(江苏专用)高考生物总复习 第45讲 DNA的粗提取与鉴定课件-人教版高三全册生物课件.pptx
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1、第第4545讲讲 DNADNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定考点DNA的粗提取与鉴定的原理及步骤高考再现总总纲纲目目录录(1)提取思路:利用DNA和其他物质在理化性质方面的差异,提取DNA。1.DNADNA粗提取与鉴定的原理粗提取与鉴定的原理考点考点 DNADNA的粗提取与鉴定的原理及步骤的粗提取与鉴定的原理及步骤(2)DNA的性质2.DNADNA粗提取与鉴定的实验过程粗提取与鉴定的实验过程(以鸡血细胞为例以鸡血细胞为例)材料的选取:选用 DNA含量相对较高的生物组织破碎细胞:向鸡血细胞中加入 蒸馏水,用玻璃棒搅拌后,用纱布过滤并收集滤液去除杂质:利用DNA在不同浓度NaCl中 溶解度不同,通过
2、控制NaCl溶液浓度去除杂质DNA的析出:将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相等的、冷却的、体积分数为 95%的 酒精溶液DNA的鉴定:在溶有DNA的NaCl溶液中加入 二苯胺试剂,混合均匀后将试管在沸水中加热5min,溶液变成蓝色1.用菜花代替鸡血作为实验材料进行“DNA粗提取与鉴定”的实验,其操作步骤相同。()2.在提取DNA时,如果没有鸡血材料,可用猪血代替。()3.进行DNA粗提取与鉴定实验时,加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨。()4.用不同浓度的NaCl溶液反复溶解和析出DNA可去除杂质。()5.将丝状物溶解在2 mol/L的NaCl溶液中,加入二苯胺试剂即呈蓝色。()6.利用鸡
3、血进行“DNA粗提取与鉴定”的实验中,将丝状物溶解在2mol/LNaCl溶液中,加入二苯胺试剂即呈蓝色。()下图是“DNA粗提取与鉴定”实验的相关操作步骤,请仔细观察并分析:(1)操作都加入蒸馏水,其目的相同吗?。(2)操作加入酒精的目的是,此时搅拌要注意。(3)加入2 mol/L NaCl溶液的目的是。答案答案(1)不相同,使鸡血细胞吸水涨破释放核物质,是稀释NaCl溶液使其浓度接近0.14 mol/L(2)析出DNA,去除溶于酒精的杂质沿一个方向轻缓地搅拌(3)使DNA再次溶解1.操作过程、方法及注意问题操作过程、方法及注意问题实验过程材料方法及注意问题理由实验材料的选取动物细胞除哺乳动物
4、的成熟红细胞以外的活细胞成熟的哺乳动物红细胞没有细胞核(或不含DNA)植物细胞选取植物活细胞植物活细胞含有细胞核破碎细胞,获取含有DNA的滤液动物细胞加入一定量的蒸馏水,并用玻璃棒搅拌细胞吸水涨破,用玻璃棒搅拌加速细胞破裂植物细胞加入洗涤剂和食盐,搅拌时速度要缓慢,防止出现大量泡沫食盐能够溶解DNA并使研磨充分,洗涤剂溶解细胞膜实验过程材料方法及注意问题理由去除滤液中的杂质氯化钠、蒸馏水在含有DNA的滤液中加入氯化钠使其浓度为2 mol/L,过滤,取滤液,除去不溶的杂质向中的滤液中加入一定量的蒸馏水,调节浓度为0.14 mol/L,析出DNA,过滤,除去溶液中的杂质再用2 mol/L氯化钠溶液
5、溶解DNADNA在不同浓度氯化钠溶液中溶解度不同,氯化钠浓度为0.14 mol/L 时,溶解度最低嫩肉粉向含有DNA的滤液中直接加入嫩肉粉,并反应1015 min 嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质恒温水浴箱将含有DNA 的滤液放在6075 水中保温1015 min在此温度范围内,蛋白质变性析出,DNA没有变性实验过程材料方法及注意问题理由DNA析出冷却的95%的酒精向除去杂质的滤液中加入等体积的冷却的95%的酒精,静置23 min,并用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起白色丝状物冷却的95%的酒精能够降低温度促进DNA析出,同时也能够溶解杂质。玻璃棒沿一个方向搅拌可防止DNA分子断裂2.2.特别提醒
6、特别提醒(1)加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要轻缓,以免加剧DNA分子的断裂。(2)尽量使用塑料器具,因为DNA易被玻璃制品吸附,影响最终提取量。提取用于鉴定时可用玻璃棒卷出。(3)冷却的酒精溶液具有以下优点:抑制核酸水解酶活性,防止DNA降解。降低分子运动易于形成沉淀析出。低温有利于增加DNA分子的柔韧性,减少断裂。(4)玻璃棒在DNA提取中的作用第一次是沿同一个方向快速搅拌,加速鸡血细胞的破裂,利于释放DNA、防止打碎DNA分子。中间步骤是沿同一个方向缓慢搅拌,防止打碎DNA,避免提取的DNA分子过少,影响实验效果。最后一次是沿同一个方向缓慢搅拌并轻轻旋转,防止打碎DNA,利于絮状物缠在玻
7、璃棒上。考向一考向一DNADNA粗提取与鉴定的原理粗提取与鉴定的原理1.(2018江苏南京、盐城一模)下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述,错误的是(B B)A.鸡血细胞是较理想的实验材料B.NaCl溶液浓度越高,DNA的溶解度越大C.在用酒精析出DNA时,最好使用95%的冷酒精D.DNA溶液中加入二苯胺试剂,沸水浴加热,检测结果呈蓝色解析解析 鸡血细胞含有细胞核,细胞核内含有DNA,且鸡血容易获得,因此提取DNA时常选用鸡血作为实验材料,A正确;当NaCl溶液的浓度低于0.14 mol/L时,随着NaCl溶液浓度的升高,DNA的溶解度逐渐降低,当NaCl溶液的浓度高于0.14 mol/
8、L时,随着NaCl溶液浓度的升高,DNA的溶解度逐渐升高,B错误;DNA不溶于酒精溶液,95%的冷酒精凝集效果最佳,C正确;在DNA粗提取和鉴定实验中,DNA溶液中加入二苯胺试剂后需水浴加热呈蓝色,D正确。2.下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验原理的叙述正确的是(B B)A.DNA在NaCl溶液中的溶解度,随NaCl溶液浓度的降低而减小B.利用DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNAC.DNA是大分子有机物,不溶于水而溶于某些有机溶剂D.温度在80100 下,蛋白质会变性,而DNA不会解析解析 DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中的溶解度最低,高于或低于这个
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