探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 及血球计数板的构造和使用.pptx

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1、1.基 础 回 扣（1）酵母菌 酵母菌是单细胞真核生物。生长周期短，增殖速度快，还可以用酵母菌作为实验材料研究（探究酵母菌的呼吸方式，判断细胞的死活探究膜的透性）第1页/共20页（2）种群数量的变化 种群数量的变化包括增长、波动、稳定、下降等 “S”型曲线有一个K值，即环境容纳量。种群数量的增长也受到许多环境因素（如温度、培养液的pH、培养液的养分种类和浓度、代谢产物等）的影响。第2页/共20页（3）血球计数板 血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器。计数时，常采用样方法。第3页/共20页（4）探究性实验探究实验设计时要遵循的原则：科学性原则、可行性原则、对照原则、单一变量原则

2、和平行重复原则。第4页/共20页培养液中酵母菌种群数量与时间的变化关系（1）实验原理：种群的数量变化有一定的规律。在理想条件下，种群呈“J”型增长，在有限的环境下，种群呈“S”型增长。酵母菌生长周期短，增殖速度快且世代间不重叠，在实验室条件下，用液体培养基培养酵母菌，可以观察酵母菌种群数量随时间变化的情况。对于压在小方格界线上的酵母菌应取相邻两边及顶角计数。第5页/共20页（2）引出培养液配制、灭菌、接种和培养等步骤l培养液配制：配制质量分数为5的葡萄糖溶液（葡萄糖20g，1000mL水），分装到5个烧杯中（200mL/烧杯）l灭菌：用高压蒸汽灭菌锅将培养液和取样、计数时所用的滴管分别灭菌。贴

3、标签。l接种：接种时要在酒精灯附近，用灭菌干净的1mL刻度吸管每次吸取0.1mL酵母菌母液，往每个烧杯中加入。（注意滴加量不要太多，避免初始菌数过多。）l培养：将烧杯置于28的恒温箱中培养第6页/共20页（3）设计实验：A组为实验组，装培养液10 mL，酵母菌母液0.1mL,环境温度28。B组装培养液10 mL，酵母菌母液0.1mL,环境温度5，与A组形成温度条件对照。C组不装培养液，只装无菌水10mL,酵母菌母液0.1mL,环境温度28，与A组形成营养条件对照。第7页/共20页（4）计数计数：首先取样，每 天取样时间大体一致，并要遵守无菌操作规范。每次取样前要试管振荡摇匀，正确地使用1mL刻

4、度吸管将lmL酵母菌培养液移入1支干净的试管里，然后用滴管吸取1滴培养液滴在已盖在血球计数板网格上的盖玻片的边缘，待培养液自行渗入并充满网格后，再放在显微镜下进行细胞计数，后立即将数据填到记录表格中。如 记数时发现，细胞数较多，不易分辨，吸取的样液应当稀释。参考1：一次实验数据记录表 参考2：出A、B、C各个处理的曲线图第8页/共20页第9页/共20页 3.讨论（1）在计数前，还应有哪些步骤？需注意些什么？（2）针对“培养液中酵母菌种群数量的动态变化”，有人提出了新的问题，某同学按下表完成了有关实验。第10页/共20页血球计数板的构造和使用第11页/共20页血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特

5、制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网.方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用.这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3.计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由1625=2516=400个小方格组成,见图.第12页/共20页第13页/共20页第14页/共20页以计数酵母菌为例(1)用血球计数板计

6、数酵母菌悬液的酵母菌个数.(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可.(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片.(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.血球计数板的使用第15页/共20页第16页/共20页(5)计数时,如果使用16格25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个

7、小方格)的酵母菌数.(6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞).(7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数.第17页/共20页3.计算公式(1)16格25格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100400104稀释倍数(2)25格x16格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80400104稀释倍数第18页/共20页4.血球计数板的清洁血球汁数板使用后,用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹风机吹干,或用95%的乙醇,无水乙醇,丙酮等有机溶剂脱水使其干燥.通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物.若不干净,则必须重复清洗直到干净为止.第19页/共20页感谢您的观看。第20页/共20页