医学专题一分瓶细胞株细胞细胞系动物细胞培养过程.ppt

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1、动物动物(dngw)细胞培养细胞培养动物动物(dngw)细胞融合细胞融合单克隆抗体单克隆抗体(kngt)制制备备细胞核移植细胞核移植动物动物细胞细胞工程工程技术技术动物细胞工程动物细胞工程的基础的基础第一页，共四十二页。动物细胞的培养动物细胞的培养(piyng)和核移植技术和核移植技术一、动物一、动物(dngw)细胞培养细胞培养第二页，共四十二页。（一）、概念（一）、概念(ginin)是指从动物机体内取出相关的是指从动物机体内取出相关的组织组织，将它分散成，将它分散成单单个细胞个细胞，然后放在适宜的，然后放在适宜的培养基培养基中，让这些中，让这些(zhxi)(zhxi)细细胞胞生长生长和和增殖

2、增殖。（二）、原理（二）、原理(yunl)细胞分裂增殖细胞分裂增殖第三页，共四十二页。（三）过程（三）过程(guchng)(guchng)幼龄动物幼龄动物取动物器官取动物器官和组织和组织剪碎组织剪碎组织胰蛋白酶处理胰蛋白酶处理单个细胞单个细胞细胞培养细胞培养第四页，共四十二页。动物动物胚胎胚胎或或幼龄幼龄(yu ln)动物的组织、器官动物的组织、器官胰蛋白酶胰蛋白酶(y dn bi mi)剪碎剪碎单个细胞单个细胞(xbo)加培养液加培养液制成制成细胞细胞悬浮悬浮液液接触接触抑制抑制部分细胞部分细胞“癌变癌变”，无限传代，无限传代10代细胞代细胞原原代代培培养养传代培养传代培养细细胞胞贴贴壁壁剥

3、离、分瓶剥离、分瓶细胞株细胞株细胞细胞细胞系细胞系2.动物细胞培养过程：动物细胞培养过程：50代细胞代细胞（大多死少（大多死少不死）不死）（大多死少（大多死少不死）不死）第五页，共四十二页。强调一：细胞强调一：细胞(xbo)贴壁过程贴壁过程细胞贴壁：细胞贴壁：在培养在培养(piyng)瓶悬液中分散的细胞很快就贴瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。附在瓶壁上，称为细胞贴壁。培养瓶或培养皿壁要求：培养瓶或培养皿壁要求：表面表面(biomin)光滑、无毒、易于光滑、无毒、易于帖附。帖附。第六页，共四十二页。当贴壁细胞分裂生长到当贴壁细胞分裂生长到表面表面(biomin)(biomin

4、)相互接触时相互接触时,细胞就会停止分裂增殖，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接这种现象称为细胞的接触抑制。触抑制。强调强调(qing dio)二：接触抑制二：接触抑制第七页，共四十二页。有关有关(yugun)概概念念:原代培养：原代培养：从机体取出后立即培养的细胞从机体取出后立即培养的细胞(xbo)(xbo)为原代细胞为原代细胞(xbo)(xbo)。传代培养：传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。培养瓶中继续培养，称为传代培养。第八页，共四十二页。有

5、关有关(yugun)概念概念细胞株：细胞株：原代细胞一般传至原代细胞一般传至1010代左右细胞生长代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40504050代，这种传代细胞为细胞株。代，这种传代细胞为细胞株。细胞系：细胞系：细胞株传代至细胞株传代至5050代后又出现细胞生代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分长停滞状态，只有部分(b fen)(b fen)细胞由于遗传物质的细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。传代细胞为细胞系。细胞株和细胞系的区别细胞株和细胞系的

6、区别：细胞系的遗传物质改细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。培养。第九页，共四十二页。动物动物胚胎胚胎或或幼龄幼龄动物动物的组织的组织(zzh)、器官、器官胰蛋白酶胰蛋白酶(y dn bi mi)剪碎剪碎单个细胞单个细胞(xbo)加培养液加培养液制成制成细胞细胞悬浮悬浮液液接触接触抑制抑制部分细胞部分细胞“癌变癌变”，无限传代，无限传代10代细胞代细胞原原代代培培养养传代培养传代培养细细胞胞贴贴壁壁剥离、分瓶剥离、分瓶细胞株细胞株细胞细胞细胞系细胞系2.动物细胞培养过程：动物细胞培养过程：50代细胞代细胞（大多死少不（

7、大多死少不死）死）（大多死（大多死少不死）少不死）第十页，共四十二页。思考题：思考题：1 1、为什么选用动物胚胎或幼龄、为什么选用动物胚胎或幼龄(yu ln)(yu ln)个体的器官或组织个体的器官或组织做动物细胞培养材料？做动物细胞培养材料？2 2、为什么培养、为什么培养(piyng)(piyng)前要将组织细胞分散成单个细胞？前要将组织细胞分散成单个细胞？因为这些组织或器官，分裂能力因为这些组织或器官，分裂能力(nngl)(nngl)旺盛，易于培养。旺盛，易于培养。成块组织使细胞靠在一起限制了细胞的生长和增殖，成块组织使细胞靠在一起限制了细胞的生长和增殖，且细胞不能与培养液充分接触，不利于

8、培养。且细胞不能与培养液充分接触，不利于培养。第十一页，共四十二页。3、胰蛋白酶的作用是什么、胰蛋白酶的作用是什么(shn me)呢？由此可说明细胞呢？由此可说明细胞间的物质是什么间的物质是什么(shn me)成份？成份？催化蛋白质水解。细胞间的物质催化蛋白质水解。细胞间的物质(wzh)(wzh)主要是蛋主要是蛋白质白质(胶原蛋白等胶原蛋白等)。4、细胞膜的主要成份、细胞膜的主要成份(chng fn)是什么？是什么？蛋白质和磷脂蛋白质和磷脂5、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？能能第十二页，共四十二页。6 6、既然胰蛋白酶既然胰蛋白酶(y dn bi mi)(y dn bi

9、 mi)能将细胞消化掉，那将能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？7 7、能够用胃蛋白酶代替、能够用胃蛋白酶代替(dit)(dit)胰蛋白酶吗？为什么胰蛋白酶吗？为什么？注意注意(zh y)时间的控制时间的控制 不能，因为两者的最适不能，因为两者的最适PHPH不同，而正常组织细胞的不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适生存环境与胰蛋白酶的最适PHPH较接近较接近第十三页，共四十二页。3.3.总结：动物总结：动物(dngw)(dngw)细细胞培养过程胞培养过程动物胚胎或幼龄动物的动物胚胎或幼龄动物的组织组织(zzh)、器官、器

10、官细胞细胞(xbo)悬浮液悬浮液剪碎用胰蛋白酶处理剪碎用胰蛋白酶处理1010代细胞代细胞转入培养瓶转入培养瓶40-5040-50代细胞代细胞传传代代培培养养无限传代无限传代单个细胞单个细胞加培养液稀释加培养液稀释传代传代1010代以内，代以内，遗传物质不改变，遗传物质不改变，保持正常二倍体核型保持正常二倍体核型。传代传代10-5010-50代左右，增长缓慢以至代左右，增长缓慢以至于完全停止，于完全停止，部分细胞核型可能发部分细胞核型可能发生变化生变化（遗传物质可能改变（遗传物质可能改变）为什么用胰蛋白酶处理？为什么用胰蛋白酶处理？原代培养特点：原代培养特点：细胞贴壁、接触抑细胞贴壁、接触抑制制

11、继续传代培养少部分细胞继续传代培养少部分细胞获得不死获得不死性性，细胞突变细胞突变，遗传物质已经改变遗传物质已经改变，等同于癌细胞等同于癌细胞。原原代代培培养养第十四页，共四十二页。归纳归纳(gun)过程过程取取 的组织的组织(zzh)(zzh)、器官、器官细胞细胞(xbo)悬浮悬浮液液 酶酶 细胞贴壁、细胞贴壁、接触抑制接触抑制 培养培养 10 10代细胞代细胞 培养培养细胞株细胞株无限传代无限传代细胞系细胞系单个细胞单个细胞加加 液液遗传物质遗传物质 改变改变遗传物质遗传物质 改变改变动物胚胎或幼龄动物动物胚胎或幼龄动物胰蛋白胰蛋白培养培养原代原代传代传代未未已已50代细胞代细胞第十五页，

12、共四十二页。讨论讨论(toln)对于多细胞生物来说，细胞都生活在内环境对于多细胞生物来说，细胞都生活在内环境(hunjng)中，根据你所学的知识，认为体外培养细中，根据你所学的知识，认为体外培养细胞应该需要什么样的条件？胞应该需要什么样的条件？第十六页，共四十二页。4.4.动物动物(dngw)(dngw)细胞培养的条件细胞培养的条件:1 1）无菌无毒）无菌无毒 的的环境环境(hunjng)(hunjng)：适宜的温度：适宜的温度：人和哺乳动物人和哺乳动物(brdngw)(brdngw)细胞最适温细胞最适温度为度为36.50.5。适宜的酸碱度：适宜的酸碱度：PH：液体合成培养基：（液体合成培养基

13、：（糖、氨基酸）、促生长因子、糖、氨基酸）、促生长因子、（无机盐、微量元素）（无机盐、微量元素）等；通常还需加入等；通常还需加入血浆、血浆、血清等血清等天然成分。天然成分。4 4）气体环境：）气体环境：2 2）营养：）营养：3 3）温度和）温度和pHpH：“95空气+5CO2”的混合气体培养箱。氧气是细胞代谢必须的；CO2维持培养液的PH。对培养液和所有培养用具对培养液和所有培养用具无菌处理；无菌处理；培养液中培养液中添加抗生素添加抗生素防止培养过程中污染；防止培养过程中污染；定期更换培定期更换培养液养液以清除代谢产物，防止对培养细胞造成危害。以清除代谢产物，防止对培养细胞造成危害。第十七页，

14、共四十二页。5.动物细胞培养技术动物细胞培养技术(jsh)的应用的应用病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体、基因工程技术、检病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体、基因工程技术、检测有毒物质、医学测有毒物质、医学(yxu)应用等。应用等。第十八页，共四十二页。植物组织培养和动物植物组织培养和动物(dngw)细胞培养的比较细胞培养的比较比较项目比较项目植物组织培养植物组织培养动物细胞培养动物细胞培养原理原理细胞的细胞的 细胞细胞培养基特有培养基特有成分成分 、植物激素、植物激素 葡萄糖、葡萄糖、培养结果培养结果植物体植物体培养目的培养目的快速繁殖、培育无快速繁殖、培育无病毒植株病毒植株获得获得全能性全能性增殖增殖

15、(zngzh)蔗糖蔗糖(zhtng)动物血动物血清清细胞株、细胞系细胞株、细胞系细胞细胞第十九页，共四十二页。2 2、在动物细胞、在动物细胞(xbo)(xbo)培养过程中遗传物质发生改变的细培养过程中遗传物质发生改变的细胞胞(xbo)(xbo)是是 （）A A获得不死性的细胞获得不死性的细胞 B B1010代以内细胞代以内细胞 C C原代细胞原代细胞 D D传代细胞传代细胞1 1、动物细胞工程技术的基础是、动物细胞工程技术的基础是 （）A.A.动物动物(dngw)(dngw)细胞融合细胞融合 B.B.单克隆抗体单克隆抗体 C.C.胚胎移植胚胎移植 D.D.动物细胞培养动物细胞培养A AD D课

16、堂课堂(ktng)反馈练习反馈练习第二十页，共四十二页。3 3、在动物细胞培养的有关叙述中正确的是：（、在动物细胞培养的有关叙述中正确的是：（）A A、动物细胞培养的目的只是为了获得大量的细胞、动物细胞培养的目的只是为了获得大量的细胞 分分泌蛋白泌蛋白B B、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散C C、细胞的癌变发生、细胞的癌变发生(fshng)(fshng)在原代培养向传代培养的过在原代培养向传代培养的过渡渡 过程中过程中D D、培养至、培养至5050代后传代细胞遗传物质没有发生改变代后传代细胞遗传物质没有发生改变B B第二十一页，共四十二页。4 4、一

17、般说来，动物细胞体外培养需要、一般说来，动物细胞体外培养需要(xyo)(xyo)满足以下条件（满足以下条件（）无毒的环境无毒的环境(hunjng)(hunjng)无菌的环境无菌的环境(hunjng)(hunjng)培养基需要培养基需要加入血清加入血清 温度与动物体温相似温度与动物体温相似 需要需要O O2 2，不需要，不需要COCO2 2 COCO2 2能调节培养液能调节培养液PHPHA A、B B、C C、D D、D D第二十二页，共四十二页。5 5、动物细胞培养的特点、动物细胞培养的特点 （）细胞贴壁细胞贴壁 有丝分裂有丝分裂 细胞分化细胞分化 接触抑制接触抑制 减减数分裂数分裂 原代培养

18、原代培养(piyng)(piyng)一般传一般传1 11010代代A A、B B、C C、D D、A A第二十三页，共四十二页。6 6、下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回、下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答答(hud)(hud)：（1 1）容器）容器A A中放置的是动物器官或组织。它一般取自中放置的是动物器官或组织。它一般取自_。（2 2）容器）容器A A中的动物器官或组织首先要进行的处理是中的动物器官或组织首先要进行的处理是 ，然后用，然后用 酶处理，这是为了使细胞分散开酶处理，这是为了使细胞分散开来，这样做的目的是来，这样做的目的是 。动物胚胎动物胚胎(piti)或幼

19、龄动或幼龄动物物剪碎剪碎胰蛋白胰蛋白(dnbi)使细胞与培养液充分接触，便于培养使细胞与培养液充分接触，便于培养第二十四页，共四十二页。（3 3）培养首先在）培养首先在B B瓶中进行，瓶中的培养基成分有瓶中进行，瓶中的培养基成分有 _等。在此瓶中培养一段时间后，等。在此瓶中培养一段时间后，有许多细胞衰老有许多细胞衰老(shuilo)(shuilo)死亡，这是培养到第死亡，这是培养到第 代。代。（4 4）为了把）为了把B B瓶中的细胞分装到瓶中的细胞分装到C C瓶中，用瓶中，用 处理，然后配置成处理，然后配置成 ，再分装。，再分装。动物动物(dngw)血清血清10胰蛋白酶胰蛋白酶(y dn bi

20、 mi)细胞悬浮液细胞悬浮液第二十五页，共四十二页。概念概念：将动物的一个细胞的细胞核，移入一个：将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体动物个体(gt)。用用核移植核移植的方法得到的动物的方法得到的动物称为称为克隆动物克隆动物核移植核移植（难度（难度(nd)高）高）受体细胞减数第二次分裂受体细胞减数第二次分裂(fnli)中期的卵母细胞中期的卵母细胞二、动物体细胞核移植技术和克隆动物二、动物体细胞核移植技术和克隆动物胚胎细胞核移植：胚

21、胎细胞核移植：体细胞核移植：体细胞核移植：细胞分化程度低，恢细胞分化程度低，恢复全能性容易复全能性容易第二十六页，共四十二页。卵细胞卵细胞C母绵羊子宫母绵羊子宫母绵羊母绵羊母绵羊母绵羊乳腺细胞乳腺细胞细胞质细胞质细胞核细胞核细胞核移植细胞核移植胚胎移植胚胎移植早期胚胎早期胚胎多利羊多利羊分娩分娩卵裂卵裂融合后的卵细胞融合后的卵细胞细胞拆合技术细胞拆合技术妊娠妊娠多多莉莉羊羊的的培培育育(piy)过过程程第二十七页，共四十二页。克克隆隆羊羊培培育育(piy)过过程程黑面绵羊去核黑面绵羊去核卵细胞卵细胞白面绵羊乳白面绵羊乳腺细胞核腺细胞核细胞核移植细胞核移植重组细胞重组细胞电脉冲刺激电脉冲刺激早期

22、胚胎早期胚胎胚胎移植胚胎移植另一头绵羊另一头绵羊(minyng)的子宫的子宫妊娠、出生妊娠、出生克隆羊多利克隆羊多利第二十八页，共四十二页。、动物的克隆、动物的克隆(k ln)与植物克隆与植物克隆(k ln)一样吗？一样吗？、用动物体细胞进行克隆的过程、用动物体细胞进行克隆的过程(guchng),其其实际操作过程是什么？实际操作过程是什么？动物克隆动物克隆(k ln)过程的实际是过程的实际是细胞核移植细胞核移植不一样不一样思考题思考题第二十九页，共四十二页。1.体细胞核移植的过程体细胞核移植的过程(guchng)（以高产奶牛为例）（以高产奶牛为例）体细胞体细胞培养培养(piyng)甲牛甲牛乙牛

23、乙牛M卵母卵母细胞细胞去除去除(q ch)核核去核卵去核卵母细胞母细胞重组重组细胞细胞卵裂卵裂重组胚重组胚胎胎代孕母牛丙代孕母牛丙移植移植体细胞群体细胞群克隆牛克隆牛细胞核移植细胞核移植胚胎移植胚胎移植物理或化学方法激活物理或化学方法激活体细胞体细胞 注入注入细胞融合细胞融合第三十页，共四十二页。供体细胞（供核）供体细胞（供核）细胞培养细胞培养体细胞体细胞卵巢卵巢(luncho)卵母细胞（卵母细胞（M中期：供质）中期：供质）去核去核无核卵母细胞无核卵母细胞注入注入(zh r)细胞细胞(xbo)融融合合重组重组细胞细胞重组胚胎重组胚胎胚胎移植胚胎移植代孕母体代孕母体生出与供体奶牛遗传基础生出与供

24、体奶牛遗传基础相同的犊牛相同的犊牛归纳归纳:1.共分成两大阶段：共分成两大阶段：核移植核移植和和胚胎移植胚胎移植2.取卵细胞作受体细胞的取卵细胞作受体细胞的原因原因是是:它是最大的细胞它是最大的细胞,易操作易操作3.严格来说新个体有卵巢母细胞的细胞质所以有严格来说新个体有卵巢母细胞的细胞质所以有两个亲本的性状两个亲本的性状细胞细胞培养培养第三十一页，共四十二页。、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须么必须(bx)先去掉受体卵母细胞的核？先去掉受体卵母细胞的核？为使核移植动物的遗传物质全部来自为使核移植动物的遗传物质全部来自(li z)

25、(li z)有利用价有利用价值的动物提供的细胞。值的动物提供的细胞。、用于核移植的供体细胞一般都选用传代、用于核移植的供体细胞一般都选用传代1010代代以内以内(y ni)(y ni)的细胞，为什么？的细胞，为什么？1010代以内的细胞一般保持正常二倍体的核型，代以内的细胞一般保持正常二倍体的核型，未发生突变未发生突变思考题思考题第三十二页，共四十二页。3 3、体细胞核移植方法生产、体细胞核移植方法生产(shngchn)的克隆动物是对体的克隆动物是对体细胞供体动物进行了细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？的复制吗？为什么？不是，克隆动物不是，克隆动物(dngw)(dngw)绝大部分绝大

26、部分DNADNA来自供体细胞来自供体细胞核，但核外还有少部分核，但核外还有少部分DNADNA（如线粒体（如线粒体DNADNA）来自）来自受体卵母细胞受体卵母细胞思考题思考题第三十三页，共四十二页。4、对比对比(dub)多莉羊和课本高产奶牛的克隆过程，找出多莉羊和课本高产奶牛的克隆过程，找出操作过程的不同点？操作过程的不同点？多莉克隆多莉克隆(k ln)过程的受体细胞是过程的受体细胞是去核去核卵卵细胞细胞，而高，而高产奶牛的克隆过程的受体细胞是产奶牛的克隆过程的受体细胞是去核去核卵母卵母细胞细胞；多莉；多莉克隆过程是将供体克隆过程是将供体细胞核细胞核注入受体细胞，而高产奶牛的注入受体细胞，而高产

27、奶牛的克隆过程是将供体克隆过程是将供体细胞细胞注入受体细胞。注入受体细胞。5 5、讨论、讨论(toln)(toln)分析上述哪一种措施更科学？并说明理分析上述哪一种措施更科学？并说明理由？由？卵母细胞当中的细胞周期蛋白含量、活性比卵母细胞当中的细胞周期蛋白含量、活性比卵细胞高，用它作受体更容易成功，卵细胞高，用它作受体更容易成功，将将供体细胞供体细胞注入受体细胞，注入受体细胞，使克隆动物更像供体动使克隆动物更像供体动物物，操作也方便。操作也方便。思考题思考题第三十四页，共四十二页。胚胎胚胎(piti)移植技术移植技术试管动物（婴儿试管动物（婴儿(yng r)）培养过程）培养过程卵细胞卵细胞精子

28、精子体外受精体外受精受精卵受精卵胚胎胚胎新个体新个体母体子宫内母体子宫内孕育、产出孕育、产出第三十五页，共四十二页。2.体细胞核移植技术的应用体细胞核移植技术的应用(yngyng)前景前景 1、加速、加速(ji s)家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育2、保护濒危物种，增加、保护濒危物种，增加(zngji)存活数量存活数量3、克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白、克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白4、可以作为异种移植的供体，可以用于组织器、可以作为异种移植的供体，可以用于组织器官的移植官的移植第三十六页，共四十二页。3.体细胞核移植技术存在体细胞核移植技术存在

29、(cnzi)的问题：的问题：（1）成功率仍然成功率仍然(rngrn)非常低。非常低。（2）绝大多数克隆动物还存在健康问题。许多克绝大多数克隆动物还存在健康问题。许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过大，异隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过大，异常常(ychng)肥胖，发育困难，脏器缺陷，免疫失调等。肥胖，发育困难，脏器缺陷，免疫失调等。（3）对克隆动物食品的安全性问题存有争议。）对克隆动物食品的安全性问题存有争议。第三十七页，共四十二页。1 1、在动物细胞培养过程、在动物细胞培养过程(guchng)(guchng)中遗传物质发生改变中遗传物质发生改变的细胞是的细胞是 -（）A A细胞系细

30、胞系 B B细胞株细胞株 C C原代细胞原代细胞 D D传代细胞传代细胞2 2、动物细胞工程技术的基础是、动物细胞工程技术的基础是 -（）A.A.动物细胞融合动物细胞融合 B.B.单克隆抗体单克隆抗体 C.C.胚胎胚胎(piti)(piti)移植移植 D.D.动物细胞培养动物细胞培养AD课堂(ktng)反馈：第三十八页，共四十二页。3 3、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞样的组织细胞 （）A.A.容易容易(rngy)(rngy)产生各种变

31、异产生各种变异 B B具有更强的全能性具有更强的全能性 C.C.取材十分方便取材十分方便 D D分裂增殖的能力强分裂增殖的能力强D第三十九页，共四十二页。4.4.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于-（）A.A.培养基不同；培养基不同；B.B.动物细胞培养不需要动物细胞培养不需要(xyo)(xyo)在无菌条件下进行；在无菌条件下进行；C.C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能；动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能；D.D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培 养成植株。养成植株。A第四十页，共四十二页。5.下

32、列关于细胞工程的叙述中，错误的是-（)A植物细胞融合必须先制备原生质体B试管婴儿技术包括人工授精和胚胎移植两方面 C经细胞核移植培育出的新个体只具有(jyu)一个亲本的遗传物质D用于培养的植物器官或组织属于外植体C第四十一页，共四十二页。内容(nirng)总结动物细胞培养。当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。6、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题(wnt)呢。传代10-50代左右，增长缓慢以至于完全停止，部分细胞核型可能发生变化（遗传物质可能改变）。适宜的温度：人和哺乳动物细胞最适温度为36.50.5。培养液中添加抗生素防止培养过程中污染。（4）为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中，用。C第四十二页，共四十二页。