09血清总胆固醇的测定.ppt

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1、一、目的一、目的 了解胆固醇的测定方法了解胆固醇的测定方法 掌握胆固醇测定临床意义掌握胆固醇测定临床意义二、原理二、原理 胆固醇酯加水在胆固醇酯酶的作用下生成游离胆固醇和脂肪酸。胆固醇酯加水在胆固醇酯酶的作用下生成游离胆固醇和脂肪酸。游离胆固醇加氧在胆固醇氧化酶的作用下生成胆脘游离胆固醇加氧在胆固醇氧化酶的作用下生成胆脘-4-烯烯-3-酮和过氧酮和过氧化氢，过氧化氢再加化氢，过氧化氢再加4-氨基氨替比林和酚在过氧化物酶的作用下生成氨基氨替比林和酚在过氧化物酶的作用下生成红色的苯醌亚胺。其反应如下：红色的苯醌亚胺。其反应如下：三、试剂三、试剂宁波慈城生化试剂厂生产的胆固醇测定试剂盒中包括：宁波慈

2、城生化试剂厂生产的胆固醇测定试剂盒中包括：缓冲液二瓶：缓冲液二瓶：90ml2酶溶液一瓶：酶溶液一瓶：10ml2工作液：临用时按需要量将试剂工作液：临用时按需要量将试剂1和和2按按9：1的比例混匀即的比例混匀即成，其他工作液置成，其他工作液置4冰箱一周内稳定。冰箱一周内稳定。标准胆固醇液一支：标准胆固醇液一支：1ml，浓度为，浓度为4.09 m mol/L(100mg/dl)。四、器材四、器材 试管、微量加样器、试管、微量加样器、恒温水浴箱、分光光度计等。恒温水浴箱、分光光度计等。五、操作五、操作取试管取试管3支，编号，按下表依次操作：支，编号，按下表依次操作：六、计算六、计算胆固醇浓度（胆固醇

3、浓度（mmol/L）=A测测/A标标C标标C标为标为4.09mmol/L参考范围：参考范围：正常人静脉空腹血清胆固醇浓度为正常人静脉空腹血清胆固醇浓度为2.66.5mmol/L七、注意事项七、注意事项1测定标本要求空腹抽血。测定标本要求空腹抽血。2.酶法测定胆固醇的前二步反应特异性高，而指酶法测定胆固醇的前二步反应特异性高，而指示反应（第三步反应）特异性则较差，干扰反应示反应（第三步反应）特异性则较差，干扰反应往往发生在指示反应。溶血标本、黄疸标本及高往往发生在指示反应。溶血标本、黄疸标本及高血脂标本均不影响测定结果，但血液中一些还原血脂标本均不影响测定结果，但血液中一些还原性物质，如维生素性物质，如维生素C、谷胱甘肽及左旋多巴可与、谷胱甘肽及左旋多巴可与色原性氧受体竞争色原性氧受体竞争H2O2，使结果出现偏差。，使结果出现偏差。3胆固醇酯酶对胆固醇酯的水解不完全，造成结果胆固醇酯酶对胆固醇酯的水解不完全，造成结果偏低。偏低。八、思考题八、思考题 本次测定的血清样本本次测定的血清样本Ch值是否正常？值是否正常？血清胆固醇浓度异常见于哪些临床疾病血清胆固醇浓度异常见于哪些临床疾病？