动物实验基本操作技术PPT讲稿.ppt

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1、动物实验基本操作技术动物实验基本操作技术第1页，共67页，编辑于2022年，星期五l实验动物的捉拿和固定方法l实验动物的给药方法l实验动物的麻醉方法l实验动物的编号方法l实验动物的去毛方法l实验动物的取血方法l实验动物的处死方法第2页，共67页，编辑于2022年，星期五一、实验动物的捉拿和固定方法1.小鼠 捉拿时先用右手将鼠尾抓住提起，放在较粗糙的台面或鼠笼上，在其向前爬行时，右手向后拉尾，用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和头颈部皮肤，将其固定于左手手心中，拉直四肢并用左手无名指压紧尾和后肢，右手即可作注射或其他实验操作。取尾血及尾静脉注射时，可将小鼠固定在金属或木制的固定器上。第3页，共67页

2、，编辑于2022年，星期五第4页，共67页，编辑于2022年，星期五2.家兔一一手手抓抓住住兔兔颈颈部部的的被被毛毛与与皮皮肤肤，另另一一手手托托其其臀臀部部或腹部，使其躯干的重量大部分集中在手上。或腹部，使其躯干的重量大部分集中在手上。第5页，共67页，编辑于2022年，星期五第6页，共67页，编辑于2022年，星期五兔兔手术固定台手术固定台第7页，共67页，编辑于2022年，星期五第8页，共67页，编辑于2022年，星期五二、实验动物的给药方法1.注射法给药：家兔耳缘静脉注射 大、小鼠尾静脉注射2.摄入法给药：家兔、大鼠、小鼠灌胃法3.涂布法给药第9页，共67页，编辑于2022年，星期五摄

3、入法给药自动口服给药强制灌胃给药：大鼠 小鼠 家兔经直肠给药第10页，共67页，编辑于2022年，星期五小鼠、大鼠灌胃法器械：灌胃器 由注射器和特殊的灌胃针构成。小鼠灌胃针长45cm 直径1 mm大鼠灌胃针长68cm 直径1.2mm第11页，共67页，编辑于2022年，星期五小鼠灌胃法按正确方法用左手抓取和固定动物。使腹部朝上，颈部拉直。固定后，右手持持接灌胃针的注射器吸取药液（或事先将药液吸好），将针头从口角插入口腔内，然后用灌胃针头压其头部，使口腔与食管成一直线，再将灌胃针头沿上腭壁轻轻进入，转动针头刺激动物吞咽，然后沿咽后壁慢慢插入食道。若动物挣扎厉害，应退出后灌胃针，待动物安静后重新插

4、入。切不可强行插入，以免损伤食道或误入气管导致动物死亡。当感觉有落空感时表明灌胃针可能进入胃内，向外抽动注射器活塞，感觉有负压说明灌胃针未插入气管，此时可将药液灌入。第12页，共67页，编辑于2022年，星期五成年小鼠插管深度一般是：3cm小鼠灌胃量：0.10.25ml/10g体重第13页，共67页，编辑于2022年，星期五大鼠灌胃法成年大鼠插管深度一般是：5cm大鼠灌胃量：12ml/100g体重第14页，共67页，编辑于2022年，星期五兔灌胃法器械：灌胃管（特制胃管或导尿管）开口器（木质纺锤状）第15页，共67页，编辑于2022年，星期五兔灌胃法操作方法：1.固定：动物取直立或平卧体位，固

5、定动物头部。直立位需2人合作，一人取坐位，将兔的躯体和下肢夹在两腿之间，左手紧握双耳固定头部，右手抓住前肢，将兔固定于竖立体位。另一人将开口器横放于兔口中，让动物咬住开口器，即可开始插入灌胃管。第16页，共67页，编辑于2022年，星期五第17页，共67页，编辑于2022年，星期五兔灌胃法兔灌胃法操作方法：2.插管：将灌胃管由开口器的中央孔插入，沿上颚壁推进约15cm。插管过程中可将灌胃管的另一端放于一杯清水中，若连续有气泡，说明插入呼吸道，应立即拔出灌胃管，重新操作；若无气泡，说明没有插入气管，即可开始注药。第18页，共67页，编辑于2022年，星期五沿上沿上颚颚壁壁推进约推进约15cm15

6、cm检查检查插入部位插入部位第19页，共67页，编辑于2022年，星期五兔灌胃法操作方法：3.给药：灌注药后可用少量清水将灌胃管里的药全部冲入胃内，以保证灌入药的剂量准确。灌胃完毕后，先退出胃管，后退出开口器。第20页，共67页，编辑于2022年，星期五兔灌胃法关关键词键词：固定，插入（沿上：固定，插入（沿上颚颚壁），壁），检查检查第21页，共67页，编辑于2022年，星期五家兔耳缘静脉注射将动物固定于实验台上，剪去耳缘部位的被毛，用乙醇轻轻擦拭，耳缘静脉即清晰可见。用左手食指和中指夹住静脉近心端，拇指和小指夹住耳缘部分，以左手无名指和小指放在耳下作垫，待静脉充盈后，右手持注射器使针头尽量由静

7、脉远心端刺入，顺血管方向平行、向心端刺入约1cm。注射完毕抽出针头，用棉球压迫注射部位数分钟，以免出血。第22页，共67页，编辑于2022年，星期五三、实验动物的麻醉方法三、实验动物的麻醉方法u全全身身麻醉法：吸入法，注射法麻醉法：吸入法，注射法u局局部麻醉法：部麻醉法：浸浸润润麻醉，表麻醉，表面面麻麻醉醉第23页，共67页，编辑于2022年，星期五（一）全身麻醉法（一）全身麻醉法1、吸入法、吸入法麻醉药：麻醉药：u乙醚乙醚u氯仿氯仿u三氟乙烷三氟乙烷第24页，共67页，编辑于2022年，星期五2、注射法、注射法 麻醉药：麻醉药：巴比妥类药物巴比妥类药物 氯胺酮氯胺酮 乌拉坦乌拉坦 水合氯醛水

8、合氯醛（一）全身麻醉法（一）全身麻醉法第25页，共67页，编辑于2022年，星期五（二）（二）局部麻醉法局部麻醉法u 1%盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因 局部浸润麻醉局部浸润麻醉u 0.022盐酸可卡因盐酸可卡因 表面麻醉表面麻醉第26页，共67页，编辑于2022年，星期五麻醉药物应用原则：麻醉药物应用原则：l依据动物体重计算麻醉药物的剂量；依据动物体重计算麻醉药物的剂量；l依据动物生命体征变化控制给药速度；依据动物生命体征变化控制给药速度；l掌握宁少勿多、分阶段给药的方式。掌握宁少勿多、分阶段给药的方式。针对不同的动物，选择不同的麻醉药物、针对不同的动物，选择不同的麻醉药物、实施不同的麻醉方法。实

9、施不同的麻醉方法。第27页，共67页，编辑于2022年，星期五麻醉具体操作：麻醉具体操作：家兔全身麻醉家兔全身麻醉麻醉剂：麻醉剂：1.5%1.5%戊巴比妥钠，戊巴比妥钠，2ml/kg2ml/kg前前1/21/2快快速速推推入入，使使动动物物能能顺顺利利、快快速速地地渡渡过过兴兴奋奋期期；后后1/21/2速速度度宜宜慢慢，且且边边注注射射边边注注意意观观察察动动物物的的生生命命体体征征变变化化，当当确确定定已已达达到到麻麻醉醉效效果果时时，即即停停止止给给药药，不不必必急急于于将将剩剩余余的的麻麻醉醉药药物物全全部部推推入。入。给药方法：给药方法：耳缘静脉注射耳缘静脉注射第28页，共67页，编辑

10、于2022年，星期五麻醉成功标志麻醉成功标志角膜反射迟钝角膜反射迟钝或消失或消失肢体肌肉松弛肢体肌肉松弛疼痛反射消失疼痛反射消失呼吸变深变慢呼吸变深变慢 第29页，共67页，编辑于2022年，星期五机能实验学常用手术方法一、常用手术器械二、常用手术插管技术 气管插管术 颈动脉插管术 颈静脉插管术第30页，共67页，编辑于2022年，星期五动物实验常用手术器械动物实验常用手术器械第31页，共67页，编辑于2022年，星期五 粗剪 用于蛙类实验中的剪骨、肌肉和皮肤等粗硬组织以及家兔等实验动物的剪毛。剪毛时，剪毛剪自然落下逆毛方向一次次将毛剪下即可，加力下压或一手提起被毛，均易剪破皮肤。剪下的毛应集

11、中放入加有清水的污物盒内，避免到处飞扬。第32页，共67页，编辑于2022年，星期五手术剪手术剪用于剪线和剪开、分离组织。用于剪线和剪开、分离组织。有直、弯、尖头、圆头、大、有直、弯、尖头、圆头、大、小之分，根据不同用途选用。小之分，根据不同用途选用。手术操作中用于沿组织间隙进手术操作中用于沿组织间隙进行分离和剪断组织者称组织剪，行分离和剪断组织者称组织剪，一般为弯形，尖端较钝圆；用一般为弯形，尖端较钝圆；用于剪断缝扎线、引流物或敷料于剪断缝扎线、引流物或敷料等用品者称剪线剪，为直形。等用品者称剪线剪，为直形。第33页，共67页，编辑于2022年，星期五眼科剪 主要用于剪血管或神经等柔软组织，

12、眼科剪也有直头与弯头之分，正确的执剪姿势与手术剪相同，即用拇指与无名指持剪，食指置于手术剪上方。第34页，共67页，编辑于2022年，星期五手术刀手术刀l由由刀刀片片和和刀刀柄柄组组成成，可可分分为为大大、中中、小号不同类型。小号不同类型。l大号大号切开皮肤；切开皮肤；l中号中号切割脏器组织；切割脏器组织；l小号小号切割特殊部位。切割特殊部位。l安安装装：先先用用持持针针器器（或或直直型型止止血血钳钳）夹夹住住刀刀片片，左左手手握握住住刀刀柄柄，按按刀刀片片上上的的空空隙隙对对准准刀刀柄柄上上的的槽槽隙隙，顺顺势势推推入入即可即可。第35页，共67页，编辑于2022年，星期五手术刀握持方法手术

13、刀握持方法第36页，共67页，编辑于2022年，星期五执执笔笔式式：即即以以持持笔笔的的手手法法握握住住刀刀柄柄，适适用用于于小小范范围围内内的的组组织织切切开开，随随意意性性强强，可可作作垂直或水平切割垂直或水平切割。持持弓弓式式：右右手手中中指指、无无名名指指按按压压在在手手术术刀刀柄柄的的外外侧侧缘缘，拇拇指指放放在在刀刀柄柄内内侧侧缘缘，食食指指按按压压在在刀刀片片后后1 13 3处处。适适用用于于切切开开皮皮肤。肤。第37页，共67页，编辑于2022年，星期五组织镊组织镊l组织镊和眼科镊。组织镊和眼科镊。l组组织织镊镊钳钳夹夹组组织织，分分离离组组织和筋膜。织和筋膜。l眼科镊眼科镊分

14、离血管。分离血管。l使使用用手手法法：以以食食指指、中中指指放放于于器器械械的的外外侧侧缘缘，拇拇指指放放于于内内侧侧缘缘，集集3指指的的力力量量实实施施操操作作动动作作，而而且且适适用用于于左左右右手手的同时操作。的同时操作。第38页，共67页，编辑于2022年，星期五止血钳止血钳l止血和分离组织。止血和分离组织。l使使用用方方法法：以以拇拇指指、中中指指（或或无无名名指指）分分别别套套人人止止血血钳钳的的套套扣扣内内，控控制制止止血血钳钳展展开开的的力力度度，以以食食指指放放在在止止血血钳钳的的关关节节部部位位，控控制制止止血血钳钳的的方向和钳夹组织部位的准确性。方向和钳夹组织部位的准确性

15、。l切切忌忌左左右右手手分分别别抓抓住住止止血血钳钳的的套套扣扣部部位位，用用两两手手的的合合力力进进行行止止血血或或分分离离组组织。织。第39页，共67页，编辑于2022年，星期五缝合针缝合针l有圆针和角针两种，圆针用于缝合组织结构；有圆针和角针两种，圆针用于缝合组织结构；l角针边缘锋利，除具有穿刺功能外，还具有角针边缘锋利，除具有穿刺功能外，还具有 切割的作用；缝合针需配合持针器同时使用。切割的作用；缝合针需配合持针器同时使用。第40页，共67页，编辑于2022年，星期五探针探针包包括括金金属属探探针针和和玻玻璃璃分分针针；用用于于对对精精细细部部位位的的分分离离和和游游离离等等操操作作。

16、有有时时，在在实实施施血血管管插插管管技技术术时时，切切开开血血管管壁壁后后往往往往借借助助于于探探针针先先将将切切口口挑挑起起，然然后后插插入导管。入导管。第41页，共67页，编辑于2022年，星期五支架 用于蛙类及哺乳类手术中换能器及刺激电极等的固定与位置调节。由底座及支架杆构成，支架上附有万向节，可在各个方向上调节。第42页，共67页，编辑于2022年，星期五哺乳类手术器械哺乳类手术器械气管插管 急性动物实验时插入气管，以保证呼吸道畅通，一端接气鼓或呼吸换能器可记录呼吸运动。分为金属插管和玻璃插管。第43页，共67页，编辑于2022年，星期五哺乳类手术器械哺乳类手术器械动脉夹 动脉夹分大

17、、中、小三种型号及直、弯两种，用于夹持动脉，暂时阻断动脉血流。使用时动脉夹的尖端套有塑料管，以防止夹持动脉时对血管造成损伤。第44页，共67页，编辑于2022年，星期五哺乳类手术器械哺乳类手术器械动脉插管 用于在急性动物实验时插入动脉。可用金属、玻璃以及塑料等不同材料制成，常用细塑料管自行拉制而成。在哺乳类动物实验中，插管一端插入动脉，另一端接压力换能器以记录血压，插管内充满肝素以防止插管内血液凝固，插管腔内不可有气泡，以免影响结果。第45页，共67页，编辑于2022年，星期五哺乳类手术器械哺乳类手术器械三通管 用于改变实验中液体流动方向，以便输液、给药或描记血压。可随意将三个通道中的任何两个

18、通道口相通，另一个不通；也可使三个通道同时都通或都不通。第46页，共67页，编辑于2022年，星期五哺乳动物手术器材清单金属用品玻璃用品消耗品手术剪1把气管插管1个纱布眼科剪1把动脉插管1根棉签血管钳4把尿道插管1根丝线手术镊1把玻璃分针1根动脉夹1个注射器1 支（1ml/5ml）手术刀1把三通管一个第47页，共67页，编辑于2022年，星期五动物实验常用插管技术动物实验常用插管技术u 气管插管术气管插管术u 颈动脉插管术颈动脉插管术u 颈静脉插管术颈静脉插管术u 导尿管插管术导尿管插管术第48页，共67页，编辑于2022年，星期五插管技术的基本步骤插管技术的基本步骤1.动物称重、麻醉、固定。

19、动物称重、麻醉、固定。2.插管部位皮肤去毛、备皮。插管部位皮肤去毛、备皮。3.皮肤切开。皮肤切开。4.皮下组织结构的分离。皮下组织结构的分离。5.目标器官或组织结构的游离。目标器官或组织结构的游离。6.导管的插入或固定。导管的插入或固定。第49页，共67页，编辑于2022年，星期五家兔颈部神经和血管的解剖位置家兔颈部神经和血管的解剖位置第50页，共67页，编辑于2022年，星期五第51页，共67页，编辑于2022年，星期五迷走神经迷走神经 交感神经交感神经第52页，共67页，编辑于2022年，星期五减减压压神神经经第53页，共67页，编辑于2022年，星期五气管插管术气管插管术第54页，共67

20、页，编辑于2022年，星期五1 1、麻醉固定、颈部皮、麻醉固定、颈部皮肤去毛、备皮肤去毛、备皮2 2、在颈前区正中、在颈前区正中作一约作一约5 5-7cmcm的切的切口口第55页，共67页，编辑于2022年，星期五3 3、钝性分离皮下组织、肌肉，游离出气管，穿线、钝性分离皮下组织、肌肉，游离出气管，穿线备用。备用。第56页，共67页，编辑于2022年，星期五4 4、在在甲甲状状软软骨骨下下方方第第3 3-4 4个个环环状状软软骨骨上上作作一一倒倒“T”形形切切口口，插插入入“Y”形形气气管管插插管管，并并用线固定好。用线固定好。第57页，共67页，编辑于2022年，星期五颈动脉插管技术颈动脉插

21、管技术1、颈正中作一约、颈正中作一约5-7cm的切口的切口2、钝性分离皮下筋膜、钝性分离皮下筋膜第58页，共67页，编辑于2022年，星期五3 3、分离一侧颈总动脉，穿双线备用。、分离一侧颈总动脉，穿双线备用。第59页，共67页，编辑于2022年，星期五4 4、结结扎扎远远心心端端，在在距距结结扎扎线线约约2 2-3cm3cm处处用用动动脉脉夹夹夹闭颈总动脉近心端。夹闭颈总动脉近心端。第60页，共67页，编辑于2022年，星期五5 5、在在靠靠近近结结扎扎线线处处用用眼眼科科剪剪剪剪一一“v”形形切切口口，切口大小约为动脉口径的切口大小约为动脉口径的1/31/31/21/2。第61页，共67页

22、，编辑于2022年，星期五6 6、将将压压力力换换能能器器与与动动脉脉插插管管连连接接好好并并充充满满肝肝素，向近心端插入动脉插管，用线结扎牢固。素，向近心端插入动脉插管，用线结扎牢固。第62页，共67页，编辑于2022年，星期五三通的使用：三通的使用：第63页，共67页，编辑于2022年，星期五u进入进入BL41410/42/420系统。系统。u选择选择“实验项目实验项目”选择选择“循环实验循环实验”“兔兔动脉血压调节动脉血压调节”实验模块；实验模块；7、打开换能器开关，观察并记录动脉血压。、打开换能器开关，观察并记录动脉血压。或或选选择择“输输入入信信号号”选选择择“通通道道”“压压力力”

23、点点击击“开开始始”实实验验按按钮钮，即即可可在在屏屏幕幕上上观察到正常的血压曲线。观察到正常的血压曲线。第64页，共67页，编辑于2022年，星期五动脉插管注意事项动脉插管注意事项动脉插管和血压换能器内注满肝素生理盐动脉插管和血压换能器内注满肝素生理盐水以排气抗凝。水以排气抗凝。压力换能器与动物心脏等高。压力换能器与动物心脏等高。动脉插管与颈总动脉呈一条直线，方向一动脉插管与颈总动脉呈一条直线，方向一致致 。掌握好三通管的方向。掌握好三通管的方向。结扎固定牢固。结扎固定牢固。第65页，共67页，编辑于2022年，星期五颈静脉插管术颈静脉插管术第66页，共67页，编辑于2022年，星期五操作操作练习练习 小鼠的抓取和灌胃小鼠的抓取和灌胃 家兔的抓取和灌胃家兔的抓取和灌胃 家兔的全身麻醉家兔的全身麻醉 家兔的气管插管家兔的气管插管 家兔的颈总动脉插管家兔的颈总动脉插管 第67页，共67页，编辑于2022年，星期五