HE的染色基本原理ppt课件.ppt
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1、为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益HE的染色基本原理浙江省肿瘤医院病理科浙江省肿瘤医院病理科 李筠李筠为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益一、细胞核的染色原理一、细胞核的染色原理为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益 细胞核内的染色质主要成份,去氧核糖核酸细胞核内的染色质主要成份,去氧核糖核酸(DNADNA),),DNADNA的双螺旋结构中,两条链上的磷酸基
2、的双螺旋结构中,两条链上的磷酸基向外,带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精向外,带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色,苏木精在碱性碱性染料以离子键或氢键结合而被染色,苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。结果:结果:细胞核细胞核呈蓝色,软骨基质,钙盐颗粒呈深蓝,粘液呈灰蓝。呈蓝色,软骨基质,钙盐颗粒呈深蓝,粘液呈灰蓝。为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益灰蓝色蓝色深蓝色为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济
3、体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益二、细胞浆的染色原理二、细胞浆的染色原理为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益 细胞浆内主要成份是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色与细胞浆内主要成份是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色与PHPH值有密切关系,当值有密切关系,当PHPH调到蛋白质等电点调到蛋白质等电点4.75.04.75.0时,胞浆对外不时,胞浆对外不显电性,同时酸或碱性染粒不易染色,当显电性,同时酸或碱性染粒不易染色,当PHPH调剂调剂6868时,大于蛋白时,大于蛋白质的等电点时,表现酸性
4、电离,而带负电荷的阴离子,可被带正电质的等电点时,表现酸性电离,而带负电荷的阴离子,可被带正电荷的染料染色,同时胞核也被染色,核和胞浆难以区分(阴离子)荷的染料染色,同时胞核也被染色,核和胞浆难以区分(阴离子)的染料染色。伊红是一种化学合成的酸性染料,在水中离解成带负的染料染色。伊红是一种化学合成的酸性染料,在水中离解成带负电荷的阴离子,与蛋白质的氨基正电荷(阴离子)结合而使细胞浆电荷的阴离子,与蛋白质的氨基正电荷(阴离子)结合而使细胞浆染色。结果:细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染色。结果:细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色,如:染成不同程
5、度的红色或粉红色,如:胞浆内胞浆内嗜酸性颗粒呈仅先强的嗜酸性颗粒呈仅先强的鲜红,鲜红,胶原纤维胶原纤维呈桔粉红色,弹力纤维呈亮粉红色,红血球呈桔红呈桔粉红色,弹力纤维呈亮粉红色,红血球呈桔红色;与蓝色的细胞核形成鲜明的对比。色;与蓝色的细胞核形成鲜明的对比。为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益质量好质量好HEHE具备条件具备条件为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作
6、人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益1.1.细胞核与细胞浆蓝红相映,鲜艳亮丽;细胞核与细胞浆蓝红相映,鲜艳亮丽;2.2.胞核鲜明、核膜、核染色质颗粒均清晰可见;胞核鲜明、核膜、核染色质颗粒均清晰可见;3.3.组织或一般结构特点及假物质成分均能显示出来。组织或一般结构特点及假物质成分均能显示出来。为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益三、HEHE染色中二甲苯、酒精和水洗的作用染色中二甲苯、酒精和水洗的作用为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合
7、法权益1.1.二甲苯的作用:二甲苯的作用:二甲苯可以溶解切片中的石蜡,以使染二甲苯可以溶解切片中的石蜡,以使染液可以进入细胞和组织,因此,石蜡的存在液可以进入细胞和组织,因此,石蜡的存在妨碍水和染料进入细胞,染色后二甲苯起透妨碍水和染料进入细胞,染色后二甲苯起透明切片的作用,以利于光线的透过。明切片的作用,以利于光线的透过。为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益2.2.酒精的作用:酒精的作用:酒精用于苏木素前,由高酒精用于苏木素前,由高低是为了洗脱用低是为了洗脱用于脱蜡的二甲苯使水能进入细胞和组织中,伊红于脱蜡的二甲
8、苯使水能进入细胞和组织中,伊红染色以后酒精由低染色以后酒精由低高逐渐脱去组织中水份,为高逐渐脱去组织中水份,为二甲苯进入细胞创造条件,否则组织切片透明度二甲苯进入细胞创造条件,否则组织切片透明度达不到光学显微镜观察时透光度的要求,在显微达不到光学显微镜观察时透光度的要求,在显微镜下不可能清晰的细胞和组织结构。镜下不可能清晰的细胞和组织结构。为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益3.3.水洗的作用:水洗的作用:在脱蜡酒精之后用水洗切片,使切片进入在脱蜡酒精之后用水洗切片,使切片进入水,才能使苏木精染液进入细胞核中,使细
9、胞水,才能使苏木精染液进入细胞核中,使细胞核染色。核染色。为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益水洗目的:水洗目的:切片清洁,提高切片质量;切片清洁,提高切片质量;切片着色均切片着色均匀;匀;防止不清洁的切片污染染液,保持染液的清洁和防止不清洁的切片污染染液,保持染液的清洁和纯度。纯度。染色之后的水洗:染色之后的水洗:为洗去未与切片结合染液为洗去未与切片结合染液分化以后的水洗:分化以后的水洗:中止分化作用中止分化作用伊红染色后的水洗:伊红染色后的水洗:洗去未结合的染液,以防止大量伊洗去未结合的染液,以防止大量伊红进入
10、染缸红进入染缸为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益四、分化和蓝化作用为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益1.1.分化作用分化作用 苏木素染色后,用水洗去未结合在切片中染苏木素染色后,用水洗去未结合在切片中染液,但是对细胞核中结合过多的染料和细胞浆中液,但是对细胞核中结合过多的染料和细胞浆中吸附的染料必须用分化液吸附的染料必须用分化液1%1%盐酸酒精脱去,才盐酸酒精脱去,才能保证细胞核和细胞浆染色的分明,把这个过程能保证细胞核和细胞浆染色
11、的分明,把这个过程称为染色的分化作用。称为染色的分化作用。为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益2.2.蓝化作用蓝化作用 分化之后苏木精在酸性条件下处分化之后苏木精在酸性条件下处红色离子红色离子状态,在碱性条件下则处于状态,在碱性条件下则处于蓝色离子蓝色离子状态,而状态,而呈蓝色,所以分化之后用水洗去酸而中止分化,呈蓝色,所以分化之后用水洗去酸而中止分化,而用弱碱水使苏木素染上细胞核变呈蓝色,称而用弱碱水使苏木素染上细胞核变呈蓝色,称蓝化作用,一般分用自来水浸洗变蓝,也可用蓝化作用,一般分用自来水浸洗变蓝,也可用稀氨
12、水或温水。稀氨水或温水。为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益苏木素、伊红染色方法苏木素、伊红染色方法(自动染色机程序)(自动染色机程序)为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益o二甲苯 5分钟二甲苯 5分钟 二甲苯 3分钟无水乙醇 5分钟无水乙醇 3分钟无水乙醇 3分钟水洗 5分钟苏木素 13分钟水洗 3分钟o伊红 8秒水洗 2秒85%酒精 5秒95%酒精 5秒无水乙醇 3分钟无水乙醇 5分钟无水乙醇 5分钟正丁醇 5分钟二甲苯 5分钟为了
13、规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益五、媒染染料五、媒染染料为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益 有些染料直接对组织染色时,由于染料有些染料直接对组织染色时,由于染料与组织间的作用力弱,有时甚至无作用,因与组织间的作用力弱,有时甚至无作用,因此组织着色很浅,甚至不着色,我们必须将此组织着色很浅,甚至不着色,我们必须将这些染料先与媒染剂结合生成色淀的染料称这些染料先与媒染剂结合生成色淀的染料称为媒染染料(此类染料多为天染染料,如苏为媒染染料(
14、此类染料多为天染染料,如苏木精、卡红)。木精、卡红)。为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益六、媒染剂六、媒染剂为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益 凡由于和组织及染料结合,生成色淀,并凡由于和组织及染料结合,生成色淀,并促进染色的金属离子盐类或金属原子的含氧酸促进染色的金属离子盐类或金属原子的含氧酸等称为媒染剂。等称为媒染剂。间接染色过程中,媒染染料间接染色过程中,媒染染料+媒染剂结合媒染剂结合=色淀色淀+组织结合组织结合 媒染剂媒染剂
15、+组织然后组织然后 再与染料结合,生成再与染料结合,生成组织组织媒染剂媒染剂染料结合物,从而使组织染料结合物,从而使组织着色着色为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益七、促染剂七、促染剂为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度,保障用人单位和职工的合法权益 指只增强染料的染色能力,但不参与指只增强染料的染色能力,但不参与染色反应的一类物质。常见:伊红染液中冰染色反应的一类物质。常见:伊红染液中冰醋酸。醋酸。为了规范事业单位聘用关系,建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业
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