2017生理实验教案.pdf
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1、实验一实验一血液凝固现象的分析血液凝固现象的分析【实验原理与目的】【实验原理与目的】血液凝固过程可分为三个阶段:凝血酶原激活物形成,凝血酶原激活成凝血酶,纤维蛋白原转变为纤维蛋白。由于激发凝血反应的原因和反应产生的途径不同,因子的激活可以分为内源性和外源性两条途径。如果直接从血管中抽血观察血液凝固,此时因血液几乎没有组织因子参予,其凝血过程主要由内源性途径所激活,若用兔脑粉(脑组织含有丰富的组织因子)启动外源性途径,则主要反映凝血过程的第二、三阶段。若在血浆中加入外源性凝血酶,则可直接观察凝血过程的第三阶段。本实验的目的是了解血液凝固的基本过程及其影响因素。【实验对象】【实验对象】家兔(雌雄不
2、拘)。【实验器材和药品】【实验器材和药品】1仪器 恒温水浴器、秒表2器械 哺乳动物手术器械一套、兔手术台、动脉夹、塑料动脉插管、清洁小试管(107.5mm)11 支,50ml 小烧杯 2 个、100ml 烧杯 1 个、0.5 ml 吸管 6 支、10ml 注射器、5 号针头、滴管、试管架、吸管架。3药品 3%戊巴比妥钠、富血小板血浆、少血小板血浆、兔脑粉悬液 140molCaCl2 溶液、生理盐水、肝素 8 单位(置小试管内)、草酸钾 12mg(置小试管内)、稀释凝血酶溶液、石蜡油、碎冰块。4其它 带橡皮刷的玻棒或竹签、棉花。【实验步骤和观察指标】【实验步骤和观察指标】1仪器装置 准备好 37
3、恒温水浴,秒表。2手术操作家兔麻醉与固定后,分离出一侧颈总动脉,在其下穿过两条丝线。一线将颈总动脉干头端结扎,另一线备用(供固定动脉插管)。在颈总动脉近心端向心脏方向插入动脉插管(请参阅颈总动脉动脉插管术),用丝线固定。需放血时开启动脉夹即可。3观察与纪录(1)观察纤维蛋白原在凝血过程中的作用 由颈总动脉插管放血 10ml,分别注1入两个小烧杯内,一杯静置;另一杯用带橡皮刷的玻棒或竹签不断地搅拌,观察血液的凝固现象。取出玻棒或竹签,用水洗净,观察缠绕在玻棒或竹签上的纤维蛋白,经过这样处理的血液是否会发生凝固?(2)血液凝固的加速和延缓 取干洁的小试管 6 支,按表 3-7-1-1 准备各种不同
4、的实验条件。由颈总动脉插管放血,各管加血 1m1,每 30 秒钟倾斜试斜一次,直至血液凝固而不再流动为止。记录血液凝固的时间。表 3-7-1-1 影响血凝的因素实验条件棉花少许粗糙面石蜡油润滑整个试管表面37水浴中温度浸在盛有碎冰块的烧杯中肝素 8 单位(加血后摇匀)凝血时间解 释草酸钾 12mg(加血后摇匀)如果肝素管及草酸钾管不出现血液凝固,两管各加 140mol CaCl2 溶液23 滴,观察血液是否会凝固?(3)观察内源性及外源性凝血过程 取干洁的小试管 3 支,按表 3-7-1-2 分别加入富血小板血浆、少血小板血浆、生理盐水和兔脑粉悬液。然后同时加入 CaCl2溶液,摇匀,每 15
5、 秒钟倾斜试管一次,分别记录三支试管的血浆凝固时间。血浆加钙后为什么会发生凝固?比较第一和第二管、第一和第三管、第二和第三管的血浆凝固时间,分析产生差别的原因。表 3-7-1-2 内源性和外源性凝血途径的观察实验条件第一管第二管0.2ml0.2ml第三管0.2ml2富血小板血浆 0.2ml少血小板血浆生理盐水0.2ml兔脑粉悬液1 40molCaCl20.2ml0.2ml血浆凝固时间(4)凝血酶时间的测定 取小试管 1 支,加入少血小板血浆0.2m1,迅速加入稀释的凝血酶溶液 0.2m1,开动秒表,播匀后置37水浴中。不断倾斜试管,密切观察并记录血浆凝固时间,此即“凝血酶时间”。【注意事项】【
6、注意事项】1第 1 和第 2 两个观察项目可同时进行,可只放血一次。2如果有必要进行第二次放血时,最先由插管内流出的血液应弃去。【思考题】【思考题】1.请分析本实验每一项结果产生的原因。2.结合本实验结果,比较血液凝固的内源性途径与外源性途径的区别。3.凝血酶时间延长有何临床意义?3实验二实验二ABOABO 血型鉴定血型鉴定一、实验目的一、实验目的1、学习辨别 ABO 血型的方法2、掌握 ABO 血型鉴定的原理二、实验原理二、实验原理在 ABO 血型系统中,红细胞膜有 A 和(或)B 两种凝集原,而血清中有抗A 和抗 B 两种抗体。A 凝集原加抗 A 抗体或 B 凝集原加抗 B 抗体会出现红细
7、胞凝集现象,从而测知受试者红细胞膜上有无 A 或 B 凝集原以判断血型。三、实验材料三、实验材料一次性采血针、消毒牙签、记号笔、标准抗A 血清和标准抗 B 血清、酒精棉球、载玻片、干棉球四、实验步骤四、实验步骤1.取清洁载玻片一块,两端分别标明“抗 A”和“抗 B”。2.消毒受检者手指指腹后,用消毒针刺破皮肤待血流出,在载玻片两端各滴一滴血。3.在载玻片的两端血滴上的中央处分别滴加标准抗 A 和抗 B 血清各一滴。4.竹签两头分别混合,搅匀。5.静置 5 分钟观察结果。先用肉眼看有无凝集现象,如有凝集反应,可见红细胞聚集成团。6.判断血型 根据被试者红细胞是否被 A,B 型标准血清所凝集,判断
8、血型。五、注意事项五、注意事项1、实验用具严格消毒,请勿污染,消毒采血针应一人一针。2、牙签沾取血液切勿过多,以防止在血清中形成团块,影响判断结果。3、分清牙签,不要用一牙签一端同时在抗 A 血清和抗 B 血清中搅拌。4、注意区别凝集现象与红细胞叠连。发生红细胞凝集时,肉眼观察呈朱红色颗粒,且液体变得清亮。六、实验结果六、实验结果4图 1 ABO 血型鉴定结果示意图七、实验小结七、实验小结1、含某种凝集原的红细胞与含相应凝集素的血清相遇,会产生凝集现象.因此血型不相容的两人不能互相输血。2、临床上在输血前必须注意鉴定血型,进行交叉配血,以确保安全输血。5实验三实验三人体心音听诊人体心音听诊【目
9、的要求】学习心音听诊的方法,识别第一心音与第二心音。【基本原理】心音是由心脏瓣膜关闭和心肌收缩引起的振动所产生的声音。用听诊器在胸壁前听诊,在每一心动周期内可以听到两个心音。第一心音:音调较低(音频为2540 次/s),而历时较长(0.142s),声音较弱,是由房室瓣关闭和心室肌收缩振动所产生的。由于房室瓣的关闭与心室收缩开始几乎同时发生,因此第一心音是心室收缩的标志,其响度和性质变化,常可反映心室肌收缩强弱和房室瓣膜的机能状态。第二心音:声调较高(音频为 50 次/s)而历时较短(0.08s),较清脆,主要是由半月瓣关闭产生振动造成的。由于半月瓣关闭与心室舒张开始几乎同时发生,因此,第二心音
10、是心室舒张的标志,其响度常可反映动脉压的高低。【实验器材】听诊器或心音放大器【方法与步骤】1.受试者安静端坐,胸部裸露。2.检查者带好听诊器,注意听诊器的耳具应与外耳道开口方向一致(向前)。以右手的食指、拇指和中指轻持听诊器胸具紧贴与胸部皮肤上,依次由左房室瓣听诊区主动脉瓣听诊区肺动脉瓣听诊区右房室瓣听诊区,仔细听取心音,注意区分两心音。如难以区分两心音,可同时触诊心尖搏动或颈动脉脉搏,此时出现的心音为第一心音。【注意事项】1.实验室内保持安静,以利听诊。2.听诊器耳具应与外耳道方向一致。橡皮管不得交叉、扭结,切勿与它物摩擦,以免发生摩擦音影响听诊。3.如呼吸音影响听诊,可令受试者暂停呼吸片刻
11、。【思考题】第一心音与第二心音是怎样形成的?它们有何临床意义?6实验四实验四人体动脉血压的测量人体动脉血压的测量【目的与要求】1学习并掌握间接测定人体血压的原理和方法2观察某些因素对动脉血压的影响3学习用生物统计学简易处理方法处理数据【基本原理】通常血液在血管中流动时没有声音,但当外加压力使血管变窄形成血液涡流时,则可发生声音。因此,可以根据血管音的变化来测量动脉血压。测定人体动脉血压最常用的方法是使用血压计间接测量。测压时,用压脉带在上臂或手腕加压,当外加压力超过动脉的收缩压时,动脉血流完全被阻断,此时在动脉处听不到声音。当外加压力等于或稍低于动脉内的收缩压时而高于舒张压时,则在心脏收缩时,
12、动脉内有少量血流通过,而心室舒张时而无血流通过。血流连续通过血管时,会发出声音。故恰好可以完全阻断血流的最小外加压力相当于收缩压。当外加压的等于或小于舒张压时,血管内血流连续通过,所发出的音调会突然降低或声音消失。在心室舒张时有少许血液通过的最大管外压力相当于舒张压。在正常情况下,人或哺乳动物的血压是通过神经和体液调节保持其相对的稳定性。但是血压的稳定性是动态的,是在不断连续的变化而不是静止不变的。人体的体位、运动、呼吸、温度以及大脑的思维活动的等因素对血压均有一定的影响。【实验器材】血压计,听诊器,冰水【方法与步骤】1 受试者取坐位,心脏与血压计零点同一水平。静坐5 分钟,待肢体放松,呼吸平
13、稳与情绪稳定。2 松开打气球上的螺丝,将压脉带内的空气排空后再将螺丝旋紧。3 受试者脱左臂衣袖,将压脉带裹于左上臂距肘窝 3cm 上方处,压脉带应与心脏同一水平,使其松紧适度,手掌向上放在实验台上。4 在压脉带下方,肘窝上方找到动脉搏动处,将听诊器的胸具置于动脉上。5 听取血管音变化。7向压脉带充气加压,同时注意倾听声音变化,在声音消失后再加压 30mmHg,然后稍稍扭松打气球上的螺丝,缓慢放气,仔细倾听听诊器内血管音的一系列变化;声音先是由无到有,次之由低到高,而后突然变低,最后完全消失。如此反复进行 2-3 次。6 测量正常动脉的血压重复上一操作,同时注意检压计读数。但徐徐放气时,第一次听
14、到的血管音即代表收缩压;最后声音消失之前的血管音代表舒张压。记下血压读数,放空压脉带,使压力降低为零,重复测压 2-3 次,记录测压均值。7 实验观察(1)受使者加深呼吸加快呼吸频率对血压的影响记录正常的血压后,令受使者加快加深呼吸 1min 测压(2)情绪对血压的影响待血压恢复正常后,令受使者回忆起最气愤的往事 1 分钟测量(3)肢体运动对血压的影响让受使者作原地蹲起运动,1 分钟内完成 50-60 次,共做 1-2 分钟,运动后立即坐下测压,并将变化最大的血压值记录下来(4)冰水刺激对血压的影响受使者取坐位,测量正常血压,然后让受使者的手浸入并冰水中 1 分钟测压8 实验结束后,将实验纪录
15、填入表9 以大组为单位,将实验数据进行统计学处理,求出 P 值,说明实验前后血压的变化由无显著性变化注意事项注意事项1、测量前应检查血压计,符合要求方可使用,。如果水银不足,可使测量的血压偏低。2、如果想监测血压的人,应做到“四定”。即定时间,定部位,定体位,定血压计。以确保抽测血压的准确性及可比性。83、测血压时,血压计“0”点应与心脏、肱动脉在同一水平位上。坐位时肱动脉平第四肋软骨,仰卧位时肱动脉平腋中线水平。4、排除袖带因素干扰:(1)、根据所测部位选择合适的袖带,袖带过宽时测得的血压偏低,袖带过窄时测得的血压值偏高。(2)、所缠袖带应松紧合适,过紧使血管在袖带未充前已受压,测得的血压值
16、偏低;过松则使袖袋呈气球 状,导致有效测量面积变窄,测得的血压值偏高。5、打气时不可过猛、过高,以免水银溢出,影响测量结果及使测量人不舒适。水争柱出现漏气时,应及时调节、检修。6、当发现血压异常或听不清时,应重测血压。但一定要把袖带内的 气体驱尽,使水银柱降至“0”点,稍待片刻,再进行测量。7、为偏瘫人测血压时,应选择健侧,因为患侧血液循环障碍,不能真实地反映血压的动态变化。9实验五实验五哺乳动物动脉血压的调节(视频哺乳动物动脉血压的调节(视频+讨论讨论)1 1 实验材料实验材料 氨基甲酸乙酯,生理盐水,肝素,去甲肾上腺素,血压换能器,RM6240 微机生物信息处理系统,止血钳,手术剪,棉线,
17、针筒,动脉夹。2 2 实验对象实验对象 家兔3 3 实验方法实验方法3.1 实验系统连接及参数设置 血压换能器固定在铁支柱上,高度与心脏同一平面。压力换能器输出线接微机生物信号采集处理系统输入通道。3.2 手术准备 3.3 实验观察 3.4 统计方法 结果以 x s 表示,统计采用 Student t test 方法。4 实验结果神经和体液调节对家兔动脉血压的影响神经和体液调节对家兔动脉血压的影响 x(x()s s10*表示 P0.05,与对照组相比,有差异。*表示 P0.05,在统计学上无意义。【讨论】【讨论】1、夹闭颈总动脉后,远心端的颈动脉窦张力感受器感受到血压下降,传出神经冲动的频率减
18、慢,信息沿窦神经上传至延髓孤束核心血管中枢,使心迷走神经紧张减弱,心交感和缩血管神经紧张加强,作用于心脏,使心率加快,心输出量增加,血管收缩,外周阻力增加,血压恢复性升高。2、注射去甲肾上腺素后,血压上升,这是由于去甲肾上腺素与血管平滑肌上的 和 2甲肾上腺素能受体结合,使血管收缩,管径变小,外周阻力增加,从而使平均动脉压升高。此外,去甲肾上腺素还可以使心率增加,心收缩力变大。只是缩血管效应更明显。3、减压神经为传入神经,兔减压神经是传入神经,其作用是将主动脉弓感受器发出的冲动传入延髓心血管中枢,反射性引起血压降低,因此刺激减压神经,动脉血压下降。4、迷走神经汗从延髓下行的传出纤维,通向心脏。
19、节前、节后纤维末端释放Ach,属于副交感神经纤维,能使cAMP 浓度降低,心率减慢,心房收缩力减弱,传导性减弱,使心输出量变小,平均动脉压降低。【实验结论】【实验结论】1、夹闭右侧颈总动脉,家兔动脉血压升高;2、注射去甲肾上腺素,平均动脉压升高;3、刺激减压神经引起家兔血压下降;4、刺激迷走神经,血压降低。11实验六实验六人体肺活量的测定人体肺活量的测定 目的目的 学习测量肺通气功能的方法。了解肺活量计的构造.试验器材及对象 实验用品实验用品 人(受试者),桶式肺活量计、75%的酒精棉球、消毒液 实验原理实验原理 肺的主要功能是进行气体交换,以维持正常的新陈代谢。为此,肺必须与外界大气不断地进
20、行通气。肺容量是指呼吸过程中某一阶段肺内空气的容积。肺通气量则为单位时间内通过肺的气体流通量。常用肺活量计用来测量肺通气量。测定这些数据可以在一定程度上反映肺通气功能 实验步骤实验步骤 1、了解肺活量计的构造:肺活量计主要由一对套在一起的圆筒组成:外筒装入一定量的清水,底部有排水阀门,中央有进气管,管的上端露出水面,管下端通向筒外的三通阀门,呼吸气经此出入。内筒为倒扣在外筒中的浮筒,浮筒内为一密闭的空间,浮筒可随呼吸气体的进出而升降。2、将肺活量计按压平稳,抽出浮筒3、将预先准备好的清水注入外筒内,使水位到达水位表的红线刻度(275 mm)。4、用三支调整螺丝调整外筒与水平面的垂直度。5、用食
21、指和中指卡住浮筒上的排水阀的阀体,用拇指压住排气压头,使浮筒徐徐压入水中,一直压倒筒底。6、检查外筒,内筒,气阀等是否漏气漏水。7、受试者手持吹气嘴,站立,深吸气至最大限度,嘴部贴紧吹气嘴,徐徐向筒内吹气,截至不能再吹气为止,读出浮筒刻度指针对应的数字,即为受试者的肺活量数字。重复三次,取最大值。8、复位:按 5 的方法将浮筒压入水中复位12 注意事项注意事项 1每次使用肺活量计前应检查其是否漏水漏气,平衡锤重量时候合适。2肺活量计中的水应在试验前灌足,以使水温与室温一致 3试验时应注意防止从鼻孔或嘴角漏气4每次更换受试者,都应重新消毒橡皮接口和吹嘴5肺活量计用后将水倒出并擦干6人体的肺活量与
22、性别,年龄,身高,体重,生活环境等有密切关系。青少年儿童的肺活量随年龄增长而增长,到 1820 岁时趋向稳定,男子肺活量均高于女子,至成年时女子的肺活量为男子的70%,且农村,城市,南北方青年的肺活量均有差别7测定最大通气量前,受试者最好练习一下如何进行最深最快的呼吸,以掌握试验所要求的呼吸方法 作业作业 1为什么肺活量的测定要取最大值?2比较肺活量与时间肺活量的意义有何不同?3浮筒内充氧气和充一般空气所测得的结果有无差别,为什么?13实验七实验七兔呼吸运动的调节(视频兔呼吸运动的调节(视频+讨论)讨论)通过观看实验的视频与实验结果,讨论影响呼吸运动的调节影响因素。实验目的实验目的观察各种因素
23、对呼吸运动的影响,结合理论,分析其作运用途径,了解呼吸运动的调节机制。实验原理实验原理呼吸运动是一种节律性活动,其深度和频率能随机体活动水平而改变.正常情况下的节律性活动是呼吸中枢节律性活动的反映,肺牵张反射是保证呼吸节律的机制之一。随生理状态的不同,其呼吸所发生的适应性变化,是由于各种剌激直接作用于呼吸中枢,或间接地通过各种化学感受器而引起.最终由呼吸中枢通过支配呼吸肌的传出神经,引起呼吸肌产生不同水平的收缩,使呼吸运动随之而改变,以维持血液中正常的 O2 和 CO2 的含量。实验讨论:实验讨论:1、CO2 浓度增加使呼吸运动加强CO2 是调节呼吸运动最重要的生理性因素,它不但对呼吸有很强的
24、刺激作用,并且是维持延髓呼吸中枢正常兴奋活动所必须的。每当动脉血中 PCO2 增高时呼吸加深加快,肺通气量增大,并可在一分钟左右达到高峰。由于吸入气中 CO2浓度增加,血液中 PCO2 增加,CO2 透过血脑屏障使脑脊液中 CO2 浓度增多,CO2 十 H2O H2CO3 HCO3-H+CO2 通过它产生的 H+刺激延髓化学感受器,间接作用于呼吸中枢,通过呼吸机的作用使呼吸运动加强,此外,当 PCO2增高时,还刺激主动脉体和颈动脉体的外周化学感受器,反射性地使呼吸加深加快。2、缺氧使呼吸运动增加吸人纯氮气时,因吸人气中缺 O2,肺泡气 PO2 下降,导致动脉血中 PO2 下降,而 PCO2 却
25、基本不变(因 CO2 扩散速度快)随着动脉血中 PO2 的下降,通过刺激主动脉体和颈动脉体外周化学感受器延髓的呼吸中枢兴奋,隔肌和肋间外肌活动加强,反射性引起呼吸运动增加。此外,缺 O2 对呼吸中枢的直接效应是抑制并随缺 O2 程度的加深而逐渐加强。所以缺 O2 程度不同,其表现也不一样。在轻度缺 O2,通过颈动脉体等的外周14化学感受器的传人冲动对呼吸中枢起兴奋作用大于缺O2对呼吸中枢的直接抑制作用而表现为呼吸增强。3、增大呼吸无效腔对呼吸运动的影响增加气道长度后家兔呼吸张力增加,呼吸频率增加。增加气道长度等于增加无效腔,增加无效腔使肺泡气体更新率下降,引起血中PCO2、PO2-下降,刺激中
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