教学课件：第三章-消毒与灭菌.ppt

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1、第三章第三章 消毒与灭菌消毒与灭菌 第一节第一节 物理因素对微生物的影响物理因素对微生物的影响 第二节第二节 化学因素对微生物的影响化学因素对微生物的影响第三节第三节 生物因素对微生物的影响生物因素对微生物的影响 几个基本概念几个基本概念 1、杀菌作用、杀菌作用指某些物质或因素所具有的在一定指某些物质或因素所具有的在一定 条件下，杀死微生物的作用。条件下，杀死微生物的作用。2、抑制作用、抑制作用指某些物质或因素所具有的抑制微指某些物质或因素所具有的抑制微 生物生长与繁殖的作用。生物生长与繁殖的作用。3、抗菌作用、抗菌作用指某些药物所具有的抑制或杀灭微指某些药物所具有的抑制或杀灭微 生物的作用。

2、生物的作用。4、灭菌、灭菌指杀灭物体中所有病原微生物、非病原指杀灭物体中所有病原微生物、非病原微生物及芽胞、霉菌孢子的方法。微生物及芽胞、霉菌孢子的方法。5、消毒、消毒指杀灭物体中的病原微生物的方法。指杀灭物体中的病原微生物的方法。6、防腐、防腐指阻止或抑制微生物生长繁殖的方法。指阻止或抑制微生物生长繁殖的方法。7、无菌、无菌指没有活的微生物的存在。指没有活的微生物的存在。无菌法无菌法采取防止或杜绝任何微生物进入动采取防止或杜绝任何微生物进入动 物机体或其他物体的方法，称为无物机体或其他物体的方法，称为无 菌法。菌法。无菌技术无菌技术以无菌法进行的操作称为无菌技以无菌法进行的操作称为无菌技 术

3、或无菌操作。术或无菌操作。3-1 3-1 物理因素对微生物的影响物理因素对微生物的影响 一、温度：一、温度：（一）生长温度：只有在最适温度范围内，（一）生长温度：只有在最适温度范围内，微生物才能迅速生长繁殖。一般病原菌最适微生物才能迅速生长繁殖。一般病原菌最适生长温度为生长温度为37左右。左右。温度过高或过低都会影响微生物的新陈温度过高或过低都会影响微生物的新陈代谢和生长发育，甚至使之死亡。代谢和生长发育，甚至使之死亡。（二）低温：大多数微生物对低温的抵抗力很强，当微生物（二）低温：大多数微生物对低温的抵抗力很强，当微生物处于最低生长温度以下时，其代谢活动降低到最低水平，生处于最低生长温度以下

4、时，其代谢活动降低到最低水平，生长繁殖停止，但仍可长时间保持活力，所以，常用低温保存长繁殖停止，但仍可长时间保持活力，所以，常用低温保存菌种。菌种。菌种保存方法：菌种保存方法：1、低温保存法：常在、低温保存法：常在510下保存细菌。下保存细菌。2、冷冻保存法：此时，温度必须迅速降低，起用时也应迅速、冷冻保存法：此时，温度必须迅速降低，起用时也应迅速融化。防止胞浆水分形成冰晶，破坏胞浆胶体、胞浆膜和细融化。防止胞浆水分形成冰晶，破坏胞浆胶体、胞浆膜和细胞壁。反复冷冻与融化对微生物具有很大伤害，应尽力避免。胞壁。反复冷冻与融化对微生物具有很大伤害，应尽力避免。为了减少细菌在冷冻时的死亡，可于菌液内

5、加入为了减少细菌在冷冻时的死亡，可于菌液内加入10左右左右甘油、蔗糖、脱脂乳或甘油、蔗糖、脱脂乳或5二甲基亚砜作为保护剂。二甲基亚砜作为保护剂。3、冷冻真空干燥法：是保存菌毒种、疫苗、补体、血清等的、冷冻真空干燥法：是保存菌毒种、疫苗、补体、血清等的良好方法，可保存微生物及生物制剂数月至数年不失活。其良好方法，可保存微生物及生物制剂数月至数年不失活。其原理是迅速冷冻，不形成冰晶，同时抽真空让固体冰中的水原理是迅速冷冻，不形成冰晶，同时抽真空让固体冰中的水分子升华除去，封闭瓶口保存。分子升华除去，封闭瓶口保存。（二）高温（二）高温：高温对微生物具有明显的高温对微生物具有明显的致死作用，是有效的灭

6、菌方法。致死作用，是有效的灭菌方法。高温灭菌原理：高温使菌体蛋白质变性高温灭菌原理：高温使菌体蛋白质变性或凝固，酶失去活性，或凝固，酶失去活性，DNA解连、断裂，解连、断裂，导致细菌死亡。导致细菌死亡。高温灭菌的方法：分干热法和湿热法两类。高温灭菌的方法：分干热法和湿热法两类。湿热法比干热法灭菌力要强，为什么？湿热法比干热法灭菌力要强，为什么？因为因为 1）湿热中菌体蛋白较易凝固；）湿热中菌体蛋白较易凝固；2）湿热的穿透力比干热强；）湿热的穿透力比干热强；3）蒸汽可以释放大量潜热，迅速）蒸汽可以释放大量潜热，迅速 提高被灭菌物体的温度。提高被灭菌物体的温度。1、干热灭菌法：、干热灭菌法：机理：

7、干热可使蛋白质变性和因电解质浓缩而机理：干热可使蛋白质变性和因电解质浓缩而引起毒性作用。包括火焰灭菌和热空气灭菌两种。引起毒性作用。包括火焰灭菌和热空气灭菌两种。1）火火焰焰灭灭菌菌法法：以以火火焰焰直直接接烧烧灼灼杀杀死死物物体体中中的的全部微生物的方法，分为灼烧和焚烧两种。全部微生物的方法，分为灼烧和焚烧两种。灼灼烧烧指指直直接接在在火火焰焰上上烧烧灼灼，主主要要用用于于耐耐烧烧物物品品，如如接接种种针针（环环）、金金属属器器具具、试试管管口口等等的的灭灭菌。菌。焚焚烧烧指指直直接接点点燃燃或或在在焚焚烧烧炉炉内内焚焚烧烧，常常用用于于需需烧烧毁毁的的物物品品，如如传传染染病病畜畜禽禽及及

8、实实验验感感染染动动物物的尸体、病畜禽垫料以其他污染的废弃物灭菌。的尸体、病畜禽垫料以其他污染的废弃物灭菌。2）热热空空气气灭灭菌菌法法：利利用用干干热热灭灭菌菌器器以以干干热热空空气气进进行灭菌的方法。行灭菌的方法。适用范围：高温下不损坏、不变质的物品，如各适用范围：高温下不损坏、不变质的物品，如各种玻璃器皿、瓷器、金属器械等的灭菌。种玻璃器皿、瓷器、金属器械等的灭菌。注意事项：注意事项：a.在干热情况下，由于热空气的穿透力较低，在干热情况下，由于热空气的穿透力较低，因此，干热灭菌需在因此，干热灭菌需在160维持维持1-2h，才能达到杀才能达到杀死所有微生物及其芽胞、孢子的目的。死所有微生物

9、及其芽胞、孢子的目的。b.灭菌时，要使温度逐渐升降，切忌太快。灭菌时，要使温度逐渐升降，切忌太快。2、湿热灭菌法：、湿热灭菌法：机理：湿热可引起蛋白质变性与凝固而失去活性。机理：湿热可引起蛋白质变性与凝固而失去活性。1）煮煮沸沸灭灭菌菌：煮煮沸沸1020min可可杀杀死死所所有有细细菌菌的的繁繁殖殖体体，若若在在水水中中加加入入1%碳碳酸酸钠钠或或25%石石炭炭酸，灭菌效果更好。酸，灭菌效果更好。适适用用范范围围：用用于于外外科科手手术术器器械械、注注射射器器、针针头头以及食具等。以及食具等。2）巴氏消毒法：以较低温度杀灭液态食品中的病原菌）巴氏消毒法：以较低温度杀灭液态食品中的病原菌或特定微

10、生物，而又不至严重损害其营养成分和风味或特定微生物，而又不至严重损害其营养成分和风味的消毒方法。的消毒方法。适用范围：目前主要用于葡萄酒、啤酒及牛乳等食品适用范围：目前主要用于葡萄酒、啤酒及牛乳等食品的消毒。的消毒。分类：分类：第一类：低温维持巴氏消毒法，在第一类：低温维持巴氏消毒法，在63-65保持保持30min。第二类：高温瞬时巴氏消毒法，在第二类：高温瞬时巴氏消毒法，在71-72保持保持15s。第三类：超高温巴氏消毒法，在第三类：超高温巴氏消毒法，在132 保持保持1-2s。加热消毒后需迅速冷却至加热消毒后需迅速冷却至10 以下，称为冷击。以下，称为冷击。3）流通蒸汽灭菌法）流通蒸汽灭菌

11、法：利用蒸汽在蒸笼或流：利用蒸汽在蒸笼或流通蒸汽灭菌器内进行灭菌的方法，也称间通蒸汽灭菌器内进行灭菌的方法，也称间歇灭菌法。灭菌后需保温过夜再灭菌，以歇灭菌法。灭菌后需保温过夜再灭菌，以达到完全灭菌的目的。达到完全灭菌的目的。适用范围：常用于一些不耐高温的培养基适用范围：常用于一些不耐高温的培养基的灭菌。的灭菌。4）高压蒸汽灭菌法：）高压蒸汽灭菌法：指用高压蒸汽灭菌器进行灭菌指用高压蒸汽灭菌器进行灭菌的方法。是应用最广泛的、最有效的灭菌方法。的方法。是应用最广泛的、最有效的灭菌方法。灭菌条件：通常用灭菌条件：通常用 1.02kg/cm2(15磅磅)的压力，在的压力，在121温度下维温度下维 持

12、持15-20min，就可杀死包括细菌芽胞在内的就可杀死包括细菌芽胞在内的所有微生物，达到完全灭菌的目的，但糖、牛奶培养所有微生物，达到完全灭菌的目的，但糖、牛奶培养基，基，10磅磅10分钟即可。分钟即可。注意事项：注意事项：a.一定要充分排除灭菌器内原有的冷空气。一定要充分排除灭菌器内原有的冷空气。b.灭菌物品不要互相挤压，以保证蒸汽通畅，使所灭菌物品不要互相挤压，以保证蒸汽通畅，使所有物品的温度均匀上升有物品的温度均匀上升。适用范围：凡耐高温、不怕潮湿的物品均可，如各种适用范围：凡耐高温、不怕潮湿的物品均可，如各种培养基、溶液、玻璃器皿、金属器皿器械、工作服等。培养基、溶液、玻璃器皿、金属器

13、皿器械、工作服等。二二、辐射：、辐射：辐射对微生物的灭活作用可分为电离辐射对微生物的灭活作用可分为电离辐射和非电离辐射两种。非电离辐射包括可见光、辐射和非电离辐射两种。非电离辐射包括可见光、日光、紫外线。日光、紫外线。（一）可见光：是指在红外线和紫外线之间的肉（一）可见光：是指在红外线和紫外线之间的肉眼可见的光线，其波长为眼可见的光线，其波长为400-800nm。可见光线对微生物一般无多大影响，但长时可见光线对微生物一般无多大影响，但长时间作用也能妨碍微生物的新陈代谢与繁殖，故培间作用也能妨碍微生物的新陈代谢与繁殖，故培养细菌和保存菌种，均应置于阴暗处。养细菌和保存菌种，均应置于阴暗处。（二）

14、阳光：直射日光有强烈的杀菌作用，（二）阳光：直射日光有强烈的杀菌作用，紫外紫外线线是日光杀菌作用的主要因素。是日光杀菌作用的主要因素。（三）紫外线：紫外线中波长（三）紫外线：紫外线中波长200-300nm部分具有部分具有杀菌作用，以杀菌作用，以265-266nm波长段的杀菌力最强。一波长段的杀菌力最强。一般实验室常用般实验室常用253.7nm，杀菌力强而稳定，照射杀菌力强而稳定，照射10-15min即可。即可。特点：穿透力很差，即使是很薄的玻璃也不能透特点：穿透力很差，即使是很薄的玻璃也不能透过。过。适用范围：常用于微生物实验室、无菌室、手术室、适用范围：常用于微生物实验室、无菌室、手术室、传

15、染病房、种蛋室等的空气消毒，或用于不能用高传染病房、种蛋室等的空气消毒，或用于不能用高温或化学药品消毒的物品表面消毒。温或化学药品消毒的物品表面消毒。杀菌原理：杀菌原理：1、紫外线照射细菌时，能使同一条、紫外线照射细菌时，能使同一条DNA链上相链上相邻的两个胸腺嘧啶通过共价结合而形成二聚体，邻的两个胸腺嘧啶通过共价结合而形成二聚体，因而改变因而改变DNA的分子结构，干扰的分子结构，干扰DNA的复制和的复制和转录，导致细菌的死亡或变异。转录，导致细菌的死亡或变异。2、紫紫外外线线还还可可使使空空气气中中的的分分子子氧氧变变为为臭臭氧氧，臭臭氧氧放放出出氧氧化化能能力力强强的的原原子子氧氧，也也具

16、具有有杀杀菌菌作作用。用。（四）电离辐射：（四）电离辐射：放射性同位素射线（放射性同位素射线（）和和X X射线等可使被照射物质发生电离，产生游射线等可使被照射物质发生电离，产生游离基，破坏离基，破坏DNADNA，有抑杀菌作用。有抑杀菌作用。杀杀菌菌作作用用 XnmXnm）、射射线线(波波长长0.000.00l-0.4nm)l-0.4nm)的的电电离离辐辐射射作作用用微微弱弱。与与射射线线的的电电离离辐辐射射作作用较强，有抑杀菌作用。用较强，有抑杀菌作用。用用途途 主主要要是是X X、和和射射线线，用用于于消消毒毒、食食品保藏和育种等方面。品保藏和育种等方面。三、干燥：微生物在干燥的环境中失去大

17、量水三、干燥：微生物在干燥的环境中失去大量水分，新陈代谢便会发生障碍，甚至引起菌体蛋分，新陈代谢便会发生障碍，甚至引起菌体蛋白质变性和由于盐类浓度的增高而逐渐导致死白质变性和由于盐类浓度的增高而逐渐导致死亡。亡。不同种类的微生物对干燥的抵抗力差异很不同种类的微生物对干燥的抵抗力差异很大，在干燥环境中有的仅能存活几天，而有的大，在干燥环境中有的仅能存活几天，而有的可存活几年到数十年以上。可存活几年到数十年以上。用途用途 微生物在干燥环境中不能生长繁殖，常用微生物在干燥环境中不能生长繁殖，常用干燥法来保存食品、饲料、谷类、皮张、药材干燥法来保存食品、饲料、谷类、皮张、药材等。等。四、超声波：四、超

18、声波：频率在频率在2 2万万-20-20万万hzhz的声波称为超声波。细菌和的声波称为超声波。细菌和酵母菌在超声波作用下于几十分钟内死亡。小型病毒、芽抱对酵母菌在超声波作用下于几十分钟内死亡。小型病毒、芽抱对超声波有抵抗力。超声波有抵抗力。用途：未应用于消毒灭菌。主要用于裂解细胞，用途：未应用于消毒灭菌。主要用于裂解细胞，提取细胞组分等。提取细胞组分等。五五、微微波波：从从几几百百兆兆赫赫至至几几十十万万兆兆赫赫频频率率的的无无线线电电波波称称为为微微波波。微微波波灭灭菌菌，主主要要是是利利用用微微波波的的加加热热作作用用完完成成（交交变变电电场场，分分子子旋旋转转振振动动、分分子子相相互互作

19、作用用产产生生摩摩擦擦力力，分分子克服摩擦力产生热量，使物品升温，起加热灭菌作用）。子克服摩擦力产生热量，使物品升温，起加热灭菌作用）。用用途途：这这种种灭灭菌菌法法，需需时时短短、加加热热均均匀匀。可可用用于于非非金属医药用品等的灭菌。金属医药用品等的灭菌。六、滤过：通过机械阻留作用将液体或空气中细六、滤过：通过机械阻留作用将液体或空气中细菌等微生物除去的方法。菌等微生物除去的方法。用途：用途：1 1、液体培养基和药物除菌、液体培养基和药物除菌 糖培养液、特殊培糖培养液、特殊培养基、血清、毒素、抗毒素、抗生素、维生素、养基、血清、毒素、抗毒素、抗生素、维生素、氨基酸等不能加热灭菌的液体常用滤

20、器过滤除菌氨基酸等不能加热灭菌的液体常用滤器过滤除菌（多用蔡氏滤器、更换滤膜滤器或一次性滤器）。（多用蔡氏滤器、更换滤膜滤器或一次性滤器）。2 2、病毒液分离除菌、病毒液分离除菌 用于病毒分离。用于病毒分离。3 3、空空气气净净化化除除菌菌 超超净净工工作作台台、无无菌菌隔隔离离器器、无无菌菌操操作作室室、实实验验动动物物室室以以及及疫疫苗苗、药药品品、食食品品等生产中洁净厂房的空气过滤除菌。等生产中洁净厂房的空气过滤除菌。滤菌器滤菌器3-2 化学因素对微生物的影响化学因素对微生物的影响 一、几个概念一、几个概念 1、消毒剂：用于杀灭病菌原微生物的化学、消毒剂：用于杀灭病菌原微生物的化学药物称

21、为消毒剂。药物称为消毒剂。2、防腐剂：用于抑制微生物生长繁殖的化、防腐剂：用于抑制微生物生长繁殖的化学药物防腐剂或抑菌剂。学药物防腐剂或抑菌剂。3、化学治疗剂：用于消除宿主体内病原微、化学治疗剂：用于消除宿主体内病原微生物或其它寄生虫的化学药物称为化学治生物或其它寄生虫的化学药物称为化学治疗剂。疗剂。二、消毒剂的种类及其应用二、消毒剂的种类及其应用 消毒剂的种类很多，一般可根据用途与消毒剂特点选择使用。消毒剂的种类很多，一般可根据用途与消毒剂特点选择使用。理想的消毒剂理想的消毒剂 杀菌力强、无腐蚀性、能长期保存、对动物杀菌力强、无腐蚀性、能长期保存、对动物毒性很小、无残留污染、价格低等。毒性很

22、小、无残留污染、价格低等。消毒剂的分类消毒剂的分类（1 1）使菌体蛋白质变性）使菌体蛋白质变性 如酚类、醇类、重金属盐类、酸碱类、如酚类、醇类、重金属盐类、酸碱类、醛类；醛类；（2 2）损伤胞浆膜）损伤胞浆膜 如酚类如酚类(低浓度低浓度)、表面活性剂、醇类等脂溶、表面活性剂、醇类等脂溶剂；剂；（3 3）干扰细菌的酶系统和代谢）干扰细菌的酶系统和代谢 如氧化剂、重金属盐类如氧化剂、重金属盐类(低度低度)；（4）改变核酸功能）改变核酸功能 如染料、烷化剂等。如染料、烷化剂等。消毒剂类别消毒剂类别名称名称浓度浓度(%)用途用途重金属盐重金属盐红汞红汞2皮肤、粘膜、小创面消毒皮肤、粘膜、小创面消毒硫柳

23、汞硫柳汞0.01生物制品防腐生物制品防腐氧化剂氧化剂高锰酸钾高锰酸钾0.1皮肤、尿道、水果、蔬菜消毒皮肤、尿道、水果、蔬菜消毒过氧化氢过氧化氢3皮肤、粘膜、创伤消毒皮肤、粘膜、创伤消毒过氧乙酸过氧乙酸0.20.5塑料、玻璃、人造纤维消毒塑料、玻璃、人造纤维消毒卤素类卤素类碘液碘液2.5皮肤消毒皮肤消毒醇类醇类乙醇乙醇7075皮肤、体温计消毒皮肤、体温计消毒酚类酚类石炭酸石炭酸35地面、器皿表面和排泄物消毒地面、器皿表面和排泄物消毒来苏尔来苏尔35同上、也常用于手及皮肤消毒同上、也常用于手及皮肤消毒表面活性剂表面活性剂新洁尔灭新洁尔灭0.1手术器械消毒手术器械消毒酸碱类酸碱类生石灰生石灰1020

24、排泄物、地面消毒排泄物、地面消毒染料染料龙胆紫龙胆紫24表浅创伤消毒表浅创伤消毒三、影响消毒剂作用的因素三、影响消毒剂作用的因素 1.1.消毒剂的性质、浓度和作用时间消毒剂的性质、浓度和作用时间 2.2.微生物的种类与数量微生物的种类与数量 3.3.温度温度 温度升高可增强消毒剂的杀菌效果。温度升高可增强消毒剂的杀菌效果。4.4.酸碱度酸碱度 消毒剂杀菌作用受消毒剂杀菌作用受pHpH影响。如新洁尔影响。如新洁尔灭灭pH 9pH 9时杀菌作用强。时杀菌作用强。5.5.有机物有机物 环境中有机物，可降低消毒剂效果。环境中有机物，可降低消毒剂效果。6.6.药药物物颉颉抗抗 两两种种消消毒毒剂剂合合用

25、用时时，有有的的能能相相互互颉颉抗。如阴离子剂肥皂与阳离子剂新洁尔灭。抗。如阴离子剂肥皂与阳离子剂新洁尔灭。7.7.其他因素其他因素 湿度、穿透力、表面张力等。湿度、穿透力、表面张力等。33 生物因素对微生物的影响生物因素对微生物的影响 自然界中，各种微生物之间，或微生物与动自然界中，各种微生物之间，或微生物与动植物之间，经常呈现相互影响的作用，如寄生、植物之间，经常呈现相互影响的作用，如寄生、共生和颉抗等现象。共生和颉抗等现象。导致颉抗的原因有抗生素和细菌素、植物杀菌素、导致颉抗的原因有抗生素和细菌素、植物杀菌素、噬菌体等。噬菌体等。一、抗生素、植物杀菌素和细菌素一、抗生素、植物杀菌素和细菌

26、素 、抗抗生生素素：某某些些微微生生物物在在代代谢谢过过程程中中产产生生的的一一类类能抑制或杀死另一类微生物的物质。能抑制或杀死另一类微生物的物质。来来源源：放放线线菌菌（如如链链霉霉素素）、霉霉菌菌（青青霉霉素素）、细细菌（多黏菌素）及化学物质合成。菌（多黏菌素）及化学物质合成。作用原理：）阻碍细菌细胞壁的合成。作用原理：）阻碍细菌细胞壁的合成。）影响细胞膜的通透性。）影响细胞膜的通透性。）影响菌体蛋白质的合成。）影响菌体蛋白质的合成。）影响核酸的合成。）影响核酸的合成。1928年A.Fleming发现青霉素澳大利亚病理学家霍华德.弗罗里与弗莱明1940提纯出青霉素。共同获得1945年诺贝尔

27、生理学和医学奖.、植物杀菌素：、植物杀菌素：某些植物中存在的具有某些植物中存在的具有杀菌作用的物质。杀菌作用的物质。如黄连、黄柏、大蒜等如黄连、黄柏、大蒜等。3、细细菌菌素素：某某种种细细菌菌产产生生的的一一种种具具有有杀杀菌作用的蛋白质。菌作用的蛋白质。特特点点：只只能能作作用用于于与与它它同同种种不不同同菌菌株株的的细细菌以及与亲缘关系相近的细菌。菌以及与亲缘关系相近的细菌。二、噬菌体二、噬菌体 噬菌体：寄生于细菌、霉形体、螺噬菌体：寄生于细菌、霉形体、螺旋体、放线菌以及蓝细菌等的一类病旋体、放线菌以及蓝细菌等的一类病毒，亦称细菌病毒。毒，亦称细菌病毒。（一）形态和结构（一）形态和结构 1

28、、形态：蝌蚪形、微球形、细杆形（纤丝形）、形态：蝌蚪形、微球形、细杆形（纤丝形）和柠檬形。和柠檬形。2、结结构构：典典型型的的蝌蝌蚪蚪形形噬噬菌菌体体由由头头部部、尾尾部部两两部部分分组成。组成。头部：呈二十面体，等轴对称或延长，由蛋白头部：呈二十面体，等轴对称或延长，由蛋白 质衣壳和线状双股质衣壳和线状双股DNA构成。构成。尾部：主要含蛋白质，呈螺旋型，由尾领、尾尾部：主要含蛋白质，呈螺旋型，由尾领、尾 髓、尾鞘、尾板、尾刺、尾丝组成。髓、尾鞘、尾板、尾刺、尾丝组成。不同的噬菌体示意图（二）抗原性及抵抗力（二）抗原性及抵抗力 1、抗原性：能刺激机体产生特异性抗体。、抗原性：能刺激机体产生特异

29、性抗体。特特性性：该该抗抗体体能能抑抑制制相相应应噬噬菌菌体体侵侵袭袭敏敏感感细细菌菌，但但对对已已吸吸附附或或已已进进入入宿宿主主菌菌的的噬噬菌菌体体不起作用。不起作用。2、抵抗力：对理化因素的抵抗力较强，较、抵抗力：对理化因素的抵抗力较强，较耐热、耐低温和冰冻，但对紫外线和射线耐热、耐低温和冰冻，但对紫外线和射线敏感；大多数能抵抗乙醚、氯仿和乙醇，在敏感；大多数能抵抗乙醚、氯仿和乙醇，在0.5%升汞或苯酚中经升汞或苯酚中经37天不丧失活性。在天不丧失活性。在饱和饱和NaCl溶液中保持活力数年。溶液中保持活力数年。（三）（三）噬菌体的增殖噬菌体的增殖 噬菌体的增殖过程分噬菌体的增殖过程分为吸

30、附、侵入、生物合成、成熟和释放四个为吸附、侵入、生物合成、成熟和释放四个阶段。与动物病毒相似。阶段。与动物病毒相似。噬噬菌菌体体在在固固体体培培养养基基上上可可使使相相应应细细菌菌裂裂解解而而呈呈现现无无细细菌菌生生长长的的区区域域，即即为为噬噬菌菌现现象象。由由于于噬噬菌菌体体裂裂解解使使相相应应菌菌苔苔上上形形成成一一个个个个透透亮不长菌的圆斑，称为噬菌斑，亦称空斑。亮不长菌的圆斑，称为噬菌斑，亦称空斑。噬噬菌菌斑斑可可用用于于细细菌菌或或噬噬菌菌体体的的鉴鉴定定和和纯纯种分离。种分离。（四）噬菌体与寄主细胞的关系：（四）噬菌体与寄主细胞的关系：可分为：溶菌反可分为：溶菌反应和溶原化两种。

31、应和溶原化两种。1 1、溶溶菌菌反反应应：侵侵入入寄寄主主细细胞胞后后，使使细细菌菌细细胞胞裂裂解解的的现象。现象。凡凡能能使使寄寄主主细细胞胞裂裂解解引引起起溶溶菌菌反反应应的的噬噬菌菌体体，称为毒性噬菌体或烈性噬菌体。称为毒性噬菌体或烈性噬菌体。2 2、溶溶原原化化：侵侵入入寄寄主主细细胞胞后后，将将其其基基因因整整合合于于细细菌菌基基因因组组中中，随随细细菌菌的的分分裂裂而而传传给给后后代代，不不形形成成病病毒毒粒子，不裂解细菌的现象叫溶原化。粒子，不裂解细菌的现象叫溶原化。引引起起溶溶原原化化的的噬噬菌菌体体叫叫温温和和噬噬菌菌体体或或溶溶原原性性噬噬菌体。带有噬菌体基因的细菌叫溶原性

32、细菌。菌体。带有噬菌体基因的细菌叫溶原性细菌。溶溶原原性性细细菌菌可可自自发发地地终终止止其其溶溶原原性性，引引起起溶溶菌菌反应而释出噬菌体。反应而释出噬菌体。（五）（五）噬菌体的应用噬菌体的应用 细菌的鉴定和分型细菌的鉴定和分型 噬菌体的噬菌作用具有种和噬菌体的噬菌作用具有种和型的特异性，即一种噬菌体只能裂解一种（型）相型的特异性，即一种噬菌体只能裂解一种（型）相应的细菌。应的细菌。检检测测未未知知细细菌菌 应应用用噬噬菌菌体体效效价价增增长长试试验验可可检检测测标标本本中中的的相相应应细细菌菌。若若其其效效价价明明显显升升高高，则则表表明明标标本中有某种细菌存在。本中有某种细菌存在。分子生物学工具分子生物学工具 噬菌体结构简单，易操作，可噬菌体结构简单，易操作，可作为研究病毒增殖的模式。基因较少，已用于研究作为研究病毒增殖的模式。基因较少，已用于研究核酸复制、转录、重组及基因表达与调控等。还可核酸复制、转录、重组及基因表达与调控等。还可作为基因载体，应用于遗传工程研究。作为基因载体，应用于遗传工程研究。用于生物防治用于生物防治 危害抗生素和发酵工业危害抗生素和发酵工业