工具酶的发现和基因工程的诞生课件.pptx

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1、阿凡达阿凡达“场景再现场景再现”神奇的自发光植神奇的自发光植物物 第一章 基因工程第一节 工具酶的发现和 基因工程的诞生 一、基因工程概述一、基因工程概述 指把一种生物的遗传物质移到另一种生物的细胞中去，并使这种遗传物质所带的遗传信息在受体细胞受体细胞中表达。核心是构建重构建重组组DNA分子。分子。（又称为又称为重组重组DNA技术技术）发光烟草的培育发光烟草的培育？细菌等微生物细菌等微生物 1.来源：2.作用：（一）、（一）、基因的剪刀基因的剪刀识别识别和和切割切割_分子内一小段分子内一小段_。特殊核苷酸序列特殊核苷酸序列任务一：阅读资料，结合书本P2-P3完成下列问题DNA3.作用部位：作用

2、部位：限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶作用部位作用部位：磷酸二酯键磷酸二酯键举例：举例：EcoRI识别识别GAATTC序列，并在序列，并在G和和A之间切开之间切开A AGTTCCTTA A GCTTA AGGAATTC识别识别GAATTC序列，并在序列，并在G和和A之间切开之间切开限制酶在切断限制酶在切断DNA时，可在切口处带有几个伸出的核苷酸，时，可在切口处带有几个伸出的核苷酸，他们之间碱基正好互补配对，因此称这些片断他们之间碱基正好互补配对，因此称这些片断为为粘性末端粘性末端。EcoRI思考：2.不同的限制性核酸内切酶识别的序列和不同的限制性核酸内切酶识别的

3、序列和切割的位点有什么特点？切割的位点有什么特点？1.获得目的基因需切几个切口，产生几获得目的基因需切几个切口，产生几个粘性末端？个粘性末端？红色剪刀红色剪刀模拟模拟限制酶限制酶EcoR，它，它识别序列和切点是识别序列和切点是GAATTC，蓝色蓝色剪刀剪刀模拟模拟限制酶限制酶BamH，它，它识别序列和切点是识别序列和切点是GGATCC，绿色绿色剪刀剪刀模拟模拟限制酶限制酶Hind，它，它识别序列和切点是识别序列和切点是AAGCTT3个含发光基因的个含发光基因的DNA序列序列活动一：模拟目的基因的获取活动一：模拟目的基因的获取材料说明：材料说明：活动内容活动内容：以以小组为单位，模拟用限制性核酸

4、内切酶识别、切割小组为单位，模拟用限制性核酸内切酶识别、切割DNA序列获得序列获得目的基因的过程，并完成学案上的思考题。目的基因的过程，并完成学案上的思考题。任务二：完成活动一，思考学案上的问题思考：1.不同的限制性核酸内切酶识别的序列和不同的限制性核酸内切酶识别的序列和切割的位点有什么特点？切割的位点有什么特点？2.获得目的基因需切几个切口，产生几获得目的基因需切几个切口，产生几个粘性末端？个粘性末端？专一性专一性2个切口，个切口，4个粘性末端个粘性末端（二）、基因的运载工具（二）、基因的运载工具作为运载工具，将外源作为运载工具，将外源基因送入受体细胞。基因送入受体细胞。作用：作用：质粒（质

5、粒（最常用）最常用）、噬菌、噬菌体和某些动植物病毒体和某些动植物病毒种类：种类：质粒质粒实质：是能够自主复制的实质：是能够自主复制的_，是一，是一种特殊的遗传物质种特殊的遗传物质。双链环状双链环状DNA分子分子任务三:看书本P3-P4,思考下列问题，并完成导学案基因载体基因载体 思考：作为载体需具备什么条件？作为载体需具备什么条件？（三）基因的针线（三）基因的针线形成形成磷酸二酯键磷酸二酯键 连接部位：连接部位：具有具有相同粘性末端相同粘性末端的两个的两个DNA片段连接起来，片段连接起来，形成形成重组重组DNA分子分子。结果：结果：CGGCCGTTAAAATTGCTATADNA连接酶连接酶活动

6、二：模拟目的基因与质粒结合形成重组DNA材料材料：活动：活动：模拟发光基因与质粒结合形成重组模拟发光基因与质粒结合形成重组DNA任务四：完成活动二，思考学案上的问题之前之前获得的发光基因，胶带（模拟获得的发光基因，胶带（模拟DNA连连接酶），接酶），3种环状种环状DNA（质粒），笔袋（质粒），笔袋（模拟受体细胞）（模拟受体细胞）思考：思考：1.用同种限制性核酸内切酶去切割目的用同种限制性核酸内切酶去切割目的基因与质粒，露出的末端有什么特点？基因与质粒，露出的末端有什么特点？2.要想获得相同的粘性末端，一定要用要想获得相同的粘性末端，一定要用相同的酶吗？相同的酶吗？限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶的识别序列和切点是的识别序列和切点是 GGATCC，限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶的识别序列和切点是的识别序列和切点是GATC。请写出以下两种酶切割出的粘性末端请写出以下两种酶切割出的粘性末端相同相同基因工程的诞生基因工程的诞生l1972年，斯坦福大学，年，斯坦福大学，完成首次完成首次DNA的的人工重组人工重组l1973年，斯坦福大学，年，斯坦福大学，首次完成细菌首次完成细菌之间性状转移之间性状转移标志标志基因工程诞生基因工程诞生