(新课标)高考生物一轮复习 专题25 基因工程课件-人教版高三全册生物课件.ppt
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1、第九单元现代生物科技专题专题25基因工程高考生物高考生物考点一考点一基因工程的原理和技术基因工程的原理和技术知识清单知识清单 一一基因工程的概念基因工程的概念1.概念概念:按照人们的愿望,进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。2.优点优点(1)与杂交育种相比:克服了远缘杂交不亲和的障碍。(2)与诱变育种相比:可定向改造生物的遗传性状。二二基因工程的工具基因工程的工具1.限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶(简称限制酶简称限制酶)(1)来源:主要从原核生物中分离纯化出来。(2)特点:能够识别双链DNA分子的某种特
2、定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。(3)结果:产生黏性末端或平末端。2.DNA连接酶连接酶(1)作用:连接双链DNA片段,恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。(2)种类3.载体载体(1)条件:能在受体细胞中复制并稳定保存;具有一至多个限制酶切点;具有标记基因。(2)种类三三基因工程的操作程序基因工程的操作程序1.获取目的基因获取目的基因(1)目的基因:主要指编码蛋白质的基因。(2)方法2.基因表达载体的构建基因表达载体的构建基因工程的核心基因工程的核心(1)目的(3)构建过程3.将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞4.目的基因的检测与鉴定
3、目的基因的检测与鉴定1.基因组文库与部分基因文库不同基因组文库与部分基因文库不同 2.与与DNA有关的四种酶的辨析有关的四种酶的辨析3.限制酶选择时的两种特例限制酶选择时的两种特例(1)限制酶具有特异性,一般情况下,不同限制酶形成的黏性(或平)末端不同。但也有不同限制酶处理后形成的黏性(或平)末端相同,可以用DNA连接酶进行连接。如:GGATCC和GATC识别的序列不同,但处理后的末端相同。(2)为了避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接,也可使用相同的两种限制酶(如下图用BamH和Hind)分别切割目的基因和质粒,形成分别对应的相同黏性末端进行连接。4.PCR技术与体内技术与体内DNA复制的
4、比较复制的比较例例1(2016课标全国,40,15分)图(a)中的三个DNA片段上依次表示出了EcoR、BamH和Sau3A三种限制性内切酶的识别序列与切割位点,图(b)为某种表达载体的示意图(载体上的EcoR、Sau3A的切点是唯一的)。根据基因工程的有关知识,回答下列问题:(1)经BamH酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被酶切后的产物连接,理由是。(2)若某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子,如图(c)所示。这三种重组子中,不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有,不能表达的原因是。(3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有和,其中既能连
5、接黏性末端又能连接平末端的是。解析解析(1)分析图(a)可知,限制酶Sau3A与BamH切割DNA后形成的黏性末端相同,故经这两种酶切割得到的产物可以用DNA连接酶进行连接。(2)构建基因表达载体时,为保证目的基因能在宿主细胞中成功表达,目的基因应插入在启动子和终止子之间,据此可判断甲、丙均不符合要求,目的基因均不能被转录。(3)常见的DNA连接酶有Ecol-iDNA连接酶和T4DNA连接酶,其中T4DNA连接酶既能连接黏性末端又能连接平末端。答案答案(1)Sau3A两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端(每空2分,共4分)(2)甲和丙(2分)甲中目的基因插入在启动子的上游,丙中目的基因插入
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