果蝇唾腺染色体制备.ppt

《果蝇唾腺染色体制备.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《果蝇唾腺染色体制备.ppt（23页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、果蝇唾腺染色体观察果蝇唾腺染色体观察 果蝇（D.melanogaster 2n=8）中文名：黑腹果蝇 果蝇果蝇 （Drosophila melanogaster 2n=8）果蝇广泛地存在于全球温带及热带气候区，而且果蝇广泛地存在于全球温带及热带气候区，而且由于其主食为腐烂的水果，因此在人类的栖息地如由于其主食为腐烂的水果，因此在人类的栖息地如果园、菜市场等地区内皆可见其踪迹（除了南北极果园、菜市场等地区内皆可见其踪迹（除了南北极外）。目前至少有外）。目前至少有1000个以上的果蝇种被发现，大个以上的果蝇种被发现，大部分的种以腐烂的水果或植物为食，少部分则只取部分的种以腐烂的水果或植物为食，少部

2、分则只取用真菌，树汁或花粉。用真菌，树汁或花粉。果蝇的优点：1.1.生活史短，生活史短，202025 1225 121515d d完成一个世代。完成一个世代。2.2.繁殖率高，一对果蝇可产卵繁殖率高，一对果蝇可产卵400400500500只。只。3.3.饲养方便。饲养方便。4.4.染色体数目少。染色体数目少。5.5.突变率高且形态容易辨认。突变率高且形态容易辨认。果蝇属节肢动物门、昆虫纲、双翅目、果蝇科、果蝇属。果蝇属节肢动物门、昆虫纲、双翅目、果蝇科、果蝇属。一、实验目的一、实验目的1、掌握果蝇幼虫唾腺分离技术，唾腺染色、掌握果蝇幼虫唾腺分离技术，唾腺染色体制片方法。体制片方法。2、观察果蝇

3、唾腺染色体的形态及特征。、观察果蝇唾腺染色体的形态及特征。二、实验原理二、实验原理 唾腺染色体的发现：唾腺染色体的发现：1881年，意大利的细胞学家巴尔比尼（年，意大利的细胞学家巴尔比尼（Balbiani)在双在双翅目昆虫摇蚊幼虫的唾腺细胞间期核中发现了一种巨大的翅目昆虫摇蚊幼虫的唾腺细胞间期核中发现了一种巨大的染色体，由于存在于唾腺细胞中，所以又称为唾腺染色体。染色体，由于存在于唾腺细胞中，所以又称为唾腺染色体。1933年，美国学者贝恩特（年，美国学者贝恩特（Painter）等又在果蝇核其它双等又在果蝇核其它双翅目昆虫的幼虫唾腺细胞间期核中发现了巨大染色体。这翅目昆虫的幼虫唾腺细胞间期核中发

4、现了巨大染色体。这种染色体宽约种染色体宽约5m，长长400m，相当于普通染色体的相当于普通染色体的100150倍，因而又称为巨大染色体。倍，因而又称为巨大染色体。形成原因形成原因：核内有丝分裂（核内有丝分裂（endomitosis）。即）。即染色体染色体DNA多次复制，但着丝粒和染色单体未分裂分离。多次复制，但着丝粒和染色单体未分裂分离。果蝇幼虫唾腺染色体的主要特点果蝇幼虫唾腺染色体的主要特点 染色中心：由染色体的着丝粒和近着丝粒的异染染色中心：由染色体的着丝粒和近着丝粒的异染色质区聚在一起形成色质区聚在一起形成 特有的体细胞联会：由染色中心伸出特有的体细胞联会：由染色中心伸出6 6条配对的染

5、条配对的染色体臂（色体臂（X X、2L2L、2R2R、3L3L、3R3R、4 4）染色体在染色后呈现出横纹，其数目、宽窄、位染色体在染色后呈现出横纹，其数目、宽窄、位置及排序具有种的特异性置及排序具有种的特异性三、实验用品三、实验用品材料：黑腹果蝇三龄幼虫材料：黑腹果蝇三龄幼虫器材：显微镜、载玻片、盖玻片、解剖针器材：显微镜、载玻片、盖玻片、解剖针药品：药品：0.7%生理盐水生理盐水 1M盐酸盐酸 1%改良改良的苯酚品红的苯酚品红四、实验操作流程1 1、挑取三龄幼虫、挑取三龄幼虫 将生长良好、形体肥大的三龄幼虫放在加有一滴低渗液或生理盐水载玻片上。2、熟悉幼虫结构 在解剖镜下检查，分清幼虫的头

6、尾。幼虫具一钝尾和带黑色口器的尖头端。3、拖出腺体 在解剖镜下用两支解剖针，一针压住身体前1/3处，另一针压住头端，平稳快拉，唾腺随之拖出。4、剥离腺体 剥离腺体旁的消化道和脂肪体，仅让腺体留下。注意滴加生理盐水或低渗液防止干燥。5、解离 用1M盐酸水解腺体510min，用滤纸条吸干盐酸溶液，再滴加生理盐水或低渗液清洗，重复34次。洗净残留的盐酸，以免影响染色效果。6、染色 滴一滴醋酸洋红或改良的苯酚品红，染色10min。7、压片 染色后，盖上盖玻片，用滤纸吸去多余染液，再用大拇指压片。8、镜检观察、镜检观察五、实验结果与分析绘制观察到的果蝇唾腺染色体图像。总结与分析 果蝇染色体数为果蝇染色体

7、数为2n=8，其中第其中第II、第第III染色体染色体为中部着丝粒染色体，第为中部着丝粒染色体，第IV和第和第I（X染色体）染色染色体）染色体为端着丝粒染色体。唾腺染色体形成时，着丝粒体为端着丝粒染色体。唾腺染色体形成时，着丝粒和近着丝粒的异染色质区聚集形成一和近着丝粒的异染色质区聚集形成一染色中心染色中心，所，所以在显微镜下可见从染色体中心处伸出以在显微镜下可见从染色体中心处伸出6条配对的条配对的染色体臂，其中染色体臂，其中5条为长臂，条为长臂，1条为紧靠染色中心的条为紧靠染色中心的很短的臂。很短的臂。二、实验原理二、实验原理 果蝇唾腺染色体是处于体细胞同源染果蝇唾腺染色体是处于体细胞同源染色体的配对状态，由于多次复制而不分开，色体的配对状态，由于多次复制而不分开，因而形成具有因而形成具有10004000根染色体丝的巨根染色体丝的巨大染色体，又称为多线染色体。大染色体，又称为多线染色体。六、注意事项：六、注意事项：（1）要要求求培培养养的的三三龄龄幼幼虫虫要要肥肥大大：需需在在培培养养基基中加入较多的糖和酵母粉中加入较多的糖和酵母粉;（2）正正确确识识别别果果蝇蝇唾唾腺腺：根根据据唾唾腺腺存存在在的的部部位位（身身体体前前1/3处处）、形形态态（囊囊状状）、色色差差（半半透透明明）等特点进行识别；等特点进行识别；（3）压片时，切勿搓动盖玻片。）压片时，切勿搓动盖玻片。