实验10《泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定》.ppt
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1、实验实验10 10 泡菜的腌制和亚硝酸的测定泡菜的腌制和亚硝酸的测定1、进行、进行泡菜的腌制泡菜的腌制。2、利用、利用光电比色法,光电比色法,测定泡菜中亚硝酸盐的含量。测定泡菜中亚硝酸盐的含量。实验目的实验目的实验目的实验目的 泡菜是一种以湿态发酵方式加工制成的浸制品,为泡菜是一种以湿态发酵方式加工制成的浸制品,为泡酸菜类的一种。泡菜制作容易,成本低廉,营养卫泡酸菜类的一种。泡菜制作容易,成本低廉,营养卫生,风味可口,利于贮存。在我国四川、东北、湖南、生,风味可口,利于贮存。在我国四川、东北、湖南、湖北、河南、广东、广西等地民间均有自制泡菜的习湖北、河南、广东、广西等地民间均有自制泡菜的习惯。
2、目前较受欢迎的是川味和韩味泡菜,它增进食欲,惯。目前较受欢迎的是川味和韩味泡菜,它增进食欲,帮助消化与吸收,是人们喜爱的开胃食品。但是帮助消化与吸收,是人们喜爱的开胃食品。但是泡菜泡菜含亚硝酸盐具致癌作用危害身体健康,所以不宜多吃。含亚硝酸盐具致癌作用危害身体健康,所以不宜多吃。腌制过程中,要注意控制腌制过程中,要注意控制无氧条件无氧条件、消毒消毒、腌制的时腌制的时间间、温度温度和和食盐的用量等食盐的用量等。温度过高、食盐用量不足温度过高、食盐用量不足1010、腌制时间过短,容易、腌制时间过短,容易造成大肠杆菌和假丝酵母大量繁殖,造成大肠杆菌和假丝酵母大量繁殖,亚硝酸盐亚硝酸盐含量增含量增加。
3、加。腌制时间过长和有氧条件下,都会导致腌制时间过长和有氧条件下,都会导致霉菌霉菌大量繁殖,大量繁殖,泡菜产生泡菜产生霉变味霉变味。泡菜腌制的原理泡菜腌制的原理 在在无氧无氧的条件下,的条件下,微生物微生物利用菜中的利用菜中的糖和其糖和其他营养物质他营养物质进行发酵,发酵产物有进行发酵,发酵产物有有机酸有机酸和和醇醇类物质类物质等,其中也有等,其中也有亚硝酸亚硝酸(HNOHNO2 2)。泡菜腌制的条件泡菜腌制的条件 在泡菜制作过程中起作用微生物的主要在泡菜制作过程中起作用微生物的主要是是假丝酵母假丝酵母和和乳酸菌乳酸菌。假丝酵母:发酵初期较为活跃,消耗氧气,产发酵初期较为活跃,消耗氧气,产生有机
4、酸。形成生有机酸。形成厌氧,酸性环境厌氧,酸性环境,为乳,为乳酸菌繁殖奠定基础。酸菌繁殖奠定基础。乳酸菌:异养、厌氧型异养、厌氧型细菌细菌在在无氧无氧条件下,将条件下,将葡萄糖葡萄糖分解成分解成乳酸。乳酸。常见的有常见的有乳酸链球菌乳酸链球菌和和乳酸杆菌乳酸杆菌(用于制作用于制作酸奶酸奶)。)。100毫升的容器毫升的容器思思考考:把把100100毫毫升升的的牛牛奶奶分分别别放放入入100100、200200、300300、400400毫毫升升的的容容器器中中进进行行乳乳酸酸发发酵酵,最最先先发发酵酵成成功功的的是哪个?是哪个?设备及用品泡菜罐泡菜罐菜刀及菜板菜刀及菜板泡菜罐口泡菜罐口的凹槽有的
5、凹槽有何作用何作用?实验材料:1.1.各种蔬菜均可,一般用白菜、洋白菜、各种蔬菜均可,一般用白菜、洋白菜、黄瓜、柿子椒、胡萝卜、白萝卜等。黄瓜、柿子椒、胡萝卜、白萝卜等。2.2.添加的调味品,如花椒、八角。添加的调味品,如花椒、八角。3.3.白酒白酒。4.4.食糖和食糖和盐水盐水。作用作用作用作用:抑制泡菜表面杂菌生:抑制泡菜表面杂菌生:抑制泡菜表面杂菌生:抑制泡菜表面杂菌生长,调味剂增加醇香长,调味剂增加醇香长,调味剂增加醇香长,调味剂增加醇香作用作用作用作用:抑制杂菌抑制杂菌抑制杂菌抑制杂菌 渗出蔬菜中水分渗出蔬菜中水分渗出蔬菜中水分渗出蔬菜中水分 调味。调味。调味。调味。注意注意注意注意
6、:盐含量过多,抑制乳酸菌自身繁殖;盐含量过多,抑制乳酸菌自身繁殖;盐含量过多,抑制乳酸菌自身繁殖;盐含量过多,抑制乳酸菌自身繁殖;盐含量盐含量盐含量盐含量过少,杂菌滋生繁殖。过少,杂菌滋生繁殖。过少,杂菌滋生繁殖。过少,杂菌滋生繁殖。(2 2)将)将泡菜坛泡菜坛洗净,并用热水洗坛内壁两次。洗净,并用热水洗坛内壁两次。(3 3)将各种蔬菜、)将各种蔬菜、盐水盐水、糖及、糖及调味品调味品放入坛,放入坛,混合均匀。如果希望发酵快些,可将混合均匀。如果希望发酵快些,可将蔬菜在开水蔬菜在开水中浸中浸1 1分钟分钟后入坛,再加上一些后入坛,再加上一些白酒白酒。(4 4)将坛口用)将坛口用水水封好,封好,防
7、止外界空气进入防止外界空气进入。(5 5)腌制)腌制1 1周左右周左右即可开坛食用,可不断取用。即可开坛食用,可不断取用。(1 1)各种菜洗净并切成)各种菜洗净并切成3 34cm4cm长的小块。长的小块。(6 6)如果加入一些已经)如果加入一些已经腌制过的泡菜汁腌制过的泡菜汁更好,这更好,这相当于接种相当于接种已经扩增的发酵菌已经扩增的发酵菌,可减少腌制时间。,可减少腌制时间。作用作用作用作用:造成无氧环境的方法,这样,坛内造成无氧环境的方法,这样,坛内造成无氧环境的方法,这样,坛内造成无氧环境的方法,这样,坛内可利用蔬菜中天然存在的乳酸菌进行乳酸可利用蔬菜中天然存在的乳酸菌进行乳酸可利用蔬菜
8、中天然存在的乳酸菌进行乳酸可利用蔬菜中天然存在的乳酸菌进行乳酸发酵。如不封闭,则会有许多需氧菌生长,发酵。如不封闭,则会有许多需氧菌生长,发酵。如不封闭,则会有许多需氧菌生长,发酵。如不封闭,则会有许多需氧菌生长,蔬菜会腐烂变质。蔬菜会腐烂变质。蔬菜会腐烂变质。蔬菜会腐烂变质。泡菜坛泡菜坛泡菜坛泡菜坛:选择无砂眼、无裂纹、无渗水的坛。选择无砂眼、无裂纹、无渗水的坛。选择无砂眼、无裂纹、无渗水的坛。选择无砂眼、无裂纹、无渗水的坛。适量的盐水适量的盐水适量的盐水适量的盐水,煮沸,煮沸,煮沸,煮沸(?)(?)(?)(?)后,冷却加入后,冷却加入后,冷却加入后,冷却加入。盐太少,。盐太少,。盐太少,。
9、盐太少,杂菌增生;盐太多,发酵变慢。杂菌增生;盐太多,发酵变慢。杂菌增生;盐太多,发酵变慢。杂菌增生;盐太多,发酵变慢。步骤:1 1 1 1、加入白酒有什么作用?、加入白酒有什么作用?、加入白酒有什么作用?、加入白酒有什么作用?白酒可抑制泡菜表面杂菌的生长,它也是一种调白酒可抑制泡菜表面杂菌的生长,它也是一种调白酒可抑制泡菜表面杂菌的生长,它也是一种调白酒可抑制泡菜表面杂菌的生长,它也是一种调味剂,可增加醇香感。味剂,可增加醇香感。味剂,可增加醇香感。味剂,可增加醇香感。思考与练习:2 2 2 2、用水封闭坛口起什么作用?不封闭有什么结果?、用水封闭坛口起什么作用?不封闭有什么结果?、用水封闭
10、坛口起什么作用?不封闭有什么结果?、用水封闭坛口起什么作用?不封闭有什么结果?水封闭坛口起着使坛内与坛外空气隔绝的作用,水封闭坛口起着使坛内与坛外空气隔绝的作用,水封闭坛口起着使坛内与坛外空气隔绝的作用,水封闭坛口起着使坛内与坛外空气隔绝的作用,空气中空气中空气中空气中21212121是氧气,这是最简易的造成无氧环境的是氧气,这是最简易的造成无氧环境的是氧气,这是最简易的造成无氧环境的是氧气,这是最简易的造成无氧环境的方法。这样,坛内可利用蔬菜中天然存在的乳酸菌方法。这样,坛内可利用蔬菜中天然存在的乳酸菌方法。这样,坛内可利用蔬菜中天然存在的乳酸菌方法。这样,坛内可利用蔬菜中天然存在的乳酸菌进
11、行乳酸发酵。如不封闭,则会有许多需氧菌(如进行乳酸发酵。如不封闭,则会有许多需氧菌(如进行乳酸发酵。如不封闭,则会有许多需氧菌(如进行乳酸发酵。如不封闭,则会有许多需氧菌(如霉菌等)生长,蔬菜会腐烂。霉菌等)生长,蔬菜会腐烂。霉菌等)生长,蔬菜会腐烂。霉菌等)生长,蔬菜会腐烂。3 3 3 3、厌氧发酵和有氧发酵的产物有什么不同?、厌氧发酵和有氧发酵的产物有什么不同?、厌氧发酵和有氧发酵的产物有什么不同?、厌氧发酵和有氧发酵的产物有什么不同?乳酸菌产生乳酸属厌氧发酵;乳酸菌产生乳酸属厌氧发酵;乳酸菌产生乳酸属厌氧发酵;乳酸菌产生乳酸属厌氧发酵;酵母菌产生乙醇属厌氧发酵;酵母菌产生乙醇属厌氧发酵;
12、酵母菌产生乙醇属厌氧发酵;酵母菌产生乙醇属厌氧发酵;醋酸菌产生乙酸属有氧发酵,如继续进行有氧发酵,醋酸菌产生乙酸属有氧发酵,如继续进行有氧发酵,醋酸菌产生乙酸属有氧发酵,如继续进行有氧发酵,醋酸菌产生乙酸属有氧发酵,如继续进行有氧发酵,则产物被氧化而产生乙酸。则产物被氧化而产生乙酸。则产物被氧化而产生乙酸。则产物被氧化而产生乙酸。此外,需氧微生物(此外,需氧微生物(此外,需氧微生物(此外,需氧微生物(霉菌霉菌霉菌霉菌等)的作用也可使蔬菜腐等)的作用也可使蔬菜腐等)的作用也可使蔬菜腐等)的作用也可使蔬菜腐烂。烂。烂。烂。4 4 4 4、为什么泡菜坛内常常会有一层白膜?、为什么泡菜坛内常常会有一层
13、白膜?、为什么泡菜坛内常常会有一层白膜?、为什么泡菜坛内常常会有一层白膜?泡菜坛表面的一层白膜是由于泡菜坛表面的一层白膜是由于泡菜坛表面的一层白膜是由于泡菜坛表面的一层白膜是由于产膜产膜酵母菌的大量酵母菌的大量酵母菌的大量酵母菌的大量繁殖繁殖繁殖繁殖导致的。泡菜营养丰富,表面氧气多,酵母菌导致的。泡菜营养丰富,表面氧气多,酵母菌导致的。泡菜营养丰富,表面氧气多,酵母菌导致的。泡菜营养丰富,表面氧气多,酵母菌繁殖快。繁殖快。繁殖快。繁殖快。资料:资料:泡菜泡菜含较多含较多亚硝酸亚硝酸盐盐具致癌作用危害身具致癌作用危害身体健康,所以不宜多体健康,所以不宜多吃。吃。亚硝酸盐主要指亚硝酸盐主要指亚硝酸
14、钠亚硝酸钠,亚硝酸钠为白,亚硝酸钠为白色至淡黄色粉末或颗粒状,味微咸,易溶于水。色至淡黄色粉末或颗粒状,味微咸,易溶于水。特点特点特点特点作用作用作用作用 用于食品加工业中的发色剂和防腐剂。用于食品加工业中的发色剂和防腐剂。使血液中正常携氧的使血液中正常携氧的低铁血红蛋白低铁血红蛋白氧化成氧化成高铁高铁血红蛋白血红蛋白。食入。食入0.30.5克的亚硝酸盐即可引起中毒克的亚硝酸盐即可引起中毒甚至死亡,甚至死亡,转化成转化成亚硝胺亚硝胺是是致癌物致癌物。危害危害危害危害分布分布分布分布腌制肉制品、泡菜及变质的蔬菜含量较高。腌制肉制品、泡菜及变质的蔬菜含量较高。原理:原理:在在酸化酸化条件下,条件下
15、,亚硝酸盐亚硝酸盐与与对氨基对氨基苯磺酸苯磺酸发生发生重氮化重氮化反应后,再与反应后,再与N-1N-1-萘基萘基乙二胺乙二胺偶联偶联,形成,形成紫红色紫红色产物,可用产物,可用光电光电比色法比色法定量测定。定量测定。比色杯分光光度计分光光度计二、亚硝酸盐含量的测定二、亚硝酸盐含量的测定我们还学过哪些颜色反应?我们还学过哪些颜色反应?分光光度计的简单原理分光光度计的简单原理 分光光度计是采用一个可以产生多个波长的光源,分光光度计是采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源产生特定波长的光源,光源透,光源透过过测试的样品测试的样品后,部分后,部分
16、光源被吸收光源被吸收,计算样品的吸光值计算样品的吸光值(光密度值光密度值),从而转化成,从而转化成样品的浓度样品的浓度。样品的。样品的吸光值吸光值(即即光密度值,又叫光密度值,又叫ODOD值值)与与样品的浓度成样品的浓度成正比正比。分光光度计分光光度计:是利用分光光度法对物质进行定量定是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。性分析的仪器。分光光度法分光光度法:通过测定被测物质在通过测定被测物质在特定波长特定波长处处光的光的吸收值吸收值(即即光密度值,又叫光密度值,又叫ODOD值值),对该物质进行,对该物质进行定性定性和和定量定量分析。分析。光电比色法亚硝酸钠标准显色液测定原理:测定原理:
17、测定原理:测定原理:亚硝酸盐亚硝酸盐+显色剂显色剂(对氨基苯磺酸(对氨基苯磺酸+N-1-萘萘基乙二胺)基乙二胺)紫红色紫红色用用分光光度计分光光度计测量测量光密度值光密度值。实验材料:1 1、氯化铵缓冲液氯化铵缓冲液氯化铵缓冲液氯化铵缓冲液:pH:pH:pH:pH为为为为9.79.79.79.72 2、硫酸锌溶液硫酸锌溶液硫酸锌溶液硫酸锌溶液3 3、氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液4 4、对氨基苯磺酸溶液对氨基苯磺酸溶液对氨基苯磺酸溶液对氨基苯磺酸溶液+蒸馏水蒸馏水蒸馏水蒸馏水+冰乙酸,冰乙酸,冰乙酸,冰乙酸,用用用用棕色瓶棕色瓶棕色瓶棕色瓶中室温保存。中室温保存。中室温保存。
18、中室温保存。5 5、N-1N-1N-1N-1萘基乙二胺溶液萘基乙二胺溶液萘基乙二胺溶液萘基乙二胺溶液+60+60+60+60乙酸溶解,乙酸溶解,乙酸溶解,乙酸溶解,用用用用棕色瓶棕色瓶棕色瓶棕色瓶装,放入装,放入装,放入装,放入冰箱冰箱冰箱冰箱保存。保存。保存。保存。6 6、显色剂显色剂显色剂显色剂:“4”:“4”:“4”:“4”和和和和“5”“5”“5”“5”配置的溶液等体积混合配置的溶液等体积混合配置的溶液等体积混合配置的溶液等体积混合7 7、NaNONaNONaNONaNO2 2 2 2标准溶液标准溶液标准溶液标准溶液(储液储液储液储液):250mg250mg250mg250mgNaNO
19、NaNONaNONaNO2 2 2 2+200mL+200mL+200mL+200mL蒸馏水蒸馏水蒸馏水蒸馏水+100mL100mL100mL100mLNHNHNHNH4 4 4 4ClClClCl缓冲液缓冲液缓冲液缓冲液500mL500mL容量瓶定容,容量瓶定容,容量瓶定容,容量瓶定容,冰箱中避光冰箱中避光冰箱中避光冰箱中避光保存。保存。保存。保存。8 8、NaNONaNONaNONaNO2 2 2 2标准溶液标准溶液标准溶液标准溶液(测定时用测定时用测定时用测定时用):1mL1mL1mL1mLNaNONaNONaNONaNO2 2 2 2标准溶液标准溶液标准溶液标准溶液+蒸馏水,蒸馏水,蒸
20、馏水,蒸馏水,100mL100mL100mL100mL容量瓶中容量瓶中容量瓶中容量瓶中定容定容定容定容 (1mL1mL测定标准液测定标准液测定标准液测定标准液=5 5 g g NaNONaNONaNONaNO2 2 2 2)防止防止NO2-在酸性下被氧化在酸性下被氧化泡菜泡菜25g少量泡菜汤少量泡菜汤制匀浆后,制匀浆后,洗涤和过滤洗涤和过滤NaOH调调pH至至8.0加加25mLZnSO4产生产生白白色沉淀色沉淀水浴加热水浴加热至至60,10min后冷却至室温后冷却至室温滤纸滤纸过滤过滤,并,并淋洗沉淀淋洗沉淀,过滤液过滤液和和洗涤液洗涤液在在500mL容量瓶中定容容量瓶中定容1 1、样品处理、
21、样品处理实验步骤实验步骤让更多的蛋白质沉淀让更多的蛋白质沉淀让更多的蛋白质沉淀让更多的蛋白质沉淀 产生沉淀的过程中的产生沉淀的过程中的胶体胶体,具有很强的具有很强的吸附作用吸附作用。取取10mL样品溶液样品溶液4.5mL氯化铵缓冲液氯化铵缓冲液2.5mL60乙酸乙酸溶液溶液5mL显色液显色液定容于定容于25mL容量瓶中,容量瓶中,混合均匀混合均匀暗处暗处静置静置25min用用光程光程为为1cm1cm的的比色杯比色杯在在550550nmnm处,处,测定测定光密度值(光密度值(ODOD值值)2 2、测定光密度值、测定光密度值(1 1 1 1)实验组)实验组)实验组)实验组 (2 2 2 2)对照组
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- 泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定 实验 10 泡菜 腌制 亚硝酸盐 测定
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