(通用版)高考生物二轮复习 专题十 现代生物科技专题 考点29 基因工程、蛋白质工程和细胞工程课件-人教版高三全册生物课件.ppt
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1、第一篇专题十现代生物科技专题考点29基因工程、蛋白质工程和细胞工程直击考纲1.基因工程的诞生()。2.基因工程的原理及技术(含PCR技术)()。3.基因工程的应用()。4.蛋白质工程()。5.植物的组织培养()。6.动物细胞培养与体细胞克隆()。7.细胞融合与单克隆抗体()。8.动物胚胎发育的基本过程与胚胎工程的理论基础()。9.胚胎干细胞的移植()。10.胚胎工程的应用()。11.转基因生物的安全性()。12.生物武器对人类的威胁()。13.生物技术中的伦理问题()。14.简述生态工程的原理()。15.生态工程的实例()。静悟提纲核心点拨栏目索引题组特训静悟提纲1.基因工程常考的基因工程常考
2、的3种基本工具种基本工具(1)限制性核酸内切酶:识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并在特定位点上切割DNA分子。(2)DNA连接酶:Ecoli DNA连接酶只能连接黏性末端;T4 DNA连接酶能连接黏性末端和平末端。(3)载体:能在宿主细胞内稳定存在并大量复制;有一个至多个限制酶切割位点,供外源DNA片段(基因)插入其中;具有特殊的标记基因以便对含目的基因的受体细胞进行鉴定和选择。核心点拨2.基因工程的基因工程的4大操作程序大操作程序(1)目的基因的获取从基因文库中获取。利用PCR技术扩增a.原理:DNA双链复制。b.条件:模板DNA、引物、游离的脱氧核苷酸、热稳定的DNA聚合酶。用化学
3、方法直接人工合成。(2)基因表达载体的构建基因表达载体模式图基因表达载体的构建过程(3)将目的基因导入受体细胞导入植物细胞:农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法。导入动物细胞:显微注射技术。导入微生物细胞:感受态细胞法(用Ca2处理)。(4)目的基因的检测与鉴定插入检测:DNA分子杂交技术。转录检测:DNARNA分子杂交技术。翻译检测:抗原抗体杂交。个体水平检测:抗性接种实验。3.图解记忆蛋白质工程图解记忆蛋白质工程4.比较记忆植物组织培养与动物细胞培养比较记忆植物组织培养与动物细胞培养项目植物组织培养动物细胞培养取材植物幼嫩部位动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织过程结果获得植株个体,可
4、以体现全能性新的细胞,不形成个体,不体现全能性条件无菌;营养;适宜条件无菌、无毒;营养、血清等;温度和pH;气体环境:O2、CO25.植物体细胞杂交与单克隆抗体制备过程比较植物体细胞杂交与单克隆抗体制备过程比较步骤植物体细胞杂交过程单克隆抗体制备过程第一步原生质体的制备(酶解法)正常小鼠免疫处理第二步原生质体融合(物理、化学法)动物细胞融合(物理、化学、生物方法)第三步杂种植株的筛选与培养杂交瘤细胞的筛选与培养第四步杂种植株的诱导与鉴定单克隆抗体的提纯相同点两种技术手段的培养过程中都进行有丝分裂,都是无性繁殖,都可称为克隆,都不涉及减数分裂;均为无菌操作,需要适宜的温度、pH等条件(1)诱导融
5、合的方法分别有哪些?融合的细胞类型有哪几种(仅考虑两两融合的细胞)?提提示示诱导植物体细胞的原生质体融合的方法主要有离心、振动、电激或用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂。动物细胞融合常用的诱导因素有聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒(诱导动物细胞融合的特有因素)、电激等。融合的细胞类型:前者AA、BB、AB。后者瘤瘤、B瘤、BB。(2)各自的原理分别有哪些?提示提示前者有细胞膜的流动性和植物细胞的全能性,后者有细胞膜的流动性和细胞增殖。6.掌握克隆动物培育的流程掌握克隆动物培育的流程7.理清单克隆抗体制备的过程理清单克隆抗体制备的过程题组一基因工程和蛋白质工程题组一基因工程和蛋白质工程1.(2018保
6、定一模)1-抗胰蛋白酶是肝脏产生的一种糖蛋白,缺乏会引起肺气肿,某公司成功研制出转基因羊,进入泌乳期后,其乳汁中含有人类的1-抗胰蛋白酶,用于治疗肺气肿,回答下列问题:(1)为获取目的基因,需要在肝细胞中提取_,通过反转录产生cDNA,再通过_技术进行快速扩增。123456题组特训mRNAPCR答案解析解解析析1-抗胰蛋白酶基因在肝细胞中表达,所以可以在肝细胞中提取mRNA,反转录产生相应cDNA,再通过PCR技术扩增。(2)将1-抗胰蛋白酶基因与乳腺蛋白基因的_等调控组件重组在一起,构建基因表达载体,然后通过_技术,导入羊的受精卵中。启动子(或启动子、终止子)显微注射答案解析解解析析为了使1
7、-抗胰蛋白酶基因在乳腺细胞中表达,需要将其与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组,构建基因表达载体,然后通过显微注射技术,导入羊的受精卵中。123456(3)受精卵通过早期胚胎培养,一般发育到_阶段,通过胚胎移植到受体子宫中孕育,为选育出能泌乳的雌羊,移植前须从胚胎的_部位取样,做DNA分析鉴定性别。桑椹胚或囊胚滋养层答案解析解解析析牛和羊的胚胎一般发育到桑椹胚或囊胚阶段,再进行胚胎移植;DNA分析鉴定性别须从胚胎的滋养层取样,这样既保证了遗传信息一致,又不影响内细胞团的进一步发育。123456(4)1-抗胰蛋白酶是一种结构较复杂的糖蛋白,因此用上述方法生产,相对传统的转基因大肠杆菌生产,优势在
8、于_。具备蛋白质加工的能力羊细胞有内质网和高尔基体,答案解析解解析析糖蛋白的形成需要进行蛋白质的加工,相对于原核细胞而言,羊细胞有内质网和高尔基体,具备蛋白质加工的能力。1234561234562.人乳铁蛋白是一种重要的药用保健蛋白。下图表示利用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的过程,图中Tetr表示四环素抗性基因,Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,五种限制酶的识别序列及切割位点如表所示,请回答以下问题:(1)要将人乳铁蛋白基因插入质粒,若只允许使用一种限制酶,应选择的限制酶是_,酶能起催化作用的原理是_。123456Sau3A可以显著降低化学反应的活化能答案解析(2)据图分析,筛选含有重组质粒的受
9、体细胞首先需要在含_(填“四环素”“氨苄青霉素”或“四环素或氨苄青霉素”)的培养基上进行,原因是_。123456氨苄青霉素用限制酶切割后破坏了Tetr基因,但不会破坏Ampr基因,导入重组质粒的受体细胞(对氨苄青霉素具有抗性),能在含氨苄青霉素的培养基上生存下来答案解析解解析析用限制酶Sau3A切割后会破坏四环素抗性基因(Tetr),但不会破坏氨苄青霉素抗性基因(Ampr),导入重组质粒的受体细胞能在含有氨苄青霉素的培养基上生存下来。因此筛选含有重组质粒的受体细胞首先需要在含氨苄青霉素的培养基上进行。(3)若BamH酶切的DNA末端与Bcl酶切的DNA末端连接起来,连接部位的6个碱基对序列为_
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