医学专题—尿液红细胞及形态19753.ppt
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1、尿液红细胞及形态学检查(jinch)(jinch)第一页,共三十四页。血尿(xu nio)(xu nio)的概念 镜下血尿:以传统的尿离心沉渣玻片涂片,在高倍镜下检镜下血尿:以传统的尿离心沉渣玻片涂片,在高倍镜下检查查1010个视野个视野(shy)(shy)后,如每高倍视野后,如每高倍视野(shy)(shy)中见到红细胞超中见到红细胞超过过3 35 5个,则定为镜下血尿。个,则定为镜下血尿。肉眼血尿:重症者尿呈洗肉水样或血色,称为肉眼血尿。第二页,共三十四页。尿红细胞检测(jin c)(jin c)方法干化学分析(huxu fnx)(huxu fnx)法显微镜检查法(镜检)自动化尿沉渣分析仪法
2、单克隆抗体免疫法 第三页,共三十四页。干化学法原理:利用尿液中红细胞内血红蛋白原理:利用尿液中红细胞内血红蛋白(xuhng dnbi)(xuhng dnbi)或其破坏释放出的血红蛋白或其破坏释放出的血红蛋白(xuhng dnbi)(xuhng dnbi)均具有过氧化物酶活性,可使过氧氢茴香素或过氧化氢烯钴释放出新均具有过氧化物酶活性,可使过氧氢茴香素或过氧化氢烯钴释放出新生态氧,后者可氧化有关色原生态氧,后者可氧化有关色原(如邻甲苯胺如邻甲苯胺)显色。因此,它既可检测红细胞,也可检显色。因此,它既可检测红细胞,也可检测游离血红蛋白测游离血红蛋白(xuhng dnbi)(xuhng dnbi),
3、还可作为红细胞镜检的筛选法。,还可作为红细胞镜检的筛选法。不足:吩噻嗪类或吩嗪类药物、肌红蛋白、对热不稳定酶、氧化剂或细菌过氧化物酶、不足:吩噻嗪类或吩嗪类药物、肌红蛋白、对热不稳定酶、氧化剂或细菌过氧化物酶、尿尿pHpH值偏高等均可使隐血出现假阳性。尿液中存在大量维生素值偏高等均可使隐血出现假阳性。尿液中存在大量维生素C C时,可由于竞争性抑时,可由于竞争性抑制反应而使干化学隐血出现假阴性。制反应而使干化学隐血出现假阴性。第四页,共三十四页。显微镜检查法(镜检)尿沉渣镜检的标准是:尿沉渣镜检的标准是:医生要求镜检或病人的主诉、体征可能在尿沉医生要求镜检或病人的主诉、体征可能在尿沉渣中出现除红
4、、白细胞以外的有形成分如结晶、异常细胞等;渣中出现除红、白细胞以外的有形成分如结晶、异常细胞等;泌尿系泌尿系统疾病或可引发肾脏并发症的疾病;统疾病或可引发肾脏并发症的疾病;尿液颜色、浊度、蛋白、亚硝酸尿液颜色、浊度、蛋白、亚硝酸盐、红细胞、白细胞有任何一项异常者。盐、红细胞、白细胞有任何一项异常者。对于干化学筛选后的镜检问题,国内学者有争议,有学者认为镜检是尿沉渣对于干化学筛选后的镜检问题,国内学者有争议,有学者认为镜检是尿沉渣分析的参考标准,其重要意义分析的参考标准,其重要意义(yy)(yy)是任何方法无可替代的,只要有条件,最是任何方法无可替代的,只要有条件,最好每份标本都镜检。好每份标本
5、都镜检。第五页,共三十四页。尿红细胞镜检是尿液红细胞检测的参考标准是尿液红细胞检测的参考标准 。其不足是:。其不足是:有些红细胞在肾脏长时间有些红细胞在肾脏长时间滞留,受机械作用破碎或在血管内发生溶血,形成滞留,受机械作用破碎或在血管内发生溶血,形成HbHb尿,不能检出;尿,不能检出;规范化尿沉渣镜检操作较为繁琐(标准化操作步骤:新鲜规范化尿沉渣镜检操作较为繁琐(标准化操作步骤:新鲜(xn xin)(xn xin)尿液尿液10ml10ml,1500r/min1500r/min离心离心5min5min后留后留0.2ml0.2ml尿沉渣,将尿沉渣充盈到标准尿沉尿沉渣,将尿沉渣充盈到标准尿沉渣计数板
6、内,计算出红细胞数渣计数板内,计算出红细胞数/l/l););获得准确的试验结果,除需训获得准确的试验结果,除需训练有素、工作认真负责的技术人员外,还需对所用试验器材(标本收集练有素、工作认真负责的技术人员外,还需对所用试验器材(标本收集器皿、离心机及计数板)进行标准化。器皿、离心机及计数板)进行标准化。第六页,共三十四页。自动(zdng)(zdng)尿沉渣分析仪UF-100UF-100尿沉渣分析仪对尿液中有形成分直接作荧光染色,利用流式细胞仪原理,尿沉渣分析仪对尿液中有形成分直接作荧光染色,利用流式细胞仪原理,通过前向散射光强度通过前向散射光强度(Fsc)(Fsc)、前向散射光脉冲宽度、前向散
7、射光脉冲宽度(Fscw)(Fscw)、荧光强度、荧光强度(Fls)(Fls)、荧光、荧光脉冲宽度脉冲宽度(Flw)(Flw)以及细胞电阻抗等参数来检测尿中有形成分的大小、长度、染色以及细胞电阻抗等参数来检测尿中有形成分的大小、长度、染色情况,从而区分尿中的各种有形成分,具有操作简单、结果重复性好等特点。在情况,从而区分尿中的各种有形成分,具有操作简单、结果重复性好等特点。在红细胞检测方面,红细胞检测方面,UF-100UF-100的特点之一是同时提供尿红细胞均一型和非均一型指标,的特点之一是同时提供尿红细胞均一型和非均一型指标,对鉴别尿中红细胞的来源有较大参考价值。对鉴别尿中红细胞的来源有较大参
8、考价值。结晶、菌尿结晶、菌尿 (草酸钙结晶和霉菌)导致假阳性,红细胞碎片(草酸钙结晶和霉菌)导致假阳性,红细胞碎片(su pin)(su pin)及影及影红细胞相对于普通红细胞而言其荧光染色敏感度下降,荧光强度弱而造红细胞相对于普通红细胞而言其荧光染色敏感度下降,荧光强度弱而造成仪器漏检。成仪器漏检。第七页,共三十四页。单克隆抗体(kngt)(kngt)免疫法 可将尿液中的红细胞或可将尿液中的红细胞或HbHb与试剂中单克隆抗体结合并显色。其优点是敏感度高、特异与试剂中单克隆抗体结合并显色。其优点是敏感度高、特异性好。按每个红细胞性好。按每个红细胞HbHb含量为含量为30pg30pg计,尿液中含
9、有计,尿液中含有2 2个红细胞个红细胞/l/l(相当于(相当于0.5/HFP0.5/HFP)即可检出。其特异性体现在仅与人)即可检出。其特异性体现在仅与人HbHb起反应,假阳性率很低。由于其过于起反应,假阳性率很低。由于其过于(guy)(guy)敏感,在正常人尿内含红细胞(敏感,在正常人尿内含红细胞(0 03/HFP3/HFP)时,即可发生反应。因此,不适)时,即可发生反应。因此,不适合常规尿红细胞检查。但当常规镜检与干化学法结果不能解释时,如尿中红细胞溶解合常规尿红细胞检查。但当常规镜检与干化学法结果不能解释时,如尿中红细胞溶解和受某些物质干扰干化学检查阳性,而镜检未找到红细胞,应用单克隆抗
10、体免疫法可和受某些物质干扰干化学检查阳性,而镜检未找到红细胞,应用单克隆抗体免疫法可为尿中红细胞的性质提供鉴别诊断依据。为尿中红细胞的性质提供鉴别诊断依据。第八页,共三十四页。综合(zngh)(zngh)评价尿红细胞镜检是尿液红细胞检测的参考标准,但对尿中溶解的红尿红细胞镜检是尿液红细胞检测的参考标准,但对尿中溶解的红细胞不能检出。细胞不能检出。干化学法可检测干化学法可检测HbHb,既有助于溶血性疾病的诊断,也可弥补,既有助于溶血性疾病的诊断,也可弥补镜检不能检出破坏的红细胞之不足,还可作为尿红细胞镜检镜检不能检出破坏的红细胞之不足,还可作为尿红细胞镜检的筛选方法。但必须注重的筛选方法。但必须
11、注重(zhzhng)(zhzhng)尿液分析仪及试剂带的质量尿液分析仪及试剂带的质量及在工作中可能出现的干扰因素。及在工作中可能出现的干扰因素。第九页,共三十四页。综合(zngh)(zngh)评价单克隆抗体单克隆抗体(kngt)(kngt)免疫法检查尿液红细胞具有很好的敏感性免疫法检查尿液红细胞具有很好的敏感性和特异性,但由于其过于敏感,不能用于常规检测;在镜检和特异性,但由于其过于敏感,不能用于常规检测;在镜检和干化学法检测结果不可解释时,其有重要的鉴别诊断价值。和干化学法检测结果不可解释时,其有重要的鉴别诊断价值。尿流式细胞仪检查不仅对尿红细胞定量分析有意义,而且还能对尿红尿流式细胞仪检查
12、不仅对尿红细胞定量分析有意义,而且还能对尿红细胞形态进行分析,以确定血尿来源。但分析过程易受某些因素的干细胞形态进行分析,以确定血尿来源。但分析过程易受某些因素的干扰,如酵母菌、精子等,当仪器出现报警时,必须用镜检确认。扰,如酵母菌、精子等,当仪器出现报警时,必须用镜检确认。第十页,共三十四页。尿红细胞形态学检查(jinch)(jinch)主要用于鉴别肾性血尿和非肾性血尿。主要方法有:普通(ptng)(ptng)光镜、相差显微镜、扫描电镜、血液分析仪、尿液有形成分分析仪等。第十一页,共三十四页。普通(ptng)(ptng)光镜检查通常,在高倍镜下(400倍)识别非染色细胞形态,此法由于缺乏(q
13、uf)(quf)色泽对比和立体感,常要求观察者有丰富熟练的尿形态学经验。改用染色法(甲基绿染色,结晶紫-沙黄染色,或瑞氏染色)可增加形态鉴别特征。第十二页,共三十四页。相差(xin ch)(xin ch)显微镜检查1968年,Kark研究小组开始应用相差(xin ch)(xin ch)显微镜观察尿细胞等形态,1979年澳大利亚的肾病学家Birch和Fairly应用于临床。相差(xin ch)(xin ch)显微镜反映红细胞立体感强,是目前检查尿红细胞形态最常用的方法。第十三页,共三十四页。扫描电镜1983年,Fasseff用扫描电镜观察尿红细胞。由于立体感强,可敏感地观察到红细胞表面面(bio
14、min(biomin)的细微变化。但因价格昂贵而难以普及于临床。第十四页,共三十四页。尿液有形成(xngchng)(xngchng)分分析仪1995年,日本推出流式细胞技术为原理的尿液分析仪Sysmex UF-100,可将尿中成分(chng fn)(chng fn)作荧光染色后识别,如为肾性红细胞,散射光分布在图像左侧,非肾性红细胞在图像右侧,能有效地区别血尿来源。第十五页,共三十四页。血液(xuy)(xuy)分析仪测定尿红细胞平均体积测定尿红细胞平均体积(MCV)(MCV):肾性红细胞以小型为主,:肾性红细胞以小型为主,MCVMCV小于血小于血MCVMCV;MCV MCV72 fl72 fl
15、;非肾性红细胞以正常为主,;非肾性红细胞以正常为主,MCVMCV大于血大于血MCVMCV。但用但用MCVMCV时,要注意排除其他微粒的干扰。时,要注意排除其他微粒的干扰。观察红细胞体积分布图观察红细胞体积分布图(RDW)(RDW):具有客观:具有客观(kgun)(kgun)、快速、准确、重、快速、准确、重复性好的特点。复性好的特点。第十六页,共三十四页。畸形(jxng)(jxng)红细胞分类 大红细胞:细胞体增大,中心淡,无双盘凹陷感。大红细胞:细胞体增大,中心淡,无双盘凹陷感。小红细胞:胞体小,外膜增厚,折光增强。小红细胞:胞体小,外膜增厚,折光增强。棘形红细胞:胞质常向一侧或多侧伸出、突起
16、,如生芽样。棘形红细胞:胞质常向一侧或多侧伸出、突起,如生芽样。环形红细胞(面包圈红细胞):因细胞内血红蛋白丢失或胞浆聚环形红细胞(面包圈红细胞):因细胞内血红蛋白丢失或胞浆聚集,形似面包圈样空心环状。集,形似面包圈样空心环状。新月形红细胞:红细胞如半月形。新月形红细胞:红细胞如半月形。颗粒形红细胞:胞质内有颗粒状的间断沉积颗粒形红细胞:胞质内有颗粒状的间断沉积(chnj)(chnj),血红蛋白丢失。,血红蛋白丢失。皱缩红细胞:高渗尿中多见。皱缩红细胞:高渗尿中多见。影红细胞:低渗尿中多见。影红细胞:低渗尿中多见。红细胞碎片红细胞碎片 第十七页,共三十四页。尿异形(y xn)(y xn)红细胞
17、形态形成机制 红细胞通过有病理改变的肾小球滤膜,受到挤压损伤;红细胞通过有病理改变的肾小球滤膜,受到挤压损伤;红细胞受到不同红细胞受到不同pHpH和渗透压持续变化的肾小管滤液的影响:肾和渗透压持续变化的肾小管滤液的影响:肾性血尿中由于性血尿中由于(yuy)(yuy)红细胞本身受损,其形态已经发生变化,因红细胞本身受损,其形态已经发生变化,因此极易受肾小管滤液此极易受肾小管滤液pHpH和渗透压变化的影响而发生形态畸变。和渗透压变化的影响而发生形态畸变。非肾性血尿则不存在红细胞通过肾小球滤膜挤压损伤的前提,非肾性血尿则不存在红细胞通过肾小球滤膜挤压损伤的前提,而且红细胞在肾小管滤液中流经的时间短暂
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- 医学 专题 尿液 红细胞 形态 19753
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