实验二食品防腐剂抑菌效果的测定幻灯片.ppt

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1、实验二食品防腐剂抑菌效果的测定第1页，共11页，编辑于2022年，星期五一、实验目的一、实验目的了解山梨酸钾产生抑菌效果的原理了解山梨酸钾产生抑菌效果的原理学会利用管碟法（牛津杯法）测定食品防学会利用管碟法（牛津杯法）测定食品防腐剂的抑菌效果腐剂的抑菌效果了解不同浓度山梨酸钾对不同微生物抑菌了解不同浓度山梨酸钾对不同微生物抑菌活性的影响活性的影响第2页，共11页，编辑于2022年，星期五二、实验原理二、实验原理 山梨酸钾是一种真菌抑制剂，防腐作用主要靠未解离的分山梨酸钾是一种真菌抑制剂，防腐作用主要靠未解离的分山梨酸钾是一种真菌抑制剂，防腐作用主要靠未解离的分山梨酸钾是一种真菌抑制剂，防腐作用

2、主要靠未解离的分子，在子，在子，在子，在pH6.0以下对霉菌和酵母菌有明显的抑制作用，在以下对霉菌和酵母菌有明显的抑制作用，在以下对霉菌和酵母菌有明显的抑制作用，在以下对霉菌和酵母菌有明显的抑制作用，在pH6.5pH6.5时无效。时无效。牛津杯里的防腐剂向琼脂培养基扩散渗透，通过对试验菌牛津杯里的防腐剂向琼脂培养基扩散渗透，通过对试验菌牛津杯里的防腐剂向琼脂培养基扩散渗透，通过对试验菌牛津杯里的防腐剂向琼脂培养基扩散渗透，通过对试验菌的抑杀作用而影响细菌的生长繁殖，在牛津杯周围形成抑的抑杀作用而影响细菌的生长繁殖，在牛津杯周围形成抑的抑杀作用而影响细菌的生长繁殖，在牛津杯周围形成抑的抑杀作用而

3、影响细菌的生长繁殖，在牛津杯周围形成抑菌圈。依据抑菌圈的大小可以判断抑菌能力的强弱。菌圈。依据抑菌圈的大小可以判断抑菌能力的强弱。菌圈。依据抑菌圈的大小可以判断抑菌能力的强弱。菌圈。依据抑菌圈的大小可以判断抑菌能力的强弱。第3页，共11页，编辑于2022年，星期五三、实验器材三、实验器材（一）培养基及试剂（一）培养基及试剂 葡萄糖蛋白胨琼脂培养基葡萄糖蛋白胨琼脂培养基 山梨酸钾溶液（山梨酸钾溶液（0.20%、0.30%、0.40%、0.50%）（二）菌种（二）菌种 1、啤酒酵母、啤酒酵母 2、金黄色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌第4页，共11页，编辑于2022年，星期五（三三）其他）其他 1、无菌、

4、无菌陶瓦盖陶瓦盖培养皿培养皿2套套 2、无菌、无菌生理盐水生理盐水1瓶瓶 3、无菌牛津杯、无菌牛津杯10个个（四四）仪器）仪器 1、超净工作台、超净工作台 2、1mL移液枪移液枪第5页，共11页，编辑于2022年，星期五四、实验步骤四、实验步骤1、熔化培养基、熔化培养基2、制平板、制平板 将熔化培养基倒入平皿内约将熔化培养基倒入平皿内约25mL（培养皿底约一半高培养皿底约一半高度度），待其凝固），待其凝固。3、涂布平板接种、涂布平板接种 用移液枪吸取用移液枪吸取0.1mL菌液加到上述平板中，用无菌菌液加到上述平板中，用无菌三角玻璃涂棒涂布均匀。三角玻璃涂棒涂布均匀。第6页，共11页，编辑于20

5、22年，星期五第7页，共11页，编辑于2022年，星期五4、加牛津杯和药液：、加牛津杯和药液：标记药液浓度后，用无菌镊子将牛津杯等距离放置标记药液浓度后，用无菌镊子将牛津杯等距离放置在培养基上，用移液枪在每个牛津杯中加入不同浓在培养基上，用移液枪在每个牛津杯中加入不同浓度的药液度的药液0.2mL。如下图：。如下图：1：0.20%2：0.30%3：0.40%4：0.50%0：空白：空白注意：注意：注意：注意：（1 1）牛津杯内加入药液后不要再移动）牛津杯内加入药液后不要再移动）牛津杯内加入药液后不要再移动）牛津杯内加入药液后不要再移动 （2 2）不能在陶瓦盖上做记号）不能在陶瓦盖上做记号）不能在

6、陶瓦盖上做记号）不能在陶瓦盖上做记号1 12 23 34 40 0第8页，共11页，编辑于2022年，星期五5、正置培养：正置培养：细菌细菌 37 真菌真菌 28 6、结果判定：、结果判定：根据牛津杯周围有无抑菌圈及其直径大小，来判根据牛津杯周围有无抑菌圈及其直径大小，来判断该菌对山梨酸钾的敏感程度。用直尺测量抑菌断该菌对山梨酸钾的敏感程度。用直尺测量抑菌圈大小，并记录。圈大小，并记录。第9页，共11页，编辑于2022年，星期五五、实验结果及分析五、实验结果及分析山梨酸钾浓度（山梨酸钾浓度（%）0.20 0.30 0.40 0.50抑菌圈直径抑菌圈直径（mmmm）啤酒酵母啤酒酵母 金黄色金黄色葡萄球菌葡萄球菌分析分析分析分析:第10页，共11页，编辑于2022年，星期五六、思考题六、思考题1、山梨酸钾抑菌的机理是什么？、山梨酸钾抑菌的机理是什么？2、山梨酸钾在食品中主要抑制哪些微生物？、山梨酸钾在食品中主要抑制哪些微生物？3、用管碟法测定时，为什么不用玻璃皿盖而、用管碟法测定时，为什么不用玻璃皿盖而用陶瓦盖？用陶瓦盖？第11页，共11页，编辑于2022年，星期五