（鲁京津琼）高考生物总复习 第31讲 微生物的培养与应用课件-人教版高三全册生物课件.pptx

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1、第第31讲微生物的培养与微生物的培养与应用用课程内容课程内容核心素养核心素养提考能提考能1.进行微生物的分离和培养进行微生物的分离和培养2.用大肠杆菌为材料进行平面培养、用大肠杆菌为材料进行平面培养、分离菌落分离菌落3.测定某种微生物的数量测定某种微生物的数量4.分离土壤中分解尿素的细菌分离土壤中分解尿素的细菌5.研究培养基对微生物的选择作用研究培养基对微生物的选择作用科学思维科学思维分析培养基的成分及作用，比较分析培养基的成分及作用，比较平板划线法与稀释涂布平板法的平板划线法与稀释涂布平板法的异同异同科学探究科学探究设计实验获得纯化的酵母菌落设计实验获得纯化的酵母菌落社会责任社会责任关注有害

2、微生物的控制、宣传健关注有害微生物的控制、宣传健康生活康生活1.微生物的培养基微生物的培养基(1)概概念念：人人们们按按照照微微生生物物对对_的的不不同同需需求求，配配制制出出供供其其_的的营营养养基质。基质。(2)营营养养组组成成：一一般般都都含含有有_和和无无机机盐盐。此此外外，还还需需要要满满足足微微生生物物生长对生长对_、氧气以及、氧气以及_的要求。的要求。考点一微生物的实验室培养考点一微生物的实验室培养营养物质营养物质生长繁殖生长繁殖水、碳源、氮源水、碳源、氮源pH特殊营养物质特殊营养物质(3)种类种类按照物理性质可分为按照物理性质可分为_培养基、固体培养基、半固体培养基。培养基、固

3、体培养基、半固体培养基。按照成分的来源可分为天然培养基和按照成分的来源可分为天然培养基和_培养基、半合成培养基。培养基、半合成培养基。按照功能用途可分为选择培养基、按照功能用途可分为选择培养基、_培养基等。培养基等。2.无菌技术无菌技术(1)含义：在培养微生物的操作中，所有防止含义：在培养微生物的操作中，所有防止_的方法。的方法。(2)作用：防止外来杂菌的入侵。作用：防止外来杂菌的入侵。液体液体合成合成鉴别鉴别杂菌污染杂菌污染(3)常用方法常用方法条件条件结果结果常用方法常用方法应用范围应用范围消毒消毒较为温和的物较为温和的物理或化学方法理或化学方法仅杀死物体表面或仅杀死物体表面或内部的部分微

4、生物内部的部分微生物煮沸消毒法煮沸消毒法日常用品日常用品巴氏消毒法巴氏消毒法不耐高温的液体不耐高温的液体化学药剂化学药剂消毒法消毒法用酒精擦拭双手，用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源用氯气消毒水源灭菌灭菌强烈的理化因强烈的理化因素素杀死物体内外所有杀死物体内外所有的微生物，包括的微生物，包括芽孢和孢子芽孢和孢子灼烧灭菌法灼烧灭菌法接种工具接种工具干热灭菌法干热灭菌法玻璃器皿、金属用具玻璃器皿、金属用具高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法培养基及容器培养基及容器3.大肠杆菌的纯化培养大肠杆菌的纯化培养(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(2)目的：在培养基上形成由目的：在培养基上形成由

5、_繁殖而来的子细胞群体繁殖而来的子细胞群体菌落。菌落。称量称量灭菌灭菌单个细胞单个细胞(3)纯化培养方法纯化培养方法主要方法主要方法平板划线法平板划线法稀释涂布平板法稀释涂布平板法纯化原理纯化原理通过接种环在琼脂固体培养基的通过接种环在琼脂固体培养基的表面表面_操作，将聚集的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面菌种逐步稀释分散到培养基表面将菌液进行一系列的将菌液进行一系列的_，稀释度足够高时，聚集在一起，稀释度足够高时，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞的微生物将被分散成单个细胞主要步骤主要步骤_操作操作系列稀释操作和涂布平板操作系列稀释操作和涂布平板操作接种工具接种工具接种环接种环_

6、平板示意图平板示意图连续划线连续划线梯度稀释梯度稀释平板划线平板划线涂布器涂布器(4)菌种的保存方法菌种的保存方法对于频繁使用的菌种，可以采用对于频繁使用的菌种，可以采用_的方法。的方法。对于需要长期保存的菌种，可以采用对于需要长期保存的菌种，可以采用_的方法。的方法。临时保藏临时保藏甘油管藏甘油管藏1.根据功能可分为选择培养基和鉴别培养基。根据功能可分为选择培养基和鉴别培养基。类型类型实例实例选择选择培养基培养基培养基中加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌培养基中加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌培养基中加入高浓度的食盐用于分离得到金黄色葡萄球菌培养基中加入高浓度的食盐用于分离得到金黄色葡萄球菌以尿素

7、作为唯一氮源的培养基用于分离分解尿素的细菌以尿素作为唯一氮源的培养基用于分离分解尿素的细菌不添加氮源的培养基用于分离固氮微生物不添加氮源的培养基用于分离固氮微生物石油是唯一碳源时，可以抑制不能利用石油的微生物的生长，使能够利用石油是唯一碳源时，可以抑制不能利用石油的微生物的生长，使能够利用石油的微生物生存，达到分离能消除石油污染的微生物的目的石油的微生物生存，达到分离能消除石油污染的微生物的目的培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物鉴别培养基鉴别培养基 伊红伊红美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌(菌落呈深紫色并带金属光泽菌

8、落呈深紫色并带金属光泽)2.平板划线操作中灼烧接种环的目的平板划线操作中灼烧接种环的目的灼烧时间灼烧时间灼烧目的灼烧目的第一次划线前第一次划线前杀死接种环上原有的微生物，防止杀死接种环上原有的微生物，防止_污染培污染培养基养基第二次及以后每次划线前第二次及以后每次划线前杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于种直接来源于_最后一次划线后最后一次划线后杀死接种环上残存的菌种，避免细菌杀死接种环上残存的菌种，避免细菌_和和_外来杂菌外来杂菌上次划线的末端上次划线的末端污染环境污染环境感染操作者感染操作者3.培养基的配制原则培养基的

9、配制原则(1)目的要明确：配制时应根据微生物的种类、培养目的等确定配制的培养基种类。目的要明确：配制时应根据微生物的种类、培养目的等确定配制的培养基种类。(2)营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。(3)pH要要适适宜宜：细细菌菌为为6.57.5，放放线线菌菌为为7.58.5，真真菌菌为为5.06.0，培培养养不不同同微微生生物所需的物所需的pH不同。不同。4.微生物对主要营养物质的需求特点微生物对主要营养物质的需求特点(1)自自养养型型微微生生物物所所需需的的主主要要营营养养物物质质是是无无机机盐盐，碳碳源源可可来来自自大大气气中中的的CO2，氮

10、氮源源可可由含氮无机盐提供。由含氮无机盐提供。(2)异异养养型型微微生生物物所所需需的的营营养养物物质质主主要要是是有有机机物物，即即碳碳源源必必须须由由含含碳碳有有机机物物提提供供，氮氮源也主要是由有机物提供，部分异养型微生物也可以利用无机氮源。源也主要是由有机物提供，部分异养型微生物也可以利用无机氮源。(1)(人人教教版版选修修一一P16“旁旁栏思思考考题”拓拓展展)请请你你判判断断以以下下材材料料或或用用具具是是否否需需要要消消毒毒或或灭灭菌。如果需要，请选择合适的方法。菌。如果需要，请选择合适的方法。培养细菌用的培养基与培养皿培养细菌用的培养基与培养皿玻棒、试管、烧瓶和吸管玻棒、试管、

11、烧瓶和吸管实验操作者的双手实验操作者的双手提示提示、需要需要灭菌；菌；需要消毒。需要消毒。(2)(人教版人教版选修一修一P19图示拓展示拓展)平板冷凝后，为什么要将平板倒置？平板冷凝后，为什么要将平板倒置？提提示示平平板板冷冷凝凝后后，皿皿盖盖上上会会凝凝结水水珠珠，凝凝固固后后的的培培养养基基表表面面的的湿湿度度也也比比较高高，将将平平板板倒倒置置，既既可可以以使使培培养养基基表表面面的的水水分分更更好好地地挥发，又又可可以以防防止止皿皿盖盖上上的的水水珠珠落落入入培养基，造成培养基，造成污染。染。(3)(人人教教版版选修修一一P18“旁旁栏小小资料料”)微微生生物物接接种种方方法法除除了了

12、平平板板划划线线法法和和稀稀释释涂涂布布平平板板法法之之外外，还还有有斜斜面面接接种种、穿穿刺刺接接种种等等方方法法。这这些些方方法法的的核核心心都都是是防防止止杂杂菌菌污污染染，保证培养物的纯度。保证培养物的纯度。1.(2018全全国国卷卷，37)在在生生产产、生生活活和和科科研研实实践践中中，经经常常通通过过消消毒毒和和灭灭菌菌来来避避免免杂杂菌菌的污染。回答下列问题：的污染。回答下列问题：(1)在在实实验验室室中中，玻玻璃璃和和金金属属材材质质的的实实验验器器具具_(填填“可可以以”或或“不不可可以以”)放放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。入干热灭菌箱中进行干热灭菌。(2)牛牛奶奶的的消消毒

13、毒常常采采用用巴巴氏氏消消毒毒法法或或高高温温瞬瞬时时消消毒毒法法，与与煮煮沸沸消消毒毒法法相相比比，这这两两种种方法的优点是方法的优点是_。(3)密密闭闭空空间间内内的的空空气气可可采采用用紫紫外外线线照照射射消消毒毒，其其原原因因是是紫紫外外线线能能_。在在照照射前，适量喷洒射前，适量喷洒_，可强化消毒效果。，可强化消毒效果。(4)水水厂厂供供应应的的自自来来水水通通常常是是经经过过_(填填“氯氯气气”“”“乙乙醇醇”或或“高高锰锰酸酸钾钾”)消消毒毒的。的。(5)某某同同学学在在使使用用高高压压蒸蒸汽汽灭灭菌菌锅锅时时，若若压压力力达达到到设设定定要要求求，而而锅锅内内并并没没有有达达到

14、到相相应应温温度，最可能的原因是度，最可能的原因是_。解解析析(1)在在实验室室中中，能能耐耐高高温温的的、需需要要保保持持干干燥燥的的物物品品，如如玻玻璃璃器器皿皿和和金金属属材材质的的实验器器具具等等可可以以放放入入干干热灭菌菌箱箱中中进行行干干热灭菌菌。(2)巴巴氏氏消消毒毒法法或或高高温温瞬瞬时消消毒毒法法与与煮煮沸沸消消毒毒法法相相比比，其其优点点表表现为在在达达到到消消毒毒目目的的的的同同时，营养养物物质损失失较少少。(3)紫紫外外线照照射射能能消消毒毒的的原原因因是是其其能能够破破坏坏微微生生物物细胞胞中中的的DNA分分子子。在在利利用用紫紫外外线照照射射前前，适适量量喷洒洒石石

15、炭炭酸酸或或煤煤酚酚皂皂溶溶液液等等消消毒毒液液，可可强化化消消毒毒效效果果。(4)自自来来水水通通常常采采用用氯气气消消毒毒。(5)采采用用高高压蒸蒸汽汽灭菌菌时，若若压力力达达到到设定定要要求求，而而温温度度未未达达到到相相应要要求求，最最可可能能的原因是没有排尽高的原因是没有排尽高压蒸汽蒸汽灭菌菌锅内的冷空气。内的冷空气。答答案案(1)可可以以(2)在在达达到到消消毒毒目目的的的的同同时时，营营养养物物质质损损失失较较少少(3)破破坏坏DNA结结构构消毒液消毒液(4)氯气氯气(5)未将锅内冷空气排尽未将锅内冷空气排尽2.(201811月浙江月浙江选考考节选)回答与微生物培养及应用有关的问

16、题：回答与微生物培养及应用有关的问题：(1)对对培培养养基基进进行行高高压压蒸蒸汽汽灭灭菌菌时时，灭灭菌菌时时间间应应从从_时时开开始始计计时时。对对于于不不耐耐热热的的液液体体培培养养基基，一一般般可可将将其其转转入入G6玻玻璃璃砂砂漏漏斗斗中中，采采用用_方式可较快地进行过滤灭菌。方式可较快地进行过滤灭菌。(2)与与酿酿造造果果醋醋相相比比，利利用用大大米米、高高粱粱等等富富含含淀淀粉粉的的原原料料制制醋醋，需需增增加加_的的过过程程。某某醋醋酸酸菌菌培培养养基基由由蛋蛋白白胨胨、酵酵母母提提取取物物和和甘甘露露醇醇组组成成，其其中中甘甘露露醇醇的的主主要要作作用是用是_。解解析析(1)由

17、由于于高高压蒸蒸汽汽灭菌菌锅的的升升温温升升压需需要要一一定定时间，而而未未达达设定定温温度度和和压力力将将导致致灭菌菌不不彻底底，因因此此对培培养养基基进行行高高压蒸蒸汽汽灭菌菌时，灭菌菌时间应从从达达到到设定定的的温温度度或或压力力值时开开始始计时。对于于不不耐耐热的的液液体体培培养养基基，如如尿尿素素培培养养基基，一一般般可可将将其其转入入G6玻玻璃璃砂砂漏漏斗斗中中过滤灭菌菌，采采用用抽抽滤方方式式可可加加快快过滤速速度度。(2)相相比比果果醋醋制制作作中中先先利利用用葡葡萄萄糖糖进行行酒酒精精发酵酵，再再进行行醋醋酸酸发酵酵，以以淀淀粉粉为原原料料制制醋醋，需需增增加加淀淀粉粉分分解

18、解成成糖糖的的过程程。醋醋化化醋醋杆杆菌菌培培养养基基由由蛋蛋白白胨、酵酵母母提提取取物物和和甘甘露露醇醇组成成，其其中中甘甘露露醇醇的的主主要要作作用用是是作作为碳源。碳源。答案答案(1)达到设定的温度或压力值抽滤达到设定的温度或压力值抽滤(2)将淀粉分解成糖作为碳源将淀粉分解成糖作为碳源走出微生物培养的走出微生物培养的4个误区个误区(1)不不是是所所有有微微生生物物培培养养基基中中均均需需加加入入特特殊殊营养养物物质。碳碳源源、氮氮源源、水水分分、无无机机盐是是微微生生物物生生长必必需需的的四四大大营养养成成分分，有有些些微微生生物物可可自自行行合合成成特特殊殊营养养物物质，而而对那那些些

19、合合成成能能力力有有限限或或不不能能合合成成特特殊殊营养养物物质的的微微生生物物(如如乳乳酸酸菌菌)，则需需在在培培养养基基中中添加添加诸如如维生素等物生素等物质。(2)稀稀释涂涂布布平平板板法法统计样品品中中菌菌落落的的数数目目往往往往比比实际数数目目“低低”。这是是因因为当当两两个个或或多多个个细胞胞连在在一一起起时，平平板板上上观察察到到的的只只是是一一个个菌菌落落。而而显微微计数数法法由由于于不不能区分死菌与活菌，故所得数能区分死菌与活菌，故所得数值可能比可能比实际值“偏高偏高”。(3)平平板板划划线法法只只适适用用于于微微生生物物的的提提纯，不不适适用用于于微微生生物物的的计数数，并

20、并且且在在最最后后一一次次划划线的末端的末端处的菌种最的菌种最纯。(4)倒平板的温度一般在倒平板的温度一般在50左右适宜，温度左右适宜，温度过高会高会烫手，温度手，温度过低培养基又会凝低培养基又会凝固。平板冷却凝固后需倒置，固。平板冷却凝固后需倒置，这样既可使培养基表面的水分更好地既可使培养基表面的水分更好地挥发，又防止，又防止皿盖上的水珠落入培养基，造成培养基皿盖上的水珠落入培养基，造成培养基污染。染。1.微生物分离的原理与措施微生物分离的原理与措施(1)原原理理：自自然然环环境境中中的的微微生生物物是是混混杂杂在在一一起起的的，因因此此分分离离获获得得纯纯培培养养物物应应首首先先采采用用的

21、的方方法法是是将将单单个个的的细细胞胞与与其其他他细细胞胞分分离离，再再给给细细胞胞提提供供合合适适的的营营养养和和条条件件，使使其其生生长成为可见的群体。长成为可见的群体。(2)常用措施常用措施接种过程中尽量使细胞分散开来，如平板划线法、稀释涂布平板法。接种过程中尽量使细胞分散开来，如平板划线法、稀释涂布平板法。运运用用选选择择培培养养基基的的作作用用特特点点，在在培培养养基基中中添添加加某某种种特特定定的的物物质质，抑抑制制不不需需要要的的微微生物的生长，促进所需微生物的生长。生物的生长，促进所需微生物的生长。考点二微生物的筛选和计数考点二微生物的筛选和计数2.土壤中分解尿素的细菌的分离与

22、计数土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(1)筛选菌株的原理筛选菌株的原理在在选选择择培培养养基基的的配配方方中中，把把尿尿素素作作为为培培养养基基中中的的唯唯一一氮氮源源，原原则则上上只只有有能能够够利利用用尿尿素的微生物才能够生长。素的微生物才能够生长。(2)统计菌落数目的方法：一般用统计菌落数目的方法：一般用_。具体操作如下。具体操作如下。设设置置重重复复组组，增增强强实实验验的的说说服服力力与与准准确确性性。将将待待测测样样品品经经一一系系列列10倍倍稀稀释释，选选择择三三个个稀稀释释度度的的菌菌液液，分分别别取取0.1mL接接种种到到已已制制备备好好的的平平板板上上，然然后后用用无无菌菌

23、涂涂布布器器将将菌菌液液涂涂布布于于整整个个平平板板表表面面，放放在在适适宜宜的的温温度度下下培培养养，计计算算菌菌落落数数。为为使使结结果果接接近近真真实实值值，可可将将同同一一稀稀释释度度的的样样液液加加到到三三个个或或三三个个以以上上的的平平板板上上，经经涂涂布布、培培养养，计计算算出菌落平均数。出菌落平均数。稀释涂布平板法稀释涂布平板法为为了了保保证证结结果果准准确确，一一般般选选择择菌菌落落数数为为_个个的的平平板板进进行行计计数数，若若设设置置的的重重复复组中结果相差太远，意味着操作有误，需重新实验。组中结果相差太远，意味着操作有误，需重新实验。计计算算公公式式：每每克克样样品品中

24、中的的细细菌菌数数(C/V)M，其其中中C代代表表某某一一稀稀释释度度下下平平板板上上生生长长的的平均菌落数，平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。代表稀释倍数。提醒提醒此此种种方方法法统计的的菌菌落落数数往往往往比比活活菌菌的的实际数数目目低低。这是是因因为当当两两个个或或多多个个细胞胞连在在一一起起时，平板上，平板上观察到的只是一个菌落。察到的只是一个菌落。(3)实验流程：实验流程：土壤取样土壤取样配制土壤溶液和制备培养基配制土壤溶液和制备培养基_涂布平板与培养涂布平板与培养菌落菌落_30300系列稀释系列稀释计数计数选择培

25、养基四种常见制备方法或实例选择培养基四种常见制备方法或实例1.(2015江江苏卷，卷，19)做做“微生物的分离与培养微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是实验时，下列叙述正确的是()A.高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖B.倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上C.为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D.用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上用记号笔标记培养皿中菌落时

26、，应标记在皿底上解解析析本本题考考查微微生生物物的的分分离离与与培培养养的的相相关关知知识。高高压灭菌菌加加热结束束时，需需先先切切断断电源源，让灭菌菌锅内内温温度度降降至至100C以以下下，压力力表表的的指指针回回到到零零时，再再打打开开锅盖盖，A错误；倒倒平平板板时，不不应将将培培养养皿皿盖盖完完全全打打开开，以以防防污染染，B错误；接接种种环经火火焰焰灭菌菌后后需需待待冷却后挑取菌落，冷却后挑取菌落，C错误。答案答案D2.(2018全国卷全国卷，37)生物生物选修选修1：生物技术实践：生物技术实践将将马马铃铃薯薯去去皮皮切切块块，加加水水煮煮沸沸一一定定时时间间，过过滤滤得得到到马马铃铃

27、薯薯浸浸出出液液。在在马马铃铃薯薯浸浸出出液液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M培养基。培养基。回答下列问题：回答下列问题：(1)M培培养养基基若若用用于于真真菌菌的的筛筛选选，则则培培养养基基中中应应加加入入链链霉霉素素以以抑抑制制_的的生生长长，加入了链霉素的培养基属于加入了链霉素的培养基属于_培养基。培养基。(2)M培培养养基基中中的的马马铃铃薯薯浸浸出出液液为为微微生生物物生生长长提提供供了了多多种种营营养养物物质质，营营养养物物质质类类型型除除氮氮源源外外还还有有_(答答出出两两点点即即可可)。氮氮源源进进入入细细胞胞后后，可可

28、参参与与合合成成的的生生物物大大分分子子有有_(答出两点即可答出两点即可)。(3)若若在在M培培养养基基中中用用淀淀粉粉取取代代蔗蔗糖糖，接接种种土土壤壤滤滤液液并并培培养养，平平板板上上长长出出菌菌落落后后可可通通过过加加入入显显色色剂剂筛筛选选出出能能产产淀淀粉粉酶酶的的微微生生物物。加加入入的的显显色色剂剂是是_，该该方方法法能能筛筛选选出出产淀粉酶微生物的原理是产淀粉酶微生物的原理是_。(4)甲甲、乙乙两两位位同同学学用用稀稀释释涂涂布布平平板板法法测测定定某某一一土土壤壤样样品品中中微微生生物物的的数数量量，在在同同一一稀稀释释倍数下得到以下结果：倍数下得到以下结果：甲甲同同学学涂涂

29、布布了了3个个平平板板，统统计计的的菌菌落落数数分分别别是是110、140和和149，取取平平均均值值133；乙乙同同学学涂涂布布了了3个个平平板板，统统计计的的菌菌落落数数分分别别是是27、169和和176，取取平平均均值值124。有有人人认认为为这这两两位位同同学的结果中，乙同学的结果可信度低，其原因是学的结果中，乙同学的结果可信度低，其原因是_。解解析析(1)在在微微生生物物学学中中，将将允允许特特定定种种类的的微微生生物物生生长，同同时抑抑制制或或阻阻止止其其他他种种类微微生生物物生生长的的培培养养基基，称称做做选择培培养养基基。若若M培培养养基基是是用用于于真真菌菌的的筛选，则应加加

30、入入链霉霉素素以以抑抑制制细菌菌的的生生长，其其属属于于选择培培养养基基。(2)马铃薯薯浸浸出出液液中中含含有有淀淀粉粉、蛋蛋白白质、脂脂质、无无机机盐、水水等等多多种种物物质，因因此此，除除氮氮源源外外其其中中还有有微微生生物物生生长所所需需要要的的碳碳源源、无无机机盐等等营养养要要素素。进入入细胞胞的的氮氮源源可可参参与与合合成成蛋蛋白白质、核核酸酸(DNA、RNA)等等含含氮氮的的生生物物大大分分子子。(3)加加入入显色色剂碘碘液液后后，淀淀粉粉遇遇碘碘变蓝，而而淀淀粉粉的的水水解解产物物则不不发生生这种种反反应。若若在在M培培养养基基中中用用淀淀粉粉取取代代蔗蔗糖糖，接接种种土土壤壤滤

31、液液并并培培养养，土土壤壤中中能能产生生淀淀粉粉酶的的微微生生物物可可将将淀淀粉粉分分解解，菌菌落落周周围就就会会出出现透透明明圈圈，这样，我我们就就可可以以通通过是是否否产生生透透明明圈圈来来筛选能能产淀淀粉粉酶的的微微生生物物了了。(4)乙乙同同学学的的结果果中中，1个个平平板板的的计数数结果果与与另另2个个相相差差太太远，说明明在在操操作作过程程中中可可能能出出现了了错误，结果果的的重重复复性性太太差，不能差，不能简单地将地将3个平板的个平板的计数数值用来求平均用来求平均值。答案答案(1)细菌选择细菌选择(2)碳源、无机盐蛋白质、核酸碳源、无机盐蛋白质、核酸(3)碘液淀粉遇碘液显蓝色，产

32、淀粉酶的菌落周围淀粉被水解，形成透明圈碘液淀粉遇碘液显蓝色，产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解，形成透明圈(4)乙同学的结果中，乙同学的结果中，1个平板的计数结果与另个平板的计数结果与另2个相差悬殊，结果的重复性差个相差悬殊，结果的重复性差3.(2019华大大新新高高考考联盟盟联考考)右右图图是是对对细细菌菌种种类类进进行行鉴鉴别别的的一一种种装装置置。实实验验时时先先向向小小试试管管中中注注满满pH6.8的的液液体体培培养养基基，再再把把小小试试管管倒倒置置放放入入含含相相同同液液体体培培养养基基的的大大试试管管中中。培培养养基基中中含含溴溴甲甲酚酚紫紫，该该指指示示剂剂在在pH6.8以以上上呈呈

33、紫紫色色，pH5.2以以下下呈呈黄黄色色。甲甲、乙乙、丙丙三三种种细细菌菌可可利利用用的的糖糖类和分解糖类的产物见下表。类和分解糖类的产物见下表。细菌种类细菌种类可利用的糖类可利用的糖类产生有机酸产生有机酸产生气体产生气体甲甲葡萄糖、乳糖葡萄糖、乳糖乙乙葡萄糖葡萄糖丙丙葡萄糖葡萄糖注：代表能注：代表能产生；代表不能生；代表不能产生。生。分析回答下列问题：分析回答下列问题：(1)用用接接种种环环挑挑取取菌菌种种，接接种种到到培培养养基基中中。接接种种环环在在使使用用_(填填“前前”、“后后”或或“前和后前和后”)应用应用_法灭菌。法灭菌。(2)现现有有两两种种培培养养基基，培培养养基基A以以乳乳

34、糖糖为为唯唯一一碳碳源源，培培养养基基B以以葡葡萄萄糖糖为为唯唯一一碳碳源源，若若要要鉴鉴别别出出甲甲、乙乙、丙丙三三种种细细菌菌，应应选选用用培培养养基基_。若若出出现现_现现象，则为细菌甲。象，则为细菌甲。(3)为为确确定定实实验验过过程程中中是是否否存存在在杂杂菌菌污污染染，本本实实验验还还应应设设置置一一组组对对照照，对对照照组组的的操操作作应应为为_。答案答案(1)前和后灼烧前和后灼烧(2)A和和B培养基培养基A(或或A和和B)变为黄色，小试管中有气泡变为黄色，小试管中有气泡(3)将未接种的培养基在相同条件下放置适宜的时间，观察培养基是否变浑浊将未接种的培养基在相同条件下放置适宜的时

35、间，观察培养基是否变浑浊澄清易错易混澄清易错易混强化科学思维强化科学思维易错易混易错易混易错点易错点1混淆两种混淆两种“对照组对照组”与与“重复组重复组”点拨点拨(1)两种两种对照照组作用比作用比较判断培养基中判断培养基中“是否有是否有杂菌菌污染染”，需将未接种的培养基同，需将未接种的培养基同时进行培养。行培养。判判断断选择培培养养基基“是是否否具具有有筛选作作用用”，需需设置置牛牛肉肉膏膏蛋蛋白白胨培培养养基基进行行接接种种后后培养，培养，观察两种培养基上菌落数目，察两种培养基上菌落数目，进行行对比得出比得出结论。(2)重复重复组的的设置及作用置及作用为排排除除偶偶然然因因素素对实验结果果的

36、的干干扰，在在每每一一稀稀释度度下下宜宜设置置3个个平平板板作作重重复复组，选择菌菌落落数数均均在在30300且且数数目目相相差差不不大大的的三三个个平平板板，用用“平平均均值”代代入入计数数公公式式予予以以计算菌落数。算菌落数。易错点易错点2不清楚为什么测定活菌的数量不能用平板划线法？不清楚为什么测定活菌的数量不能用平板划线法？点拨点拨由于在所划的由于在所划的线中，一般只有最后一次划中，一般只有最后一次划线的末端才会形成只由一个的末端才会形成只由一个细菌形成菌形成的菌落，而其他一些菌落往往由两个的菌落，而其他一些菌落往往由两个细菌或多个菌或多个细菌繁殖而成，而在菌繁殖而成，而在计数数时一个菌

37、一个菌落落对应着一个着一个细菌，菌，这样在划在划线所得的平板中，菌落数目所得的平板中，菌落数目远低于活菌的低于活菌的实际数数值，所以不能用平板划所以不能用平板划线法法测定活菌数量。定活菌数量。某某研研究究小小组组对对生生活活用用水水中中大大肠肠杆杆菌菌含含量量进进行行检检测测，并并研研究究在在高高盐盐度度(NaCl)工工业业废废水水中中提取可降解有机物的耐盐菌，请分析回答有关问题：提取可降解有机物的耐盐菌，请分析回答有关问题：(1)大肠杆菌进行检测的操作和配方图如下：大肠杆菌进行检测的操作和配方图如下：深度纠错深度纠错若若要要将将图图乙乙中中大大肠肠杆杆菌菌检检测测配配方方修修改改后后用用于于

38、培培养养可可降降解解高高盐盐度度工工业业废废水水中中有有机机物物的的耐耐盐菌，则应去除的成分有盐菌，则应去除的成分有_，同时需要添加的成分是，同时需要添加的成分是_。(2)将将高高盐盐度度工工业业废废水水采采用用平平板板划划线线法法接接种种在在含含3%NaCl的的固固体体培培养养基基上上(如如图图一一)。然然后后置置于于适适宜宜条条件件下下培培养养一一段段时时间间，观观察察形形成成的的菌菌落落特特征征；再再将将分分离离纯纯化化后后的的菌菌株株制制成成菌菌液液，取取等等量量菌菌液液，分分别别加加入入到到不不同同NaCl浓浓度度的的液液体体培培养养基基中中摇摇床床培培养养35小小时时，定定时时取取

39、样统计活菌数目，测定结果样统计活菌数目，测定结果(如图二如图二)。图图一一所所示示操操作作，第第一一次次划划线线前前灼灼烧烧接接种种环环的的目目的的是是_，第第二二次次及及之之后后的的几次划线前灼烧接种环的目的是几次划线前灼烧接种环的目的是_。图图二二所所示示活活菌菌数数目目在在进进行行统统计计时时，直直接接从从静静置置的的培培养养液液中中取取样样计计数数的的做做法法是是错错误误的的，正正确确的的操操作作是是将将培培养养液液_后后取取样样计计数数，且且每每种种浓浓度度需需设设3个个重重复复实实验验求求其其平平均均值。值。(3)由由图图二二可可知知，该该耐耐盐盐菌菌最最适适合合处处理理含含_(填

40、填浓浓度度)NaCl的的工工业业废废水水，原原因因是是_。解解析析(1)图乙乙中中伊伊红、美美蓝是是用用来来鉴别大大肠杆杆菌菌的的，因因此此若若用用于于培培养养可可降降解解高高盐度度工工业废水水中中有有机机物物的的耐耐盐菌菌，需需去去除除其其中中的的伊伊红、美美蓝，此此外外由由于于工工业废水水中中的的有有机机物物能能够作作为碳碳源源，还应去去除除乳乳糖糖这一一碳碳源源；作作为选择培培养养基基，同同时需需加加入入高高浓度度的的氯化化钠溶溶液液。(2)第第一一次次接接种种前前灼灼烧接接种种环的的目目的的是是防防止止杂菌菌污染染。接接种种后后接接种种环上上有有残残留留的的菌菌种种，因因此此第第二二次

41、次及及之之后后的的几几次次划划线前前灼灼烧接接种种环的的目目的的是是杀死死上上次次划划线后后接接种种环上上残残留留的的菌菌种种。取取样计数数时，需需将将培培养养液液振振荡摇匀匀，使使菌菌种种分分布布均均匀匀，再再吸吸取取培培养养液液。(3)分分析析图二二可可知知，处理理后后每每隔隔5小小时取取样检测时，3种种NaCl浓度度下下，均均是是NaCl浓度度为3%时该耐耐盐菌的相菌的相对数量最多，数量最多，这说明明该耐耐盐菌适合菌适合处理理NaCl浓度度为3%的工的工业废水。水。答案答案(1)伊红、美蓝、乳糖伊红、美蓝、乳糖(高浓度高浓度)氯化钠氯化钠(2)防止杂菌污染杀死上次划线后接防止杂菌污染杀死上次划线后接种环上残留的菌种种环上残留的菌种(使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端)振荡摇匀振荡摇匀(3)3%据图可知，在据图可知，在3种种NaCl浓度下，浓度下，NaCl浓度为浓度为3%时该菌的相对数量时该菌的相对数量最多最多