克氏双糖KIA(整理).ppt
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1、克氏双糖铁培养基(KIA)配方:含蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、硫代硫酸钠、硫酸亚铁、琼脂、酚红、乳糖1、葡萄糖0.1用途:主要用于观察肠杆菌科细菌是否分解乳糖、葡萄糖产酸产气、是否产生H2S。斜面部分暴露于空气中,为有氧环境有氧环境。而下部与空气隔绝是相对厌氧的环境厌氧的环境(配KIA时,最重要的是斜面部分和管下部琼脂的长度,两者均为3cm,以保证两部分相对应的有氧或厌氧环境)。KIA指示剂为酚红,其在pH6.8时变为黄色黄色黄色黄色;pH8.4为红色红色;KIA的pH为7.4,产少量的酸就可导致颜色变化;如接种的是发酵葡萄糖不发酵乳糖的细菌,培养基内仅有0.1%葡萄糖可产酸。1)培养8-12h时
2、,产生的酸足以引起斜面和底部颜色变黄色黄色黄色黄色;2)葡萄糖被完全消耗,斜面部分的细菌在有氧条件下开始氧化降解氨基酸,产生的胺类很快就中和斜面上存在的酸;到18-24h,整个斜面又转换成碱性pH,颜色有变成红色红色。3)深部(厌氧区域),氨基酸降解不足以中和形成的酸,培养基仍为黄色黄色黄色黄色。KIA结果观察:A-发酵葡萄糖:发酵葡萄糖:底层呈酸性反应(黄色)斜面为碱性反应(红色)若发酵葡萄糖产酸产气,底层 同时有气泡C-发酵葡萄糖和乳糖:发酵葡萄糖和乳糖:底层和斜面均呈酸性反应(黄色)B-产生产生H2S:培养基变黑1.未接种细菌未接种细菌3.分解乳糖和葡萄糖产酸产气、硫化氢阴性分解乳糖和葡萄糖产酸产气、硫化氢阴性 (AA)2.分解乳糖和葡萄糖产酸不产气、硫化氢阴性(分解乳糖和葡萄糖产酸不产气、硫化氢阴性(AA)4.不分解乳糖、分解葡萄糖产酸不产气、硫化氢阴性不分解乳糖、分解葡萄糖产酸不产气、硫化氢阴性(KA)5.不分解乳糖、分解葡萄糖产酸不产气、硫化氢阳性不分解乳糖、分解葡萄糖产酸不产气、硫化氢阳性(KA)
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