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1、 DAKO产品简介产品简介DAKO产品结构产品结构npharmacoDiagnosticsTMn Immumocytochemestryn Molecular Pathologyn Flow Cytometryn Clinical Immunochemistryn MicrobiologypharmacoDiagnosticsTMDako HercepTestTMMolecular PathologynPNA Probes and PNA ISH Detection (主要有检测EBV,Kappa,Lambda,Telomere的荧光标记探针)nDNA Probes and DNA ISH D
2、etection(主要为检测HPV)Molecular PathologynB and T Cell Gene Rearrangement Probes for Souther Blotting and Chemiluminescent System for Nucleic acid Blotting原理:用荧光标记探针做Southern或Northern杂交,再用标记AP的抗荧光的抗体去检测,由于AP能水解底物dioxtane-phosphate,在探针处发出化学光并被胶片所捕捉,通过CCD照相系统显影特点:无放射性 较P32方法暴光时间短 使用标准胶片ISH Catalyzed Signa
3、l Amplification(CSA)SystemDAKO GenePointTM for Biotinylated Nucleic Acid Probes原理原理:Step1:Step2:Step3:Step4:Step5:biotinylated peroxidase-biotinyl deposition applicationprobe conjugated tyramide of biotinyl of DAB streptavidin tyramideSeep Flow Cytometry ClinicalImmunochemistry MicrobiologyImmumocyt
4、ochemestrynAutomated Staining SystemsnPrimary AntibodiesnVisualization SystemsnAccessoryAutomated Staining SystemsDako Autostainer全自动免疫组化染色仪全自动免疫组化染色仪 特点特点:一次完成48张切片 试剂开放 可同时使用不同的显色系统 结果可靠,重复性好 软件界面易学易用 无需特殊消耗品特点法特点法网网Primary Antibodies Visualization Systems发展史发展史Direct method60年代年代特点特点:特异性高,简便快捷缺点缺
5、点:敏感性差,需标记每一个一抗,对于荧光标记抗体:需荧光显微镜,价 昂,暗视野对比差,且需新鲜组织不能 作回顾性研究。FITCEnzymeIndirect method70年代年代特点特点:不需标记每一个一抗缺点缺点:敏感性差EnzymePAPABC(LSAB)ABC(LSAB)80年代年代PAP法法:敏感性提高,敏感性提高,可用于石蜡切片可用于石蜡切片 ABC法法:敏感性较敏感性较PAP法法 提高提高20-40倍倍 LSAB法法:90年代年代j多聚物系统多聚物系统:1 mol 多聚物骨架10 mol二抗70 mol HRP特点特点:二步法,简便快捷敏感性增强、背景着色低特异性增强提高一抗稀释
6、度DAKO ARKTM(Animal Research Kit)单克隆抗体用于小鼠组织降低背景试剂盒单克隆抗体用于小鼠组织降低背景试剂盒 原理原理:Step1:Step1:Primary Ab biotinylated Primary-Secondary Fab fragment complex特点法特点法网网 +A Apply to tissue Normal mouse serumm如何获得一张成功的如何获得一张成功的免疫组化染色切片免疫组化染色切片三大要素三大要素:组织固定组织固定 抗原修复抗原修复 敏感的检测系统敏感的检测系统组织固定:组织固定:目的:目的:保存抗原 固定液:固定液:1
7、0%中性福尔马林 固定时间:固定时间:4-6小时以上不超过48小时 特点法特点法网网 抗原修复抗原修复 目的:目的:方式:方式:微波微波 高压锅高压锅 水浴水浴 酶消化酶消化 注意:修复液注意:修复液PHPH值值 特点法特点法网网 E Envision System nvision System 操作步骤操作步骤1 1、切片脱蜡至水洗、切片脱蜡至水洗2 2、抗原修复(根据一抗说明而定)、抗原修复(根据一抗说明而定)抗原修复操作步骤见抗原修复操作步骤见DAKO中文目录第中文目录第72页。页。抗原修复液用枸橼酸缓冲液、抗原修复液用枸橼酸缓冲液、PH6.0,编号编号 为为GT1002。对于一些核表达
8、的抗体,如:对于一些核表达的抗体,如:CD3、CD5、ER、PR、AR、bcl-2等,建议用高等,建议用高PH的抗原修的抗原修 复液,编号为复液,编号为S3308。3、蒸馏水漂洗,置于蒸馏水漂洗,置于PBS中。中。4、阻断内源性过氧化物酶(仅用、阻断内源性过氧化物酶(仅用 于于Envition标记标记HRP的试剂)。的试剂)。用用3%过氧化氢避光孵育过氧化氢避光孵育20分钟。分钟。5、蒸馏水漂洗,置于蒸馏水漂洗,置于PBS中。中。6、一抗孵育。、一抗孵育。、注意:孵育时间长短可自行调整,且与孵育温注意:孵育时间长短可自行调整,且与孵育温 度度有关,温度高,时间短,温度低,时间长。如:有关,温度
9、高,时间短,温度低,时间长。如:4冰箱孵育需过夜,冰箱孵育需过夜,37孵育孵育2小时。小时。7 7、PBS漂洗漂洗5分钟分钟2次次。8 8、Envision/HRP Envision/HRP 37孵育孵育45-60分钟。分钟。9、PBS漂洗漂洗5分钟分钟2次次。10、DAB显色显色、镜下控制时间。镜下控制时间。DAB配制方法:配制方法:DAKO DAB 编号编号GK346810。1ml稀释液加稀释液加20ul DAB浓缩液浓缩液注注意意:无无需需再再加加3%过过氧氧化化氢氢,稀稀释释液液中中已已经经加加有有3%过氧化氢。过氧化氢。1111、蒸馏水漂洗蒸馏水漂洗1212、复染及封片、复染及封片
10、DAKO市场市场成都分区主要竞争对手比较成都分区主要竞争对手比较特点法特点法网网推广方式比较推广方式比较n迈新:迈新:定期分发宣传资料,介绍新产品新技术新方法。每年举办病理科主任联系会;倾力赞助各种病理相关会议;免费技术培训等。客户投诉:无条件更换。n中山:中山:定期分发宣传资料,介绍新产品新技术新方法。赠送病理杂志;代卖各种病理书籍;选择性赞助病理相关会议。客户投诉:无条件更换。Promotionn加大推广力度加大推广力度,树立公司良好形象树立公司良好形象n保证库存品种齐全保证库存品种齐全,加快到货时间加快到货时间n举办举办workshop关于关于RTU的市场分析的市场分析n目标客户:目标客
11、户:部分大医院病理科部分大医院病理科地市级等中小型医院病理科地市级等中小型医院病理科少部分研究生及研究单位少部分研究生及研究单位关于关于RTU的市场分析的市场分析n技术情况:技术情况:专业知识薄弱专业知识薄弱设备简陋设备简陋不懂英文不懂英文关于关于RTU的市场分析的市场分析n用量:用量:外检量:外检量:2000-6000例例/年年免疫组化用量:免疫组化用量:4000-10000元(元(RMB)/年年n市场占有量约市场占有量约40%关于关于RTU的市场分析的市场分析nPromotion:举办workshop定期分发宣传资料,介绍新产品新技术新方法。技术支持Price(Commission)Sample关于关于RTU的市场分析的市场分析nPromotion:库存:(包括辅助产品)到货:(附中文说明书)售后:讨讨 论论n如何为一个新开展免疫组化的病理科选配如何为一个新开展免疫组化的病理科选配一套免疫组化试剂?一套免疫组化试剂?n如何说服病理科购买你的免疫组化试剂?如何说服病理科购买你的免疫组化试剂?谢 谢!
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