样品检测过程中的假阳性.pptx

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1、一一.样品检测过程中的假阳性结果分析样品检测过程中的假阳性结果分析1.污染（包括实验环境、实验器材、实验操作等）2.葡聚糖的干扰3.鲎试剂（预设OD值的确定）4.特殊样品第1页/共27页1.1.污染污染a.实验环境：没有明显空气流动的洁净工作室即可。（操作规程：实验应在洁净室或洁净工作台内进行。）b.实验器材：规范程序C.实验操作：避免污染第2页/共27页2.2.葡聚糖葡聚糖-D-glucan在自然界的分布很广，主要存在担子菌、真菌、地衣类、高等植物以及酵母、藻类的菌体成分中。另外，某些使用人造纤维制作的人工肾透析膜上也含有类似物质。第3页/共27页含有葡聚糖样品反应时间法分析结果第4页/共2

2、7页含葡聚糖样品反应速率法分析结果第5页/共27页内毒素反应曲线第6页/共27页葡聚糖反应曲线第7页/共27页内毒素和葡聚糖反应曲线第8页/共27页葡聚糖反应曲线和速率曲线第9页/共27页内毒素反应曲线和速率曲线第10页/共27页3.3.鲎试剂的影响（预设鲎试剂的影响（预设ODOD值的确定）值的确定）反应时间法是预设一个OD值，测定从反应开始到反应溶液达到该OD值的时间，从而达到测定反应溶液中内毒素浓度的目的。该OD值是反应进入快速反应期的吸光度。我们采用与国际上其他仪器相同的取值（0.02），该点在反应曲线上的位置为浊度开始快速变化的时期，该取值能够快速、稳定获得反应时间。第11页/共27页

3、内毒素反应曲线（某厂家鲎试剂）第12页/共27页内毒素反应曲线（某厂家鲎试剂）第13页/共27页4.4.特殊样品特殊样品某些样品会和鲎试剂中某些成分发生化学反应，形成浊度变化，造成假阳性。如碳酸氢钠注射液第14页/共27页未调整PH反应曲线第15页/共27页调整PH至7-7.5反应曲线第16页/共27页调整PH至6-7反应曲线第17页/共27页一一.样品检测过程中的假阴性结果分析样品检测过程中的假阴性结果分析1.器材处理2.鲎试剂、内毒素标准品失效3.样品回收率4.特殊反应第18页/共27页1.1.器材处理器材处理实验器材处理不当，不但容易造成假阳性，还容易造成假阴性。实验器材在经过洗液浸泡后

4、，如果冲洗不干净，有酸性物质残留，会造成实验结果出现假阴性。第19页/共27页2.2.鲎试剂、内毒素标准品失效鲎试剂、内毒素标准品失效鲎试剂保存使用不当，使鲎试剂失效，实验结果表现为假阴性。内毒素标准品失效，定标出现偏差，造成假阴性。第20页/共27页3.3.样品回收率样品回收率实验中，样品回收管是必须测定的，对此，药典有明确规定。回收率是否符合药典规定（50-200%），是测定值是否真实可靠的指标。对于一些PH较低或较高的样品，需经PH调整后，再进行测定。第21页/共27页4.4.特殊反应特殊反应某些特殊样品，如不进行预处理，会造成实验结果的假阴性。如血红蛋白第22页/共27页回收管制备时，稀释后加内毒素标准品第23页/共27页回收管制备时，稀释前加内毒素标准品第24页/共27页补充补充1.相同批号鲎试剂2.为确保所选择的处理方法能有效的排除干扰且不会使内毒素失去活性，要使用预先添加了标准内毒素再经过处理的供试品溶液进行干扰试验。第25页/共27页谢谢大家！谢谢大家！第26页/共27页感谢您的观看！第27页/共27页