(全国卷 地区专用)高考生物总复习 第十二单元 生物技术实践 第2讲 微生物的培养与应用课件-人教版高三全册生物课件.ppt
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1、第十二单元 生物技术实践第第2 2讲微生物的培养与应用讲微生物的培养与应用考点一考点一 考点二考点二考点三考点三1 1培养基培养基(1)概念:人们按照微生物对_的不同需求,配制出供其_的营养基质。(2)营养组成:一般都含有_和无机盐。此外,还需要满足微生物生长对_、氧气以及_的要求。(3)分类3大肠杆菌的纯化培养 (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(2)纯化大肠杆菌的方法纯化培养原理:想方设法在培养基上得到_的肉眼可见的_,即可获得较纯的菌种。纯化大肠杆菌的关键步骤:_。【考点知识突破答案检索】【考点知识突破答案检索】1(1)营养物质生长繁殖(2)水、碳源、氮源pH特殊营养物质(3)固体液体2(
2、1)外来杂菌(2)化学药剂消毒干热灭菌高压蒸汽灭菌外来杂菌3(1)称量灭菌倒平板考点一考点一 考点二考点二考点三考点三常用的微生物接种方法有两种常用的微生物接种方法有两种a平板划线法:是通过_在琼脂固体培养基表面_的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。b_:是将菌液进行一系列的_,然后将_的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。(3)菌种的保存方法 对于频繁使用的菌种,可以采用_的方法。对于需要长期保存的菌种,可以采用_的方法。【教材深挖】1平板冷凝后,为什么要将平板倒置?2涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求,说一说第2步应如何进行无菌
3、操作?【考点知识突破答案检索】【考点知识突破答案检索】(2)由一个细胞繁殖而来菌落接种接种环连续划线稀释涂布平板梯度稀释不同稀释度(3)临时保藏甘油管藏教材深挖启动高考长句应答模式1平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,平板倒置,既可以防止皿盖上的水珠落入培养基,又可以避免培养基中的水分过快地挥发。2应从操作的各个细节保证“无菌”。例如,酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等。答案(1)碳源和能源(2)BD(3)灭菌(4)D【解析】(1)葡萄糖为主要的能源物质,是一种含碳的有机物,因此该培养基的葡萄糖为微生物的生长繁殖主要提供碳源和能源。(2)该培养基以尿素为
4、唯一氮源,只有尿素分解菌才能在该培养基上生长繁殖,因此属于选择培养基;该培养基配方中加入了凝固剂琼脂,又属于固体培养基,即B、D正确。(3)在培养基上划线操作中,操作的第一步及每次划线之前都要灼烧接种环,其目的是对接种环进行灭菌,以防杂菌污染。(4)制备培养基的操作步骤是:b计算d称量c溶化e灭菌a倒平板,A、B、C错误,D正确。考点一考点一 考点二考点二考点三考点三1.下表是一种细菌培养基配方,请回答下列问题。成分KH2PO4Na2HPO4MgSO47H2O葡萄糖尿素琼脂含量1.4 g2.1 g0.2 g10.0 g1.0 g15.0 g(1)该培养基的葡萄糖为微生物的生长繁殖主要提供_。(
5、2)该培养基属于_培养基(多选)。A液体B固体C鉴定D选择E天然(3)如果要对培养基的菌落进行纯化,在培养基上划线操作中,操作的第一步及每次划线之前都要灼烧接种环,目的是对接种环进行_。(4)制备培养基的操作步骤是_。(用下列字母排序)a倒平板b计算c溶化d称量e灭菌Aabcde BebdcaCbdcae Dbdcea2.(2017江苏大丰新丰中学月考,18)下图中甲是稀释涂布平板法中的部分操作,乙是平板划线法的操作结果。下列叙述中错误的是()A甲中涂布前要将涂布器灼烧,冷却后才能取菌液B对于浓度较高的菌液,如甲中的稀释倍数仅为102,则所得的菌落不一定是由单一的细胞或孢子繁殖而成C乙培养皿中
6、所得的菌落都符合要求D乙中的连续划线的起点是上一次划线的末端C【解析】灼烧后的涂布器如果没有冷却就接触菌液,会将菌体杀死,A正确;稀释倍数过低会导致多个菌体聚集在一起繁殖成菌落,B正确;平板划线法中最后一次划线的末端处形成的菌落才是由单一的细胞或孢子繁殖而成,这种菌落才符合要求,C错误;连续划线中,除了第一次划线外,每一次划线的起点是上一次划线的末端,目的是使得菌体密度越来越小,保证最后划线末端处的菌落是由单一的细胞或孢子繁殖而成。考点一考点一 考点二考点二考点三考点三3请回答与大肠杆菌纯化培养有关的问题。(1)制备培养基配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行_,培养基在接种前要进行_灭菌
7、。(2)纯化大肠杆菌通过接种在琼脂固体培养基的表面进行连续划线操作,将聚集的菌种逐步分散到培养基的表面,在数次划线后培养,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这种方法称为_。用该方法统计样本菌落数时_(填“是”或“否”)需要设置对照组。为什么?_。(3)讨论分析纯化大肠杆菌时,_(填“可”或“不可”)用加入抗生素的方法防止杂菌感染。用该方法分离大肠杆菌时,从第二次划线操作起,每次总是要从上一次划线的末端开始划线,并划线数次,其原因是_。大肠杆菌与酵母菌的最本质区别是_。答案:(1)调pH高压蒸汽(2)平板划线法是需要判断培养基是否被污染(3)不可线条末端的细菌数量少,最终可得到
8、由单个细菌繁殖而形成的菌落大肠杆菌无成形的细胞核考点一考点一 考点二考点二考点三考点三1 1消毒和灭菌的比较消毒和灭菌的比较归纳总结归纳总结考点一考点一 考点二考点二考点三考点三项目条件结果常用方法应用范围消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部的部分对人体有害的微生物 煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高温的液体化学药剂消毒法用酒精擦拭双手,用氯气消毒水源灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子 灼烧灭菌法接种工具干热灭菌法玻璃器皿、金属工具高压蒸汽灭菌法培养基及容器的灭菌2 2两种纯化细菌的方法的比较两种纯化细菌的方法的比较归纳总结归纳总结考点一考点一 考点二考点二
9、考点三考点三项目优点缺点适用范围项目平板划线法可以观察菌落特征,对混合菌进行分离不能计数适用于好氧菌平板划线法稀释涂布平板法可以计数,可以观察菌落特征吸收量较少,较麻烦,平板不干燥效果不好,容易蔓延适用于厌氧菌和兼性厌氧菌稀释涂布平板法1土壤中分解尿素的细菌的分离与计数土壤中分解尿素的细菌的分离与计数考点一考点一 考点二考点二考点三考点三项目详细内容实验原理(1)能合成_的细菌才能分解尿素(2)配制以_为唯一氮源的培养基,能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌数量统计(1)_法(显微镜下用特定细菌计数板或血细胞计数板)(2)间接计数法:_实验流程土壤取样配制土壤溶液和制备培养基_涂布平板与培养菌落
10、_2.分解纤维素的微生物的分离(1)纤维素酶组成:纤维素酶是一种_,一般认为它至少包括三种组分,即_。作用(2)纤维素分解菌的筛选【考点知识突破答案检索】【考点知识突破答案检索】1脲酶尿素直接计数稀释涂布平板法系列稀释计数2(1)复合酶C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶纤维二糖葡萄糖(2)红色复合物透明圈刚果红透明圈纤维素纤维素选择培养基梯度稀释鉴别纤维素分解菌透明圈教材深挖启动高考长句应答模式1配制的选择培养基中,石油作为唯一的碳源,然后用这种培养基培养多种微生物,凡是能在该种培养基上生存的就是能分解石油的微生物。2由于在所划的线中,一般只有最后一次划线的末端才会形成只由一个细菌形成的菌落,而其他一
11、些菌落往往由两个细菌或多个细菌繁殖而成,而在计数时一个菌落对应着一个细菌,这样在划线所得的平板中,菌落数目低于活菌的实际数值,所以不能用平板划线法测定活菌数量。考点一考点一 考点二考点二考点三考点三筛选方法:_染色法,即通过是否产生_来筛选纤维素分解菌。培养基:以_为唯一碳源的选择培养基。实验流程【教材深挖】1一些微生物可以有效地分解石油,如何配制选择培养基将这类微生物选择出来?2为什么测定活菌的数量不能用平板划线法?【解析】酵母菌是真菌,通常可以用含青霉素的培养基进行选择培养,因为青霉素抑制细菌生长,但不能抑制真菌生长。硝化细菌为自养型生物,能够利用氨转变为亚硝酸和硝酸所释放的能量,把无机物
12、转变为有机物以维持自身生命活动,利用含氨的无机培养基可进行选择培养。B 1.(2017云南姚安一中月考,18)选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。为选择酵母菌和硝化细菌,应选用的培养基分别为()A伊红美蓝培养基、含青霉素培养基B含青霉素培养基、含氨的无机培养基C含氨的无机培养基、含青霉素培养基D含青霉素培养基、伊红美蓝培养基考点一考点一 考点二考点二考点三考点三【解析】(1)对培养基进行灭菌的方法是高压蒸汽灭菌;对配制好的培养基不接种培养,观察有无菌落出现可判断灭菌效果。(2)菌液要
13、进行一系列的梯度稀释,得到不同稀释度菌液,然后采用稀释涂布平板法分别接种到相应的培养基上,通过观察和比较不同组别的菌落数得出实验结论。无菌技术除了用来防止培养基被杂菌污染以外,还可以防止致病菌感染操作者本身。(3)因为金黄色葡萄球菌耐高浓度食盐,所以在基本培养基中加入高浓度NaCl溶液可筛选出金黄色葡萄球菌,从功能上讲,该培养基属于选择培养基。考点一考点一 考点二考点二考点三考点三2金黄色葡萄球菌是一种耐高浓度食盐的致病菌,为探究某天然植物抗菌液对金黄色葡萄球菌的抑菌作用,某实验小组按照以下实验步骤进行了相关实验。回答下列问题。(1)为防止杂菌污染,常用_法对固体培养基进行灭菌处理,为检测灭菌
14、效果,可对培养基进行_。(2)将配制好的多组培养基均分为甲、乙两组,甲组加入适量的天然植物抗菌液,乙组加入等量的蒸馏水。将金黄色葡萄球菌菌液进行一系列的_后,采用_法分别接种到甲、乙两组对应的培养基上,在适宜条件下培养一段时间后,观察比较不同组别的菌落数。由于金黄色葡萄球菌具有致病性,因此严格进行无菌操作,一方面是防止培养基被外界环境中的杂菌污染,另一方面也是为了防止_。(3)在基本培养基中加入_可筛选出金黄色葡萄球菌,从功能上讲,该培养基属于_培养基。答案:(1)高压蒸汽灭菌不接种培养(或空白培养)(2)梯度稀释稀释涂布平板操作者本身被致病菌感染 (3)高浓度NaCl溶液选择【解析】只有能合
15、成脲酶的微生物才能分解尿素,A正确;筛选分解尿素的细菌的实验中,采用的是以尿素为唯一氮源的培养基,B错误;统计样品中的活菌数目一般用稀释涂布平板法,C错误;在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,培养某种细菌后,如果pH升高,指示剂变红,这样就能初步鉴定该种细菌能够分解尿素,D错误。A3.下面关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的叙述中,正确的是()A只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素B筛选分解尿素的细菌时应以尿素作为培养基中的唯一营养物质C统计样品中的活菌数目时一般用平板划线法D在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,若指示剂变蓝,则 表明筛选到了分解尿素的细菌考点一考点一 考点二考
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