[精选]梅毒的实验室检查与技术规范课件.pptx

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1、梅毒的实验室检查与技术标准梅毒的实验室检查与技术标准 2013年3月2日主要内容主要内容u梅毒梅毒概述概述u梅毒血清学检测方法梅毒血清学检测方法u梅毒检测技术标准梅毒检测技术标准梅毒概述梅毒概述一一性接触是主要的传染途径 未经治疗的患者在感染后的1年内最具有传染性 随着病期的延长，传染性越来越小 到感染后2年，通过性接触一般无传染性母 婴 传 播 在妊娠7周时，梅毒螺旋体即可通过胎盘传染未经治疗者，虽已无性传播病期2年，但妊娠时仍可传染给胎儿,病期越长，传染性越小;梅毒概述梅毒概述二二n一期梅毒一期梅毒硬下疳和或腹股沟淋巴结肿大n二期梅毒二期梅毒 可有一期梅毒史，病期在2年以内有多形性皮疹、扁

2、平湿疣等n三期晚期梅毒三期晚期梅毒可有一期或二期梅毒史，病期在2年以上皮肤黏膜损害等，包括神经梅毒、心血管梅毒n隐性潜伏梅毒隐性潜伏梅毒 早期：病期在2年以内；晚期：病期在2年以上。无任何梅毒性的病症和体征n胎传先天梅毒胎传先天梅毒早期：在2岁前发生；晚期：在2岁以后发病。胎传隐性梅毒：无临床表现梅毒概述梅毒概述三三疑似病例、确证病例诊断依据：疑似病例、确证病例诊断依据：病史病症实验室检查梅毒的实验室检查结果对诊断有决定性意义梅毒实验室检测技术梅毒实验室检测技术病原学检测病原学检测血清学检测血清学检测梅毒血清学检测方法梅毒血清学检测方法梅毒血清学检测分类梅毒血清学检测分类1 非梅毒螺旋体抗原血

3、清学试验 非特异性梅毒抗体2 梅毒螺旋体抗原血清学试验 特异性梅毒抗体两类方法。为什么梅毒实验室诊断需要两类血清学检测方法？为什么梅毒实验室诊断需要两类血清学检测方法？非梅毒螺旋体抗原血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清学试验l原理原理n人体感染了梅毒螺旋体后，组织受到破坏，释放出来的一种类脂成分，与梅毒螺旋体结合形成完全抗原，刺激机体在3周-4周产生类脂质抗体反响素。主要是IgM和IgG混合抗体。l抗体的作用抗体的作用n无保护作用，治疗监测。未经治疗的病人，其血清内的反响素可长期存在。经正规治疗后，反响素可以逐渐减少至转为阴性。临床上非梅毒螺旋体抗原血清学试验为什么有定性和定量两种检测法临床上非梅

4、毒螺旋体抗原血清学试验为什么有定性和定量两种检测法？非梅毒螺旋体抗原血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清学试验l所有非梅毒螺旋体抗原血清试验的抗原基本成分都是一样l方法包括：1快速血浆反响素环状卡片试验 RPR 2甲苯胺红不加热血清试验TRUST 3性病研究实验室试验 VDRL等。l基本成分是心磷脂 卵磷脂和胆固醇l抗原抗体结合形成复合物，凝集成网状沉淀颗粒被肉眼所见l上述方法的敏感性和特异性都基本相似 试验特点试验特点n原理和成分与试验相同n血清不需要灭活n不需要显微镜观测结果n可作定量试验n有现成的试剂盒携带方便n操作简单n价格廉价操作要点操作要点1.1.仪器：水平旋转仪。仪器：水平旋转仪。2.

5、2.定性实验定性实验n加样：吸取50ul血清浆放在卡片圈中，并均匀地涂布在整个圈内n加抗原：将抗原轻轻摇匀，用9号针头加1滴抗原n反响：将卡片置水平旋转仪旋转8分钟，立即在亮光下观察结果3.3.定量试验定量试验n稀释夜准备：在圈内参加50uL生理盐水根据需要确定稀释度，勿将盐水涂开。n加样：吸取50uL血清浆与各圈中盐 水作系列稀释，并涂布整个圈内。n下同定性试验。非梅毒螺旋体抗原血清学试验结果判断非梅毒螺旋体抗原血清学试验结果判断RPRTRUST非梅毒螺旋体抗原血清学试验临床意义非梅毒螺旋体抗原血清学试验临床意义u早期梅毒硬下疳出现1周-2周后，血清可呈阳性。u经治疗后血清滴度可下降并转阴性

6、，故可作为疗效观察、判愈、复发或再感染的指征。为什么要做定量检测？非梅毒螺旋体抗原血清学试验临床意义非梅毒螺旋体抗原血清学试验临床意义u 一期梅毒1年后转为阴性u 二期梅毒2年后转为阴性。u 晚期梅毒 治疗后血清滴度下降缓慢，2年后约50%病人血清反响仍为阳性。TRUST结果解释示意图假阳性问题假阳性问题假阳性：非梅毒患者的血清反响呈阳性技术性假阳性技术性假阳性由于标本的保存不当如细胞污染或溶血、试剂质量差或过期、或实验室操作错误所造成。生物学假阳性生物学假阳性是由于患者有其他疾病或生理状态发生变化，使梅毒血清试验出现阳性某些疾病：结核、疟疾、肝病、红斑狼疮、流感、肺炎、类风某些疾病：结核、疟

7、疾、肝病、红斑狼疮、流感、肺炎、类风湿性关节炎、风湿性心脏病、风疹、系统性硬化症等，疾病开湿性关节炎、风湿性心脏病、风疹、系统性硬化症等，疾病开展过程中释放心磷脂到血液中展过程中释放心磷脂到血液中呈呈假阳性。假阳性。老年人。老年人。生理机能发生变化：少数孕妇也可发生生物学假阳性。生理机能发生变化：少数孕妇也可发生生物学假阳性。梅毒假阳性反响的处理梅毒假阳性反响的处理u技术性假阳性反响一般是由于操作错误引起的假阳性反响，经过重复试验即可除外。u对生物学假阳性反响，应做TPHATPPA等试验进行排除。前带现象l指非梅毒螺旋体抗原血清试验中，有时血清中存在高浓度的抗体时出现的弱阳性、不典型或阴性反响

8、的结果，而临床上又象二期梅毒，此时将血清稀释后再进行试验，出现了阳性的结果，该现象称为前带现象。l处理：处理：将血清稀释后再进行试验。耐血清性血清固定l指经抗梅毒治疗后，非梅毒螺旋体抗原血清试验在一定时期内不阴转。早期的耐血清性常与治疗量缺乏或不规则治疗、复发、再感染或有神经系统梅毒等因素有关。梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验方法梅毒螺旋体抗原血清学试验方法u 梅毒螺旋体颗粒凝集试验 TPPAu 梅毒螺旋体血球凝集试验 TPHAu 梅毒酶联免疫吸附试验ELISAu 梅毒免疫层析法-梅毒快速检测 RTu 荧光螺旋体抗体吸收试验FTA-ABSu 化学发光免疫

9、分析法CLIAu 梅毒螺旋体蛋白印迹试验WBTPPAuTPPA试验用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒，此致敏颗粒与人血清中的抗梅毒螺旋体抗体结合，产生可见的凝集反响，具有较高的敏感性和特异性。uTPPA是目前WHO认可的梅毒抗原血清学试验的“金标准，常用于新方法、新试剂评价的参照标准。TPPATPPATPHATPHA试验原理示意图试验原理示意图梅毒螺旋体抗原血清试验的临床意义梅毒螺旋体抗原血清试验的临床意义u一般情况下，一旦梅毒患者梅毒螺旋体抗原血清试验呈阳性，即使经过正规有效治疗治，仍将终身阳性。所以TPPA等试验不能作为疗效观察的指标。u作为非梅毒螺旋体抗原血清试验初筛阳性标本确实证试验。uTPPA

10、等阳性不能区分既往感染和现症感染，应结合非梅毒螺旋体抗原血清试验结果进行诊断。TPPA结果解释示意图梅毒血清学试验结果解释梅毒血清学试验结果解释 梅毒检测技术标准简介全国梅毒检测技术标准l第一章 梅毒检测样品的采集和处理l第二章 梅毒血清学检测l第三章 梅毒病原体显微镜检测l第四章 梅毒病原体核酸检测l第五章 实验室生物安全l第六章 梅毒检测实验室质量管理第一章 样品的采集和处理血清、血浆、全血及脑脊液血清、血浆、全血及脑脊液:梅毒血清学检测或核酸检测梅毒血清学检测或核酸检测皮损部位组织液、淋巴穿刺液皮损部位组织液、淋巴穿刺液:梅毒病原体检测或核酸检测。梅毒病原体检测或核酸检测。梅毒血清学试验

11、适用范围第二章 梅毒血清学检测检测目的检测目的:临床诊断、血液筛查、流行病学监测临床诊断、血液筛查、流行病学监测以临床诊断为目的的检测是为了确定梅毒感染的状况。以临床诊断为目的的检测是为了确定梅毒感染的状况。以血液筛查为目的的检测是为了防止梅毒的经血传播。以血液筛查为目的的检测是为了防止梅毒的经血传播。以流行病学监测为目的的检测是为了调查梅毒血清学以流行病学监测为目的的检测是为了调查梅毒血清学感染率和发病率。感染率和发病率。梅毒实验室检测策略选择u根据目的选择检测方法及检测策略。u可采用任何一类梅毒血清学检测方法作为筛查试验。以临床诊断为目的检测策略一以临床诊断为目的检测策略一以临床诊断为目的

12、检测策略二以临床诊断为目的检测策略二策略一和策略二比较策略一和策略二比较第三章 梅毒体病原学检测检测方法检测方法暗视野显微镜检查暗视野显微镜检查镀银染色检查镀银染色检查第四章 梅毒核酸检测n可对血浆、血清、皮损部位组织液、淋巴穿刺液及脑脊液可对血浆、血清、皮损部位组织液、淋巴穿刺液及脑脊液等标本的梅毒螺旋体核酸检测等标本的梅毒螺旋体核酸检测n在早期梅毒、神经梅毒和先天梅毒等诊断，以及螺旋表达在早期梅毒、神经梅毒和先天梅毒等诊断，以及螺旋表达症感染和既往感染鉴别诊断中具有一定的价值症感染和既往感染鉴别诊断中具有一定的价值n可应用于梅毒螺旋体的耐药性监测、菌株流行病学分型。可应用于梅毒螺旋体的耐药

13、性监测、菌株流行病学分型。第五章 实验室生物安全n梅毒的生物危害梅毒的生物危害n梅毒螺旋体属第三类病原微生物，一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，是有有效治疗和预防方法的致病微生物n梅毒相关检测的生物安全级别梅毒相关检测的生物安全级别n为了保证安全，对临床和现场未知样本的梅毒血清学检测应在符合级生物安全实验室BSL-2要求的实验室中进行。如有艾滋病检测实验室，可以在艾滋病抗体检测实验室中进行。第六章 实验室质量管理质量保证质量保证质量评估质量评估试剂评价试剂评价质量保证检测方法和试剂的选择检测方法和试剂的选择 用于临床诊断的检测方法应使用经国

14、家食品药品监督用于临床诊断的检测方法应使用经国家食品药品监督管理局注册批准的试剂，应选择敏感性高、特异性好的试管理局注册批准的试剂，应选择敏感性高、特异性好的试剂。性病参比实验室和省级性病中心实验室应定期组织开剂。性病参比实验室和省级性病中心实验室应定期组织开展梅毒诊断试剂的临床质量评价和新方法与技术的评估展梅毒诊断试剂的临床质量评价和新方法与技术的评估。质量评价u所有梅毒检测实验室应参加外部质量评价所有梅毒检测实验室应参加外部质量评价u省级中心实验室应参加国家级职能工作考核和省级中心实验室应参加国家级职能工作考核和PTPTu其他实验室应参加省级职能工作考核和其他实验室应参加省级职能工作考核和

15、PTPT。质量评价u考评组织单位根据考评组织单位根据PTPT考核结果、职能工作评价结果及对局考核结果、职能工作评价结果及对局部实验室现场评价情况，汇总各实验室的最终考评结果，部实验室现场评价情况，汇总各实验室的最终考评结果，上报相关机构。上报相关机构。u考评单位应将考评得分及扣分原因反响各参评实验室，以考评单位应将考评得分及扣分原因反响各参评实验室，以适当的方式在适当范围内公开发布考评结果。为合格者颁适当的方式在适当范围内公开发布考评结果。为合格者颁发合格证书。发合格证书。小结小结1、非梅毒螺旋体抗原血清学试验阳性往往是梅毒现症感染者，临床上即可开展治疗。2、非梅毒螺旋体抗原血清学试验定量试验

16、可作为疗效观察的指标。3、完善操作的标准化，杜绝有个人特点的操作。4、根据目的选择检测方法及检测策略。可采用任何一类梅毒血清学检测方法作为筛查试验。5 5、临床上采用两种方法同时检测，可以快速诊断梅毒，使病人能够得到及时治疗。9、静夜四无邻，荒居旧业贫。4月-234月-23Tuesday,April18,202310、雨中黄叶树，灯下白头人。08:28:1108:28:1108:284/18/20238:28:11AM11、以我独沈久，愧君相见频。4月-2308:28:1108:28Apr-2318-Apr-2312、故人江海别，几度隔山川。08:28:1108:28:1108:28Tuesd

17、ay,April18,202313、乍见翻疑梦，相悲各问年。4月-234月-2308:28:1108:28:11April18,202314、他乡生白发，旧国见青山。18四月20238:28:11上午08:28:114月-2315、比不了得就不比，得不到的就不要。四月238:28上午4月-2308:28April18,202316、行动出成果，工作出财富。2023/4/188:28:1108:28:1118April202317、做前，能够环视四周；做时，你只能或者最好沿着以脚为起点的射线向前。8:28:11上午8:28上午08:28:114月-239、没有失败，只有暂时停止成功！。4月-23

18、4月-23Tuesday,April18,202310、很多事情努力了未必有结果，但是不努力却什么改变也没有。08:28:1108:28:1108:284/18/20238:28:11AM11、成功就是日复一日那一点点小小努力的积累。4月-2308:28:1108:28Apr-2318-Apr-2312、世间成事，不求其绝对圆满，留一份缺乏，可得无限完美。08:28:1108:28:1108:28Tuesday,April18,202313、不知香积寺，数里入云峰。4月-234月-2308:28:1108:28:11April18,202314、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏。

19、18四月20238:28:11上午08:28:114月-2315、楚塞三湘接，荆门九派通。四月238:28上午4月-2308:28April18,202316、少年十五二十时，步行夺得胡马骑。2023/4/188:28:1108:28:1118April202317、空山新雨后，天气晚来秋。8:28:11上午8:28上午08:28:114月-239、杨柳散和风，青山澹吾虑。4月-234月-23Tuesday,April18,202310、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。08:28:1108:28:1108:284/18/20238:28:11AM11、越是没有本领的就越加自命非凡。4月-

20、2308:28:1108:28Apr-2318-Apr-2312、越是无能的人，越喜欢挑剔别人的错儿。08:28:1108:28:1108:28Tuesday,April18,202313、知人者智，自知者明。胜人者有力，自胜者强。4月-234月-2308:28:1108:28:11April18,202314、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏。18四月20238:28:11上午08:28:114月-2315、最具挑战性的挑战莫过于提升自我。四月238:28上午4月-2308:28April18,202316、业余生活要有意义，不要越轨。2023/4/188:28:1108:28:1118April202317、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。8:28:11上午8:28上午08:28:114月-23MOMODA POWERPOINTLoremipsumdolorsitamet,consecteturadipiscingelit.Fusceidurnablandit,eleifendnullaac,fringillapurus.Nullaiaculistemporfelisutcursus.感感 谢谢 您您 的的 下下 载载 观观 看看专家告诉