备课素材:碱基含量的测定-高一下学期生物人教版必修2.docx
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1、碱基含量的测定2019版高中生物学必修二提到,沃森一克里克构建DNA双螺旋结构模型依据之一,是DNA中碱基的含量比例:那么,DNA碱基因含量比例是如何测定出来的?20世纪40年代,奥地利生化学家卡伽夫对不同物种和同一物种不同器官的DNA分子中碱基数目及比例的关系进行了详细的研究,并于1951年提出了著名的有关DNA分子中碱基含量的卡伽夫法则。卡伽夫研制了一种化学方法,用来测定DNA每种碱基的含量。核酸的分子量为几万到几百万或更多。可因高温、极端pH及某些化学试剂的影响发生变性。他首先用当时比较精确的纸层析法分离4种碱基。由于核酸中的碱基杂环结构在260纳米波长区域内吸收紫外光,故可用紫外吸收值
2、的变化定性或定量测定核酸。也可利用戊糖的颜色反应或磷酸含量来测定核酸。卡伽夫通过该方法测定了大量不同来源DNA的A、T、G和C,其中括号表示物质量的浓度。实验结果如下:通过对上述实验数据进行处理可以得出:表1不同种生物中DNA碱基分析上述表格可以得到,不同生物来源的DNA,碱基A的含量等于T的含量,G的含量等于C的含量。即AGTC,可能存在A与T、G与C分别配对。表2同种生物不同器官中DNA碱基分析上述表格说明,同种生物不同器官细胞的DNA中脱氧核苷酸的比例基本相同,不同生物的A、T之和与G、C之和的比值不一致。DNA具有多样性和特异性。卡伽夫的贡献在于否定了“四核苷酸假说”(由科学家列文因其
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