白质检测方法对含量低及深加工的转基因产品无法检测，故故DNADNA检测方法应用范围相对要广。检

38、测方法应用范围相对要广。目前国内外对采用转基因产品为原料目前国内外对采用转基因产品为原料,经深加工或精加工的经深加工或精加工的食品即使采用食品即使采用DNADNA检测方法检测方法,也无法检出转基因成分。例如也无法检出转基因成分。例如:酱油、色拉油的制成要经过发酵、加热和分离等工序酱油、色拉油的制成要经过发酵、加热和分离等工序,导导入的外源入的外源DNADNA及其产生的蛋白质已经分解。所以迄今为止还及其产生的蛋白质已经分解。所以迄今为止还无有效的检测方法来判断是否含转基因成分无有效的检测方法来判断是否含转基因成分,这在国际生物这在国际生物界是一个公认的难题。界是一个公认的难题。第35页/共46页

39、第36页/共46页(一一)基因水平的检测方法基因水平的检测方法u转基因技术将从各种生物中克隆出来的基因片断插入转基因技术将从各种生物中克隆出来的基因片断插入到靶向受体中时，一般要构建启动子、终止子、选择标到靶向受体中时，一般要构建启动子、终止子、选择标记基因、报告基因等。记基因、报告基因等。u从基因水平进行转基因的检测就是要检测受体的核酸从基因水平进行转基因的检测就是要检测受体的核酸序列、目的片断的整合位点、基因多态性、目的片断的序列、目的片断的整合位点、基因多态性、目的片断的含量分析以及启动子、终止子、选择标记基因、报告基含量分析以及启动子、终止子、选择标记基因、报告基因等。因等。u导入基因

40、较蛋白质具热稳定性导入基因较蛋白质具热稳定性,加工工序影响较小加工工序影响较小,且且存在存在GMOGMO的任何部位组织。的任何部位组织。第37页/共46页u可直接检测启动子、终止子、标记基因片断、目可直接检测启动子、终止子、标记基因片断、目的基因片断。的基因片断。u当前约当前约75%的转基因植物中使用的转基因植物中使用Ca MV35S启动启动子子,其次是胭脂碱和章鱼碱合成酶的其次是胭脂碱和章鱼碱合成酶的NOS启动子和启动子和Ocs启动子。常用的终止子是胭脂碱合成酶的启动子。常用的终止子是胭脂碱合成酶的NOS终止子和终止子和Rubisco小亚基基因的小亚基基因的3 3端区域。端区域。u所以当前对

41、启动子和终止子的检测实际上是对所以当前对启动子和终止子的检测实际上是对Ca MV35S启动子和启动子和NOS终止子的检测。终止子的检测。第38页/共46页第39页/共46页(二二)外源蛋白质的检测方外源蛋白质的检测方法法 1.1.蛋白质印迹法蛋白质印迹法(Western blot)(Western blot)u把从样品中提取的蛋白质用凝胶电泳分离成把从样品中提取的蛋白质用凝胶电泳分离成大小不同的分子作为抗原大小不同的分子作为抗原,并将其转移到固体并将其转移到固体支持物上支持物上,用含有放射性标记的抗体做探针与用含有放射性标记的抗体做探针与之杂交之杂交,通过放射性自显影检测外源基因的表通过放射性

42、自显影检测外源基因的表达产物。达产物。u灵敏度为灵敏度为1-5ng1-5ng2.2.酶联免疫吸附试验酶联免疫吸附试验(ELISA)(ELISA)u复杂基质对它的准确性和精确度有干扰复杂基质对它的准确性和精确度有干扰.u只适合未加工的原材料的检测。只适合未加工的原材料的检测。第40页/共46页3.3.“侧流侧流”型免疫测定型免疫测定(Lateral Flow)u该法与该法与ELISAELISA相似相似.操作简单操作简单,能用于野外测试。能用于野外测试。u目标蛋白一般是水溶的且抗体具有高度专一性目标蛋白一般是水溶的且抗体具有高度专一性,样品仅样品仅需粗提便达到测试要求需粗提便达到测试要求,与与DN

43、ADNA测定比测定比,特性蛋白分析的特性蛋白分析的样品处理简单。样品处理简单。u因为抗体只识别没有变性的蛋白因为抗体只识别没有变性的蛋白,免疫蛋白实验通常仅免疫蛋白实验通常仅限于对植物叶、种子的分析。限于对植物叶、种子的分析。u在外源基因并不表达蛋白情况下在外源基因并不表达蛋白情况下,无法对转基因食品进无法对转基因食品进行免疫学蛋白测定行免疫学蛋白测定,只能采用转基因只能采用转基因DNADNA的测定。的测定。第41页/共46页4.4.试纸条法试纸条法(Lateral Flow(Lateral Flow Strip)Strip)u此法与此法与ELISAELISA相似。是将特异的抗体交联到试相似。

44、是将特异的抗体交联到试纸条上和有颜色的物质上纸条上和有颜色的物质上,当纸上抗体和特异当纸上抗体和特异抗原结合后抗原结合后,再和带有颜色的特异抗体进行反再和带有颜色的特异抗体进行反应应,就形成了带有颜色的三明治机构就形成了带有颜色的三明治机构,并且固定并且固定在试纸条上在试纸条上,如果没有抗原如果没有抗原,则没有颜色。则没有颜色。u此法操作相对简单。目前市场上也出现了一此法操作相对简单。目前市场上也出现了一些此类测试的试剂盒。些此类测试的试剂盒。第42页/共46页5.5.蛋白芯片蛋白芯片u此法原理和操作过程与基因芯片是类似的此法原理和操作过程与基因芯片是类似的,只是其原理是利用抗原抗体的特异性结

45、合而只是其原理是利用抗原抗体的特异性结合而不是碱基对的互补杂交。不是碱基对的互补杂交。u此方法现在仅原理上可以此方法现在仅原理上可以,实际操作过程中实际操作过程中还有一定的困难还有一定的困难,如特异外源蛋白的获得等。如特异外源蛋白的获得等。第43页/共46页外源蛋白质检测方法外源蛋白质检测方法小小结结优势优势:除蛋白芯片法外。快速除蛋白芯片法外。快速,具有一定的灵敏度具有一定的灵敏度,也能进行半定也能进行半定量量,尤其是试纸条法尤其是试纸条法,不需特殊仪器设备不需特殊仪器设备,适用于现场检验或适用于现场检验或初筛。初筛。局限性局限性:1.1.由于抗原抗体反应的专一性由于抗原抗体反应的专一性,每

46、种转基因产品都要开发和建每种转基因产品都要开发和建立专门的检测试剂和方法立专门的检测试剂和方法,而转基因产品种类繁多而转基因产品种类繁多,要建立所要建立所有转基因产品的蛋白质检测法工作量很大。有转基因产品的蛋白质检测法工作量很大。2.2.对于加工过的转基因食品对于加工过的转基因食品,其蛋白质很容易被破坏其蛋白质很容易被破坏,从而影从而影响检测结果的准确性。响检测结果的准确性。3.3.有些插入基因还具有表达部位特异性有些插入基因还具有表达部位特异性,甚至有的插入基因根甚至有的插入基因根本不表达或表达量很低。这些都会影响检测结果。本不表达或表达量很低。这些都会影响检测结果。第44页/共46页第45页/共46页感谢您的观看！第46页/共46页