药物分析药物鉴别试验.pptx

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1、11.1.取样取样2.2.鉴别鉴别3.3.检查检查4.4.含量测定含量测定5.5.检验报告检验报告工工 作作 程程 序序 药品检验工作的基本内容药品检验工作的基本内容第1页/共74页2鉴鉴 别别 是根据药物的是根据药物的分子结构分子结构、理理化性质化性质，采用化学、物理化，采用化学、物理化学或生物学方法来学或生物学方法来判断药物判断药物的真伪的真伪.鉴别方法要求鉴别方法要求:专属性强、专属性强、再再现性好、灵敏度高、简便快速现性好、灵敏度高、简便快速第2页/共74页3鉴鉴 别别 中国药典中国药典鉴别项下规定的试验方法鉴别项下规定的试验方法,仅反仅反应药品某些物理、化学或生物学应药品某些物理、化

2、学或生物学等性质的等性质的特征特征，不完全不完全代表对该代表对该药品药品化学结构化学结构的的确认确认第3页/共74页4鉴别试验特点鉴别试验特点1.已知物的确证试验,不是鉴定未知物的组成和结构，仅用于证实贮藏在有标签容器中的药物是否为其所标示的药物，而非对未知物的鉴别。2.鉴别试验是个别分析不是系统分析(采用灵敏度高专属性强的方法,试验项目少)3.选用药物的化学鉴别反应,光谱特征,色谱行为,物理常数等不同方法鉴别同一个供试品4.鉴别制剂注意消除辅料的干扰第4页/共74页5 鉴鉴别别试试验验 鉴别试验项目鉴别试验项目 鉴别方法鉴别方法 鉴别试验条件鉴别试验条件鉴鉴 别别第5页/共74页6鉴鉴别别实

3、实验验项项目目鉴鉴 别别（一）性状（一）性状（二）一般鉴别试验（二）一般鉴别试验（三）专属鉴别试验（三）专属鉴别试验第6页/共74页7性状性状包括颜色、臭味等应有包括颜色、臭味等应有的的外观外观以及以及溶解度溶解度和和物理常数物理常数.是质量重要表征之一是质量重要表征之一,在一在一定程度上反映药品的纯度及疗效定程度上反映药品的纯度及疗效.第7页/共74页8 1外观 指药物外表感观和色泽，包括聚集状态、晶型、色泽以及臭味等性质。如如中中国国药药典典对对二二巯巯基基丁丁二二钠钠的的描描述述为为“本本品品为为白色至微黄色的粉末；有类似蒜的特臭白色至微黄色的粉末；有类似蒜的特臭”。2溶解度 溶解度是药

4、物的一种物理性质，在一定程度上反映了药品的纯度。如磺胺嘧啶如磺胺嘧啶“在乙醇或丙酮中微溶，在水中几乎在乙醇或丙酮中微溶，在水中几乎不溶；在氢氧化钠试液中易溶，在稀盐酸中溶解不溶；在氢氧化钠试液中易溶，在稀盐酸中溶解”。鉴别实验项目第8页/共74页9尼莫地平在丙酮、三氯甲烷或乙酸乙酯中易溶，在乙醇中溶在丙酮、三氯甲烷或乙酸乙酯中易溶，在乙醇中溶解，在乙醚中微溶，在水中几乎不溶。解，在乙醚中微溶，在水中几乎不溶。中国药典中国药典第9页/共74页10 3 3物理常数物理常数 物理常数：评价药品质量的重要指标物理常数：评价药品质量的重要指标 药物鉴别药物鉴别，药品的，药品的纯杂程度。纯杂程度。中国药典

5、中国药典收载的物理常数包括：收载的物理常数包括：相对密度、馏程、熔点、凝点、比旋度、折光率、黏度、酸值、皂化值、羟值、碘值、吸收系数。鉴别实验项目第10页/共74页11(1)熔点熔点：由固体熔化成液体的温度由固体熔化成液体的温度 熔融同时分解的温度熔融同时分解的温度 在熔化时在熔化时初熔初熔至至全熔全熔的一段温度的一段温度。（2）比旋度比旋度：在一定波长与温度下，偏振光透过长在一定波长与温度下，偏振光透过长1dm1dm且每且每1ml1ml中含有旋光性物质中含有旋光性物质1g1g的溶液时测得的旋光度称为比的溶液时测得的旋光度称为比旋度。旋度。反映手性药物特性及其纯度的主要指标反映手性药物特性及其

6、纯度的主要指标 用途：鉴别药品用途：鉴别药品 纯度检查纯度检查 含量测定含量测定鉴别实验项目第11页/共74页12鉴别实验项目 例1:溴化新斯的明项下所述：“本品的熔点为171176，熔融时同时分解”。例2：如维生素C的比旋度测定：“取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释使成每1ml中约含0.10g的溶液，依法测定，比旋度为+20.5至+21.5”。第12页/共74页13 （3）吸收系数吸收系数：在给定的波长、溶剂和温度等条件下，吸光在给定的波长、溶剂和温度等条件下，吸光物质在单位浓度、单位液层厚度时的吸收度称物质在单位浓度、单位液层厚度时的吸收度称为吸收系数为吸收系数。表示方法表示方法：摩尔吸

7、收系数：摩尔吸收系数 百分吸收系数百分吸收系数 用用 途：途：检查纯度检查纯度 测定制剂含量测定制剂含量鉴别实验项目第13页/共74页14 依据某一类药物的依据某一类药物的化学结构化学结构或或理化理化性质性质的特征，通过化学反应来鉴别药的特征，通过化学反应来鉴别药物的真伪物的真伪鉴鉴别别实实验验项项目目一般鉴别试验一般鉴别试验第14页/共74页15无机药物无机药物:根据阴、阳离子根据阴、阳离子（钠盐、钙盐、（钠盐、钙盐、硫酸盐、氯化物）硫酸盐、氯化物）的特殊反应的特殊反应,并以药典附并以药典附录项下的一般鉴别试验为依据；录项下的一般鉴别试验为依据；有机药物有机药物:多采用典型的官能团反应（多采

8、用典型的官能团反应（芳芳香第一胺、水杨酸盐）香第一胺、水杨酸盐）.鉴鉴别别实实验验项项目目一般一般鉴别试验鉴别试验第15页/共74页16只能证实是某一类药物，而不能证实是哪一种药物。例如:钠盐的焰色试验,不能辨认是氯化钠、苯钾酸钠或者是其它某一种钠盐药物.只适用于确认单一单一的化学药物，对多种药物的混合物或有干扰物存在时，不适用。鉴鉴别别实实验验项项目目一般一般鉴别试验鉴别试验第16页/共74页17无无机机酸酸盐盐有有机机酸酸盐盐无无机机金金属属盐盐类类有有机机氟氟化化物物类类芳芳香香第第一一胺胺类类托托烷烷生生物物碱碱类类丙丙二二酰酰脲脲类类中中 国国 药药 典典第17页/共74页181.有

9、机氟化物有机氟化物无机氟化物茜素氟蓝硝酸亚铈pH4.3蓝紫色络合物二、一般鉴别试验第18页/共74页19 1有机氟化物有机氟化物 （地地塞塞米米松松、依依诺诺沙沙星星、氧氧氟氟沙沙星星、醋醋酸酸曲曲安安奈奈德德、醋醋酸酸氟氟轻轻松松、醋酸氟轻可的松醋酸氟轻可的松）取取供供试试品品约约7mg7mg，照照氧氧瓶瓶燃燃烧烧法法进进行行有有机机破破坏坏，用用水水20ml20ml与与0.01mol/L0.01mol/L氢氢氧氧化钠溶液化钠溶液6.5ml6.5ml为吸收液，待燃烧完全后，充分振为吸收液，待燃烧完全后，充分振 摇摇，取取吸吸收收液液2ml2ml，加加茜茜素素氟氟蓝蓝试试液液 0.5ml0.5

10、ml，再再加加12%12%醋醋酸酸钠钠的的稀稀醋醋酸酸溶溶液液0.2 0.2 mlml，用用水水稀稀释释至至4ml4ml，加加硝硝酸酸亚亚铈铈试试液液0.5ml0.5ml，即即显显蓝蓝紫紫色色，同同时时做做空空白白对对照照试试验。验。一般鉴别实验鉴鉴别别方方法法第19页/共74页20 2 2有机酸盐有机酸盐（1 1）水杨酸）水杨酸1 1）鉴别）鉴别方法一方法一：取供试品的稀溶液，加三氯化铁试液：取供试品的稀溶液，加三氯化铁试液1 1滴，即显紫堇色。滴，即显紫堇色。2 2）反反应应原原理理：本本品品在在中中性性或或弱弱酸酸性性条条件件下下，与与三三氯氯化化铁铁试试液液生生成成配配位位化化合合物物

11、，在中性时呈红色，弱酸性时呈紫色。在中性时呈红色，弱酸性时呈紫色。一般鉴别实验第20页/共74页21二、一般鉴别试验2.水杨酸盐水杨酸盐鉴别方法二FeCl3反应反应弱酸性中性加稀加稀HClHCl，即析出白色沉淀；分离，沉淀溶于，即析出白色沉淀；分离，沉淀溶于醋酸铵溶液。醋酸铵溶液。第21页/共74页22（2 2）酒石酸盐酒石酸盐1）鉴鉴别别方方法法：取取供供试试品品的的中中性性溶溶液液，置置洁洁净净的的试试管管中中，加加氨氨制制硝硝酸酸银银试液数滴，置水浴中加热，银即游离并附在试管内壁成试液数滴，置水浴中加热，银即游离并附在试管内壁成银镜。一般鉴别实验第22页/共74页23 2 2）反应原理：

12、其反应式为：反应原理：其反应式为：HOCHCOOH +2Ag(NH3)2OH HOCHCOOH HOCCOONH4 2Ag+2NH3+2H2O HOCCOONH4第23页/共74页24 3 芳香第一胺类（1）鉴别方法：取取供供试试品品约约50mg50mg，加加稀稀盐盐酸酸1ml1ml，必必要要时时缓缓缓缓煮煮沸沸使使溶溶，放放冷冷，加加亚亚硝硝酸酸钠钠溶溶液液（0.1mol/L0.1mol/L）数数滴滴，滴滴加加碱碱性性-萘萘酚酚试试液液数数滴滴，视视供供试品不同，生成试品不同，生成橙黄色到猩红色沉淀橙黄色到猩红色沉淀。（2）反应原理：重氮化-偶合反应一般鉴别实验第24页/共74页25 中国药

13、典2005版二部芳香第一胺反应鉴别的药物 对乙酰氨基酚 盐酸普鲁卡因 艾司唑仑 硝西泮 奥沙西泮 磺胺嘧啶第25页/共74页26 4 4 托烷生物碱类托烷生物碱类 （硫酸阿托品、氢溴酸山莨菪碱、氢溴酸东莨菪碱）（硫酸阿托品、氢溴酸山莨菪碱、氢溴酸东莨菪碱）（1）鉴鉴别别方方法法：取取供供试试品品约约10mg10mg，加加发发烟烟硝硝酸酸5 5滴滴，置置水水浴浴上上蒸蒸干干，即即得得黄黄色色的的残残渣渣，放放冷冷，加加乙乙醇醇2-32-3滴滴，加加固固体体氢氢氧氧化化钾钾一一小小颗颗，即显深紫色。即显深紫色。（2 2）反反应应原原理理：托托烷烷生生物物碱碱类类均均具具有有莨莨菪菪酸酸结结构构，有

14、有VitaliVitali反反应应，显显紫紫色色。后后马马托托品品具具莨莨菪菪醇醇结结构构而而不不具具莨莨菪菪酸酸结结构构，无无此此反应。反应。一般鉴别实验第26页/共74页27莨菪酸莨菪酸三硝基衍生物三硝基衍生物醌式化合物醌式化合物硝基化反应硝基化反应莨菪醇莨菪醇第27页/共74页28 5 5无机金属盐无机金属盐（1 1）NaNa、K K、CaCa的焰色反应的焰色反应 1 1）鉴鉴别别方方法法：取取铂铂丝丝，用用盐盐酸酸湿湿润润后后，蘸蘸取取供供试试品品，在在无无色色火火焰焰中中燃燃烧烧，火焰即显各离子的特征颜色。火焰即显各离子的特征颜色。NaNa+鲜黄色鲜黄色 K K+紫色紫色 CaCa2

15、+2+砖红色砖红色一般鉴别实验第28页/共74页292）测定原理：）测定原理：火焰光谱的谱线不同火焰光谱的谱线不同Na 589.0nm、589.6nm，显黄色。K 766.49nm、769.90nm，由于人眼 在此波长附近敏感度较差，显紫色。Ca 622nm、554nm、442.67nm与 602nm，622nm的谱线最强，砖红色。一般鉴别实验第29页/共74页30（2 2）铵盐）铵盐 鉴别方法：鉴别方法：供试品供试品+NaOH NH3a.发生氨臭；发生氨臭；b.b.遇湿润的红色石蕊试纸遇湿润的红色石蕊试纸 蓝蓝c.c.硝酸亚汞硝酸亚汞试液湿润的滤纸试液湿润的滤纸 黑黑一般鉴别实验第30页/共

16、74页31 6 6 无机酸根无机酸根 （1 1）氯化物）氯化物 鉴别一：鉴别一：硝酸银反应：硝酸银反应：Cl-+AgNO3 AgCl NH3H2O 沉淀溶解 +HNO3 沉淀生成 如供试品为生物碱或其他有机碱的盐酸盐，如供试品为生物碱或其他有机碱的盐酸盐，须先加氨试液使成碱性，将析出的沉淀滤过须先加氨试液使成碱性，将析出的沉淀滤过除去，取滤液进行试验。除去，取滤液进行试验。一般鉴别实验第31页/共74页32 鉴别二 取供试品少量，置试管中，加等量的二氧化锰取供试品少量，置试管中，加等量的二氧化锰,混匀混匀,加硫酸湿润加硫酸湿润,缓缓加热缓缓加热,即发生氯气即发生氯气.Cl2 +KI-淀粉试纸

17、蓝色一般鉴别实验第32页/共74页33（2）硫酸盐 鉴别一：鉴别一：SO42-+BaCl2 BaSO4 沉淀在 HCl或 HNO3中不溶解。鉴别二：鉴别二：取取供供试试品品溶溶液液，加加醋醋酸酸铅铅试试液液，即即生生成成白白色色沉沉淀淀；分分离离，沉沉淀淀在在醋醋酸酸铵铵试试液液或或氢氢氧氧化化钠钠试液中溶解试液中溶解。一般鉴别实验第33页/共74页34（3）硝酸盐 鉴别一：取供试品溶液，加等量硫酸，混合冷却沿壁管加FeSO4试液,使成两液层，界面显棕色 鉴别二：取供试品溶液，加硫酸和铜丝，加热即生成红棕色蒸汽。一般鉴别实验第34页/共74页35（三）专属鉴别试验（三）专属鉴别试验 证实某一种

18、药物的依据证实某一种药物的依据 它根据每一种药物化学结构的差异它根据每一种药物化学结构的差异及其引起的物理化学性质不同及其引起的物理化学性质不同,选用某选用某些些灵敏的定性灵敏的定性反应反应,来鉴别药物真伪来鉴别药物真伪.鉴鉴别别实实验验项项目目第35页/共74页36 一般鉴别试验一般鉴别试验,区别不同区别不同类别类别的药物。的药物。专专属属鉴鉴别别试试验验，区区别别各各个个药药物物单单体体，达到最终确证药物真伪的目的。达到最终确证药物真伪的目的。第36页/共74页37苯巴比妥司可巴比妥钠巴比妥第37页/共74页38中国药典中国药典20052005年版年版(二部二部)用于鉴别的仪器分析法用于鉴

19、别的仪器分析法紫外紫外-可见分光光度法可见分光光度法 546 546 种种红外分光光度法红外分光光度法 593593 种种高效液相色谱法高效液相色谱法 484484 种种薄层色谱法薄层色谱法 199199 种种气相色谱法气相色谱法 3 3 种种第38页/共74页39化化学学鉴鉴别别法法化学鉴别法必须反应迅速、现象明显化学鉴别法必须反应迅速、现象明显 类型：类型：(1)(1)呈色反应鉴别法呈色反应鉴别法 (2)(2)沉淀生成反应鉴别法沉淀生成反应鉴别法 (3)(3)荧光反应鉴别法荧光反应鉴别法 (4)4)气体生成鉴别法气体生成鉴别法 （5)5)使试剂褪色鉴别法使试剂褪色鉴别法第39页/共74页4

20、0(1)(1)呈色反应鉴别法呈色反应鉴别法 三氯化铁呈色反应三氯化铁呈色反应对乙酰氨基酚 异羟肟酸铁反应异羟肟酸铁反应氯贝丁酯 ClCl化化学学鉴鉴别别法法第40页/共74页41(1)(1)呈色反应鉴别法呈色反应鉴别法 茚三酮呈色反应茚三酮呈色反应 重氮化重氮化-偶合呈色反应偶合呈色反应左旋多巴 对乙酰氨基酚化化学学鉴鉴别别法法第41页/共74页42(2)(2)沉淀生成鉴别法沉淀生成鉴别法 与重金属离子沉淀反应与重金属离子沉淀反应 还原基团的银镜反应还原基团的银镜反应 异烟肼异烟肼化化学学鉴鉴别别法法第42页/共74页43 (3)(3)荧光反应鉴别法荧光反应鉴别法 药物本身在可见光下发射荧光药

21、物本身在可见光下发射荧光 药物溶液药物溶液+硫酸硫酸 药物溶液药物溶液+溴溴 药物溶液药物溶液+间苯二酚间苯二酚化化学学鉴鉴别别法法第43页/共74页44(4)(4)气体生成反应鉴别法气体生成反应鉴别法化化学学鉴鉴别别法法大多数伯胺（铵）类药物、酰尿类以及某大多数伯胺（铵）类药物、酰尿类以及某 些酰胺类药物些酰胺类药物,可经强碱处理后加热产生氨气可经强碱处理后加热产生氨气.化学结构含硫药物化学结构含硫药物,可经强酸处理后加热可经强酸处理后加热 产生硫化氢气体产生硫化氢气体.硫鸟嘌呤 巴比妥类药物第44页/共74页45(4)(4)气体生成反应鉴别法气体生成反应鉴别法化化学学鉴鉴别别法法含碘有机药

22、物含碘有机药物 经直火加热可经直火加热可 生成紫色碘蒸气生成紫色碘蒸气.碘苷含醋酸酯和乙酰胺含醋酸酯和乙酰胺醋酸酯类药物经硫酸醋酸酯类药物经硫酸水解后水解后,加乙醇可产加乙醇可产生醋酸乙酯的香味生醋酸乙酯的香味.对乙酰氨基酚第45页/共74页46二、光谱鉴别法1.1.紫外光谱鉴别法紫外光谱鉴别法(Ultraviolet spectrophotometry)美法仑 测定测定maxmax，或同时测定，或同时测定minmin；测定一定浓度的供试液在测定一定浓度的供试液在maxmax处的处的A A 规定规定和和E E 规定规定 和和A A1 1/A/A2 2 经化学处理后，测定其反应产物的经化学处理后

23、，测定其反应产物的吸收光谱特性。吸收光谱特性。12第46页/共74页471 1 紫外光谱鉴别法紫外光谱鉴别法测定测定maxmax，或同时测定，或同时测定minmin乙胺嘧啶乙胺嘧啶 供试品在供试品在0.1mol/L0.1mol/L盐酸介质盐酸介质中的紫外吸收在中的紫外吸收在272nm272nm处为峰处为峰,216nm,216nm处处为谷为谷.光光谱谱鉴鉴别别法法第47页/共74页48测定一定浓度的供试液在测定一定浓度的供试液在maxmax处的处的A A 盐酸布比卡因浓度盐酸布比卡因浓度0.4mg/ml0.4mg/ml溶液溶液,在在263nm、271nm波长处有最大吸收波长处有最大吸收.其吸其吸

24、光度分别为光度分别为0.53-0.580.53-0.58与与0.43-0.480.43-0.48光光谱谱鉴鉴别别法法第48页/共74页49 规定规定和和E E 光光谱谱鉴鉴别别法法 经化学处理后经化学处理后,测定其反应产物测定其反应产物的吸收光谱特性的吸收光谱特性.第49页/共74页50规定规定和和A A1/A1/A2 2 两性霉素在两性霉素在362nm、381nm、405nm波波长处有最大吸收长处有最大吸收.规定规定362nm362nm与381nm381nm处处吸收度比值不大于吸收度比值不大于0.60.6、381nm381nm与与405nm405nm波长比值不大于波长比值不大于0.90.9.

25、光光谱谱鉴鉴别别法法第50页/共74页51 在在200 200 400nm 400nm 波长范围内扫描波长范围内扫描两溶液两溶液,要求在相同的波长处有要求在相同的波长处有最最大吸收大吸收、最小吸收最小吸收和相同的和相同的吸收系吸收系数数，或，或吸收比吸收比在规定的范围内在规定的范围内.与对照品比较与对照品比较,对比吸收光谱对比吸收光谱 的一致性的一致性光光谱谱鉴鉴别别法法第51页/共74页52 2 2 红外光谱法红外光谱法特点：专属性强，应用广（固体、液体、气体）用途：原料药 同类药（其他方法不易区分的）磺胺类、甾体激素类、半合成抗生素光光谱谱鉴鉴别别法法第52页/共74页53 2 2 红外光

26、谱法红外光谱法Ch.PCh.P（20052005）采用标准图谱对照法采用标准图谱对照法BP BP （20052005）采用标准图谱对照法采用标准图谱对照法USP USP（2929）采用对照品法采用对照品法JP JP （1515）采用规定条件下测定一定波采用规定条件下测定一定波 数处的特征吸收峰数处的特征吸收峰试样制备方法：试样制备方法：试样制备方法：试样制备方法：压片法、糊法、膜法、溶液法压片法、糊法、膜法、溶液法压片法、糊法、膜法、溶液法压片法、糊法、膜法、溶液法光光谱谱鉴鉴别别法法第53页/共74页54光谱鉴别法光谱鉴别法特征区指纹区第54页/共74页55 3 3 近红外光谱法近红外光谱法

27、 测定物质在近红外谱区7502500nm的特征光谱，用化学计量的方法提取信息进行定性、定量分析。特点：快速、准确、对样品无破坏光光谱谱鉴鉴别别法法第55页/共74页56光谱鉴别法光谱鉴别法3.3.近红外光谱法近红外光谱法(Near-(Near-Infrared spectrophotometry)第56页/共74页57 4 4 原子吸收法原子吸收法 利用原子蒸汽可以吸收由该元素作为空心阴极灯发出的特征谱线，供试液溶液在特征谱线处的最大吸收和特征谱线强度减弱程度进行定性、定量分析。光光谱谱鉴鉴别别法法第57页/共74页58 5 5 核磁共振法核磁共振法 测定供试品指定基团上质子峰的化学位移和偶合

28、常数进行药物的鉴别光光谱谱鉴鉴别别法法第58页/共74页59 结晶物质的鉴别 比较 供试品 已知物质的X射线粉末衍射图 依据：各衍射线的衍射角（2）相对强度 面间距X X射射线线粉粉末末衍衍射射法法第59页/共74页60色色谱谱谱谱鉴鉴别别法法 适用于复杂环境下药物有效成分及杂质鉴适用于复杂环境下药物有效成分及杂质鉴别别,具有分离、分析同时进行的特点具有分离、分析同时进行的特点.高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC)供试品和对照品供试品和对照品色谱峰保留时间一致色谱峰保留时间一致.气相色谱法气相色谱法 (GC)(GC)同同HPLCHPLC要求要求薄层扫描法薄层扫描法(TLC)对照品比较法，对

29、照品比较法，供试供试品斑点与对照品的品斑点与对照品的Rf值及斑点的颜色应一致值及斑点的颜色应一致.色谱法（色谱法（HPLC GC TLC MS)HPLC GC TLC MS)第60页/共74页611.薄层色谱法（TLC)第61页/共74页62色色谱谱谱谱鉴鉴别别法法 同浓度对照品在同一块薄层板比较同浓度对照品在同一块薄层板比较 供试品与对照品等体积混合在同一块薄层供试品与对照品等体积混合在同一块薄层板比较板比较 供试品与和其化学结构相似对照品比较供试品与和其化学结构相似对照品比较 将将下两溶液等体积混合点样、比较下两溶液等体积混合点样、比较1.1.薄层色谱法（薄层色谱法（TLC)TLC)第62

30、页/共74页63色色谱谱谱谱鉴鉴别别法法高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC)供试品和对照品供试品和对照品色谱峰保留时间一致色谱峰保留时间一致.内标法时内标法时,药物峰保留药物峰保留时间与内标峰保留时间比值一致时间与内标峰保留时间比值一致气相色谱法气相色谱法 (GC)(GC)同同HPLCHPLC要求要求2.2.高效液相色谱法（高效液相色谱法（HPLC)HPLC)第63页/共74页64GC和和HPLC鉴别法鉴别法色谱鉴别法色谱鉴别法色谱鉴别法色谱鉴别法第64页/共74页65色色谱谱谱谱鉴鉴别别法法 在高真空状态下将被测物质离子化在高真空状态下将被测物质离子化,按质子按质子的质荷比的质荷比(m/

31、z)(m/z)大小分离进行定性和定量分析大小分离进行定性和定量分析3.3.质谱法（质谱法（MS)MS)第65页/共74页66色谱鉴别法色谱鉴别法3.质谱鉴别法质谱鉴别法 (Mass Spectrometry)第66页/共74页67 生物鉴别法生物鉴别法 特点：利用微生物或实验动物利用微生物或实验动物 进行鉴别进行鉴别 用途：抗生素抗生素 生化药物生化药物生生物物鉴鉴别别法法第67页/共74页68第三节 鉴别试验的方法鉴鉴 别别 方方 法法化学鉴别法化学鉴别法光谱鉴别法光谱鉴别法生物学法生物学法 色谱鉴别法色谱鉴别法 HPLC、GC鉴别法鉴别法 薄层色谱鉴别法薄层色谱鉴别法 纸色谱鉴别法纸色谱鉴

32、别法 呈色反应鉴别法呈色反应鉴别法 沉淀生成反应鉴别法沉淀生成反应鉴别法 气体生成反应鉴别法气体生成反应鉴别法 使试剂褪色鉴别法使试剂褪色鉴别法荧光反应鉴别法荧光反应鉴别法 紫外光谱鉴别法紫外光谱鉴别法 红外光谱鉴别法红外光谱鉴别法 第68页/共74页69 化学法和仪器法相结合化学法和仪器法相结合,每种药每种药 品一般选用品一般选用2 2 4 4种方法进行鉴种方法进行鉴 别试验别试验,相互取长补短相互取长补短.方法要有一定的专属性、灵敏方法要有一定的专属性、灵敏 性、且便于推广性、且便于推广.尽可能采用药典中收载的方法尽可能采用药典中收载的方法.鉴鉴别别法法小小结结第69页/共74页70（2）

33、在维生素C的分子中具有烯二醇的结构，这个结构具有很强的还原性,可以和一些氧化剂作用.例1.维生素C的鉴别：维生素C分子中具有2个手性C原子,所以具有旋光性,可以通过测定旋光度来进行鉴别.（1）药典中规定：维生素C的比旋度应为+20.5+21.5鉴鉴别别法法小小结结第70页/共74页71鉴别方法 硫酸阿米卡星的薄层色谱法鉴别试验：硫酸阿米卡星的薄层色谱法鉴别试验：“取本品与硫酸阿米卡星标准品适量，分别加水制成每1ml中约含10mg的溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10ul，分别点于同一硅胶H薄层板上，以氯仿-甲醇-浓氨溶液-水（1：4：2：1）为展开剂，展开后，晾干，喷以0.2%茚三酮

34、的水饱和正丁醇溶液，在100加热10min。供试品溶液与标准品溶液所显主斑点的颜色与位置应相同”。第71页/共74页72 溶液的浓度溶液的浓度 溶液的温度溶液的温度 溶液的酸碱度溶液的酸碱度 试验时间试验时间鉴鉴别别实实验验条条件件 干扰成分的存在干扰成分的存在第72页/共74页73鉴别试验 空空白白试试验验：在在与与供供试试品品鉴鉴别别试试验验完完全全相相同同的的条条件件下下，除除不不加加供供试试品品外外，其它试剂均同样加入而进行的试验。其它试剂均同样加入而进行的试验。为为了了消消除除试试剂剂和和器器皿皿可可能能带带来来的的影影响响，应应同同时时进进行行空空白白试试验验（blank blank testtest）以供对照。）以供对照。鉴鉴别别试试验验灵灵敏敏度度第73页/共74页74感谢您的观看！第74页/共74页