农业大学之染色体与DNA讲义课件(共70张PPT).pptx

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1、分分分分 子子子子 生生生生 物物物物 学学学学培训专用第二章第二章 染色体与染色体与DNA 本本章章将将介介绍绍DNA的的结结构构和和从从一一代代细细胞胞岛岛到到下下一一代代细细胞胞的的传传递递、遗传及变异等过程。遗传及变异等过程。2023/4/192南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院培训专用第二章第二章 染色体与染色体与DNAv第一节 染色体v第二节 DNA的结构v第三节 DNA的复制v第四节 原核生物和真核生物DNA复制特点v第五节 DNA的修复v第六节 DNA的转座2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院3培训专用第一节第一节 染色体染色体2

2、023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院4由于亲代能够将自己的遗传物质DNA以染色体的形式传给子代，保持物种的稳定性和连续性。因此，人们普遍认为染色体在遗传上起着主要作用。人类22对染色体及性染色体性染色体扫描电镜图培训专用第一节第一节 染色体染色体2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院51.染色体概述：v19世纪中叶，细胞生物学家在光学显微镜下，在细胞分裂时观察到存在于细胞核中的棒状可染色结构并将其命名为染色体。v染色体包括DNA和蛋白质两部分。同一物种内每条染色体所带的DNA的量是一定的，但不同的染色体或不同物种之间变化很大，从上百万

3、到几亿个核苷酸对不等。此外，组成染色体的蛋白质（组蛋白和非组蛋白）的种类和含量也是十分稳定的。培训专用第一节第一节 染色体染色体2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院61.染色体概述：v染色体在细胞分裂间期表现为染色质。染色体与染色质是同一种物质的两种形态。伸展的染色质形态有利于在它上面的DNA储存的信息的表达，而高度螺旋化了的棒状染色体则有利于细胞分裂中遗传物质的平分。左图为人类染色体，在光镜下即可观察其形态，右图为电镜图片，可见不规则的染色质。培训专用第一节第一节 染色体染色体2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院7 1.染色体概

4、述：v原核细胞染色体：n一般只有一条大染色体且大都带有单拷贝基因，除少数基因外（如rRNA基因）。n整个染色体DNA几乎全部由功能基因和调控序列所组成。n几乎每个基因序列都与它所编码蛋白质序列呈线性对应关系。培训专用第一节第一节 染色体染色体2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院82.真核细胞染色体的组成：v真核生物染色体中DNA相对分子质量一般大大超过原核生物，并结合有大量的蛋白质，结构非常复杂。其具体组成成分为：组蛋白、非组蛋白、DNA。v在真核细胞染色体中，DNA与蛋白质完全融合在一起，其蛋白质与相应DNA的质量之比约为2:1。这些蛋白质在维持染色体结构中起

5、着重要作用。培训专用第一节第一节 染色体染色体2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院92.1.组蛋白v组蛋白是染色体的结构蛋白，其与DNA组成核小体。根据其凝胶电泳性质可将其分为H1、H2A、H2B、H3及H4。培训专用第一节第一节 染色体染色体2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院10 2.1.组蛋白v组蛋白的特性：n进化上极端保守性。其中H3、H4最保守，H1较不保守。n无组织特异性。到目前为止，仅发现鸟类、鱼类及两栖类红细胞染色体不含H1而带有H5，精细胞染色体的组蛋白是鱼精蛋白。n肽链上氨基酸分布的不对称性。碱性氨基酸集中分布

6、在N端的半条链上。例如，N端的半条链上净电荷为+16，C端只有+3，大部分疏水基团都分布在C端。n组蛋白的修饰作用。包括甲基化、乙基化、磷酸化及ADP核糖基化等。n富 含 赖 氨 酸 的 组 蛋 白 H5。H5赖 氨 酸 含 量 高 达24%。培训专用第一节第一节 染色体染色体2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院11 2.2.非组蛋白v染色体上除了存在大约与DNA等量的组蛋白以外，还存在大量的非组蛋白。n非组蛋白的量大约是组蛋白的60%70%，但它的种类却很多，约在20-100种之间，其中常见的有15-20种。非组蛋白的组织专一性和种属专一性。n非组蛋白包括酶类

7、、骨架蛋白、核孔复合物蛋白以及肌动蛋白、肌球蛋白等。它们也可能是染色质的组成成分。v几类常见的非组蛋白：nHMC蛋白。一般认为可能与DNA的超螺旋结构有关。nDNA结合蛋白。可能是一些与DNA的复制与转录有关的酶或调解物质。nA24非组蛋白。位于核小体内，功能不详。培训专用第一节第一节 染色体染色体2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院12 2.3.DNAv真核细胞基因组最大的特点是好有大量的重复序列，而且功能DNA序列大多被不编码蛋白质的非功能DNA所隔开，这就是著名的“C值反常现象”。nC值：一种生物单倍体基因组DNA的总量。n一般情况，真核生物C值是随着生物

8、进化而增加，高等生物的C值一般大于低等生物。（下页左图）n进一步研究发现，某些两栖类C值大于哺乳动物，而且在两栖类中C值变化也很大，可相差100倍。（下页右图）培训专用v由此推断，许多DNA序列不编码蛋白质，是无生理功能的。v根据对DNA的动力学研究，真核生物DNA序列大致可分为3类：n不重复序列、中度重复序列、高度重复序列。2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院131培训专用第一节第一节 染色体染色体2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院14 2.3.DNAv不不重重复复序序列列。在在单单倍倍体体基基因因组组里里，这这些些序序列列一

9、一般般只只有有一一个个或或几几个个拷拷贝贝，它它占占DNA总总量量的的40%80%。不不重重复复序序列列长长约约7502000dp，相相当当于于一一个个结结构构基基因因的的长长度。单拷贝基因通过基因扩增仍可合成大量的蛋白质度。单拷贝基因通过基因扩增仍可合成大量的蛋白质。如蚕丝心蛋白基因。如蚕丝心蛋白基因。v中中度度重重复复序序列列。这这类类重重复复序序列列的的重重复复次次数数在在10104之之间间，占占总总DNA的的10%40%。各种。各种rRNA、tRNA 及组蛋白基因等都属这一类。及组蛋白基因等都属这一类。v高高度度重重复复序序列列卫卫星星DNA。这这类类DNA只只在在真真核核生生物物中中

10、发发现现，占占基基因因组组的的10%60%，由由6100个个碱碱基基组组成成，在在DNA链链上上串串联联重重复复几几百百万万次次。由由于于碱碱基基的的组组成成不不同同，在在CsCl密密度度梯梯度度离离心心中中易易与与其其他他DNA分分开开，形形成成含含量量较较大大的的主主峰峰及及高高度度重重复复序序列列小小峰峰，后后者者又又称称卫卫星星区区带带（峰峰）。培训专用第一节第一节 染色体染色体2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院152.4.真核细胞染色体的结构n真 核 细 胞 染 色 体 的DNA如图所示，经过四级压缩，长度压缩将近10000倍。n四级分别为：n核小体

11、n螺线管n超螺旋圆筒n染色单体培训专用第一节第一节 染色体染色体2.4.真核细胞染色体的结构v核小体n核小体是由H2A、H2B、H3、H4各两个分子生成的八聚体和由大约200bpDNA组成的。八聚体在中间，DNA分子盘绕在外，而H1则在核小体的外面。每个核小体只有一个H1。n在核小体中DNA盘绕组蛋白八聚体核心，从而使分子收缩成1/7，200bpDNA的长度约为68nm，却被压缩在10nm的核小体中。n核小体串联起来形成10nm纤维。2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院16培训专用2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院17培训专用第

12、一节第一节 染色体染色体2.4.真核细胞染色体的结构v螺线管n螺线管是由10nm染色质细丝盘绕形成的螺旋管状细丝，表现为30nm纤维。n螺线管每一螺旋包含6个核小体，压缩比为6。n这种螺线管是分裂间期和分裂前期染色体的基本组分。2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院18培训专用第一节第一节 染色体染色体2.4.真核细胞染色体的结构v超螺旋圆筒超螺旋圆筒n有迹象表明：中期染色质是一细长、中空的圆筒，直径4000nm，由30nm的螺线管缠绕而成，压缩比为40。v染色单体染色单体n染色单体由超螺旋圆筒再压缩5倍而成。2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学

13、院生命科学学院19培训专用第一节第一节 染色体染色体2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院203.原核生物基因组：v原核生物基因组很小，大多只有一条染色体，且DNA含量少。如大肠杆菌DNA仅4.6Mb，完全伸展总长约为1.3mm，含4000多个基因。v从基因组的结构来看，原核细胞DNA有如下特点：n结构简练。非编码序列极少，这与真核细胞DNA冗余现象完全不同。n存在转录单元。多顺反子mRNA。n有重叠基因。同一段DNA含有两种不同蛋白质的信息。培训专用第二节第二节 DNA的结构的结构2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院21第二节第二

14、节 DNA的结构的结构培训专用第二节第二节 DNA的结构的结构2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院22vDNA作为遗传物质的主要优点：n信息量大，可以缩微n表面互补，电荷互补，双螺旋结构说明了精确复制机理n核糖的2脱氧，在水溶液中稳定性好n可以突变，以求进化（突变对个体是不幸的，进化对群体是有利的）n有T无U，基因组得以增大，而无C脱氨基成U带来的潜在危险。（尿嘧啶DNA糖苷酶可以灵敏识别DNA中的U而随时将其剔除）。培训专用第二节第二节 DNA的结构的结构2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院231.DNA的一级结构vWatson

15、和Crick于1953年提出了著名的DNA双螺旋模型。vDNA又称脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid）。vDNA的一级结构即是指四种 核苷酸的连接及排列顺序，表示该DNA分子的化学构成。vDNA有脱氧核苷酸聚合而成。v碱基的不同决定了脱氧核苷 酸的不同。培训专用第二节第二节 DNA的结构的结构2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院241.DNA的一级结构v脱氧核苷酸由碱基（A、T、G、C）、脱氧核糖及磷酸基团组成。以下是脱氧核苷酸及碱基结构式。培训专用第二节第二节 DNA的结构的结构2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命

16、科学学院251.DNA的一级结构v脱氧核苷酸之间由35磷酸二酯键连接成DNA链，两条链的碱基通过氢键实现AT、GC配对。培训专用第二节第二节 DNA的结构的结构2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院261.DNA的一级结构vDNA一级结构特点是：nDNA分子由两条互相平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成。nDNA分子中的脱氧核糖和磷酸交替连接，排在外侧，构成基本骨架，碱基排列在内侧。n两条链上的碱基通过氢键相结合，形成碱基对，它的组成有一定的规律。这就是嘌呤与嘧啶配对（A与T，G与C配对）。碱基之间的这种一一对应的关系叫碱基互补配对原则。由于碱基可以任何顺序排列，构成了D

17、NA分子的多样性。培训专用第二节第二节 DNA的结构的结构2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院272.DNA的二级结构vDNA二级结构是指两条多核苷酸链反相平行盘绕所生成的双螺旋盘绕结构。vDNA有三种构想：A-DNA、B-DNA、Z-DNA，其中AB为右手构象，Z为左手构想。vB型为普遍存在的结构。vA型、Z型可能具有不同 的生物活性v还存在其他构型。培训专用第二节第二节 DNA的结构的结构2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院282.DNA的二级结构vB-DNA特点：n螺旋直径2nmn链间有螺旋形凹槽，较小的为小沟（1.2nm）

18、，较大的为大沟（2.2nm）n碱基间距0.34nmn每轮碱基数10n碱基平面与纵轴垂直培训专用第二节第二节 DNA的结构的结构2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院293.DNA的高级结构vDNA的高级结构指DNA双螺旋进一步扭曲盘旋所形成的特定空间结构。v超螺旋结构是DNA高级结构的主要形式，可分为正超螺旋和负超螺旋两类，它们在不同类型的拓扑异构酶作用下或特殊情况下可相互转变，如：拓扑异构酶溴乙啶拓扑异构酶溴乙啶负超螺旋正超螺旋松弛DNA培训专用第二节第二节 DNA的结构的结构2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院303.DNA的高

19、级结构vDNA的超螺旋结构形成的意义：n使DNA形成高度致密状态从而得以装入核中；n推动DNA结构的转化以满足 功能上的需要。如负超螺旋 分子所受张力会引起互补链 分开导致局部变性，利于复 制和转录。螺螺旋旋超超螺螺旋旋培训专用第三节第三节 DNA的复制的复制双链双链DNA的复制是一个非常复杂的过程，在复制的起始、的复制是一个非常复杂的过程，在复制的起始、延伸和终止三个阶段，需要多种酶和蛋白质的协同参与。延伸和终止三个阶段，需要多种酶和蛋白质的协同参与。2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院31培训专用第三节第三节 DNA的复制的复制2023/4/19南京农业大学

20、南京农业大学 生命科学学院生命科学学院321.DNA的半保留复制的半保留复制Watson和和Crick在在 提提 出出DNA双双螺螺旋旋结结构构模模型型时时即即推推测测，DNA在在复复制制时时首首先先两两条条链链之之间间的的氢氢键键断断裂裂两两条条链链分分开开，然然后后以以每每一一条条链链分分别别做做模模板板各各自自合合成成一一条条新新的的DNA链链，这这样样新新合合成成的的子子代代DNA分分子子中中一一条条链链来来自自亲亲代代DNA，另另一一条条链链是是新新合合成成的的，这这种种复制方式为复制方式为半保留复制。半保留复制。培训专用第三节第三节 DNA的复制的复制2023/4/19南京农业大学

21、南京农业大学 生命科学学院生命科学学院331.DNA的半保留复制的半保留复制1958年年，Meselson和和Stahl研研究究了了经经15N标标记记3个个世世代代的的大大肠肠杆杆菌菌DNA，首次证明了，首次证明了DNA半保留复制。半保留复制。培训专用第三节第三节 DNA的复制的复制2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院342.复制的起点、方向和速度复制的起点、方向和速度v复制时，双链复制时，双链DNA要解开成两股链进行，使复制起点呈叉状，被称要解开成两股链进行，使复制起点呈叉状，被称为复制叉。为复制叉。v复制子为生物体复制子为生物体DNA的复制单位。的复制单位。

22、培训专用第三节第三节 DNA的复制的复制2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院352.复制的起点、方向和速度复制的起点、方向和速度v复制时，复制叉从复制起点开始沿着DNA链连续移动，起始点可以启动单向复制或者双向复制。这取决于复制起点形成一个复制叉还是两个复制叉。如右图：培训专用第三节第三节 DNA的复制的复制2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院362.复制的起点、方向和速度复制的起点、方向和速度vDNA复制时，复制方向有5向3复制，前导链连续合成，后随链合成不连续，形成冈崎片段。如图：培训专用第三节第三节 DNA的复制的复制202

23、3/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院372.复制的起点、方向和速度复制的起点、方向和速度vDNA复制：n复制起点是固定的，表现为固定序列，并识别参与复制起始的特殊蛋白质。n复制叉移动的方向和速度虽多种多样，但以双向等速为主物种物种细胞内复制子数细胞内复制子数目目/个个平均长度平均长度/kb复制子移动速度复制子移动速度/(bpmin-1)大肠杆菌1420050000酵母500403600果蝇3500402600爪蟾15000200500蚕豆35000300？培训专用第三节第三节 DNA的复制的复制2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院383

24、.复制的几种主要方式复制的几种主要方式v线性DNA双链复制 如右图：v环状DNA双链复制n型n滚环型nD-环型培训专用2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院39v环状DNA复制n型n滚环型nD-环型培训专用第四节第四节 原核、真核生物原核、真核生物DNA复制特复制特点点1.原核生物原核生物DNA复制的特复制的特点点vDNA双螺旋的解旋。n首先在拓扑异构酶I的作用下解开负超螺旋，并由解链酶解开双链，n接着由SSB蛋白来稳定解开的单链，以保证该局部结构不会恢复为双链。2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院40培训专用vDNA复制的引发。n

25、首先由引发酶（一种RNA聚合酶）在DNA模板上合成一段RNA链,n接着由DNA聚合酶从RNA引物3端合成新DNA链n后随链的引发过程由引发体来完成2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院41培训专用v冈崎片段与半不连续复制n已知DNA聚合酶的合成方向都是53，这使得后随链无法连续合成。n后随链以53的方式先合成片段（冈崎片段），在连接为完整的链。2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院42培训专用2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院43v复制的终止n当复制叉前移，遇到约22个碱基的重复性终止序列（Ter）时

26、，Ter-Tus复合物能阻止DNA的解链，阻挡复制叉的前移。n复制停止后，仍有50-100bp未被复制，将由修复方式填补空缺，而后两链解开。培训专用vDNA聚合酶n现已知大肠杆菌存在DNA聚合酶I、II、III、IV和V。nDNA聚合酶I 非主要聚合酶，可确保DNA合成的准确性，并可切除紫外线照射产生的嘧啶二聚体。nDNA聚合酶II 主要生理功能为修复DNA。nDNA聚合酶III 为主导聚合酶。nDNA聚合酶IV和V主要在SOS修复中起作用。2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院44DNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶（复合物）分子量109000120000400

27、000每个细胞所含400100102053聚合作用+35核酸外切酶+53核酸外切酶+新生链合成+生物学活性10.0515聚合速度（37核苷酸/min.分子）100010030015000以上培训专用第四节第四节 原核、真核生物原核、真核生物DNA复制特复制特点点2.真核生物真核生物DNA复制的特点：复制的特点：v真核生物每条染色体上可以有多个复制起点。v真核生物DNA在完成复制前不能开始新的复制，而原核生物则可以连续开始新的DNA复制，一个复制单元多个复制叉。vDNA复制只能在分裂期进行。v复制起点为自主复制序列（ARS）。v复制叉移动速度慢，仅50bp/s，不到大肠杆菌的1/20。v真核生物

28、DNA聚合酶有15种以上，其中nDNA聚合酶功能主要是引物合成。nDNA聚合酶主要负责DNA的复制。n还存在其它一些酶，、等，有修复损伤功能2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院45培训专用第四节第四节 原核、真核生物原核、真核生物DNA复制特复制特点点2.真核生物真核生物DNA复制的特点：复制的特点：v真核生物真核生物DNA聚合酶聚合酶2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院46表11-9真核生物五种DNA聚合酶DNA聚合酶（）（）（）位置核核核核线粒体功能后随链的合成和引发前导链的合成修复修复复制相对活性80%1015%215%分子

29、量300kD170230kD250kD40kD180300kD53外切35外切+双脱氧T不影响不影响弱抑制抑制培训专用第四节第四节 原核、真核生物原核、真核生物DNA复制特复制特点点3.DNA复制的调控：复制的调控：v原核细胞内复制叉的多少决定了复制起始频率的高低，复制起始频率的直接调控因子是蛋白质和RNA。n大肠杆菌染色体DNA复制起点编码复制调节蛋白质、复制起点与调节蛋白质相互作用并启动复制。nColE1质粒DNA的复制调控。其复制不依赖本身编码的蛋白质，而完全依靠宿主DNA聚合酶I。2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院47培训专用第四节第四节 原核、真核生

30、物原核、真核生物DNA复制特复制特点点3.DNA复制的调控：复制的调控：v真核细胞DNA的复制调控。DNA复制只发生在分裂期，其有3个水平的调控。n细胞生活周期水平的调控。也称限制点调控，即决定细胞停留在G1还是进入S期。n染色体水平调控。决定不同染色体或同一染色体不同部位的复制子按一定顺序在S期进行复制。n复制子水平调控。决定复制的起始与否，这宗调控从单细胞生物到高等生物是高度保守的。2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院48培训专用第五节第五节 DNA的修复的修复由由于于染染色色体体DNA在在生生命命过过程程中中占占有有至至高高无无上上的的地地位位，DNA的的

31、复复制制的的准准确确性性以以及及DNA日日常常保保养养中中的的损损伤伤修修复复就就有有着着特特别别重重要要的的意意义义。下下表表是是大大肠肠杆杆菌菌中中的的DNA修复系统：修复系统：2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院49DNA修复系统修复系统功能功能错配修复恢复错配切除修复（碱基、核苷酸）切除突变的碱基和核苷酸片段重组修复复制后的修复DNA直接修复修复嘧啶二体SOS系统DNA的修复，导致变异培训专用1.DNA的突变的突变vDNA的突变分为两大类：单碱基改变和的突变分为两大类：单碱基改变和DNA结构畸变。结构畸变。v单碱基改变。如下图：单碱基改变。如下图：202

32、3/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院50第五节第五节 DNA的修复的修复胞嘧啶氧化脱氨胞嘧啶氧化脱氨CA复制错误复制错误培训专用vDNA结构畸变结构畸变n嘧啶二聚体n鸟嘌呤甲基化n腺嘌呤脱嘌呤作用2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院51第五节第五节 DNA的修复的修复上：上：G G甲基化。下：甲基化。下：A A脱嘌呤脱嘌呤左：嘧啶二聚体左：嘧啶二聚体培训专用第五节第五节 DNA的修复的修复2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院522.DNA修复系统修复系统v错配修复错配修复v切除修复切除修复v重组修复重组修

33、复vDNA直接修复直接修复vSOS系统系统培训专用2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院53v错配修复错配修复v一一旦旦在在DNA复复制制过过程程中中发发生生错错配配，通通过过该该系系统统几几乎乎能能完完全全修修正正。该该系系统统对对DNA复制忠实性贡献很大。复制忠实性贡献很大。v修复过程：修复过程：n识别错配，n复合物的形成，甲基化及非甲基化链的切开，nDNA外切酶切除含错配的部分DNA链，nDNA聚合酶III合成新链。培训专用2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院54v切除修复切除修复v切除修复分为两种：切除修复分为两种：v碱基切

34、除修复碱基切除修复形成去AP位点AP核酸内切酶切除受损片段DNA聚合酶I和DNA连接酶修复DNA链v核苷酸切除修复核苷酸切除修复nDNA切割酶切割移去12-13个核苷酸（原核）或27-29个核苷酸（真核）的单链DNA，再由DNA聚合酶和DNA连接酶修复DNA链培训专用2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院55v重组修复重组修复v又被称为“复制后修复”，修复的对象是子代DNA。v损伤的DNA先进行复制，在子代DNA损伤互补的部位出现缺口，通过分子间重组，将另一个子代完好的片段移至缺口处，再填补重组产生的缺口。v模板上的伤疤始终留着。只能随 着重组修复次数，伤疤占的比

35、例。培训专用2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院56vDNA的直接修复的直接修复n直直接接修修复复是是把把损损伤伤的的碱碱基基回回复复到到原原来来状状态态的的一一种种修修复复。如如在在DNA光解酶的作用下修复嘧啶二聚体。光解酶的作用下修复嘧啶二聚体。vSOS反应反应nSOS反反应应是是细细胞胞DNA受受到到损损伤伤或或复复制制系系统统受受到到抑抑制制的的经经济济状状况下，细胞为求生存而产生的一种应急措施。况下，细胞为求生存而产生的一种应急措施。nSOS反反应应包包括括诱诱导导DNA损损伤伤的的修修复复、诱诱变变效效应应、细细胞胞分分裂裂的的抑制等。抑制等。nSO

36、S反反应应广广泛泛存存在在于于原原核核和和真真核核生生物物中中，可可产产生生两两方方面面的的作作用用：DNA的修复、的修复、DNA的变异。的变异。培训专用第五节第五节 DNA的转座的转座DNA的的转转座座，或或称称位位移移，是是由由可可位位移移因因子子介介导导的的遗遗传传物物质质重重排排现现象象。转转座座子子最最先先由由Barbara McClintock于于20世世纪纪40年年代代在在玉玉米米遗遗传传学学研研究究时时发发现的。现的。2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院57培训专用1.转座子的分类和结构特征转座子的分类和结构特征v转转座座子子（transposo

37、n,Tn）是是存存在在于于染染色色体体DNA上上可可自主复制和移位的基本单位。自主复制和移位的基本单位。v转转座座子子存存在在于于所所有有生生物物体体内内，人人类类基基因因组组中中由由35%的的序序列列为为转转作作序序列列，其其中中大大部部分分与与疾疾病病有有关关。转转座座子子分分为为两两大大类：类：n插入序列（insertional sequence,IS）n复合型转座子（composite transposon）2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院58第五节第五节 DNA的转座的转座培训专用v插入序列（插入序列（IS因子）因子）v最最简简单单的的转转座座子子

38、，不不含含任任何何宿宿主基因。主基因。v特征：特征：n很小的DNA片段n末端具有倒置重复序列n复 制 宿 主 靶 位 点DNA（4-15bp）n转座频率10-4-10-3/世代n恢复频率10-10-10-6/世代2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院59第五节第五节 DNA的转座的转座培训专用2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院60v复合型转座子复合型转座子v复合型转座子是一类带有某些抗药性基因（或其它宿主基因）的转座子。v特征：n复合型转座子两翼往往是两个相同或高度同源的IS序列。nIS序列插到功能基因的两端就可能产生复合型转座子

39、。n复合型转座子的转座能力由IS序列决定和调节的。培训专用2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院61v复合型转座子复合型转座子v复合型转座子还有一类无IS序列、体积庞大的的转座子（5000bp以上）TnA家族。vTnA特征：n携带3个基因，其中 一个为编码-内酰胺 酶基因（AmpR）n两翼都有38bp的倒置 重复序列（IR）培训专用2.真核生物中的转座子真核生物中的转座子v转座子也存在于真核生物中。在玉米和果蝇中发现了多个在基因组内随机分布而且能重复移动的转座因子序列。v玉米中的转座子nAc-Ds系统nSpm-dSpm系统v果蝇中的转座子：P转座子（可诱发杂种不育

40、）2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院62第五节第五节 DNA的转座的转座培训专用2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院63培训专用3.转座作用的机制转座作用的机制v限制性内切酶切开靶序列v转座子插入，形成具有单链粘性末端的转座子v修补缺刻，形成直接重复序列。2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院64第五节第五节 DNA的转座的转座培训专用3.转座作用的机制转座作用的机制v转作可分为复制型和非复制型两大类转作可分为复制型和非复制型两大类v复制型（复制型（TnA类）类）v非复制型（非复制型（IS序列、序列

41、、Mu及及Tn5）2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院65复制型复制型非复制型非复制型培训专用4.转座的遗传效应转座的遗传效应v引起插入突变，可导致基因表达失活。v产生新的基因。v产生的染色体畸变，引起DNA缺失或倒位。v引起的生物进化，可产生新的生物学功能的基因。2023/4/19南京农业大学南京农业大学 生命科学学院生命科学学院66第五节第五节 DNA的转座的转座培训专用培训专用培训专用谢谢观看/欢迎下载BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES

42、ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES.BY FAITH I BY FAITH培训专用内容总结南京农业大学 生命科学学院。南京农业大学 生命科学学院。第二节 DNA的结构。第二节 DNA的结构。第三节 DNA的复制。第五节 DNA的修复。一般只有一条大染色体且大都带有单拷贝基因，除少数基因外（如rRNA基因）。几乎每个基因序列都与它所编码蛋白质序列呈线性对应关系。其中H3、H4最保守，H1较不保守。根据对DNA的动力学研究，真核生物DNA序列大致可分为3类：。单拷贝基因通过基因扩增仍可合成大量的蛋白质。高度重复序列卫星DNA。螺线管每一螺旋包含6个核小体，压缩比为6。这种螺线管是分裂间期和分裂前期染色体的基本组分。（尿嘧啶DNA糖苷酶可以灵敏识别DNA中的U而随时将其剔除）。脱氧核苷酸之间由35磷酸二酯键连接成DNA链，两条链的碱基通过氢键实现AT、GC配对。这就是嘌呤与嘧啶配对（A与T，G与C配对）。DNA二级结构是指两条多核苷酸链反相平行盘绕所生成的双螺旋盘绕结构。第四节 原核、真核生物DNA复制特点。首先由引发酶（一种RNA聚合酶）在DNA模板上合成一段RNA链,。后随链的引发过程由引发体来完成。已知DNA聚合酶的合成方向都是53，这使得后随链无法连续合成。53核酸外切酶培训专用