仪器分析教案第七章色谱法PPT讲稿.ppt

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1、仪器分析教案第七章色谱法2023/4/8第1页，共116页，编辑于2022年，星期三第七章第七章 气相色谱分析法气相色谱分析法 一、一、色谱分析法的历史色谱分析法的历史The history二、气相色谱分析二、气相色谱分析Gas chromatography三、课程的学习方法三、课程的学习方法learning method of the course四、参考资料四、参考资料references 第一节第一节 色谱分析法概述introductionThe summarization of chromatography2023/4/8第2页，共116页，编辑于2022年，星期三国产气相色谱仪HP高

2、压液相色谱仪美国气相色谱仪2023/4/8第3页，共116页，编辑于2022年，星期三俄国植物学家俄国植物学家Tswett于于1901年年发现：利用吸附发现：利用吸附原理原理分离植物色素分离植物色素1903年年发表文章：发表文章：On a new category of adsorption phenomena and their application to biochemical analysis1906年年Tswett 创立创立“chromatography”“色谱法色谱法”新名新名词词一、色谱分析法的历史一、色谱分析法的历史2023/4/8第4页，共116页，编辑于2022年，星期三1

3、907年年在德国生物会议上第一次向世界公开展示显在德国生物会议上第一次向世界公开展示显现彩色现彩色环带的柱管环带的柱管1935年年Adams and Holmes 发明了苯酚发明了苯酚-甲醛型离子交甲醛型离子交换树脂，进一步发明了换树脂，进一步发明了离子色谱离子色谱1938年年Izmailov 发明发明薄层色谱薄层色谱1941年年Martin&Synge 发明了发明了液液-液分配色谱液分配色谱1944年年Consden,Gordon&Martin 发明发明纸色谱纸色谱1952年年Martin&Synge 发明发明气气-液色谱液色谱1953年年Janak发明发明气气-固色谱固色谱1954年年Ra

4、y发明发明热导检测器热导检测器2023/4/8第5页，共116页，编辑于2022年，星期三1954年我国研究成功年我国研究成功第一台色谱仪第一台色谱仪1957年年Martin&Golay 发明发明毛细管色谱毛细管色谱1959年年Porath&Flodin 发明发明凝胶色谱凝胶色谱1960年年液相色谱技术完善液相色谱技术完善色谱法色谱法(chromatography)：以试样组分在固定相和流动相：以试样组分在固定相和流动相间的间的溶解、吸附、分配、离子交换或其他亲和作用的差溶解、吸附、分配、离子交换或其他亲和作用的差异异为依据为依据而建立起来的各种而建立起来的各种分离分析方法分离分析方法称色谱法

5、。称色谱法。是借助是借助色谱分离原理色谱分离原理而使混合物中各组分分离的而使混合物中各组分分离的技术技术；将色谱分离技术应用于分析化学，称为将色谱分离技术应用于分析化学，称为色谱分析。色谱分析。2023/4/8第6页，共116页，编辑于2022年，星期三二、色谱方法的分类二、色谱方法的分类1.定义定义 色谱是一种分离技术色谱是一种分离技术.色谱柱：进行色谱分离用的细长管。色谱柱：进行色谱分离用的细长管。固定相：管内保持固定、起分离作用的填充物。固定相：管内保持固定、起分离作用的填充物。流动相：流经固定相的空隙或表面的冲洗剂。流动相：流经固定相的空隙或表面的冲洗剂。2023/4/8第7页，共11

6、6页，编辑于2022年，星期三2.色谱法的分类色谱法的分类(三种三种)（1 1）按两项存在的物理状态分类）按两项存在的物理状态分类 根据流动相的物态：根据流动相的物态：气相色谱法气相色谱法(GC)(GC)液相色谱法液相色谱法(LC)(LC)根据固定相的物态：根据固定相的物态：气气-固色谱法固色谱法 液液-固色谱法固色谱法 气气-液色谱法液色谱法 液液-液色谱法液色谱法2023/4/8第8页，共116页，编辑于2022年，星期三（2）按固定相使用的形式分类）按固定相使用的形式分类 柱色谱、柱色谱、纸色谱、纸色谱、薄层色谱薄层色谱（3 3）按分离机理分类）按分离机理分类 吸吸附附色色谱谱、分分配配

7、色色谱谱、离离子子交交换换色色谱谱、凝胶色谱凝胶色谱2023/4/8第9页，共116页，编辑于2022年，星期三三、色谱法的特点（后）三、色谱法的特点（后）(1)(1)高选择性高选择性(2)(2)高效能高效能(3)(3)高灵敏度高灵敏度(4)(4)分析速度快分析速度快2023/4/8第10页，共116页，编辑于2022年，星期三四、色谱法的应用四、色谱法的应用(1)(1)色色谱谱分分析析广广泛泛应应用用于于极极为为复复杂杂的的混混合合物物成成分分分分析；析；(2)(2)液液相相色色谱谱法法，在在糖糖类类、氨氨基基酸酸、农农药药、染染料料、贵贵金金属、有机金属化合物等方面得到了广泛的应用。属、有

8、机金属化合物等方面得到了广泛的应用。(3)(3)色色谱谱分分离离是是一一种种非非常常有有效效的的提提纯纯物物质质的的技技术术，常常用用于制备分离，得到高纯样品。于制备分离，得到高纯样品。(4)(4)色色谱谱质质谱谱联联用用仪仪已已成成为为研研究究分分子子结结构构的的重重要要手手段。段。2023/4/8第11页，共116页，编辑于2022年，星期三第二节第二节 气相色谱分析理论基础气相色谱分析理论基础 高效能高效能填充柱都有填充柱都有几千块几千块理论塔板理论塔板毛毛细细管管柱柱可可达达10104 4块块10105 5块块理理论论塔塔板板，可可以以分分析析沸沸点点十十分相近的组分和极为复杂的多组分

9、混合物分相近的组分和极为复杂的多组分混合物高选择性高选择性可分离同系物、同分异构化合物。可分离同系物、同分异构化合物。一、气相色谱法的特点一、气相色谱法的特点2023/4/8第12页，共116页，编辑于2022年，星期三高灵敏度高灵敏度可以检测出可以检测出1010-11-11g g1010-13-13g g物质物质痕痕量量杂杂质质分分析析：可可以以测测出出超超纯纯气气体体、高高分分子子单单体体、高高纯试剂中质量分数为纯试剂中质量分数为1010-6-61010-10-10数量级的杂质数量级的杂质大大气气污污染染物物分分析析：可可以以直直接接检检出出质质量量分分数数为为1010-9-9数数量量级级

10、的痕量毒物的痕量毒物农农药药残残留留物物的的分分析析：可可以以检检出出农农副副产产品品、食食品品、水水质质中中质质量分数为量分数为1010-6-61010-9-9数量级的氯、硫、磷化合物数量级的氯、硫、磷化合物2023/4/8第13页，共116页，编辑于2022年，星期三分析速度快分析速度快一一般般分分析析可可在在几几分分到到几几十十分分内内可可以以完完成成，某某些些快快速速分分析析1s1s内内可以分析数个组分。可以分析数个组分。2023/4/8第14页，共116页，编辑于2022年，星期三二、气相色谱法的基本概念二、气相色谱法的基本概念1 1色谱常用术语色谱常用术语色谱图色谱图试样中各组分经

11、色谱柱分离后，按先后次序经过检测试样中各组分经色谱柱分离后，按先后次序经过检测器时，检测器就将流动相中器时，检测器就将流动相中各组分浓度变化转变为相应各组分浓度变化转变为相应的电信号，的电信号，由记录仪所记录下的由记录仪所记录下的信号信号时间的变化曲时间的变化曲线线，称为，称为色谱流出曲线。色谱流出曲线。2023/4/8第15页，共116页，编辑于2022年，星期三2023/4/8第16页，共116页，编辑于2022年，星期三2023/4/8第17页，共116页，编辑于2022年，星期三2023/4/8第18页，共116页，编辑于2022年，星期三基线基线在在操操作作条条件件下下，没没有有试试

12、样样进进入入检检测测器器，只只有有纯纯流流动动相相进进入入检检测测器器时时的的流流出出曲曲线线，记记录录仪仪记记录录的的是是一一条条直直线线，这条直线称为基线。这条直线称为基线。噪音：噪音：使基线发生细小的波动的现象使基线发生细小的波动的现象基基线线是是在在实实验验操操作作条条件件下下，反反映映检检测测器器系系统统噪噪声声随随时时间间变变化化的曲线。的曲线。2023/4/8第19页，共116页，编辑于2022年，星期三色谱峰高和峰面积色谱峰高和峰面积峰峰高高(h)(h)：峰峰高高h h指指色色谱谱峰峰最最高高点点到到基基线线的的距距离离，一一般般用用cmcm为单位。为单位。峰峰面面积积(A)：

13、峰峰峰峰高高高高与与与与峰峰峰峰底底底底宽宽宽宽之之之之间间间间的的的的乘乘乘乘积积积积称称称称为为为为峰峰峰峰面面面面积积积积(peak(peak area)area)，用，用，用，用A A表示。表示。表示。表示。2023/4/8第20页，共116页，编辑于2022年，星期三峰的区域宽度：峰的区域宽度：峰的区域宽度：峰的区域宽度：峰宽峰宽(Y)(Y)与半峰宽与半峰宽YY1/21/2)从色谱峰两侧的转折点从色谱峰两侧的转折点(拐点拐点)作切线，在基线上的作切线，在基线上的截距叫峰底宽截距叫峰底宽(Y)(Y)；简称；简称峰宽峰宽；峰高一半处色谱峰的宽度叫峰高一半处色谱峰的宽度叫半峰宽半峰宽(Y(

14、Y1/21/2)。由于色谱峰顶呈圆孤形，色谱峰的半峰宽并不等于峰底宽由于色谱峰顶呈圆孤形，色谱峰的半峰宽并不等于峰底宽的一半。的一半。a、峰底宽、峰底宽 Y=4=1.70 Y1/2 b、半高峰宽、半高峰宽 Y1/2=2.355 c、标准偏差峰宽、标准偏差峰宽 Y0.607h=2 2023/4/8第21页，共116页，编辑于2022年，星期三例例4.2.1 4.2.1 已已知知记记录录纸纸的的速速度度是是2.5cm2.5cmminmin-1-1，测测得得某某色色谱谱峰的峰底宽度为峰的峰底宽度为3.2cm3.2cm，用时间表示的色谱峰宽度为多少，用时间表示的色谱峰宽度为多少?解：解：3.2cm(2

15、.5cm 3.2cm(2.5cmminmin-1-1)1.28min1.28min答：色谱峰的宽度为答：色谱峰的宽度为1.28min1.28min。2023/4/8第22页，共116页，编辑于2022年，星期三保留值保留值表表示示被被测测组组分分从从进进样样到到色色谱谱柱柱后后出出现现浓浓度度最最大大值值所所需需要要的的时间时间(或所需载气的体积或所需载气的体积)，叫做保留值。，叫做保留值。保保留留时时间间(t tR R):):是是指指被被测测组组分分从从进进样样开开始始到到柱柱后后出出现浓度最大值时所需的时间。现浓度最大值时所需的时间。组分在流动相中停留的时间组分在流动相中停留的时间 +在固

16、定相中所停留的时间在固定相中所停留的时间2023/4/8第23页，共116页，编辑于2022年，星期三 调调整整保保留留时时间间(t tR R)：组组分分的的保保留留时时间间与与死死时时间间的差值：的差值：t tR R=t=tR R-t-t0 0它它表表示示与与固固定定相相发发生生作作用用的的组组分分比比载载气气在在色色谱谱柱柱中中多多滞滞留的时间，实际上是留的时间，实际上是组分在固定相中所滞留的时间组分在固定相中所滞留的时间。死时间（死时间（t0）：不与固定相作用的组分（空气）从）：不与固定相作用的组分（空气）从进样到柱后出现浓度最大值所需要的的时间。进样到柱后出现浓度最大值所需要的的时间。

17、2023/4/8第24页，共116页，编辑于2022年，星期三 保保留留体体积积（VR）：从从进进样样开开始始到到柱柱后后出出现现浓浓度度最最大大值所需要的载气体积值所需要的载气体积 VR=qv,0 tR 调调整整保保留留体体积积（VR）：指指扣扣除除死死体体积积后后的的保保留留体积体积VR=t0 qv,0 死体积（死体积（V0）：不与固定相作用的组分从进样到柱）：不与固定相作用的组分从进样到柱后出现浓度最大值所需要的载气体积。若载气的体积流量后出现浓度最大值所需要的载气体积。若载气的体积流量为为qv,0，则死体积为，则死体积为V0=qv,0 t02023/4/8第25页，共116页，编辑于2

18、022年，星期三相对保留值相对保留值()()表示组分表示组分2 2的调整保留值与组分的调整保留值与组分1 1的调整保留值之比：的调整保留值之比：值越大，两组分的色谱峰相距越远，分离得越好值越大，两组分的色谱峰相距越远，分离得越好2023/4/8第26页，共116页，编辑于2022年，星期三2.2.分配系数与分配比分配系数与分配比定义：定义：组分在固定相和流动相之间发生的吸附与解（脱）附组分在固定相和流动相之间发生的吸附与解（脱）附或者溶解与挥发的过程叫或者溶解与挥发的过程叫分配过程分配过程。（1 1）分分配配系系数数(K K):):在在一一定定温温度度、压压力力下下，当当组组分分在在流流动动相

19、相和和固固定定相相两两相相中中达达到到分分配配平平衡衡时时，组组分分在在两两相相中的中的浓度之比浓度之比，称为分配系数，称为分配系数(K K)。2023/4/8第27页，共116页，编辑于2022年，星期三KK溶溶解解度度或或吸吸附附能能力力，组组分分在在固固定定相相中中的的量量，在在气相中的量气相中的量。KK进进入入固固定定相相的的组组分分，组组分分在在固固定定相相中中滞滞留留的的时时间间越越长，流出色谱柱所需的时间也就越长。长，流出色谱柱所需的时间也就越长。组分在固定相中的质组分在固定相中的质量浓度量浓度(g(gmLmL-1-1)组分在流动相中的质量组分在流动相中的质量浓度浓度(g(gmL

20、mL-1-1)2023/4/8第28页，共116页，编辑于2022年，星期三（2）分配比分配比(k)定定义义：分分配配比比是是在在一一定定温温度度、压压力力下下，组组分分在在两两相相间间达达到分配平衡时，两相间组分的到分配平衡时，两相间组分的质量比质量比：k=ms/mm分配比又称为分配比又称为容量因子或容量比容量因子或容量比分配比分配比k的大小由下式计算：的大小由下式计算：k=tR/t0通过实验来测定分配比通过实验来测定分配比k的数值的数值k k值值越越大大，保保留留时时间间越越长长。k k=0=0的的组组分分，其其保保留留时时间间即即为为死死时间。时间。2023/4/8第29页，共116页，

21、编辑于2022年，星期三（3 3）分配系数与分配比的关系分配系数与分配比的关系相比：表示流动相体积与固定相体相比：表示流动相体积与固定相体积之比积之比2023/4/8第30页，共116页，编辑于2022年，星期三3.3.谱分析的实验依据：谱分析的实验依据：根据色谱峰的位置（保留时间）可以进行定性分析。根据色谱峰的位置（保留时间）可以进行定性分析。根据色谱峰的面积或峰高可以进行定量分析。根据色谱峰的面积或峰高可以进行定量分析。根据色谱峰的展宽程度，可以对某物质在实验条件根据色谱峰的展宽程度，可以对某物质在实验条件下的分离特性进行评价。下的分离特性进行评价。相对保留值相对保留值应该与柱长、柱径、填

22、充情况、流动应该与柱长、柱径、填充情况、流动相流速等条件无关，而仅与温度、固定相种类有相流速等条件无关，而仅与温度、固定相种类有关。关。当当r ri i，s s=1=1时两个组分不能分离。时两个组分不能分离。2023/4/8第31页，共116页，编辑于2022年，星期三三、气相色谱法的基本理论1.塔板理论塔板理论（Martin and Synge 1941）七点假设：七点假设：将一根色谱柱视为一个精馏塔将一根色谱柱视为一个精馏塔色谱柱是由一系列连续的、水平的塔板构成色谱柱是由一系列连续的、水平的塔板构成每一块塔板的高度为每一块塔板的高度为H组分气体以脉冲的方式进入塔板组分气体以脉冲的方式进入塔

23、板组分在每一块塔板上迅速达到分配平衡组分在每一块塔板上迅速达到分配平衡分配系数在各塔板上是常数分配系数在各塔板上是常数气体的纵向扩散可以忽略不计气体的纵向扩散可以忽略不计2023/4/8第32页，共116页，编辑于2022年，星期三塔板理论认为，一根柱子可以分为塔板理论认为，一根柱子可以分为n段，在每段，在每段内组分在两相间很快达到平衡，把每一段称段内组分在两相间很快达到平衡，把每一段称为一块理论塔板。为一块理论塔板。设柱长为设柱长为L，理论塔板高度为，理论塔板高度为H，则，则 H=L/n式中式中n为理论塔板数。为理论塔板数。同长度的色谱柱塔板数越多，塔板高度同长度的色谱柱塔板数越多，塔板高度

24、H越越小，分离效果越好。小，分离效果越好。2023/4/8第33页，共116页，编辑于2022年，星期三理论塔板数（理论塔板数（n）可根据色谱图上所测得的保留）可根据色谱图上所测得的保留时间（时间（tR）和峰底宽（）和峰底宽（Y）或半峰宽（）或半峰宽（Yh/2）按）按下式下式推算推算：或或保留时间越长，保留时间越长，Y或或Y1/2越小，色谱峰越窄，理论越小，色谱峰越窄，理论塔板数越多，组分在两相间达到分配平衡的次数也塔板数越多，组分在两相间达到分配平衡的次数也越多，分离能力越强，柱效也就越高。越多，分离能力越强，柱效也就越高。2023/4/8第34页，共116页，编辑于2022年，星期三例例2

25、.2 2.2 某色谱柱长某色谱柱长2.1m2.1m，测得某组分的保留时间为，测得某组分的保留时间为5min42s5min42s，在色谱纸上量得色谱峰的宽度为，在色谱纸上量得色谱峰的宽度为1.2cm1.2cm，已知纸，已知纸速为速为2cm2cmminmin-1-1，求塔板高度。，求塔板高度。解：将色谱峰的宽度换算成时间：解：将色谱峰的宽度换算成时间：2023/4/8第35页，共116页，编辑于2022年，星期三答：塔板高度为答：塔板高度为1.45mm1.45mm。2023/4/8第36页，共116页，编辑于2022年，星期三有效塔板数（有效塔板数（neff）的计算公式为；）的计算公式为；Heff

26、=L/neff n=1+k k2 neff有有效效塔塔板板数数扣扣除除了了死死时时间间的的影影响响，通通常常用用（n neffeff）来来评评价价柱柱的的效效能能,较较为为真真实实地地反反映映了了柱柱效效能能的的好好坏坏,比比较较符符合合实实际际。neff 越越大大或或H Heffeff越越小小，则则色色谱柱的柱效越高。谱柱的柱效越高。2023/4/8第37页，共116页，编辑于2022年，星期三塔板理论的特点塔板理论的特点优点：优点：理论直观，能解释流出曲线的形理论直观，能解释流出曲线的形状和浓度极大点状和浓度极大点(色谱峰色谱峰)的位置，应用广的位置，应用广泛。泛。缺点：缺点：理论建立在几

27、点假设之上，不能理论建立在几点假设之上，不能解释塔板高度量受哪些因素的影响，也解释塔板高度量受哪些因素的影响，也不能指出降低塔板高度的途径。不能指出降低塔板高度的途径。2023/4/8第38页，共116页，编辑于2022年，星期三2.2.速率理论速率理论（J.J.Van Deemter 1956）速速率率理理论论认认为为，单单个个组组分分粒粒子子在在色色谱谱柱柱内内固固定定相相和和流流动动相相间间要要发发生生千千万万次次转转移移，加加上上分分子子扩扩散散和和运运动动途途径径等等因因素素，它它在在柱柱内内的的运运动动是是高高度度不不规规则则的的，是是随随机机的的，在在柱柱中中随随流流动动相相前前

28、进的进的速度是不均一的速度是不均一的。2023/4/8第39页，共116页，编辑于2022年，星期三范第姆特方程式：范第姆特方程式：式中：式中：U为流动相平均线速度；为流动相平均线速度；A为涡流扩散项；为涡流扩散项；B/U为分子扩散项；为分子扩散项；CU为传质阻力项。为传质阻力项。H=A+B/U+CU减少减少A，B/U，CU三项的值，可以降低塔板高度量，减三项的值，可以降低塔板高度量，减少色谱峰的扩张，提高柱效。少色谱峰的扩张，提高柱效。2023/4/8第40页，共116页，编辑于2022年，星期三（1 1）涡涡流流扩扩散散项项(A A)：A A 的的大大小小，与与填填充充物物的的平平均均颗颗

29、粒粒直直径径d dp p(单单位位为为cm)cm)有有关关，也也与与固固定定相相填填充充不不均均匀匀因因子子有关：有关：2023/4/8第41页，共116页，编辑于2022年，星期三（2 2）分子扩散项分子扩散项(B/UB/U)试试样样分分子子沿沿色色谱谱柱柱纵纵的的方方向向扩扩散散，系系数数B B 的的大大小小与与气气体体路路径径弯弯曲曲因因子子和和组组分分在在气气体体中中的的扩扩散散系系数数D Dg g(单位为单位为cmcm2 2.s.s-1-1)有关：有关：毛细管柱：毛细管柱：=1填充柱填充柱：12023/4/8第42页，共116页，编辑于2022年，星期三（3 3）传质阻力项传质阻力项

30、(CUCU)定定义义：被被测测组组分分由由于于浓浓度度不不均均匀匀而而发发生生物物质质迁迁移移过过程程，称为传质过程。称为传质过程。C C 称为传质阻力系数。称为传质阻力系数。传质过程分为：气相传质过程与液相传质过程传质过程分为：气相传质过程与液相传质过程传传质质阻阻力力系系数数C C等等于于气气相相传传质质阻阻力力系系数数C Cg g和和液液相相传传质质阻阻力系数力系数C Cl l之和：之和：C=Cg+C12023/4/8第43页，共116页，编辑于2022年，星期三液膜厚度液膜厚度组分在气体中的扩散系数组分在气体中的扩散系数2023/4/8第44页，共116页，编辑于2022年，星期三总结

31、：总结：范第姆特方程范第姆特方程H=A+B/U+CUA A，B/UB/U，CUCU越越小小，色色谱谱柱柱的的塔塔板板高高度度H H 越越小小，柱柱效效率越高。率越高。改善柱效率的因素：改善柱效率的因素：选择颗粒较小的均匀填料选择颗粒较小的均匀填料选用较低的柱温操作选用较低的柱温操作降低担体表面液层的厚度降低担体表面液层的厚度选选用用合合适适的的载载气气及及载载气气流流速速：流流速速较较小小时时，分分子子扩扩散散项项成成为为色色谱谱峰峰扩扩张张的的主主要要因因素素，宜宜用用相相对对分分子子质质量量较较大大的的载载气气；流流速速较较大大时时，传传质质项项为为控控制制因因素素，宜宜用用相对分子质量较

32、小的载气。相对分子质量较小的载气。2023/4/8第45页，共116页，编辑于2022年，星期三第四节 色谱分离条件的选择一、分离度和影响分离的因素一、分离度和影响分离的因素（1）分离度）分离度R及计算及计算定定义义：相相邻邻两两色色谱谱峰峰保保留留值值之之差差与与两两组组分分色色谱谱峰峰底底宽宽度度平平均值之比，用均值之比，用R表示。表示。分分离离度度可可以以用用来来作作为为衡衡量量色色谱谱峰峰分分离离效效能能的的指指标标。色色谱谱柱柱的的选选择择性性越越强强，两两组组分分的的色色谱谱峰峰相相距距越越远远；柱柱效效能能越越高高，色色谱峰越窄。谱峰越窄。2023/4/8第46页，共116页，编

33、辑于2022年，星期三2023/4/8第47页，共116页，编辑于2022年，星期三R R1 1时，分离程度为时，分离程度为98.7%98.7%R R1.51.5时，分离程度可达时，分离程度可达99.7%99.7%R R1.51.5作为完全分开的标志作为完全分开的标志2023/4/8第48页，共116页，编辑于2022年，星期三若若两两组组分分分分离离效效果果较较差差，可可用用半半峰峰宽宽(Y(Y1/21/2)代代替替峰峰底底宽宽(Y)(Y)计算分离度：计算分离度：2023/4/8第49页，共116页，编辑于2022年，星期三（2 2）色谱分离基本方程式）色谱分离基本方程式由上式可知：由上式可

34、知：增加塔板数可以提高分离度增加塔板数可以提高分离度k k值的最佳范围是：值的最佳范围是：1 1k k1010相对保留值相对保留值增大，能显著地提高分离度增大，能显著地提高分离度两根同种色谱柱的相互关系式：两根同种色谱柱的相互关系式：2023/4/8第50页，共116页，编辑于2022年，星期三 与柱效的关系（柱效因子）与柱效的关系（柱效因子）与容量因子的关系与容量因子的关系R nR n1/21/2增加柱长增加柱长减小塔板高度减小塔板高度限制：限制：L过长，保留时间延过长，保留时间延长，分析时间延长，色谱长，分析时间延长，色谱峰扩展。峰扩展。使用性能优良的色使用性能优良的色谱柱，并选择最佳谱柱

35、，并选择最佳分离条件分离条件k值增大，有利于分离，但值增大，有利于分离，但k 10时，对时，对R的增加的增加不明显，也会显著增加分析时间不明显，也会显著增加分析时间k的最佳范围：的最佳范围：1 102023/4/8第51页，共116页，编辑于2022年，星期三 与柱选择性的关系与柱选择性的关系 分离度、柱效、柱选择性的关系分离度、柱效、柱选择性的关系r2,1越大，柱选择性越好，分离效果越好。如果越大，柱选择性越好，分离效果越好。如果两个相邻峰的选择因子足够大，则即使色谱柱的两个相邻峰的选择因子足够大，则即使色谱柱的理论塔板数较小，也可以实现分离。理论塔板数较小，也可以实现分离。L=16R2H有

36、效有效 a aa a-12=n有效有效 H有效有效2023/4/8第52页，共116页，编辑于2022年，星期三例例4.2.3 4.2.3 如如果果柱柱长长L L2 2为为1m1m时时，分分离离度度及及为为0.80.8，要要实实现现完完全全分离分离(R R1.5)1.5)，色谱柱，色谱柱L Ll l至少应有多长至少应有多长?解：解：答：色谱柱至少应有答：色谱柱至少应有3.52m3.52m长。长。2023/4/8第53页，共116页，编辑于2022年，星期三例例4.2.4 4.2.4 用用3m3m长的填充柱得到如图长的填充柱得到如图4.2.64.2.6所示的色谱流所示的色谱流出曲线，为了得到出曲

37、线，为了得到R R1.51.5的分辨率，填充柱最短需要多的分辨率，填充柱最短需要多少米少米?2023/4/8第54页，共116页，编辑于2022年，星期三塔板高度为：塔板高度为：代入公式，得：代入公式，得：解：2023/4/8第55页，共116页，编辑于2022年，星期三二、分离条件的选择二、分离条件的选择载气及其最佳流速的选择载气及其最佳流速的选择 载气的选择载气的选择 热导池检测器常用氢气、氦气作载气热导池检测器常用氢气、氦气作载气 氢火焰检测器宜用氮气作载氢火焰检测器宜用氮气作载2023/4/8第56页，共116页，编辑于2022年，星期三载气流速的选择载气流速的选择范范第第姆姆特特方方

38、程程式式H=A+B/U+CU中中，A，B，C与与载载气气线线速速度无关。度无关。载气的最佳流速：载气的最佳流速：2023/4/8第57页，共116页，编辑于2022年，星期三柱温的选择柱温的选择柱柱温温改改变变时时，柱柱效效率率、分分离离度度R R、选选择择性性及及色色谱谱柱柱的的稳稳定定性性都将产生相应的改变。都将产生相应的改变。2023/4/8第58页，共116页，编辑于2022年，星期三汽化温度的选择汽化温度的选择 比汽化室高比汽化室高30307070或：比试样组分中最高的沸点高或：比试样组分中最高的沸点高30305050进样时间和进样量进样时间和进样量 在在0.1s0.1s内把试样样进

39、完内把试样样进完 液体进样量为液体进样量为0.10.1L L5 5L L 气体进样量为气体进样量为0.1mL0.1mL5mL5mL2023/4/8第59页，共116页，编辑于2022年，星期三三、固定相及其选择三、固定相及其选择1气气固色谱固定相固色谱固定相吸附吸附物理化学过程物理化学过程吸附剂分类：吸附剂分类：(1)非非极极性性吸吸附附剂剂：如如活活性性炭炭，适适用用于于低低沸沸点点的的碳碳氢氢化合物的分析。化合物的分析。(2)弱弱极极性性吸吸附附剂剂：如如氧氧化化铝铝吸吸附附剂剂，适适用用于于分分析析C1C4烃类及异构体。烃类及异构体。2023/4/8第60页，共116页，编辑于2022年

40、，星期三(3)强强极极性性吸吸附附剂剂：如如分分子子筛筛，适适于于分分析析N2，O2，CO，H2等等气气体和正异构烷烃。体和正异构烷烃。(4)氢氢键键型型吸吸附附剂剂：如如硅硅胶胶吸吸附附剂剂，适适用用于于分分析析有有氢氢键键或或极极性性的的化合物。化合物。2023/4/8第61页，共116页，编辑于2022年，星期三2.2.气气-液色谱固定相液色谱固定相气气-液色谱的优点：液色谱的优点：(1)(1)固定液的品种繁多，可选择范围大；固定液的品种繁多，可选择范围大；(2)(2)固固定定液液的的用用量量可可以以任任意意变变化化；可可以以根根据据需需要要选选用用合合适的固定液用量，以改善分离效果；适

41、的固定液用量，以改善分离效果；(3)(3)气气-液色谱在通常操作条件下有良好的对称峰；液色谱在通常操作条件下有良好的对称峰；寿命长。寿命长。2023/4/8第62页，共116页，编辑于2022年，星期三担体担体担担体体的的作作用用是是提提供供一一个个很很大大的的惰惰性性表表面面，使使固固定定液液以以薄薄膜膜状状态分布在其表面上态分布在其表面上有白色硅藻土担体和红色硅藻土担体两类有白色硅藻土担体和红色硅藻土担体两类2023/4/8第63页，共116页，编辑于2022年，星期三担体的选择的基本原则担体的选择的基本原则(1)固固定定液液用用量量在在5%以以上上的的，采采用用硅硅藻藻土土型型担担体体；

42、固固定液用量在定液用量在5%以下的，采用表面处理过的担体。以下的，采用表面处理过的担体。(2)高高沸沸点点组组分分的的分分离离，由由于于控控制制的的柱柱温温(色色谱谱柱柱温温度度)较高，使用玻璃微球作担体。较高，使用玻璃微球作担体。(3)对高腐蚀性的组分，应选用抗腐蚀性强的聚四氮乙烯担对高腐蚀性的组分，应选用抗腐蚀性强的聚四氮乙烯担体体(氟担体氟担体)。担担体体的的粒粒度度常常选选用用60目目80目目或或80目目100目目，高高效效柱柱可可选选用用100目目120目。目。2023/4/8第64页，共116页，编辑于2022年，星期三固定液固定液对固定液的要求：对固定液的要求：(1)难以挥发，热

43、稳定性好。难以挥发，热稳定性好。在在工工作作柱柱温温下下，固固定定液液粘粘度度小小，能能均均布布在在担担体体表表面面上形成液膜。上形成液膜。(3)(3)对被测组分有一定的溶解度且有较高的选择性。对被测组分有一定的溶解度且有较高的选择性。化化学学稳稳定定性性好好，在在操操作作条条件件下下，固固定定液液不不与与载载气气、担担体体、被测组分发生不可逆的化学反应。被测组分发生不可逆的化学反应。2023/4/8第65页，共116页，编辑于2022年，星期三固定液的分类固定液的分类主要是按固定液的极性分级：主要是按固定液的极性分级：“0 0”级级非极性固定液非极性固定液“+1+1”与与“+2+2”级级弱极

44、性固定液弱极性固定液“+3+3”级级中等极性固定液中等极性固定液“+4+4”与与“+5+5”级级强极性固定液强极性固定液2023/4/8第66页，共116页，编辑于2022年，星期三固定液的选择原则：固定液的选择原则：(1)(1)非极性试样，用非极性固定液；非极性试样，用非极性固定液；(2)(2)极性试样，使用极性固定液；极性试样，使用极性固定液；(3)(3)极性与非极性的混合物，一般选用极性固定液；极性与非极性的混合物，一般选用极性固定液；(4)(4)能形成氢键的试样，选用极性或形成氢键的固定液；能形成氢键的试样，选用极性或形成氢键的固定液；(5)(5)复杂的多组分混合试样，常用两种或两种以

45、上的复杂的多组分混合试样，常用两种或两种以上的混合固定液。混合固定液。2023/4/8第67页，共116页，编辑于2022年，星期三第四节 气相色谱检测器一、气相色谱议的基本部件与作用一、气相色谱议的基本部件与作用2023/4/8第68页，共116页，编辑于2022年，星期三气相色谱仪的工作过程气相色谱仪的工作过程气相色谱仪分为五个主要组成部分：气相色谱仪分为五个主要组成部分：载气系统：气体流动相的运行系统；载气系统：气体流动相的运行系统；进样系统：样品的导入系统；进样系统：样品的导入系统；分离系统：混合样品的分离；分离系统：混合样品的分离；检测系统：分离后物质检测信号的形成；检测系统：分离后

46、物质检测信号的形成；记录系统：检测信号的记录与运算；记录系统：检测信号的记录与运算；2023/4/8第69页，共116页，编辑于2022年，星期三 二、气相色谱检测器气相色谱检测器（一）气相色谱检测器的类型（一）气相色谱检测器的类型1.1.气相色谱检测器根据响应原理的不同可分为气相色谱检测器根据响应原理的不同可分为浓度浓度型检测器型检测器和和质量型检测器质量型检测器两类。两类。（1 1）浓度型检测器：）浓度型检测器：测量的是载气中某组分瞬间浓度的变化，即检测器的响应值和组分的瞬间浓度成正比。如热导池检测器（TCD）和电子捕获检测器（ECD）（2 2）质量型检测器：）质量型检测器：测量的是载气中

47、某组分质量比率的变化，即检测器的响应值和单位时间进入检测器的组分质量成正比。如氢火焰离子化检测器（FID）和火焰光度检测器（FPD）2023/4/8第70页，共116页，编辑于2022年，星期三 2.2.按照应用范围分按照应用范围分通用通用和和专用专用检测器检测器 通用检测器有：通用检测器有：（1 1）热导池检测器，）热导池检测器，TCD(Thermal conductivity TCD(Thermal conductivity detector)detector)测一般化合物和永久性气体测一般化合物和永久性气体（2 2）氢火焰离子化检测器）氢火焰离子化检测器,FID(Hydrogen fla

48、me,FID(Hydrogen flame ionization detector)ionization detector)测一般有机化合物测一般有机化合物专用检测器有：专用检测器有：（3 3）电子俘获检测器，）电子俘获检测器，ECD(Electron capture ECD(Electron capture detector)detector)测带强电负性原子的有机化合物测带强电负性原子的有机化合物（4 4）火焰光度检测器，）火焰光度检测器，FPD(Flame photometric FPD(Flame photometric detector)detector)测含硫、含磷的有机化合物测含

49、硫、含磷的有机化合物2023/4/8第71页，共116页，编辑于2022年，星期三（二）检测器的工作原理（二）检测器的工作原理1.1.热导检测器热导检测器（1 1）热导池检测器的结构及测量原理）热导池检测器的结构及测量原理热导检测器的依据是组分和载气分别具有不同的热导系热导检测器的依据是组分和载气分别具有不同的热导系数，它的特点是结构简单，稳定性好，操作容易，灵敏数，它的特点是结构简单，稳定性好，操作容易，灵敏度适中，对无机试样和有机试样都能响应，是应用最广度适中，对无机试样和有机试样都能响应，是应用最广泛、最成熟的一种通用型检测器。泛、最成熟的一种通用型检测器。2023/4/8第72页，共1

50、16页，编辑于2022年，星期三2023/4/8第73页，共116页，编辑于2022年，星期三2023/4/8第74页，共116页，编辑于2022年，星期三2.氢火焰检测器氢火焰检测器利利用用有有机机化化合合物物在在氢氢火火焰焰中中燃燃烧烧时时能能产产生生带带电电离离子子碎碎片片，收集其荷电量进行测定。收集其荷电量进行测定。氢火焰检测器的结构原理氢火焰检测器的结构原理离离子子化化机机理理：有有机机物物在在氢氢火火焰焰中中发发生生化化学学电电离离火火焰焰中中的的正正离离 子子 以以H3O+最最多多，约约占占90%；其其他他还还有有CHO+，CH3O+，C3H+等。等。对对在在氢氢火火焰焰中中不不