生物蛋白质分子芯片的制造幻灯片.ppt

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1、生物蛋白质分子芯片的制造第1页，共52页，编辑于2022年，星期一1 1 分析课题分析课题 由于我们小组成员是首次接触这方面的课题，由于我们小组成员是首次接触这方面的课题，因此在进行课题分析时首先利用百度、因此在进行课题分析时首先利用百度、GoogleGoogle这这两个搜索引擎搜索两个搜索引擎搜索生物蛋白质分子芯片制造的一生物蛋白质分子芯片制造的一些的基本知识。在百度中我们检索到一篇名为些的基本知识。在百度中我们检索到一篇名为生物芯片及其应用生物芯片及其应用 的文章对我们理解课题非的文章对我们理解课题非常有帮助。如下图：常有帮助。如下图：第2页，共52页，编辑于2022年，星期一第3页，共5

2、2页，编辑于2022年，星期一 本课题以本课题以生物蛋白质分子芯片的制造方法生物蛋白质分子芯片的制造方法为为研究对象研究对象，学科分类主要属于学科分类主要属于“生物工程学（生生物工程学（生物技术）物技术）”领域，是领域，是生物传感技术生物传感技术的一个研究方的一个研究方向。向。根据中国图书馆图书分类法的类目设置，根据中国图书馆图书分类法的类目设置，涉及涉及“蛋白质工程蛋白质工程”和和“生物工程应用生物工程应用”其分类其分类号分别为号分别为Q816Q816、Q819Q819；课题提示时间范围是查课题提示时间范围是查找最近找最近1010年的文献。主要属于文献类检索，文献年的文献。主要属于文献类检索

3、，文献类型主要涉及图书、期刊、学位论文、专利、报类型主要涉及图书、期刊、学位论文、专利、报纸等文献类型。先查中文，后查外文。纸等文献类型。先查中文，后查外文。第4页，共52页，编辑于2022年，星期一2 2 选择检索工具选择检索工具（1 1）中文检索工具）中文检索工具维普中文科技期刊数据库维普中文科技期刊数据库 CNKI中国期刊全文数据库中国期刊全文数据库 CNKI中国博士学位论文全文数据库中国博士学位论文全文数据库 CNKI中国重要会议论文全文数据库中国重要会议论文全文数据库 万方数据资源系统万方数据资源系统超星电子图书超星电子图书中国国家知识产权局的专利数据库中国国家知识产权局的专利数据库

4、搜索引擎：搜索引擎：Baidu、Google等等第5页，共52页，编辑于2022年，星期一 SDOS ARL ProQuest博硕士论文全文数据库博硕士论文全文数据库 EBSCOhost 美国专利商标局和欧洲专利局美国专利商标局和欧洲专利局 Google学术搜索学术搜索选择检索工具选择检索工具（2）外文检索工具：）外文检索工具：第6页，共52页，编辑于2022年，星期一 选择原则一般是先用中文，后用外文数选择原则一般是先用中文，后用外文数据库。先用期刊数据库，后用图书、学位论据库。先用期刊数据库，后用图书、学位论文、专利数据库，最后用其他特种文献数据文、专利数据库，最后用其他特种文献数据库或者

5、搜索引擎。就本题而言，首选的检索库或者搜索引擎。就本题而言，首选的检索工具是维普工具是维普中文科技期刊数据库中文科技期刊数据库，是收，是收录全国录全国19891989年以来各类科技期刊最全、更年以来各类科技期刊最全、更新速度最快的中文期刊全文数据库，正合本新速度最快的中文期刊全文数据库，正合本题使用，而期刊文献具有连续性与新颖的特题使用，而期刊文献具有连续性与新颖的特点，是最重要的信息源之一。点，是最重要的信息源之一。选择检索工具选择检索工具第7页，共52页，编辑于2022年，星期一3 3 确定检索途径确定检索途径 本课题可选用主题（关键词）途本课题可选用主题（关键词）途径为主，结合分类途径。

6、径为主，结合分类途径。第8页，共52页，编辑于2022年，星期一4 4 拟定检索词拟定检索词根据研究内容拟定首选检索词为：根据研究内容拟定首选检索词为：（1）蛋白质芯片或微阵列芯片（）蛋白质芯片或微阵列芯片（protein chip或或protein microarray）（2）制造（）制造（make或或Manufacture）扩展检索词为：扩展检索词为：（1）生物芯片（）生物芯片（biochip或或biological chip）（2）制备或设计（）制备或设计（preparation或或development）第9页，共52页，编辑于2022年，星期一5 实施检索实施检索（1）维普）维普中文

7、科技期刊数据库中文科技期刊数据库命中0篇第10页，共52页，编辑于2022年，星期一扩展检索，命中扩展检索，命中扩展检索，命中扩展检索，命中10篇篇第11页，共52页，编辑于2022年，星期一实施检索实施检索（2）CNKI中国期刊全文数据库中国期刊全文数据库 命中命中19篇篇第12页，共52页，编辑于2022年，星期一实施检索实施检索（3）CNKI中国博士学位论文全文数据库中国博士学位论文全文数据库 命中命中28篇篇第13页，共52页，编辑于2022年，星期一（4 4）CNKI中国重要会议论文全文数据库中国重要会议论文全文数据库中国重要会议论文全文数据库中国重要会议论文全文数据库命中命中命中命

8、中1 1条条实施检索实施检索第14页，共52页，编辑于2022年，星期一实施检索实施检索（5 5）万方数据资源系统）万方数据资源系统命中命中6666篇篇第15页，共52页，编辑于2022年，星期一（6 6）超星电子图书）超星电子图书）超星电子图书）超星电子图书命中命中命中命中0 0条条实施检索实施检索第16页，共52页，编辑于2022年，星期一扩展检索扩展检索扩展检索扩展检索命中命中命中命中5 5条条实施检索实施检索第17页，共52页，编辑于2022年，星期一实施检索实施检索（7）中国国家知识产权局的专利数据库）中国国家知识产权局的专利数据库命中命中5条条第18页，共52页，编辑于2022年，

9、星期一第19页，共52页，编辑于2022年，星期一实施检索实施检索（8）百度）百度第20页，共52页，编辑于2022年，星期一实施检索实施检索（9 9）Google Google 学术搜索（中文）学术搜索（中文）第21页，共52页，编辑于2022年，星期一实施检索实施检索（10）Elsevier SDOL(ScienceDirect Online)第22页，共52页，编辑于2022年，星期一实施检索实施检索（11）ARL第23页，共52页，编辑于2022年，星期一实施检索实施检索（1212）ProQuestProQuest博硕士论文全文数据库博硕士论文全文数据库第24页，共52页，编辑于202

10、2年，星期一实施检索实施检索（13）EBSCOhost第25页，共52页，编辑于2022年，星期一美国专利商标局第26页，共52页，编辑于2022年，星期一欧洲专利局由于校园网网速太慢，无法打开欧洲专利局主页，因而未进行检索。第27页，共52页，编辑于2022年，星期一（1414）Google学术搜索（英文）学术搜索（英文）实施检索实施检索第28页，共52页，编辑于2022年，星期一实施检索实施检索（15）Scirus第29页，共52页，编辑于2022年，星期一6 6 获取原文获取原文（1）维普中文科技期刊数据库）维普中文科技期刊数据库第30页，共52页，编辑于2022年，星期一获取全文获取全

11、文（2 2）CNKICNKI中国期刊全文数据库中国期刊全文数据库 第31页，共52页，编辑于2022年，星期一获取全文获取全文（3 3）CNKICNKI中国博士学位论文全文数据库中国博士学位论文全文数据库 第32页，共52页，编辑于2022年，星期一获取全文获取全文（4 4）CNKICNKI中国重要会议论文全文数据库中国重要会议论文全文数据库 第33页，共52页，编辑于2022年，星期一获取全文获取全文（5 5）万方数据资源系统）万方数据资源系统 第34页，共52页，编辑于2022年，星期一获取全文获取全文（6）超星数字图书馆）超星数字图书馆第35页，共52页，编辑于2022年，星期一获取全文

12、获取全文（7）中国国家知识产权局的专利数据库）中国国家知识产权局的专利数据库第36页，共52页，编辑于2022年，星期一获取全文获取全文（8）百度）百度第37页，共52页，编辑于2022年，星期一获取全文获取全文（9 9）Google Google 学术搜索（中文）学术搜索（中文）第38页，共52页，编辑于2022年，星期一获取全文获取全文（10）Elsevier SDOL(ScienceDirect Online)第39页，共52页，编辑于2022年，星期一（1111）ARL第40页，共52页，编辑于2022年，星期一（12）ProQuest第41页，共52页，编辑于2022年，星期一获取全

13、文获取全文（13）EBSCOhost第42页，共52页，编辑于2022年，星期一（1414）美国专利商标局）美国专利商标局第43页，共52页，编辑于2022年，星期一（16）Google学术搜索（英文）学术搜索（英文）第44页，共52页，编辑于2022年，星期一7 检索结果分析 中英文文献数量年变化趋势图中英文文献数量年变化趋势图通过对各个检索工具的检索结果进行去重等处理，最后得到相关文献86篇，其中中文14篇，英文72篇。文献的年分布如下图所示：第45页，共52页，编辑于2022年，星期一1从上图中我们可以看出对蛋白质生物芯片的研究呈逐年递增的趋势。22007年前后出现峰值。32007年后有

14、略微上升的趋势，表明可能对生物芯片的研究出现了新的热点领域。4 中文文献的数量远远少于英文文献的数量，这表明我国对蛋白质芯片制造方法的研究远远落后于国外，还有较大的研究空间。分析分析第46页，共52页，编辑于2022年，星期一分析后得出的蛋白质芯片的制造方法：分析后得出的蛋白质芯片的制造方法：蛋白质芯片是一种新型的生物芯片，是由固定于不同种类支持介质上的抗原或抗体微阵列组成，阵列中固定分子的位置及组成是以知的，用标记（荧光物质、酶或化学发光物质等标记）的抗体或抗原与芯片上的探针进行反应，然后通过特定的扫描装置进行检测，结果由计算机分析处理。分析分析第47页，共52页，编辑于2022年，星期一方

15、法一：噬菌体抗体库技术方法一：噬菌体抗体库技术噬菌体抗体库技术就是典型的代表，它可以同时有效的处理大量的分子，而且抗体分子可以不经过动物的阴性选择，能从任一种属获得少有的抗体专一性和提高亲和力。最近deWildt等用scFv抗体制作微阵列，阵列化的抗体在数周乃至数月后保持稳定。也可用其他的蛋白质文库制作探阵蛋白，如全合成人重组抗体库、噬菌体肽库、噬菌体表达文库等。分析分析第48页，共52页，编辑于2022年，星期一本方法的特征在于：首先采用标准的半导体工艺清洗和热氧化硅片；然后使用十八烷基三氯硅烷处理硅表面，再采用原子力显微镜(AFM)纳米刻蚀技术在硅片表面刻蚀纳米图形；之后用-氨基-丙基-三

16、乙基硅烷处理硅表面，最后将加工好的纳米图形位置的硅片浸入蛋白质溶液，使蛋白质分子固定在非刻蚀图形位置的硅片表面上，而刻蚀过的硅片表面没有蛋白质分子。本方法的优点是能有效地保证蛋白质分子的活性，提高结合的牢固程度，且具有超高蛋白质分子集成度。分析分析方法二：刻蚀技术方法二：刻蚀技术第49页，共52页，编辑于2022年，星期一分析分析方法三：纳米生物技术与无细胞表达系统方法三：纳米生物技术与无细胞表达系统 第50页，共52页，编辑于2022年，星期一方法四：亲和层析结合制备凝胶电泳技术方法四：亲和层析结合制备凝胶电泳技术采用亲和层析结合制备胶电泳的方法，对16种用于构建蛋白质芯片的食管癌相关抗原基因进行克隆重组并在大肠杆菌中进行表达。对高表达的重组蛋白首先制备包涵体，然后采用Ni-Sepharose亲和层析得到初步纯化的蛋白质，最后使用SDS-PAGE制备胶电泳作进一步纯化。经过透析复性后，用于制备蛋白质芯片。研究表明，采用亲和层析结合制备凝胶电泳纯化抗原蛋白，是一条简便快捷，适合需要量不大，但对纯度要求比较高的蛋白质芯片制备的技术路线。第51页，共52页，编辑于2022年，星期一第52页，共52页，编辑于2022年，星期一