食品化学第八章酶幻灯片.ppt
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1、食品化学第八章酶食品化学第八章酶第1页,共80页,编辑于2022年,星期三本章内容本章内容n概述概述n酶的固定化酶的固定化n酶促褐变酶促褐变n酶在食品加工中的应用酶在食品加工中的应用第2页,共80页,编辑于2022年,星期三第一节第一节 概述概述酶对食品科学的重要性酶对食品科学的重要性n控制着所有重要的生物大分子和小分子的合成、分解控制着所有重要的生物大分子和小分子的合成、分解n食品加工的主要原料是生物材料食品加工的主要原料是生物材料,生物材料中含有大量的酶生物材料中含有大量的酶n酶的作用酶的作用n有益的:蛋白酶有益的:蛋白酶n有害的:果胶酶、脂酶有害的:果胶酶、脂酶n有效地使用和控制内源酶和
2、外源酶有效地使用和控制内源酶和外源酶第3页,共80页,编辑于2022年,星期三1 1、酶的化学本质、酶的化学本质八十年代以前八十年代以前:n酶是一类由活性细胞产生的具有催化作用和高度专一性的特酶是一类由活性细胞产生的具有催化作用和高度专一性的特殊蛋白质。殊蛋白质。八十年代以后八十年代以后:n 酶是一类由酶是一类由活性细胞活性细胞产生的生物大分子,又称催化剂。产生的生物大分子,又称催化剂。n蛋白质蛋白质n核糖酶:核糖酶:RNA、DNA第4页,共80页,编辑于2022年,星期三2 2、酶分子的组成和结构据酶据酶蛋白蛋白结构结构特征特征分类分类单体酶单体酶寡聚酶寡聚酶多酶复合体多酶复合体只有一条具有
3、活性部位的多肽链,只有一条具有活性部位的多肽链,即仅由即仅由单一的三级结构蛋白质构成单一的三级结构蛋白质构成。通常为水解酶类。通常为水解酶类。由多个具有三级结构的亚基聚合而成由多个具有三级结构的亚基聚合而成,亚基聚合时有活性,解聚后失活。亚基聚合时有活性,解聚后失活。由几由几种种功能相关的酶功能相关的酶靠非共价键靠非共价键嵌合而嵌合而成的复合体。成的复合体。第5页,共80页,编辑于2022年,星期三2 2、酶分子的组成和结构、酶分子的组成和结构金属离子金属离子小分子有机化合物小分子有机化合物酶蛋白酶蛋白(蛋白质部分蛋白质部分)辅助因子辅助因子(非蛋白质部分)(非蛋白质部分)仅由蛋白质组成,水解
4、仅由蛋白质组成,水解-氨基酸氨基酸决定反应专一性决定反应专一性 决定反应性质决定反应性质 二者缺一不可二者缺一不可,否则不具有催化特性否则不具有催化特性全酶才有催化活性全酶才有催化活性单纯蛋白酶:单纯蛋白酶:结合蛋白酶结合蛋白酶(全酶)(全酶)据酶据酶分子分子组成组成分类分类第6页,共80页,编辑于2022年,星期三辅助因子分类辅助因子分类按其按其与酶蛋白结合的紧密程度与酶蛋白结合的紧密程度辅酶辅酶(co(co-enzyme):enzyme):与酶蛋白结合与酶蛋白结合疏松疏松,可可用用透析透析或或超滤超滤的方法的方法除去除去。辅基辅基(prosthetic group):(prosthetic
5、 group):与酶蛋白结合与酶蛋白结合紧密紧密,不能不能用透析或超滤的方法用透析或超滤的方法除去除去。第7页,共80页,编辑于2022年,星期三3.3.酶的催化作用特点酶的催化作用特点n高效性:反应速度是普通催化剂的1071013;n反应条件温和:pH5-8,20-40C;n酶活力条件可控:生成与降解量的调节,催化效力的调节,改变底物浓度对酶进行调节等;n专一性:即酶只能对特定的一种或一类底物起作用。n绝对专一性:有些酶只作用于一种底物,催化一个反应,而不作用于任何其它物质。n相对专一性:这类酶对结构相近的一类底物都有作用。包括键的专一性和基团的专一性。n立体异构专一性:这类酶只对底物的某一
6、种构型起作用,而不催化其他异构体。包括旋光异构专一性和几何异构专一性。第8页,共80页,编辑于2022年,星期三底底 物物 活性中心以外的活性中心以外的必需基团必需基团结合基团结合基团催化基团催化基团 活性中心活性中心 催化底物转变催化底物转变成产物成产物维持酶活性中维持酶活性中心应有的空间心应有的空间构象构象第9页,共80页,编辑于2022年,星期三4.4.影响酶催化反应速度的因素影响酶催化反应速度的因素n内在因素内在因素n酶的浓度酶的浓度n底物的浓度底物的浓度n环境条件环境条件npHpHn温度温度n水分活度水分活度n激活剂或抑制剂激活剂或抑制剂第10页,共80页,编辑于2022年,星期三底
7、物浓度底物浓度对酶促反应的影响对酶促反应的影响 在酶浓度,在酶浓度,pHpH,温度等条件不变,温度等条件不变的的情况下研究底物浓度和反应速度的情况下研究底物浓度和反应速度的关系。如右图所示:关系。如右图所示:n在低底物浓度时在低底物浓度时,反应速度与底物反应速度与底物浓度成正比,浓度成正比,表现为表现为一级反一级反应特征。应特征。n当底物浓度达到一定值,几乎所有当底物浓度达到一定值,几乎所有的酶都与底物结合后,反应速度达的酶都与底物结合后,反应速度达到最大值到最大值(V Vmaxmax),此时再增加底物),此时再增加底物浓度,反应速度不再增加,表现为浓度,反应速度不再增加,表现为零零级反应级反
8、应。SvVmax一级反应一级反应 v=k S零级反应零级反应 v=k E第11页,共80页,编辑于2022年,星期三酶浓度的影响酶浓度的影响底物充足底物充足,其它因素不变时:其它因素不变时:n反应速率与酶浓度反应速率与酶浓度成正比成正比;n底物浓度不足底物浓度不足或或酶浓度过高酶浓度过高、产物产物积累积累对反应有抑制作用,会对反应有抑制作用,会妨碍反妨碍反应速率应速率;n实际生产中,酶浓度如过高,既浪实际生产中,酶浓度如过高,既浪费又影响产品质量。费又影响产品质量。第12页,共80页,编辑于2022年,星期三温度的影响温度的影响 q最适温度:酶促反应速度最快时的环境温度。q动物细胞酶 3750
9、 C q植物细胞酶 5060 Cq双重影响qTCT最适C:温度升高,酶促反应速度升高qTCT最适C:由于酶的本质是蛋白质,温度升高,可引起酶的变性,从而反应速度降低。酶酶活活性性0.51.02.01.50 10 20 30 40 50 60 温度温度 C 温度对淀粉酶活性的影响温度对淀粉酶活性的影响 第13页,共80页,编辑于2022年,星期三pHpH的影响的影响1.1.最适最适pH pH n表现出酶最大活力的表现出酶最大活力的pHpH值值2.pH2.pH稳定性稳定性n在一定的在一定的pHpH范围内酶是稳定的范围内酶是稳定的pHpH对酶作用的影响机制对酶作用的影响机制:n1.1.环境过酸、过碱
10、使酶变性失活;环境过酸、过碱使酶变性失活;n2.2.影响酶活性基团的解离;影响酶活性基团的解离;n3.3.影响底物的解离。影响底物的解离。0 0酶酶活活性性pHpH pHpH对某些酶活性的影响对某些酶活性的影响 胃蛋白酶胃蛋白酶 淀粉酶淀粉酶 胆碱酯酶胆碱酯酶 2 24 46 68 81010第14页,共80页,编辑于2022年,星期三Aw Aw 的影响的影响 n一般而言,一般而言,酶活力随酶活力随AwAw的的升高而增大。升高而增大。n食品原料中的水分含量必须食品原料中的水分含量必须低于低于1%1%2%2%,才能抑制,才能抑制酶活力酶活力第15页,共80页,编辑于2022年,星期三激活剂的影响
11、激活剂的影响n使酶由无活性变为有活性或使酶活性增加的物质。n其中大部分是一些无机离子和小分子简单有机物。n如:Na+、K+、Ca2+、Mg2+、Cu2+、Zn2+、Co2+、Cr2+、Fe2+、Cl-、Br-、I-、CN-、NO3-、PO4-等;n激活剂对酶的作用具有一定的选择性,使用不当,会适得其反,激活剂之间有时存在拮抗现象。n激活剂的浓度有一定的范围,超出此范围,会得到相反的效果。第16页,共80页,编辑于2022年,星期三n使酶的必需基团或活性部位中的基团的化学性质改变而降低酶使酶的必需基团或活性部位中的基团的化学性质改变而降低酶活力甚至使酶失活的物质,称为抑制剂活力甚至使酶失活的物质
12、,称为抑制剂n酶的抑制剂一般具备酶的抑制剂一般具备两个方面的特点两个方面的特点:na.a.在在化学结构上化学结构上与被抑制的底物分子或底物的过渡状态相似。与被抑制的底物分子或底物的过渡状态相似。nb.b.能够能够与酶的活性中心与酶的活性中心以非共价或共价的方式形成比较稳定的复以非共价或共价的方式形成比较稳定的复合体或结合物。合体或结合物。抑制剂的影响抑制剂的影响第17页,共80页,编辑于2022年,星期三固定化酶固定化酶 将将水水溶溶性性酶酶用用物物理理或或化化学学方方法法处处理理,固固定定于于高高分分子子支支持持物物(或或载载体体)上上而而成成为为不不溶溶于于水水,但但仍仍有有酶酶活活性性的
13、的一一种种酶制剂形式,称固定化酶。酶制剂形式,称固定化酶。n优点优点n酶的稳定性提高酶的稳定性提高n易分离,酶能反复多次使用,可连续化、自动化操易分离,酶能反复多次使用,可连续化、自动化操作作n产物中不含酶,不需要采用热处理灭酶,有助于产物中不含酶,不需要采用热处理灭酶,有助于提高食品的质量提高食品的质量第18页,共80页,编辑于2022年,星期三酶的固定方法酶的固定方法吸附吸附n将酶吸附在氧化铝、有机聚合物、玻将酶吸附在氧化铝、有机聚合物、玻璃、无机盐或硅胶等材料上璃、无机盐或硅胶等材料上n优点:优点:n操作简便、条件温和,不会引起操作简便、条件温和,不会引起酶的变性失活,载体价廉易得,酶的
14、变性失活,载体价廉易得,而且可反复使用。而且可反复使用。n缺点:缺点:n由于是靠物理吸附作用,由于是靠物理吸附作用,结合力较弱结合力较弱,酶与载体结合不太牢固而易脱落。酶与载体结合不太牢固而易脱落。第19页,共80页,编辑于2022年,星期三载体截留载体截留n凝胶(聚丙烯酰胺)凝胶(聚丙烯酰胺)n特点:特点:n低低MW底物可通过底物可通过扩散扩散自由进入凝胶颗粒,自由进入凝胶颗粒,酶和高酶和高MW的终产物不能从凝胶颗粒中渗的终产物不能从凝胶颗粒中渗漏出去。漏出去。n局限:局限:n只能适用于低只能适用于低MW底物。底物。食品体系常常有食品体系常常有大分子。大分子。n 酶通过扩散而损失酶通过扩散而
15、损失的可能性还是存在的。的可能性还是存在的。第20页,共80页,编辑于2022年,星期三胶囊包合胶囊包合n类似载体截留法,形成很小的颗类似载体截留法,形成很小的颗粒或胶囊粒或胶囊n硝酸纤维素或尼龙硝酸纤维素或尼龙n只适合低只适合低MW底物底物第21页,共80页,编辑于2022年,星期三共价连接共价连接n化学试剂化学试剂n优点:优点:n共价键牢固,酶不易泄漏共价键牢固,酶不易泄漏n缺点:缺点:n一部分酶起着载体的作用而失去了一部分酶起着载体的作用而失去了催化能力,因此用交联法固定的催化能力,因此用交联法固定的酶酶活力较低。活力较低。n对于价格昂贵的酶,不经济。对于价格昂贵的酶,不经济。第22页,
16、共80页,编辑于2022年,星期三交联法交联法n采用采用双功能试剂双功能试剂使酶分子之间或使酶分子之间或酶分子与固相载体之间发生交酶分子与固相载体之间发生交联。联。n戊二醛戊二醛n优点:优点:结合牢固结合牢固n缺点:由于交联反应较激烈,酶缺点:由于交联反应较激烈,酶分子的多个基团被交联,分子的多个基团被交联,酶活力酶活力损失较大损失较大。第23页,共80页,编辑于2022年,星期三固定化酶在食品工业中的应用固定化酶在食品工业中的应用n可把可把固定化的固定化的-淀粉酶与葡萄糖淀粉酶混合装柱淀粉酶与葡萄糖淀粉酶混合装柱,糊化的,糊化的淀粉溶液流经此柱后,淀粉便水解为葡萄糖淀粉溶液流经此柱后,淀粉便
17、水解为葡萄糖n采用采用过氧化氢对牛奶灭菌过氧化氢对牛奶灭菌,为了除去牛奶中过量的过氧化氢,为了除去牛奶中过量的过氧化氢,可用可用固定化的过氧化氢酶固定化的过氧化氢酶使之分解。使之分解。n用用固定化果胶酶固定化果胶酶澄清果汁;澄清果汁;n用用固定化木瓜蛋白酶固定化木瓜蛋白酶澄清啤酒;澄清啤酒;n用用固定化葡萄糖异构酶固定化葡萄糖异构酶将葡萄糖转变为果糖等。将葡萄糖转变为果糖等。第24页,共80页,编辑于2022年,星期三酶促褐变酶促褐变1 1、定义、定义n较浅色的水果、蔬菜在受到机械性损伤(削皮、切片、压伤、虫咬、较浅色的水果、蔬菜在受到机械性损伤(削皮、切片、压伤、虫咬、磨浆、捣碎)及处于异常
18、环境变化(受冻、受热等磨浆、捣碎)及处于异常环境变化(受冻、受热等),),在酶促(催化)在酶促(催化)下氧化而呈褐色,称为酶促褐变。下氧化而呈褐色,称为酶促褐变。2 2、酶促褐变机理、酶促褐变机理n植物中的植物中的酚类物质酚类物质在在酚酶酚酶及及过氧化物酶过氧化物酶的催化下的催化下氧化成醌氧化成醌,醌再进,醌再进行行非酶促反应非酶促反应生成褐色的色素。生成褐色的色素。第25页,共80页,编辑于2022年,星期三酚酶酚酶n以Cu离子为辅基n以氧为受氢体是以氧为受氢体的末端氧化酶n是两种酶的复合体n甲酚酶(又称酚羟化酶),作用于一元酚;n儿茶酚酶(又称为多元酚氧化酶),作用于二元酚。n酚酶属氧化酶
19、类,能直接催化氧化底物酚类n它最适pH为7,较耐热,在100 可钝化。第26页,共80页,编辑于2022年,星期三甲酚酶甲酚酶邻二酚酶邻二酚酶 聚合聚合OHOHOHOOOO黑色素黑色素 醌醌 二元酚二元酚一元酚一元酚n3 3、酶促褐变的机制、酶促褐变的机制第27页,共80页,编辑于2022年,星期三实例实例1 1:土豆(:土豆(酪氨酸酪氨酸)的褐变)的褐变n土豆褐变,毛发、皮肤中黑色素形成机制;土豆褐变,毛发、皮肤中黑色素形成机制;n目前发现的唯一一目前发现的唯一一条动植物共有的褐变途径。条动植物共有的褐变途径。第28页,共80页,编辑于2022年,星期三实例实例2 2:含有:含有儿茶酚儿茶酚
20、水果的褐变水果的褐变第29页,共80页,编辑于2022年,星期三 实例:v 梨心变黑贮存前经两次“发汗”;v 香蕉心变黑,不能贮存在12以下,但也不能温度过高,乙烯催熟;实例实例3 3:绿原酸绿原酸的酶促褐变的酶促褐变邻苯二酚氧化酶邻苯二酚氧化酶1/2O2聚合聚合褐色褐色黑色黑色第30页,共80页,编辑于2022年,星期三4 4、酶促褐变发生的条件、酶促褐变发生的条件n 酚类底物酚类底物n 酶酶n 氧氧三者缺一不可三者缺一不可 易发生酶促褐变的食品:易发生酶促褐变的食品:藕、香蕉、洋葱、茄子、土豆、苹果、梨、桃子等;藕、香蕉、洋葱、茄子、土豆、苹果、梨、桃子等;不易发生酶促褐变的食品:不易发生
21、酶促褐变的食品:柠檬、桔子、香瓜、西瓜等;柠檬、桔子、香瓜、西瓜等;第31页,共80页,编辑于2022年,星期三5 5、控制酶促褐变的方法、控制酶促褐变的方法除去多酚类物质困难,不现实。除去多酚类物质困难,不现实。一般为一般为降低酚酶活性、驱氧降低酚酶活性、驱氧 主要途径:主要途径:钝化酶的活性(热烫、抑制剂等);钝化酶的活性(热烫、抑制剂等);改变酶作用的条件(改变酶作用的条件(pH,pH,水分活度等);水分活度等);隔绝氧气;隔绝氧气;使用抗氧化剂(使用抗氧化剂(Vc,SOVc,SO2 2等)等)第32页,共80页,编辑于2022年,星期三用于食品方面主要有以下几种用于食品方面主要有以下几
22、种(1 1)加热处理)加热处理n在适当温度和时间在适当温度和时间,加热新鲜果蔬加热新鲜果蔬,可可使酚酶及其它酶失使酚酶及其它酶失活活n常用的方法有:常用的方法有:漂烫、巴氏杀菌漂烫、巴氏杀菌n加工中,必须严格加工中,必须严格控制时间和温度控制时间和温度。n不彻底加热,反而促进褐变不彻底加热,反而促进褐变;过度则影响风味、质构。过度则影响风味、质构。n微波加热微波加热,热穿透力强,迅速均匀,不影响风味。,热穿透力强,迅速均匀,不影响风味。第33页,共80页,编辑于2022年,星期三(2)控制pH酸处理法|酚酶的最适pH在67,3明显无活性;|水果:控制在酸性条件下|蔬菜:控制在中、碱性条件下n常
23、用的酸有:柠檬酸、苹果酸、磷酸、抗坏血酸、混合酸。n柠檬酸:降低pH,控制酚酶活性;螯合酚酶的Cu辅基。n抗坏血酸:使酚酶失活,且可耗氧。第34页,共80页,编辑于2022年,星期三(3)亚硫酸盐类处理法 n 抑制酚酶活性;n 将醌还原为酚;n 与醌加成,防止聚合。n如:在蘑菇、马铃薯、桃、苹果等加工中,常用二氧化硫及亚硫酸盐类作护色剂。&优点:优点:v 防止酶促褐变,防腐;防止酶促褐变,防腐;v 避免避免V VC C氧化失效;氧化失效;v SO SO2 2易去除;易去除;v 方便,成本低;方便,成本低;&缺点:缺点:v 漂白,破坏花青素;漂白,破坏花青素;v 腐蚀素铁罐的内壁;腐蚀素铁罐的内
24、壁;v 不愉快嗅味不愉快嗅味;v 破坏破坏VB1VB1第35页,共80页,编辑于2022年,星期三n(4)驱氧 na.涂Vc液,涂膜;b.浸没;c.渗入(5)底物甲基化 5 5蛋氨酸腺苷蛋氨酸腺苷 儿茶酚儿茶酚 愈创木酚愈创木酚 咖啡酸咖啡酸 阿魏酸阿魏酸 绿原酸绿原酸 3 3阿魏酸金鸡钠酸阿魏酸金鸡钠酸 第36页,共80页,编辑于2022年,星期三褐变的利用褐变的利用期望的褐变:期望的褐变:n苹果酒、红茶发酵(生成茶红素)、可可粉、葡萄干、苹果酒、红茶发酵(生成茶红素)、可可粉、葡萄干、梅干、椰枣、无花果。梅干、椰枣、无花果。第37页,共80页,编辑于2022年,星期三第四节第四节 酶在食品
25、加工中的应用酶在食品加工中的应用使用酶的目的使用酶的目的n提高食品品质提高食品品质n制造合成食品制造合成食品n提高提取食品成分的速度及产量提高提取食品成分的速度及产量n改良食品风味改良食品风味n稳定食品品质稳定食品品质n增加副产物的利用率增加副产物的利用率第38页,共80页,编辑于2022年,星期三使用酶的优点使用酶的优点n天然、无毒天然、无毒n催化的特异性,不造成不需要的副反应催化的特异性,不造成不需要的副反应n一般是粗酶制剂,可能会产生不期望的产物;但使用高纯度一般是粗酶制剂,可能会产生不期望的产物;但使用高纯度的酶制剂在经济上不合算的酶制剂在经济上不合算n在很温和的温度和在很温和的温度和
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