实验专题生物组织可溶性还原糖脂肪和蛋白质的鉴定.ppt

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1、实验专题实验专题实验一、实验一、生物组织可溶性还原糖、脂肪和蛋白质的鉴定生物组织可溶性还原糖、脂肪和蛋白质的鉴定1、实验原理：、实验原理：可溶性糖中的还原糖可溶性糖中的还原糖+斐林试剂斐林试剂砖红色砖红色Cu2O沉淀沉淀苏丹苏丹对脂肪染色对脂肪染色显微镜下看到染色细胞呈橘黄色显微镜下看到染色细胞呈橘黄色蛋白质中多肽键蛋白质中多肽键+双缩脲试剂双缩脲试剂紫色络合物紫色络合物2、实验材料与实验试剂、实验材料与实验试剂（1）可溶性还原糖的鉴定）可溶性还原糖的鉴定材料：材料：含糖量高的生物组织（要求色浅，颜色反应明显）含糖量高的生物组织（要求色浅，颜色反应明显）试剂试剂斐林试剂：斐林试剂：A液：液：0

2、.1g/ml NaOH；B液：液：0.05g/mlCuSO4班氏试剂：班氏试剂：A液：液：CuSO4 B液：柠檬酸钠和碳酸溶液液：柠檬酸钠和碳酸溶液某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物产某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应生特定的颜色反应。（2）脂肪的鉴定）脂肪的鉴定材料：材料：富含脂肪的花生种子（提前浸泡富含脂肪的花生种子（提前浸泡3-4d）试剂：试剂：苏丹苏丹干粉干粉0.1g，95酒精酒精100ml（3）蛋白质的鉴定）蛋白质的鉴定材料：材料：富含蛋白质的大豆或蛋清，（蛋清要稀释）富含蛋白质的大豆或蛋清，（蛋清要稀释）试剂：试剂：双缩脲试剂双缩脲试剂（A液：液：

3、0.1g/ml NaOH；B液：液：0.1g/mlCuSO4）双缩脲反应：双缩脲反应：HNOC-NH-CONH+Cu+紫色或紫红色络合物紫色或紫红色络合物（碱性环境）（碱性环境）3、实验方法及步骤、实验方法及步骤（1）可溶性还原糖的鉴定）可溶性还原糖的鉴定制备组织样液制备组织样液鉴定样液鉴定样液（取（取2ml样液于试管样液于试管取取2ml斐林试剂放入试管中斐林试剂放入试管中水浴煮沸水浴煮沸2min观察观察（淡兰色（淡兰色棕色棕色砖色）砖色）（2）脂肪的鉴定）脂肪的鉴定制作切片制作切片（D染液染液吸水纸吸去染液吸水纸吸去染液酒精洗去浮色酒精洗去浮色吸去多余酒精吸去多余酒精 滴加滴加1-2滴蒸馏水

4、滴蒸馏水盖片）盖片）（3）蛋白质的鉴定）蛋白质的鉴定镜检（橘黄色小颗粒）镜检（橘黄色小颗粒）制备样液制备样液2ml双缩脲试剂双缩脲试剂A液液（红紫色）（红紫色）另取另取2ml样液加样液加2mlI水，颜色无变化水，颜色无变化染色染色鉴定鉴定（2ml样液样液滴滴B液液3-4D摇匀观察）摇匀观察）（对照）（对照）4、注意事项、注意事项（1）注意选材）注意选材（2）注意观察颜色变化并作好记录）注意观察颜色变化并作好记录（3）斐林试剂要现配现用，加热要均匀）斐林试剂要现配现用，加热要均匀（4）切片要薄（显微化学鉴定）切片要薄（显微化学鉴定）（5）蛋白质鉴定时，若用蛋清，则要稀释；样液要留出一份作）蛋白质

5、鉴定时，若用蛋清，则要稀释；样液要留出一份作对照。对照。实验二、高倍镜的使用和观察叶绿体实验二、高倍镜的使用和观察叶绿体1、实验原理、实验原理叶绿体呈扁平的椭球形或球形，绿色；随细胞质不断流动；叶绿体呈扁平的椭球形或球形，绿色；随细胞质不断流动；可以用高倍显微镜观察它的形态和分布。可以用高倍显微镜观察它的形态和分布。2、实验材料（要求取材方便，制片简单，观察效果好）、实验材料（要求取材方便，制片简单，观察效果好）菠菜的叶肉，水松叶或藓类叶等（撕下表皮、稍带叶肉）菠菜的叶肉，水松叶或藓类叶等（撕下表皮、稍带叶肉）3、实验方法与步骤、实验方法与步骤（1）制片：）制片：撕取表皮稍带叶肉制成临时装片撕

6、取表皮稍带叶肉制成临时装片（2）观察：）观察：先低倍镜，后高倍镜先低倍镜，后高倍镜实验三、观察细胞质的流动实验三、观察细胞质的流动1、实验原理：、实验原理：活细胞的细胞质处于不断流动的状态活细胞的细胞质处于不断流动的状态2、实验材料：、实验材料：黑藻幼嫩叶片黑藻幼嫩叶片（叶片扁平、薄；有叶绿体，易观察）（叶片扁平、薄；有叶绿体，易观察）细胞质流动的意义：细胞质流动的意义：有利于细胞内物质的运输细胞器的移动，能够为细胞有利于细胞内物质的运输细胞器的移动，能够为细胞内的新陈代谢提供所需物质及合适的环境内的新陈代谢提供所需物质及合适的环境 同时细胞质流动受细胞的代谢状况和外界环境因素的影响；同时细胞

7、质流动受细胞的代谢状况和外界环境因素的影响；如适宜的光照、温度、如适宜的光照、温度、pH值、生长素等，都可以促进细胞质的值、生长素等，都可以促进细胞质的流动，反之不利的环境变化和某些化学药品如麻醉剂等则可以流动，反之不利的环境变化和某些化学药品如麻醉剂等则可以抑制细胞质的流动。抑制细胞质的流动。3、实验方法与步骤、实验方法与步骤制片制片 观察观察（参照物、流速、流向）（参照物、流速、流向）（叶脉部位细胞水分供应充足）（叶脉部位细胞水分供应充足）实验四、观察植物细胞的有丝分裂实验四、观察植物细胞的有丝分裂1、实验原理、实验原理有丝分裂是一个连续动态的变化过程，但可以通过它的有丝分裂是一个连续动态

8、的变化过程，但可以通过它的形态变化，特别是细胞核中的染色体行为，人为地划分形态变化，特别是细胞核中的染色体行为，人为地划分阶段并进行比较研究。阶段并进行比较研究。植物的分生组织细胞，能够通植物的分生组织细胞，能够通过有丝分裂增殖过有丝分裂增殖2、实验步骤及方法、实验步骤及方法（1）试剂配制）试剂配制0.01g/ml的龙胆紫（的龙胆紫（1g龙胆紫，龙胆紫，100ml蒸馏水）蒸馏水）0.01g/ml醋酸洋红（醋酸洋红（1g洋红，洋红，100ml冰醋酸煮沸冰醋酸煮沸30S，冷，冷却后过滤）却后过滤）（2）洋葱根尖的培养）洋葱根尖的培养实验前实验前3-4天，取洋葱一个，放入一盛满水的广口瓶天，取洋葱一

9、个，放入一盛满水的广口瓶上使洋葱底部接触到水平面，注意常换水，待洋葱上使洋葱底部接触到水平面，注意常换水，待洋葱长到长到1-5cm时，取材进行实验。时，取材进行实验。（3）装片制作）装片制作解离解离 漂洗漂洗 染色染色制片制片观察观察（4）注意事项）注意事项根尖培养要常换水且温度要适宜，根尖培养要常换水且温度要适宜，取材时间要注意，取材时间要注意，解离时间要适宜，解离时间要适宜，漂洗充分，漂洗充分，染色时间要把握好，染色时间要把握好，制片时根尖要弄碎并要压片制片时根尖要弄碎并要压片实验五、比较过氧化氢酶和实验五、比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率的催化效率1、实验原理：、实验原理：氯化铁溶液中

10、的氯化铁溶液中的Fe3是一种无机催化剂，其中的是一种无机催化剂，其中的Fe3+可以催化过氧化氢分解成水和氧；新鲜肝可以催化过氧化氢分解成水和氧；新鲜肝脏中含有过氧化氢酶，和脏中含有过氧化氢酶，和Fe3+一样，也能催化一样，也能催化过氧化氢分解成水和氧，但二者效率不一样。过氧化氢分解成水和氧，但二者效率不一样。2、实验材料：、实验材料：新鲜肝脏的研磨液新鲜肝脏的研磨液3、试剂与仪器、试剂与仪器（3三的过氧化氢溶液和三的过氧化氢溶液和3.5的氯化铁溶液等）的氯化铁溶液等）4、实验方法与步骤、实验方法与步骤（1）取两支洁净的试管，编号，并且各注入）取两支洁净的试管，编号，并且各注入2ml过氧化氢溶液

11、过氧化氢溶液（2）向）向1号试管内滴入号试管内滴入2滴肝脏研磨液；向滴肝脏研磨液；向2号对试管内滴入号对试管内滴入2滴滴氯化铁溶液氯化铁溶液（3）堵住试管口，轻轻地振荡两支试管，使试管内的物质混合）堵住试管口，轻轻地振荡两支试管，使试管内的物质混合均匀。仔细观察并记录哪支试管产生的气泡多均匀。仔细观察并记录哪支试管产生的气泡多（4）将点燃但无火焰的卫生香分别放入）将点燃但无火焰的卫生香分别放入1、2试管内液面的上试管内液面的上方，观察并记录哪支卫生香燃烧猛烈。方，观察并记录哪支卫生香燃烧猛烈。（5）注意事项）注意事项肝脏要新鲜，并要研磨；肝脏要新鲜，并要研磨；滴加氯化铁溶液和肝脏研磨液不能合用

12、一支滴管；滴加氯化铁溶液和肝脏研磨液不能合用一支滴管；要特别注意比较；要特别注意比较；过氧化氢有腐蚀性；过氧化氢有腐蚀性；实验时实验时将点燃的卫生香插入试管处，不要插入太深。将点燃的卫生香插入试管处，不要插入太深。（6）实验结果与讨论）实验结果与讨论两支试管均有气泡产生，但两支试管均有气泡产生，但1号试管产生得快而且多，两支卫生号试管产生得快而且多，两支卫生香均燃烧，但香均燃烧，但1号试管口的更猛烈。号试管口的更猛烈。通过以上的一组对比实验可以证明酶的高效性。通过以上的一组对比实验可以证明酶的高效性。（7）实验思路拓宽）实验思路拓宽a、实验目的：、实验目的：通过增加酶的稀释度来说明酶作用的高效

13、性。通过增加酶的稀释度来说明酶作用的高效性。b、实验原理：、实验原理：酶是生物催化剂，催化新陈代谢的许多化学顺利酶是生物催化剂，催化新陈代谢的许多化学顺利进行，具有高效性进行，具有高效性c、实验材料用具：、实验材料用具：稀释唾液，稀释唾液，1淀粉糊，革兰氏碘液等淀粉糊，革兰氏碘液等d、实验步骤、实验步骤准备四支试管，分别编号后，在准备四支试管，分别编号后，在4支试管内各装入支试管内各装入9ml蒸馏蒸馏水。在水。在1号号试管内加入试管内加入1ml未经稀释的唾液，充分摇匀。未经稀释的唾液，充分摇匀。用一移液管吸取用一移液管吸取1号试管中的唾液号试管中的唾液稀释液稀释液1ml到到2试管中，试管中，充

14、分摇匀。充分摇匀。另取一移液管吸取另取一移液管吸取2号试管内的唾液稀释液号试管内的唾液稀释液1ml到到3号试管中，号试管中，充分摇匀。充分摇匀。用同样的方法，从用同样的方法，从3号试管中吸取唾液稀释液号试管中吸取唾液稀释液1ml到到4号号试管。试管。于是于是1号、号、2号、号、3号、号、4号试管内的唾液，分另稀释了号试管内的唾液，分另稀释了10倍、倍、100倍、倍、1000倍和倍和1000倍。倍。随后，在上述试管内各加入随后，在上述试管内各加入1淀粉糊淀粉糊1ml，把，把4支试管放在支试管放在37C水浴中保温水浴中保温30min。在这期间，每隔。在这期间，每隔5min从各试管中取从各试管中取出

15、少量水样，用革兰氏碘液测试并观察水样的颜色变化，出少量水样，用革兰氏碘液测试并观察水样的颜色变化，e、分析讨论、分析讨论通过定时从通过定时从4支试管中取出少量水样测试结果表明，支试管中取出少量水样测试结果表明，4支试管由于支试管由于唾液稀释度不等，各管中淀粉被充分水解所需时间也不同。由于唾液稀释度不等，各管中淀粉被充分水解所需时间也不同。由于唾液淀粉酶在唾液中本身已被稀释，所以唾液淀粉酶在唾液中本身已被稀释，所以4号试管内的唾液淀粉号试管内的唾液淀粉酶实际上稀了远不止酶实际上稀了远不止10000倍，这样高的稀释度仍能在较短时间倍，这样高的稀释度仍能在较短时间内将淀粉完全水解，虽然无机催化剂也能

16、将淀粉完全水解，这决内将淀粉完全水解，虽然无机催化剂也能将淀粉完全水解，这决定于反应的平衡点。故证明了酶作用的高效性。定于反应的平衡点。故证明了酶作用的高效性。实验六实验六.探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的水解作用探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的水解作用1、实验原理：、实验原理：淀粉和蔗糖都没有还原性，也就是都不能使斐林试剂还淀粉和蔗糖都没有还原性，也就是都不能使斐林试剂还原，所以都不能与斐林试剂发生反应。唾液淀粉酶将淀原，所以都不能与斐林试剂发生反应。唾液淀粉酶将淀粉水解成的麦芽糖则具有还原性，能够使斐林试剂还原，粉水解成的麦芽糖则具有还原性，能够使斐林试剂还原，生成砖红色沉淀。蔗糖水解产生的葡萄糖和果糖都

17、具有生成砖红色沉淀。蔗糖水解产生的葡萄糖和果糖都具有还原性，但唾液淀粉酶不能将蔗糖水解。还原性，但唾液淀粉酶不能将蔗糖水解。2、实验材料：、实验材料：质量分数为质量分数为3的可溶性淀粉溶液和蔗糖溶液；质量分的可溶性淀粉溶液和蔗糖溶液；质量分数为数为2的新鲜淀粉酶溶液。的新鲜淀粉酶溶液。3、试剂与仪器：、试剂与仪器：斐林试剂等斐林试剂等4、实验方法与步骤、实验方法与步骤（1）取两支洁净的试管，编上号，然后向）取两支洁净的试管，编上号，然后向1号注入号注入2ml可溶可溶性淀粉溶液和性淀粉溶液和2ml新鲜淀粉酶溶液。向新鲜淀粉酶溶液。向2号注入号注入2ml蔗糖溶液蔗糖溶液和和2ml新鲜淀粉酶溶液。新

18、鲜淀粉酶溶液。（2）轻轻振荡这两支试管，使试管内的液体混合均匀，然）轻轻振荡这两支试管，使试管内的液体混合均匀，然后将试管的下半部浸到后将试管的下半部浸到370C左右的热水中，保温左右的热水中，保温5min。（3）取出试管，各加入）取出试管，各加入2ml斐林试剂。斐林试剂。（4）将两支试管的下半部放进盛有热水的大烧杯中，）将两支试管的下半部放进盛有热水的大烧杯中，用洒精灯加热，煮沸并保持用洒精灯加热，煮沸并保持1min（5）观察并记录两支试管内的变化。）观察并记录两支试管内的变化。5、实验结果与分析、实验结果与分析1号有砖红色沉淀，号有砖红色沉淀，2号没有颜色变化。号没有颜色变化。即淀粉被淀粉

19、酶水解，而蔗糖没有被水解即淀粉被淀粉酶水解，而蔗糖没有被水解由实验现象知：由实验现象知：淀粉酶只能催化淀粉水解，不能催化蔗糖水解；淀粉酶只能催化淀粉水解，不能催化蔗糖水解；也就是：酶作用有专一性。也就是：酶作用有专一性。6、注意事项、注意事项做好本实验的关键是蔗糖的纯度和新鲜程度；做好本实验的关键是蔗糖的纯度和新鲜程度；实验中要将试管的下半部浸入到实验中要将试管的下半部浸入到370的温水中；的温水中；实验用蔗糖溶液要现配现用；实验用蔗糖溶液要现配现用；制备的可溶性淀粉溶液，一定要完全冷却；制备的可溶性淀粉溶液，一定要完全冷却；7、实验思路拓展、实验思路拓展 酶的专一性的验证酶的专一性的验证（实

20、验步骤）（实验步骤）准备两支试管，分别编号后，在两支试管中各装入准备两支试管，分别编号后，在两支试管中各装入1淀粉湖淀粉湖2ml。在。在1号试管加入稀释唾液号试管加入稀释唾液2ml，2号试管加入胃蛋白酶液号试管加入胃蛋白酶液2ml，把两支试管放在，把两支试管放在370C水浴中保温处理水浴中保温处理10min。用革兰氏碘。用革兰氏碘液测试并观察水样的颜色变化。液测试并观察水样的颜色变化。实验现象：实验现象：1号试管水样用革兰氏碘液测试，不出现蓝色；号试管水样用革兰氏碘液测试，不出现蓝色；（说明什么？）（说明什么？）2号试管中的水样用革兰氏碘液测试则呈蓝色；号试管中的水样用革兰氏碘液测试则呈蓝色；

21、（说明什么？）（说明什么？）结果：酶作用的专一性。结果：酶作用的专一性。（实验七）探索影响酶活性的因素（实验七）探索影响酶活性的因素1、实验原理、实验原理淀粉具有遇碘变蓝的特性，淀粉酶在适宜的条件下可使淀粉具有遇碘变蓝的特性，淀粉酶在适宜的条件下可使淀粉水解成麦芽糖和葡萄糖，它们遇碘不再变蓝；但麦淀粉水解成麦芽糖和葡萄糖，它们遇碘不再变蓝；但麦芽糖和葡萄糖能够与斐林试剂发生氧化还原反应生成砖芽糖和葡萄糖能够与斐林试剂发生氧化还原反应生成砖红色沉淀。红色沉淀。2、实验材料、实验材料质量分数为质量分数为2的新鲜淀粉酶溶液，质量分数为的新鲜淀粉酶溶液，质量分数为1的可溶性淀粉溶液的可溶性淀粉溶液3、

22、试剂与仪器、试剂与仪器质量分数为质量分数为5的盐酸、质量分数为的盐酸、质量分数为5的氢氧化钠溶液、热水、的氢氧化钠溶液、热水、冰块、碘液、斐林试剂等冰块、碘液、斐林试剂等4、方法步骤、方法步骤（1）取）取3支试管编上号，并且分别注入支试管编上号，并且分别注入2ml可溶性淀粉溶液。可溶性淀粉溶液。（2）将）将3支洁净的试管分别放入支洁净的试管分别放入600C左右的热水、沸水和冰块左右的热水、沸水和冰块中，维持各自的温度中，维持各自的温度5min。（3）在）在3支试管中各注入支试管中各注入1ml新鲜的淀粉酶溶液，摇匀后，维新鲜的淀粉酶溶液，摇匀后，维持各自的温度持各自的温度5min。（4）在）在3

23、支试管中各滴入支试管中各滴入1滴碘液，然后摇匀。滴碘液，然后摇匀。（5）观察并记录这）观察并记录这3支试管中溶液颜色的变化情况。支试管中溶液颜色的变化情况。A、温度对酶活性的影响、温度对酶活性的影响5、注意事项、注意事项在实验在实验A中注入中注入2ml可溶性淀粉的可溶性淀粉的3支试管要先放入不同环境支试管要先放入不同环境5min在实验在实验B中，操作时必须先将酶置于不同环境条条件下，中，操作时必须先将酶置于不同环境条条件下，再加可溶性淀粉液。再加可溶性淀粉液。配制配制1可溶性淀粉液时，可用可溶性淀粉液时，可用0.5的氯化钠作溶剂，的氯化钠作溶剂，氯离子可使淀粉酶活性增强。氯离子可使淀粉酶活性增

24、强。B、pH对酶活性的影响对酶活性的影响（1）取三支洁净的试管，编上号，其中）取三支洁净的试管，编上号，其中1号试管注入号试管注入1ml新鲜淀粉新鲜淀粉酶溶液、酶溶液、1ml蒸馏水和蒸馏水和2ml可溶性淀粉溶液；可溶性淀粉溶液；2号试管注入号试管注入1ml新鲜淀新鲜淀粉酶溶液、粉酶溶液、1ml氢氧化钠和氢氧化钠和2ml可溶性淀粉溶液；可溶性淀粉溶液；3号试管注入号试管注入1ml新新鲜淀粉酶溶液、鲜淀粉酶溶液、1ml盐酸和盐酸和2ml可溶性淀粉溶液。可溶性淀粉溶液。（2）振荡这）振荡这3支试管，使试管内的液体混合均匀。然后，将支试管，使试管内的液体混合均匀。然后，将3支试支试管的下半部浸到管的下

25、半部浸到600C左右的热水中，保温左右的热水中，保温5min。（3）在）在3支试管中各加入支试管中各加入2ml斐林试剂斐林试剂（4）将）将3支试管的下半部放进的大烧杯中，用酒精灯加热，煮沸并支试管的下半部放进的大烧杯中，用酒精灯加热，煮沸并保持保持1min（5）观察并记录这）观察并记录这3支试管中溶液颜色的变化情况。支试管中溶液颜色的变化情况。（实验八）叶绿体中色素的提取和分离（实验八）叶绿体中色素的提取和分离1、实验原理、实验原理提取的原理：提取的原理：叶绿体中存在色素，这些色素能溶叶绿体中存在色素，这些色素能溶于丙酮液中于丙酮液中分离的原理：分离的原理：四种色素在层析液中溶解度不同，因随四

26、种色素在层析液中溶解度不同，因随层析液在滤纸上扩散速度不同层析液在滤纸上扩散速度不同2、实验材料、实验材料菠菜叶、大叶黄杨（含水量相对少、颜色深菠菜叶、大叶黄杨（含水量相对少、颜色深绿、色素较多）绿、色素较多）3、试剂与仪器、试剂与仪器丙酮、层析液、碳酸钙、二氧化硅、毛细吸管等。丙酮、层析液、碳酸钙、二氧化硅、毛细吸管等。4、实验方法与步骤、实验方法与步骤（1）色素的提取）色素的提取（研磨法）（研磨法）（丙酮、二氧化硅、碳酸钙）（丙酮、二氧化硅、碳酸钙）（2）制备滤纸条）制备滤纸条（3）色素的分离）色素的分离（纸层析法）（纸层析法）（4）观察记录）观察记录5、注意事项、注意事项取材时要选取新鲜

27、叶片，取材时要选取新鲜叶片，研磨要快速、充分；研磨要快速、充分；滤液收集后，要及时把试管口塞紧；滤液收集后，要及时把试管口塞紧；制备滤纸条时要剪去一端两角，可使色素扩散制备滤纸条时要剪去一端两角，可使色素扩散均匀，同时画线要细并直且均匀；均匀，同时画线要细并直且均匀；分离色素时滤液细线不能接触到层析液。分离色素时滤液细线不能接触到层析液。（实验九）观察植物细胞的质壁分离与复原（实验九）观察植物细胞的质壁分离与复原1、实验原理、实验原理细胞质是一种溶液。细胞液外面的原生质层相当于一层细胞质是一种溶液。细胞液外面的原生质层相当于一层选择透过性膜。当把这样的细胞置于溶液中后，就构成选择透过性膜。当把

28、这样的细胞置于溶液中后，就构成了一个渗透系统，细胞就通过渗透作用吸水或失水。了一个渗透系统，细胞就通过渗透作用吸水或失水。当外界溶液大于细胞液时，细胞失水，原生质层体积当外界溶液大于细胞液时，细胞失水，原生质层体积缩小，发生质壁分离；反之则质壁分离复原。缩小，发生质壁分离；反之则质壁分离复原。2、实验材料、实验材料（紫色洋葱磷片叶）（液泡大且有颜色易观察）（紫色洋葱磷片叶）（液泡大且有颜色易观察）3、实验方法与步骤、实验方法与步骤（1）配制）配制0.3g/ml的蔗糖溶液的蔗糖溶液（2）撕下一小块洋葱鳞片叶紫色的外表皮制成临时装片）撕下一小块洋葱鳞片叶紫色的外表皮制成临时装片（3）低倍镜下观察正

29、常细胞，可看到原生质层紧贴着细）低倍镜下观察正常细胞，可看到原生质层紧贴着细胞壁，还可看到紫色的大液泡。胞壁，还可看到紫色的大液泡。（4）向载玻片上盖玻片一侧滴加质量浓度为）向载玻片上盖玻片一侧滴加质量浓度为0.3g/ml的蔗糖溶液，在另一侧用吸水纸吸引，使的蔗糖溶液，在另一侧用吸水纸吸引，使细胞浸在蔗糖溶液中细胞浸在蔗糖溶液中（5）用高倍镜观察质壁分离现象。）用高倍镜观察质壁分离现象。（6）向载玻片上盖玻片一侧加清水，在另一侧用）向载玻片上盖玻片一侧加清水，在另一侧用吸水纸吸引使用细胞浸在清水中吸水纸吸引使用细胞浸在清水中（7）用高倍观察复原了的细胞。）用高倍观察复原了的细胞。4、注意事项、

30、注意事项（材料的选择，（材料的选择，试剂的种类和浓度）试剂的种类和浓度）5、实验结果与分析、实验结果与分析显微镜下观察可以看到细胞首先从角部出现质壁分离，显微镜下观察可以看到细胞首先从角部出现质壁分离，最后原生质层缩成圆球。最后原生质层缩成圆球。6、实验思路拓宽、实验思路拓宽如果使用不同浓度梯度的溶液，分别做多个装片上的细胞实验，如果使用不同浓度梯度的溶液，分别做多个装片上的细胞实验，可以测定出细胞液的浓度，这就是浓度梯度法。可以测定出细胞液的浓度，这就是浓度梯度法。（实验十）（实验十）DNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定1、实验原理、实验原理鸟类血液中红细胞有细胞核，细胞核内鸟类血液中红细胞有

31、细胞核，细胞核内DNA与蛋白质结合与蛋白质结合成染色质。利用成染色质。利用DNA在在0.14mol/L的氯化钠溶液中溶解度的氯化钠溶液中溶解度最低，而蛋白质此时的溶解度高的特点，可以使最低，而蛋白质此时的溶解度高的特点，可以使DNA与蛋与蛋白质分离，形成沉淀析出，通过过滤，得到初提取的滤出白质分离，形成沉淀析出，通过过滤，得到初提取的滤出物物DNA。再利用。再利用DNA不溶入酒精，但细胞中的其他物质不溶入酒精，但细胞中的其他物质可溶于酒精的特点，进一步提取含杂质少的可溶于酒精的特点，进一步提取含杂质少的DNA。利用利用DNA遇二苯胺（沸水浴）成蓝色遇二苯胺（沸水浴）成蓝色 特性，可以鉴特性，可

32、以鉴定提取的定提取的DNA2、实验材料、实验材料鸡血细胞液：鸡血细胞液：先配备先配备10的柠檬酸钠溶液，按的柠檬酸钠溶液，按180ml新新鸡血混合鸡血混合100ml10柠檬酸钠溶液的比例，柠檬酸钠溶液的比例，立即将血液与柠檬酸钠充分混合，同时用立即将血液与柠檬酸钠充分混合，同时用玻璃棒搅拌以免凝血。离心后去掉上清液玻璃棒搅拌以免凝血。离心后去掉上清液就得到所需的鸡血细胞悬液。就得到所需的鸡血细胞悬液。3、试剂与仪器、试剂与仪器2mol/L的的NaCl溶液；溶液；二苯胺试剂（二苯胺试剂（A液：液：1.5g二苯胺溶于二苯胺溶于100ml冰醋酸中，冰醋酸中，再加再加1.5ml浓硫酸，用棕色瓶保存。浓

33、硫酸，用棕色瓶保存。B液：体积分数为液：体积分数为0.2的乙醛溶液。实验前将的乙醛溶液。实验前将0.1mlB液倒入液倒入10ml的的A液中。液中。0.015mol/L的的NaCl溶液；溶液；4、实验方法与步骤、实验方法与步骤提取核物质提取核物质 溶解核内的溶解核内的DNA 析出析出DNA黏稠物黏稠物滤取滤取DNA黏稠物黏稠物DNA黏稠物再溶解黏稠物再溶解过滤含过滤含DNA的氯化钠溶液的氯化钠溶液 提取含杂质少的提取含杂质少的DNADNA的鉴定的鉴定5、注意事项、注意事项实验中有三次过滤；实验中有三次过滤；6次搅拌；两次使用蒸馏水；次搅拌；两次使用蒸馏水；三次加氯化钠溶液三次加氯化钠溶液实验成功

34、的关键：实验成功的关键：要保证提取足量且较纯净的要保证提取足量且较纯净的DNA实习和研究性课题实习和研究性课题一一.种群密度的取样调查种群密度的取样调查1.目的要求目的要求初步学会种群密度取样调查的方法初步学会种群密度取样调查的方法2.实习原理实习原理种群密度是指单位空间内某种群的个体数量种群密度是指单位空间内某种群的个体数量.在一般情在一般情况下况下,要逐一计数某个种群的种群密度是困难的要逐一计数某个种群的种群密度是困难的.研究者研究者常常只计数种群的一小部分常常只计数种群的一小部分,用来估计整个种群的种群用来估计整个种群的种群密度密度,这种方法称为取样调查法这种方法称为取样调查法.在对植物

35、种群密度的调在对植物种群密度的调查中查中,常常采用样方法常常采用样方法,也就是在被调查种群的生存环境也就是在被调查种群的生存环境内内,随机选取若干个样方随机选取若干个样方(样方是有一定面积或空间的区样方是有一定面积或空间的区域域,如进行草本植物种群调查进如进行草本植物种群调查进,样方面积为样方面积为1m2),通过通过计数每个样方内的个体数计数每个样方内的个体数,求得每个样方的种群密度求得每个样方的种群密度,以以所有样方群密度的平均值作为该种群的种群密度所有样方群密度的平均值作为该种群的种群密度.3.实习器材实习器材皮尺皮尺(卷尺卷尺),尼龙绳尼龙绳10根根,木橛子木橛子(40个个),钢笔和记录

36、本钢笔和记录本等等4.实习方法与步骤实习方法与步骤(1)确定调查的对象确定调查的对象(2)选取样方选取样方(3)计数并记录计数并记录(4)计算种群密度计算种群密度(以双子叶草本植物种群密度的取样调查为例以双子叶草本植物种群密度的取样调查为例)5.注意事项注意事项(1)调查时调查时,要选熟的要选熟的,又容易计数的植物又容易计数的植物;(2)选取样方时选取样方时,要按要求选取要按要求选取;(3)选取样方的个数要依总面积的大小而定选取样方的个数要依总面积的大小而定,总面积大总面积大的选取的样方应多些的选取的样方应多些;(4)计数时计数时,若有正好长在边界上的若有正好长在边界上的,只计样方相邻两只计样

37、方相邻两条边上的个体条边上的个体.同种植物无论大小都应计数同种植物无论大小都应计数.(5)种种群密度调查还有多种方法种种群密度调查还有多种方法,对不同的生物应对不同的生物应选择适宜的方法选择适宜的方法.动物种群密度的取样调查动物种群密度的取样调查 在调查动物的种群密度时在调查动物的种群密度时,一般采作标志重捕法一般采作标志重捕法(捉放法捉放法).就是在一个有比较明确界限的区域内就是在一个有比较明确界限的区域内,捕捕捉一定数量的动物个体进行标志捉一定数量的动物个体进行标志,然后放回然后放回,经过一经过一个适当时期个适当时期(标志个体与未标志个体重新充分混合分标志个体与未标志个体重新充分混合分布布

38、)后后,再进行重捕再进行重捕.根据重捕样本中标志者的比例根据重捕样本中标志者的比例,估计该区域的种群总数估计该区域的种群总数,可计算某种动物的种群密度可计算某种动物的种群密度.(前提是标志个体与未标志个体在重捕时被前提是标志个体与未标志个体在重捕时被捕的概率相等捕的概率相等)(适用于哺乳类、鸟类、爬行类、两栖类、鱼类和适用于哺乳类、鸟类、爬行类、两栖类、鱼类和昆虫类等动物昆虫类等动物)注意事项注意事项:(1)标志物和标志方法必须对动物的身体不会产生对标志物和标志方法必须对动物的身体不会产生对于寿命和行为的伤害于寿命和行为的伤害;(2)标志不能过分醒目标志不能过分醒目;(3)标志符号必须能维持一

39、定的时间标志符号必须能维持一定的时间,在调查研究期在调查研究期间不能消失间不能消失;动物种群密度调查示例（摸拟捉放法）动物种群密度调查示例（摸拟捉放法）1、材料用具、材料用具绿豆一包，红豆绿豆一包，红豆50粒，大小烧杯各粒，大小烧杯各1个个2、方法步骤、方法步骤（1）从一包绿豆中取也）从一包绿豆中取也50粒，换上粒，换上50粒红豆（代替粒红豆（代替标志），然后将这包豆子放入大烧杯中，充分搅拌，标志），然后将这包豆子放入大烧杯中，充分搅拌，使两种豆子混合均匀；使两种豆子混合均匀；（2）闭上眼睛抓取豆子，每次从大烧杯中随机抓取一）闭上眼睛抓取豆子，每次从大烧杯中随机抓取一粒豆子，放入小烧杯中。依次

40、方法连续抓取豆子粒豆子，放入小烧杯中。依次方法连续抓取豆子20次；次；（3）数一下小烧杯中共有多少颗红豆（）数一下小烧杯中共有多少颗红豆（a）；）；（4）按照下列公式计算纸包中的绿豆总数；）按照下列公式计算纸包中的绿豆总数；a/20=50/x；x为纸包中的绿豆总数（代表种群总数）为纸包中的绿豆总数（代表种群总数）则则X=1000/a（5）重复测算）重复测算3次，求平均值；次，求平均值；（6）数绿豆总数）数绿豆总数一一.植物向性动物的实验设计和观察植物向性动物的实验设计和观察 原理：原理：向性运动是植物受单向外界因素的刺激而引起的定向向性运动是植物受单向外界因素的刺激而引起的定向运动。运动。它的

41、运动方向随刺激的方向而定。如单侧光、重力。它的运动方向随刺激的方向而定。如单侧光、重力。实验设计实验设计(一)植物的向光性实验设计方案示例 1 1实验题目：植物的向光性实验。实验题目：植物的向光性实验。2 2目的要求：观察植物在单侧光照射下的生长目的要求：观察植物在单侧光照射下的生长情况，验证植物的生长具有向光性。情况，验证植物的生长具有向光性。3 3材料用具：植物幼苗材料用具：植物幼苗(玉米、小麦等玉米、小麦等)、火柴、火柴杆、小花盆杆、小花盆(或培养皿或培养皿)、泥土、不透光的纸盒、台、泥土、不透光的纸盒、台灯、剪刀。灯、剪刀。4 4实验假设：依据植物生长的向光性原理，幼实验假设：依据植物

42、生长的向光性原理，幼苗应朝纸盒开孔的方向生长，也就是向着光源的方苗应朝纸盒开孔的方向生长，也就是向着光源的方向生长。向生长。5 5实验预期：经过一定时间之后，幼苗将弯向实验预期：经过一定时间之后，幼苗将弯向光源生长光源生长。6方法步骤：方法步骤：(1)(1)用剪刀在不透光的纸盒一侧挖一个直径为用剪刀在不透光的纸盒一侧挖一个直径为1cm1cm的孔，待模拟单的孔，待模拟单侧光照射时使用。侧光照射时使用。(2)(2)将几株长势相同但真叶尚未出胚芽鞘的小麦幼苗依次排开，分将几株长势相同但真叶尚未出胚芽鞘的小麦幼苗依次排开，分别栽种在两个花盆中。在幼苗的旁边插一根火柴杆，作为对比别栽种在两个花盆中。在幼

43、苗的旁边插一根火柴杆，作为对比的参照物。的参照物。(3)(3)将制作好的遮光罩扣住花盆将制作好的遮光罩扣住花盆(一组用不透光的纸盒，另一组用一组用不透光的纸盒，另一组用一侧带小孔的纸盒一侧带小孔的纸盒)，白天将装置置于阳光充足的地方，夜间以，白天将装置置于阳光充足的地方，夜间以台灯代替光源，并使光从小孔中透入纸盒。台灯代替光源，并使光从小孔中透入纸盒。7 7实验记录：将观察日期、时间、环境条件实验记录：将观察日期、时间、环境条件(温度、温度、天气天气)、幼苗生长情况等列表记录。、幼苗生长情况等列表记录。8 8实验结果和结论：分析实验结果，得出结论。实验结果和结论：分析实验结果，得出结论。(4)

44、(4)每天打开纸盒，观察幼苗的生长情况，记录下高每天打开纸盒，观察幼苗的生长情况，记录下高度、倾斜角及当日温度、天气等情况，并间断地拍度、倾斜角及当日温度、天气等情况，并间断地拍照，保留图片记录。但要注意，打开纸盒观察实验照，保留图片记录。但要注意，打开纸盒观察实验现象的时间应该尽可能地短，并保持透光孔的方向现象的时间应该尽可能地短，并保持透光孔的方向与前次一致。与前次一致。实验设计：实验设计：假设假设：如果不同波长的光或光的强度对植物向光生长有影响，如果不同波长的光或光的强度对植物向光生长有影响，那么植物向光生长的速度或弯曲的角度会不同；那么植物向光生长的速度或弯曲的角度会不同；方法步骤：方

45、法步骤：分组分组：把长势相同的的刚萌发的玉米胚芽鞘分成若干组。把长势相同的的刚萌发的玉米胚芽鞘分成若干组。条件控制：甲组用红色单侧光照射；乙组用绿色单侧光照射；条件控制：甲组用红色单侧光照射；乙组用绿色单侧光照射；丙组用白光单侧光照射；丁组在黑暗状态下。丙组用白光单侧光照射；丁组在黑暗状态下。结果记录：用尺子测量胚芽鞘生长的长度；用量角器等测量结果记录：用尺子测量胚芽鞘生长的长度；用量角器等测量 茎（胚芽鞘）弯曲的角度。茎（胚芽鞘）弯曲的角度。(二二)不同光质对植物向光性的影响不同光质对植物向光性的影响时间时间红红光光绿绿光光白光白光黑暗黑暗长长度度弯曲度弯曲度长长度度弯曲度弯曲度长长度度弯曲

46、度弯曲度长长度度弯曲度弯曲度(三三)、植物向重力性实验设计参考、植物向重力性实验设计参考 方案一：方案一：方案二：方案二：1、在一扁形玻璃槽内紧贴、在一扁形玻璃槽内紧贴一侧玻璃，将已萌动的玉米或一侧玻璃，将已萌动的玉米或小麦种子种在潮湿的沙土中。小麦种子种在潮湿的沙土中。均匀浇水，培养一段时间，观均匀浇水，培养一段时间，观察根、茎的生长。察根、茎的生长。2、待已明显看出向地生长的、待已明显看出向地生长的幼根和背地生长的幼茎后，将幼根和背地生长的幼茎后，将玻璃槽横置，仍然均匀浇水，玻璃槽横置，仍然均匀浇水，观察根、茎的生长。几天后，观察根、茎的生长。几天后，便可看到横置的根会弯向地心便可看到横置

47、的根会弯向地心方向生长，横置的茎又弯向背方向生长，横置的茎又弯向背向地心方向生长。证明根具有向地心方向生长。证明根具有向重力性，茎有负向重力性。向重力性，茎有负向重力性。方案三：方案三：1、将干琼脂溶解于沸水中制成、将干琼脂溶解于沸水中制成 3浓度的琼脂溶液，浓度的琼脂溶液，倒入一培养血中，使厚度在倒入一培养血中，使厚度在23 mm左右，能固定种左右，能固定种子即可，不宜过厚，以免影响种子的呼吸。子即可，不宜过厚，以免影响种子的呼吸。2、待琼脂溶液温度下降，未凝固前，将一粒已萌动的、待琼脂溶液温度下降，未凝固前，将一粒已萌动的玉米种子固定于培养皿中央，盖上培养盖，保持湿度。玉米种子固定于培养皿

48、中央，盖上培养盖，保持湿度。3、将培养皿竖着固定在一支架上，放在恒温箱、将培养皿竖着固定在一支架上，放在恒温箱（25）培养。每隔一日将培养皿的角度转）培养。每隔一日将培养皿的角度转90，观察，观察根的生长情况。根的生长情况。方案四：方案四：将一新鲜柳树的枝条正挂；将一新鲜柳树的枝条正挂；将一新鲜柳树的枝条倒挂；将一新鲜柳树的枝条倒挂；保持潮湿、温暖的环境条件保持潮湿、温暖的环境条件(四四)、植物向水性实验设计参考、植物向水性实验设计参考 方案一：方案一：四、植物向水性实验设计参考四、植物向水性实验设计参考 方案二：方案二：（三）设计实验，观察生长素或生长素类似物对植物（三）设计实验，观察生长素

49、或生长素类似物对植物生长发育的影响生长发育的影响 例如：课题例如：课题不同浓度的生长素对月季扦插枝条生根的作用不同浓度的生长素对月季扦插枝条生根的作用1 1实验原理：实验原理：适宜浓度的生长素能够促进扦插枝条生根；生长素的生理作适宜浓度的生长素能够促进扦插枝条生根；生长素的生理作用具有两重性，即低浓度促进生长，浓度过高抑制生长。用具有两重性，即低浓度促进生长，浓度过高抑制生长。探究课题：探究课题：不同浓度生长素对无根豆芽菜生产的作用（记录根的长度）不同浓度生长素对无根豆芽菜生产的作用（记录根的长度）不同浓度生长素对防止草莓落花落果的作用（记录花、果实不同浓度生长素对防止草莓落花落果的作用（记录

50、花、果实的数量）的数量）2 2材料用具：材料用具：月季枝条、不同浓度生长素；月季枝条、不同浓度生长素；3 3方法步骤：方法步骤：分组：分组：处理：除浸泡枝条下端的生长素溶液浓度不同，其处理：除浸泡枝条下端的生长素溶液浓度不同，其余条件均相同。余条件均相同。定期测量生根的条数和长度；定期测量生根的条数和长度；4 4结果：结果：生根速度和数量；生根速度和数量；5 5结论：结论：生长素在浓度低于生长素在浓度低于时促进月季枝条生时促进月季枝条生根；高于根；高于时抑制月季枝条生根。（注意：该浓度时抑制月季枝条生根。（注意：该浓度不是最适浓度）不是最适浓度）（三）设计农业生态系统（三）设计农业生态系统 原