比较肾上腺素和去甲肾上腺素对心脏和血管的影响课件.ppt

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1、自主设计实验 比较肾上腺素和去甲肾上腺素 对心脏和血管的影响实验目的实验目的学习记录哺乳动物动脉血压，学习记录哺乳动物动脉血压，血管收缩舒张的直接测定方法并了血管收缩舒张的直接测定方法并了解哺乳类动物心脏离体灌流方法解哺乳类动物心脏离体灌流方法（Langendorff氏法），以此比氏法），以此比较肾上腺素和去甲肾上腺素对心脏较肾上腺素和去甲肾上腺素对心脏和血管的作用。和血管的作用。实验原理实验原理哺乳动物从心脏从动物体摘取之后，用有一定压力、温度哺乳动物从心脏从动物体摘取之后，用有一定压力、温度（37）并充氧的修正洛氏液经主动脉根部灌流。灌流液经）并充氧的修正洛氏液经主动脉根部灌流。灌流液经冠

2、状冠状动脉口进入冠状血管营养心脏，以维持心脏的节律性活动，即动脉口进入冠状血管营养心脏，以维持心脏的节律性活动，即Langendorff氏法氏法激素激素激素激素部位部位部位部位结合受体结合受体结合受体结合受体 产生作用产生作用产生作用产生作用肾上腺肾上腺肾上腺肾上腺素素素素 心脏心脏心脏心脏11三正效应三正效应三正效应三正效应血血血血管管管管皮肤，胃，肾皮肤，胃，肾皮肤，胃，肾皮肤，胃，肾肠，血管平滑肠，血管平滑肠，血管平滑肠，血管平滑肌肌肌肌 血管收缩血管收缩血管收缩血管收缩骨骼肌，肝骨骼肌，肝骨骼肌，肝骨骼肌，肝小剂量小剂量小剂量小剂量22血管舒张血管舒张血管舒张血管舒张大剂量大剂量大剂量

3、大剂量 血管收缩血管收缩血管收缩血管收缩去甲肾去甲肾去甲肾去甲肾上腺素上腺素上腺素上腺素 心脏心脏心脏心脏11三正效应（弱）三正效应（弱）三正效应（弱）三正效应（弱）血管血管血管血管全身血管全身血管全身血管全身血管 血管收缩血管收缩血管收缩血管收缩3实验对象实验对象家兔。家兔。4实验药品实验药品生理盐水，生理盐水，20%氨基甲酸乙脂，肝素氨基甲酸乙脂，肝素（500Uml-1），），5:100000肾上腺素，肾上腺素，1:10000去甲肾上腺素，去甲肾上腺素，95%O2+5%CO2饱饱和的和的K-H生理溶液，修正洛氏液。生理溶液，修正洛氏液。5仪器与器械仪器与器械计算机生物信号采集处理系统（或二

4、道生理记计算机生物信号采集处理系统（或二道生理记录仪、刺激器），兔手术台，手术器械一套，动脉录仪、刺激器），兔手术台，手术器械一套，动脉夹，蛙心夹，滑轮，血压换能器，保护电极，夹，蛙心夹，滑轮，血压换能器，保护电极，37浴槽，浴槽，4浴槽，金属钩，棉线，纱布，棉球、浴槽，金属钩，棉线，纱布，棉球、注射器（注射器（50、10、2ml），支架，双凹夹），支架，双凹夹。实验准备实验准备（1）麻醉和固定）麻醉和固定：家兔称重后，耳缘静脉缓慢注射：家兔称重后，耳缘静脉缓慢注射20氨基甲酸乙氨基甲酸乙酯（酯（5mlkg-1）或）或3%戊巴比妥钠（戊巴比妥钠（1mlkg-1）进行麻醉。当动物四）进行麻醉。当

5、动物四肢松软，呼吸变深变慢，角膜反射迟钝时，表明动物已被麻醉，即肢松软，呼吸变深变慢，角膜反射迟钝时，表明动物已被麻醉，即可停止注射。将麻醉的家兔仰卧位固定于兔手术台上。可停止注射。将麻醉的家兔仰卧位固定于兔手术台上。（2）离体心脏环境的准备，包括恒温、恒压灌流和供气三个部分）离体心脏环境的准备，包括恒温、恒压灌流和供气三个部分。配置修正洛氏液（原料参考有关文献）的原液时先加蒸馏水配置修正洛氏液（原料参考有关文献）的原液时先加蒸馏水(总总体积体积 90%左右左右)，再依次加入上述试剂，但加，再依次加入上述试剂，但加 NaHCO3 时应逐滴加时应逐滴加入，并不断摇晃混匀，入，并不断摇晃混匀，防止

6、形成防止形成 CaCO3 沉淀，最后再加入蒸馏水，沉淀，最后再加入蒸馏水，补足液体量。补足液体量。将灌流系统用胶管连接，灌流液瓶灌满灌流液。调将灌流系统用胶管连接，灌流液瓶灌满灌流液。调整灌流液瓶的高度使灌流压力达到实验要求，一般整灌流液瓶的高度使灌流压力达到实验要求，一般 要求灌流液瓶中要求灌流液瓶中心管的下端距心脏的高度为心管的下端距心脏的高度为 7090cm，可按心脏的大小而适当调，可按心脏的大小而适当调整。整。混合气瓶（或球胆）的减压阀出口用软管接至灌流管内的充混合气瓶（或球胆）的减压阀出口用软管接至灌流管内的充气管，调节气瓶上的减压阀，使灌流液中气管，调节气瓶上的减压阀，使灌流液中

7、的气泡连续且小而均匀。的气泡连续且小而均匀。.调节恒温循环器使心脏插管内的灌流液温度恒定在调节恒温循环器使心脏插管内的灌流液温度恒定在 37左右。左右。为了保证离体心脏的表面有一定的温度为了保证离体心脏的表面有一定的温度 和湿度，将心脏置于由玻璃和湿度，将心脏置于由玻璃或有机玻璃制成的保温灌流槽内。保温灌流槽的底部有漏斗形的开或有机玻璃制成的保温灌流槽内。保温灌流槽的底部有漏斗形的开口，上方盖子盖住才可以保证保温灌流槽内温度恒定。口，上方盖子盖住才可以保证保温灌流槽内温度恒定。（3）家兔离体心脏的制备）家兔离体心脏的制备(1).摘取心脏：取心脏前摘取心脏：取心脏前 20min，家，家兔腹腔注射

8、肝素液抗凝兔腹腔注射肝素液抗凝(6ml/kg)。取心脏时迅速沿胸前壁正中剪。取心脏时迅速沿胸前壁正中剪开皮肤，打开胸腔，轻轻提起心脏，小心剪断腔静脉、主动脉及心开皮肤，打开胸腔，轻轻提起心脏，小心剪断腔静脉、主动脉及心脏周围组织，迅速将心脏连同一段主动脉取出。手术过程中注意不脏周围组织，迅速将心脏连同一段主动脉取出。手术过程中注意不要损伤心脏，要损伤心脏，主动脉根部要留主动脉根部要留 0.51cm 长度以备插管用。心脏取出长度以备插管用。心脏取出后立刻置于预先备好的充氧的冷克氏液（后立刻置于预先备好的充氧的冷克氏液（4左右）左右）中，用手指轻中，用手指轻压心室以利于其中的剩余的血排出，防止凝血

9、块形成。心脏停跳后，压心室以利于其中的剩余的血排出，防止凝血块形成。心脏停跳后，迅速剪开心包膜并剪去迅速剪开心包膜并剪去 心脏周围的组织（包括肺组织、气管以及附心脏周围的组织（包括肺组织、气管以及附着于心脏上的其他组织），认清主动脉、腔静脉及肺动脉的解剖位着于心脏上的其他组织），认清主动脉、腔静脉及肺动脉的解剖位置，在主动脉根部穿一棉线备用。置，在主动脉根部穿一棉线备用。(2).灌流心脏：将主动脉套进心灌流心脏：将主动脉套进心脏插管口内，用棉线将主动脉和心脏插管结扎在一起并固定。插管脏插管口内，用棉线将主动脉和心脏插管结扎在一起并固定。插管进入主进入主 动脉不宜过深，以免损伤主动脉瓣及堵住冠状

10、动脉开口，影动脉不宜过深，以免损伤主动脉瓣及堵住冠状动脉开口，影响冠状血管的灌流。心脏经充氧的温修正洛氏液灌流后，在响冠状血管的灌流。心脏经充氧的温修正洛氏液灌流后，在 lmin 内即可开始恢复跳动，但起初心率较慢，并常有心律不齐，以后逐内即可开始恢复跳动，但起初心率较慢，并常有心律不齐，以后逐渐变快而且心律也逐步恢复正常和稳定并可维持数小时。渐变快而且心律也逐步恢复正常和稳定并可维持数小时。(4)家兔离体动脉环的制备家兔离体动脉环的制备：开胸取出心脏后，迅速开腹取肠系膜：开胸取出心脏后，迅速开腹取肠系膜动脉，再肝动脉。将取出的血管立即移入动脉，再肝动脉。将取出的血管立即移入95%O2+5%C

11、O2饱和的饱和的K-H生理溶液内，仔细剔除粘附于动脉周围的脂肪结缔组织，分别截生理溶液内，仔细剔除粘附于动脉周围的脂肪结缔组织，分别截取取5mm左右的动脉环。左右的动脉环。连接实验装置连接实验装置 （1）用蛙心夹在心室舒张期夹住心尖，并将）用蛙心夹在心室舒张期夹住心尖，并将连接蛙心夹的丝线通过滑轮连至张力换能器，调连接蛙心夹的丝线通过滑轮连至张力换能器，调节与张力换能器相连丝线的松紧度，使心肌前负节与张力换能器相连丝线的松紧度，使心肌前负荷约荷约 5g，记录心脏活动。调节固定保温灌流槽，记录心脏活动。调节固定保温灌流槽，使保温灌流槽罩住心脏。灌流液进入冠状血管后使保温灌流槽罩住心脏。灌流液进入

12、冠状血管后到右心房经腔静脉及肺动脉滴入双层灌流槽中，到右心房经腔静脉及肺动脉滴入双层灌流槽中，经槽底部的漏斗形开口流出，用量筒收集一定时经槽底部的漏斗形开口流出，用量筒收集一定时间内的流出液即为冠脉流量。流量基本稳定后，间内的流出液即为冠脉流量。流量基本稳定后，进行各项观察。进行各项观察。（2）用两个金属钩分别将两动脉环悬置于含）用两个金属钩分别将两动脉环悬置于含K-H液，液，95%O2+5%CO2 37浴槽中，一端连接浴槽中，一端连接张力换能器及整个计算机化记录系统，另一端固张力换能器及整个计算机化记录系统，另一端固定。通过观察动脉环等长张力改变以衡量血管的定。通过观察动脉环等长张力改变以衡

13、量血管的收缩和舒张反应。调节静息张力约收缩和舒张反应。调节静息张力约2.5g。实验项目实验项目（1）心脏实验）心脏实验记录正常情况下的冠脉流量（记录正常情况下的冠脉流量（ml/min）和心脏活动作为对照。）和心脏活动作为对照。由心脏插管的侧管注入由心脏插管的侧管注入 1:10000 肾上腺素溶液肾上腺素溶液0.5ml，观察冠脉，观察冠脉流量和心脏活动的变化。流量和心脏活动的变化。由心脏插管的侧管注入由心脏插管的侧管注入 1:10000去肾上腺素甲溶液去肾上腺素甲溶液0.5ml，观察冠，观察冠脉流量和心脏活动的变化。脉流量和心脏活动的变化。（2）血管实验）血管实验记录正常情况下两血管收缩舒张情况

14、作为对照。记录正常情况下两血管收缩舒张情况作为对照。向两血管中同时注入向两血管中同时注入5:100000肾上腺素溶液肾上腺素溶液0.1ml,观察的两血管观察的两血管收缩舒张情况的变化。收缩舒张情况的变化。向两血管中同时注入向两血管中同时注入5:100000去甲肾上腺素溶液去甲肾上腺素溶液0.1ml,观察的两观察的两血管收缩舒张情况的变化。血管收缩舒张情况的变化。向两血管中同时注入向两血管中同时注入1:10000肾上腺素溶液肾上腺素溶液0.1ml,观察的两血管观察的两血管收缩舒张情况的变化。收缩舒张情况的变化。向两血管中同时注入向两血管中同时注入1:10000肾上腺素溶液肾上腺素溶液0.1ml,

15、观察的两血管观察的两血管收缩舒张情况的变收缩舒张情况的变 大剂量大剂量小剂量小剂量 注意事项注意事项 1.制作离体心脏标本时操作要迅速，不要损伤心脏。制作离体心脏标本时操作要迅速，不要损伤心脏。2.灌流压力和灌流液温度要严格维持恒定。灌流压力和灌流液温度要严格维持恒定。3.蛙心夹应在心室舒张期一次性夹住心尖，避免因夹伤心脏而导致蛙心夹应在心室舒张期一次性夹住心尖，避免因夹伤心脏而导致漏液。漏液。4.注射各种药物时要观察其影响流量的全过程。注射各种药物时要观察其影响流量的全过程。5.每次用药后，心脏要用修正洛氏液灌流，使心脏恢复正常；血管每次用药后，心脏要用修正洛氏液灌流，使心脏恢复正常；血管

16、要要95%O2+5%CO2饱和的饱和的K-H生理溶液清洗，防止干扰下次用药现生理溶液清洗，防止干扰下次用药现象。象。6.每一观察项目都应先描记一段正常曲线，然后再加药并记录其效每一观察项目都应先描记一段正常曲线，然后再加药并记录其效应。加药时应在心跳曲线上予以标记，以便观察分析。应。加药时应在心跳曲线上予以标记，以便观察分析。7.各种注射器应分开，不可混用。各种注射器应分开，不可混用。8.各血管要保持通畅。各血管要保持通畅。9.在做血管实验时，一定要注意控制变量。在做血管实验时，一定要注意控制变量。10.谨防灌流液沿丝线流入张力传感器内量的全过程而损坏其电子谨防灌流液沿丝线流入张力传感器内量的全过程而损坏其电子元件。元件。分析分析 作者：郑州大学公共卫生学院作者：郑州大学公共卫生学院 预防医学五班预防医学五班 第四生理实验小组第四生理实验小组2011-5-6