实验5 小麦萌发前后淀粉酶活力的比较.ppt

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1、实验实验5 5 小麦萌发前后淀粉酶小麦萌发前后淀粉酶 活力的比较活力的比较 一、实验目的一、实验目的学习分光光度计的原理和使用方法学习分光光度计的原理和使用方法 学习测定淀粉酶活力的方法学习测定淀粉酶活力的方法 了解小麦萌发前后淀粉酶活力的比较了解小麦萌发前后淀粉酶活力的比较 二、实验原理二、实验原理 淀粉是植物最主要的贮藏多糖，也是人和动淀粉是植物最主要的贮藏多糖，也是人和动物的重要食物和发酵工业的基本原料。物的重要食物和发酵工业的基本原料。淀粉经淀粉酶作用后生成麦芽糖、葡萄糖等淀粉经淀粉酶作用后生成麦芽糖、葡萄糖等小分子物质而被机体利用小分子物质而被机体利用。淀粉酶主要包括淀粉酶主要包括-

2、淀粉酶淀粉酶和和-淀粉酶淀粉酶两种。两种。-淀粉酶可随机地作用于淀粉中的淀粉酶可随机地作用于淀粉中的-1,4-1,4-糖糖苷键，生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精苷键，生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖等还原糖，同时使淀粉的粘度降低，因此又称，同时使淀粉的粘度降低，因此又称为液化酶。为液化酶。-淀粉酶可从淀粉的非还原性末淀粉酶可从淀粉的非还原性末端进行水解，每次水解下一分子麦芽糖，端进行水解，每次水解下一分子麦芽糖，又被又被称为糖化酶（啤酒发酵前期工艺）。称为糖化酶（啤酒发酵前期工艺）。淀粉在淀粉在体外体外或或体内体内(细胞外细胞外)的降解的降解:水解的键水解的键 作用方式作用方式 产

3、物产物-淀粉酶淀粉酶 -1,4糖苷键糖苷键 任何位置任何位置 麦芽糖麦芽糖和葡萄和葡萄 糖及小分子量多糖糖及小分子量多糖-淀粉酶淀粉酶 -1,4糖苷键糖苷键 非还原性单位非还原性单位 麦芽糖连续单位麦芽糖连续单位 极限糊精极限糊精-1,6糖苷键酶糖苷键酶 水解支链淀粉中水解支链淀粉中 支链淀粉的支链淀粉的 糊精和麦芽糖的糊精和麦芽糖的 (如植物中的如植物中的R酶和酶和 -1,6糖苷键糖苷键 分支部位分支部位 混合物混合物小肠粘膜的小肠粘膜的-糊精糊精酶等酶等)(只能从淀粉的非还原端开始水解)2 2（C C6 6H H1010O O5 5）n+nHn+nH2 2O OnCnC1212H H121

4、2O O1111 淀粉酶催化产生的这些还原糖能使淀粉酶催化产生的这些还原糖能使3,5-3,5-二硝基水杨二硝基水杨酸还原，生成棕红色的酸还原，生成棕红色的3-3-氨基氨基-5-5-硝基水杨酸，后者硝基水杨酸，后者可用分光光度计法测定。可用分光光度计法测定。二、实验原理二、实验原理3,5-二硝基水杨酸二硝基水杨酸3-氨基氨基-5-硝基水杨酸硝基水杨酸 休眠种子的淀粉酶活力很弱，种子休眠种子的淀粉酶活力很弱，种子吸胀萌动后，酶活力逐渐增强，并随吸胀萌动后，酶活力逐渐增强，并随着发芽天数的增长而增加。着发芽天数的增长而增加。本实验观察小麦种子萌发前后淀粉本实验观察小麦种子萌发前后淀粉酶活力的变化。酶

5、活力的变化。三、主要仪器设备三、主要仪器设备 离心机、离心管、研钵、电炉、恒离心机、离心管、研钵、电炉、恒温水浴、温水浴、20mL20mL具有塞子的刻度试管、具有塞子的刻度试管、试管架、移液管、分光光度计。试管架、移液管、分光光度计。分光光度计分光光度计根据根据Lambert-beer定律：定律：标准管：标准管：A=KCsL (下标下标S：标准液：标准液)待测管：待测管：AxKCxL (下标下标X：待测液：待测液)四、实验步骤四、实验步骤酶液的提取酶液的提取 酶活力的测定酶活力的测定 计算计算 五、注意事项五、注意事项 1 1、发芽后的酶液要稀释适量；、发芽后的酶液要稀释适量；2 2、4 4个管在个管在2525反应时间一定要保反应时间一定要保持一致。持一致。