抗核抗体谱检测及临床意义虞伟.pptx

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1、两者的关系自身免疫也就是产生自身抗体和的现象。正性应答、样作用 而被清除。-“清道夫清道夫缔合性（）特异性抑制作用免疫网络，自身免疫和自身免疫病自身抗体在自身免疫病诊断中的价值与临床意义南京军区南京总医院全军临床检验医学研究所报告人：虞 伟自身免疫病的分类1.器官特异性自身自身免疫（autoimmunity）:指机体免疫系统对自身抗原产生免疫应答也就是产生自身抗体和/或自身致敏淋巴细胞的现象。自身免疫病（Autoimmunity Diseases）:指免疫系统对宿主自身抗原发生正性应答、造成其组织或器官的病理性损伤、影响其生理功能、并最终导致各种临床症状的状态。自身免疫引起疾病;疾病引起自身免

2、疫;某些因素引起前两者;自身免疫病相关学科免疫病：局限某特定器官,器官特异性抗原引临床特征症状：发热、雷诺现急诊免疫学肾内起的免疫应答导致自身免疫病。象、晨僵等体征：关节肿胀、皮2.非器官特异性自身免疫病疹、肌无力等辅助检查皮肤自身免疫病（风湿病）血液病变见于多种器官及结缔组织；又称结缔组织病或胶自身抗体(ANA,dsDNA,RF,AnuA)、免疫球蛋白,骨科呼吸消化原病。补体,常规化验及影像学检查等大量误诊病例自身免疫病的基本特征：血液中测得高效价的自身抗体/致敏淋巴细胞。自身抗体/致敏淋巴细胞作用于自身组织而引起损伤或功能紊乱。动物实验可复制出相似的病理模型。确认自身免疫病的条件：证实自身

3、抗体或自身反应性T细胞的存在；找到自身抗原；用该自身抗原免疫动物能够诱发同样的自身免疫病；通过被动转移实验证实抗体或者T细胞的致病能力。关于自身抗体的作用天然自身抗体(natural autoantibody)清道夫”样作用以可溶性CIC而被清除。-非特异性低亲和力Auto-Ab，可阻止自身抗原与自身反应性细胞的作用-缔合性缔合性（connectivity）特异性抑制作用：可形成独特型(Id)-抗独特型抗独特型(A-Id)免疫网络，使自身抗体不致过度产生，有利于维持机体内环境的相对稳定。1破坏细胞。沉积局部:的理解已不再局限于核成分，Sm抗体与 CCP抗体与而非选干扰素；抗体等。常规检查对AI

4、D诊断、分类：抗体（复合物）抗体（抗 和类风湿因子（）等多种自身抗体的检测。类风湿因子(RF)试验：尚未在临床广泛推广，金标准”抗体、-抗核抗体抗核抗体单特异性自身抗体确认)多肽抗体谱)、病理性自身抗体自身抗体引起的细胞破坏:激活补体、调理吞噬、介导ADCC破坏细胞。如自身免疫性溶血性贫血、药物过敏性血细胞减少症。抗受体抗体与受体结合：刺激或阻断细胞的功能。如Graves 病、重症肌无力。自身抗体与自身抗原形成ICIC沉积局部:活化补体引起组织、细胞损伤。如系统性红斑狼疮、类风湿关节炎。抗细胞外成分自身抗体与相应物质结合:激活补体、调理吞噬作用杀伤破坏自身细胞。如肺出血肾炎综合征。抗核抗体（A

5、NA）传统定义：顾名思义是指抗细胞核抗原成分的自身抗体的总称（狭义定义）；现代定义：指抗细胞内所有抗原成分的自身抗体的 总称。对ANA的理解已不再局限于核成分，而是指抗核 酸（nucleic acid）和核蛋白（nucleoprotein）抗体的总称（广病理性自身抗体的临床意义疾病诊断与鉴别诊断：如：抗dsDNA、抗 抗体与SLE；抗 抗体与RA；AoAb与POF、女性不育、流产者有关；疾病分期：如：EM-Ab 与EMT、女性不育有关；EM-Ab在EMT 期阳性率依次为86%、60%、43%和14%；疾病监测、预后判定如：抗dsDNA,ANA为SLE疾病活动标志指导临床用药：如：ANA、ASM

6、A（+）与AIH-1 激素治疗,而非选干扰素；与疾病的临床表现有关：抗CCP抗体等。因此，自身抗体常规检查对AID诊断、治疗与病情监测至关重要!抗核抗体谱（ANAs）分类根据细胞内靶抗原分子理化特性和分布部位将ANAs分类：抗DNA抗体抗体（anti-dsDNA，anti-ssDNA）抗组蛋白抗体（histons:H1,H2A,H2B,H3,H4,H2A-H2B复合物复合物）抗ENA抗体抗体（抗体:Sm,nRNP,SSA/Ro,SSB/La,rRNP,Scl-70,Jo-1,PCNA,RA33,Ku,RANA,义定义）；ANAs抗非组蛋白抗体Mi-1,Mi-2,PL-7,PL-12.）靶抗原分

7、布：细胞核成分；细胞核、细胞浆、细胞骨架、细胞分裂周期抗核抗体用于疾病诊断的临床应用指南抗着丝点抗体（anti-CENP-A,B,C，D，F，G）抗核仁抗体（抗体:RNA-polymerase-1,PM-Scl/PM-1，Th/To,U3nRNP/Fibrillaria，4-6-S-RNA）抗其他细胞成分抗体（高尔基体，中心体，纺锤体，线粒体，溶酶体，肌动蛋白，Vimentin，细胞角蛋白，Lamin)自身抗体免疫学测定方法（%）琼脂双向扩散或对流免疫电泳-抗抗ds-DNA，抗Sm，抗U1RNP和类风湿因子和类风湿因子（RF）胶乳凝集试验:类风湿因子Farr试验试验：抗ds-DNA抗体抗体放射

8、免疫沉淀法：-尚未在临床广泛推广尚未在临床广泛推广，但已有报道用于抗U1,U2,U3-RNP等多种自身抗体的检测等多种自身抗体的检测。间接免疫荧光技术：细胞内抗原自身抗体筛查的“金标准抗核抗体(ANA)、抗ds-DNA抗体抗体、抗平滑肌抗体(ASMA)、ANCA等等酶联免疫吸附试验(ELISA):单特异性自身抗体确认免疫印迹免疫斑点技术(单特异性自身抗体确认-ANA谱谱(含含ENA多肽抗体谱多肽抗体谱、AMA(M2/M4/M9)、抗LKM-1、抗LC-1、抗SLA/LP等等悬浮芯片/或液态芯片技术微阵列免疫芯片技术2皮肤、多脏器和/或 症状，排除类似特定组织、阳性等）-球蛋白 增高、RibP蛋

9、白均质型)955050SLE。60S的标志抗体.系统性自身免疫病相关自身抗体谱临床症状与特征有难以解释的皮肤、关节、血管及多脏器和 或多系统损害症状，后者可影响包括肝、肾、肺、胸腺、胰腺、甲状腺、胃肠道及神经和血液系统等表现核染色体染色质核小体DNA染色体染色质疑似自身免疫病患者注意排除类似特定组织、器官及肿瘤和感染性疾病，并与之鉴别常规实验室（含临检、生化、免疫和病原体）检查，免疫功能异常者（如血清 球蛋白、IgG增高、补体降低和CIC阳性等）血清自身抗体指标测定抗nRNP,抗Sm,抗SS-A,抗SS-B,ASMA,抗LKM-1,抗pANCA,cANCA抗Scl-70,抗PM-Scl,抗Jo

10、-1,抗PCNA抗 蛋白,ANucA,抗dsDNA等（+）LC-1,抗SLA/LP,AMA:-M2/M4/M9抗PR3,抗MPO（+）核小体ANA(IIF)抗dsDNA抗心磷脂抗CCPAILD抗体谱ANCA抗GAbASCA抗PCA抗TG抗GAD抗2GPIAKA,RF抗PAb抗IFAb抗TPO抗IA2抗TSHR抗IAA组蛋白DNASLE、MCTD、SS、PSS、DM/PM、APS、RA、AIH、PBC、PSC、MPA、WG、CSS、UC、CD、萎缩性胃炎、恶性贫血、Graves 病、桥本氏甲状腺炎、型糖尿病核小体:是染色体功能亚单位,为DNA与组蛋白的复合体ANA(均质型)抗RNP/Sm抗体抗体

11、系统性红斑狼疮相关自身抗体抗 体抗核抗体(ANA)dsDNA抗体抗Sm抗体膜DNA抗体核小体抗体U1RNP抗体SS-A 抗体SS-B 抗体抗心磷脂抗体类风湿因子敏感性(%)99702578855025-351520-4025特异性(%)809599949287-9470407530主要相关自身抗体:抗ds-DNA,核小体和组蛋白抗体等.主要见于SLE。抗原:核糖体60S亚单位的3种蛋白：P0,P1,P2 (38,19,17 kDa)。在碳端的具有相同的免疫反应表位。疾病:SLE:5%-15%;,为SLE的标志抗体.PCNA抗体组蛋白抗体核蛋白抗体530-80583%RA*%RA*dsDNA、蛋

12、白的一个多肽序列（Sm复合抗原物中复合抗原物中可以达到70%，(IBT)法病情活动度及肾损害有关，SLE继发肾病的敏感性和特异性分别为继发肾病的敏感性和特异性分别为0/503/500/50和双链DNA自身抗体检测 其敏感性和特异性分别为91%AnuA及抗dsDNA-NcX抗体在特异性为91%SLE中的阳性率为中的阳性率为dsDNA抗体的产生具有相关性抗体的产生具有相关性N-甲基甲基研究证实RA相关自身抗体抗体：口腔)大鼠)症状前）抗体：患者：抗体阳性、阳性）抗体临床诊断价值小结:(无症状正常人患者)骨破坏时,三种不同方法抗dsDNA、ANcA检测结果及在抗SmD1抗体抗体 SLE诊断的新标记诊

13、断的新标记 靶抗原：为 复合抗原物中Dl蛋白的一个多肽序列（氨基酸80-l19）SLE疾病诊断中的价值 SLE：阳性率可以达到 ，其他疾病中少见 原因：抗Sm自身抗体直接与一个隐蔽的多肽表位结合自身抗体直接与一个隐蔽的多肽表位结合研究组别及考察指标IIFT法抗dsDNA抗dsDNA免疫印迹(IBT)法AnuA 抗dsDNA/AnuA抗dsDNAELISA法抗dsDNA-NcX抗C1q抗体抗体研究组别:自身抗体阳性例数/样本检测例数(%)与SLE病情活动度及肾损害有关病情活动度及肾损害有关，适于监测狼疮性肾炎的活动度 对 继发肾病的敏感性和特异性分别为86%和95%系统性红斑狼疮疾病对照组38/

14、875/9838/807/9842/805/9848/809/9850/875/4256/873/42 联合采用C1q和双链 自身抗体检测,其敏感性和特异性分别为和90%正常对照组 1/50 0/50 0/50抗dsDNA,及抗dsDNA 抗体在SLESLE疾病诊断中的价值抗端粒抗体 在 中的阳性率为60%,特异性为 该抗体与抗 抗体的产生具有相关性,可能是一种新的高特异性SLE相关抗体相关抗体抗 甲基-D-天冬氨酸受体抗体研究证实，该抗体与狼疮患者精神症状的发生有关。敏感性(%)特异性(%)Youden指数阳性似然比阴性似然比阳性预测值阴性预测值43.795.90.39610.661.288

15、0.8640.74347.595.30.42810.111.1050.8440.7752.596.60.49115.440.9050.8940.7960.093.90.5399.840.6670.8420.81357.591.30.4886.610.7390.8620.69464.496.70.61119.520.5530.9490.742与各自的疾病对照组和正常对照组比,P0.01-临床检验杂志.2009;27(4):292-294相关自身抗体:APFAFAAKA抗CCP抗体抗CCP抗体：可出现于RA临床症状之前抗CCP抗体阳性抗核周因子(APF;1964)核心抗原多肽衍生物:环瓜氨酸肽抗C

16、CP抗体抗体抗角蛋白抗体(AKA;1979)70%RA患者80%靶抗原:纯化的丝聚蛋白AFAELISA方法测定50%60%40%上皮细胞(口腔靶抗原:前丝聚蛋白去磷酸化产物抗丝聚蛋白自身抗体(APF AFA AKA)敏感度:35-80%食管(大鼠靶抗原:食道上皮前丝聚蛋白及其酸性异构体10%20%0%特异性:70-99%108642什么是丝聚蛋白的抗原位点?年（开始出现RA症状前）Rantapa-Dahlqvist et al.,Arthritis Rheum,2003开始出现症状抗CCP抗体：发展到RA的标志从普通的关节炎（UA）发展到RA(318名UA患者：22%抗CCP抗体阳性、22%I

17、gM-RF阳性）抗CCP抗体临床诊断价值小结10075抗CCP抗体抗体抗CCP抗体阳性抗体阳性抗CCP抗体阴性抗体阴性93%10075IgM-RFIgM-RF阳性阳性IgM-RF阴性阴性75%对RA患者具有良好的敏感度和特异性与类风湿因子平行检测可提高RA患者血清学的诊出率可检测RA临床症状出现前的人群 无症状正常人、未明5050确的关节炎患者以及早期的RA患者2525%2531%对于关节侵蚀损伤具有较高的阳性预测值0012300123已经列入2009年ACR/EULAR RA分类标准和评分系统（随访）年随访（年）PPV 93%,NPV 75%*根据ACR标准诊断PPV 75%,NPV 69%

18、Van Gaalen et al.,Arthritis Rheum,2004无影像学典型RARA骨破坏时,依据评分表评分6分确诊为RA4年分类标准（3个关节炎 ），持续肿胀），持续至少6周阳性。4条阳性即可诊断8%注1234高度特异)、肾微粒体抗体（诊断与鉴别诊断、-与疾病活动性相关型抗体（*-与疾病活动性相关抗体）抗体）AMA）：强烈提示为PBC*-高滴度抗体）为何 RA 的诊断标准（ACR）不停地发生变化？类风湿关节炎相关自身抗体1987年分类标准（RA）名 称敏感性(%)特异性(%)1958年标准1、晨僵1h，持续至少6周；2、个关节炎（肿胀），持续至少6周；类风湿因子RA33/36抗体

19、抗体50-7025-458693.61963年标准1987年标准2009年标准均不能满足RA早期诊治要求抗CCP抗体增列其中3、手关节（腕、掌、指关节）炎（），持续至少 周；4、对称性关节炎（肿胀）；5、类风湿皮下结节；6、影像学检查可见关节骨质破坏（侵蚀性）；7、RF阳性。Sa抗体抗体抗角蛋白抗体抗核周因子抗CCP抗体抗体抗CB10抗体抗体抗BiP抗体抗体373338-6260-70727078-9787-9270-909670-8892 条阳性即可诊断RA。自身免疫性肝病Autoimmune liver diseases（AILD）主要包括三种与自身免疫密切相关的，以肝、胆损伤为主的疾病,

20、PBCAMAANASMA特殊类型的肝病，其诊断和治疗完全不同于一般慢性病毒性肝炎 自身免疫性肝炎（AIH）-Autoimmune hepatitisHCVLKMANA10%Autoimmun-10%AICAMA neg.PBC 原发性胆汁性肝硬化（PBC）-Primary biliary cirrhosisHepatitis 原发性硬化性胆管炎（PSC）-Primary sclerosing cholangitis 自身免疫性胆管炎（AIC）-Autoimmune cholangitis(AMA-negative PBC)重叠综合征（Overlap Syndrome）13%Andere(?)6

21、%PSCANAANCA指标/特性自身免疫性肝炎积分系统(1999)分值 注 指标/特性 分值AILD相关自身抗体谱女性ALP/AST (或 ALT)比值3.0血清球蛋白或IgG2.01.5-2-01:801:801:401:40AMA阳性病毒性肝炎指标阳性阴性用药史阳性阴性烈酒日平均摄入量60 g/day+2+20-2+3+2+10+3+2+10-4-3+3-4+1+2-2肝组织学界面性肝炎淋巴细胞浸润为主肝细胞玫瑰花无以上情况胆道改变其他改变其他自身免疫性疾病其他重要指标其他特异性AutoAbHLA DR3 or DR4对治疗的反应完全复发累计分的提示治疗前明确的AIH可能的AIH治疗后明确

22、的AIH可能的AIH+3+1+1-5-3-3+2+2+1+2+31510-151712-1756789101112 抗核抗体(ANA)：多核点型抗体(高度特异、抗组蛋白抗体、抗DNA抗体 抗核膜抗体-核复合体210kDa糖蛋白抗体-核心蛋白p62抗体-核纤层蛋白B受体抗体 抗平滑肌抗体（ASMA）*-ANA/SMA 同时出现,1型AIH诊断与鉴别诊断 抗肝-肾微粒体抗体（抗LKM-1）*-2型AIH诊断与鉴别诊断、判断预后 抗去唾液酸受体抗体（抗ASGPR）*与疾病活动性相关(各型AIH)抗可溶性肝抗原抗体（抗SLA/LP）*-诊断与鉴别诊断(3型AIH)抗肝细胞溶质抗原I型抗体（抗LC-1）

23、与疾病活动性相关(2型AIH)抗肝细胞膜抗原抗体（抗LMA抗体）抗肝特异性蛋白抗体（抗LSP抗体）抗胆管、胆小管抗体 *-PSC诊断与鉴别诊断 抗胃壁细胞抗体（PCA）抗线粒体抗体（）：M2/M4/M8/M9 高滴度AMA-M2,强烈提示为 抗中性粒细胞胞浆抗体（pANCA）*-PSC诊断与鉴别诊断 抗甲状腺抗体（抗TG、抗TPO抗体）抗板层素抗体（A/C）*-PBC诊断与鉴别诊断 类风湿因子（RF）5核点型（好发于青年人。是一组以血管纤维素样坏死，的一种全身性疾病。患者并发溃疡性结肠炎。相关。抗体。(ERCP)等技术免疫沉积；Type I-AIHANA and ASMAType-AIH:LK

24、M-1 and LC-1 Detection:IIFT,ANA(HEp-2 cells)ASMA(rat stomach)ASMA:LKM(rat kidney)LC-1(liver rat)ELISA,Immunoblot A-LKM-1Detection:IIFTPrevalence:40-90%Prevalence:2-4%(more common inchildhood AIH)Target antigen:Actin(HEp-2 cells)ANA:Detection:IIFT Actin(primate liver)Prevalence:5-70%Target antigens:v

25、arious,e.g.dsDNA(20%)High titers and ASMA suggest AIHTarget antigens:various,mostly F-actinHigh titers anti-F-actin and ANAsuggest AIH(ANA seen in 70-80%of the patientsbut not specific forAIH)LKM(rat liver)Cytochrome p4502D6 Occurs also inHepatitis C More severedisease?LC-1 Prevalence:1-2%Target ant

26、igen:FTCD(formiminotransferasecyclodeaminase)PBC:AMA,ANA-nuclear dot,nuclearmembranePBC:Diagnosis abnormal liver function testsAMA(95%)Sens:90-95%Spec:96%抗核点抗体(30%)抗核膜抗体(2%)alkaline phosphatase usually 3-4 times elevated normal or minimally elevated transaminases(3x)elevated serum cholesterol and Ig

27、M often seen jaundice,hypoalbuminemia,and coagulopathy seen inlater stages of the diseaseserologic testing AMA present in 90-95%(the best have sens=98%,spec=96%)RF found in 70%ASMA in 66%anti-thyroid in 40%ANA in 35%ANA:核点型核点型（anti-sp100）in 30%ANA:核核膜型 in 2%1）Cholesterol：胆固醇2）jaundice,hypoalbuminemi

28、a,and coagulopathy：黄疸，低蛋白血症，消耗性凝血病原发性硬化性胆管炎(PSC)以肝内外胆管炎症、纤维化为特征的慢性疾病。PSC好发于青年人。主要症状有疲劳、骚痒、色素沉积、黄斑瘤和黄疸。系统性血管炎（SV）基本概念：基于血管壁的炎症（动脉受累为主），），是一组以血管壁炎症（炎性细胞浸润）和血管壁纤维素样坏死，并导致多系统损害的一种全身性疾病。近70%患者并发溃疡性结肠炎。与HLA-B8、-DR3、-DRW52相关。60-70%有pANCA，10有LSP和ASGPR抗体。胆胰造影(ERCP)等技术，提高该病的诊断率。主要免疫病理改变：单核粒细胞浸润；可见有IgG/IgM 或Ig

29、A免疫沉积；过敏反应类型：可见、和 型；每种疾病各有其模式（Disease pattern)normal liver“onion skin fibrosis”in PSC6方法：靶抗原进行确认，捕获法的应用提高了检测敏感度;MPA的敏感度分别为系统性血管炎发病机制ANCA-vasculitis细菌、立克次体螺旋体、病毒直接损伤乙肝病毒A b+A g(CIC)激活补体中性粒细胞抗内皮细胞抗体抗基底膜抗体单核细胞ANCAJ.CHARLESJENNETTE,AND RONALD J.FALK,The New England Journal of Medicine抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）ANC

30、A=Anti-Neutrophil Cytoplasm AutoantibodiescANCA(靶抗原间接免疫荧光法：4种核型1、cANCA：靶抗原为PR3;2、pANCA：靶抗原为MPO（甲醛抗性）;3、非MPO-pANCA：不提示血管炎，而提示炎症性肠病或其它自身免疫性疾病;（甲醛敏感）中性粒细胞为弱阳离子或中性蛋白,如PR3等)pANCA(靶抗原为强阳离子蛋白,如MPO,CG,4、非典型cANCA：靶抗原为BPI，常提示慢性感染。ELISA方法：可对PR3和MPO靶抗原进行确认，但不同试剂盒的反应性不同影响检测敏感度,捕获法的应用提高了检测敏感度两种方法共同检测：对血管炎的特异性为99%

31、，对WG和 的敏感度分别为73%和67%LF等)ANCA与血管炎及相关疾病ANCA 型 胞浆内抗原c-ANCA 蛋白酶 3（丝氨酸蛋白酶）髓过氧化酶（+）p-ANCA髓过氧化酶（）CG、LF、BPI、unknown疾病（敏感性）Wegener 肉芽肿（30%90%）特发性新月体肾炎Churg-Strauss 综合征显微镜下多动脉炎Crohns 病（75%）溃疡性结肠炎（20%）慢性活动性肝炎（75%）原发性硬化性胆管炎（70%）原发性胆汁性肝硬化（30%）正常对照（5%）C.G.Dileep Sharma*and A.R.Pradeep*,J Periodontol August 20067为

32、主的IC沉积+），诊断考虑+），检查等。），进一步导致SLE中有较高检出率中有较高检出率），但抗体却为阴性；-胞衬蛋白胞衬蛋白 的一个高灵敏度及特异性标记物,早期发现,的鉴别诊断，抗体检测到；诊断具有较高的特异性。细胞浆不发荧光.抗体(70kd)1327ANCA 检测:推荐方案ANCA检测和报告的国际共识(Savige,van der Woude,Wiik et al.,1999)系统性血管炎诊断思路举例：表现为可触性紫癜、腹痛、关节炎、血尿、蛋白尿IIFT肾穿显示IgA为主的 沉积，诊断考虑肾穿显示血管内皮IgM（+）IgG（），有循环冷球蛋白（），诊断考虑过敏性紫癜冷球蛋白血症性血管炎阴性

33、阳性当免疫荧光无免疫复合物沉积，而ANCA显微镜下多血管炎（+），则诊断考虑5%患者血清仅在ELISA中表现为阳性最优检测单特异性 ELISA检测当有肉芽肿性炎症，而无哮喘，则诊断倾向当有肉芽肿性炎症，有哮喘史及嗜酸性粒Wegener肉芽肿Churg-Strauss 综合征细胞增多，诊断最低检测结果诊断依据：临床特点+病理改变+相关检查；想到本病：临床上有难以解释的系统性表现或 /和多脏器缺血症状；认识本病：熟悉分类标准，根据标准推断；诊断本病：尽量争取组织或血管活检、血管造影和 MRIMRI检查等。干燥综合征:抗SS-A、抗SS-B抗体 一种原因不明的自身免疫疾病，淋巴细胞浸腺体（主要影响泪

34、腺和唾液腺），进一步导致干燥性结角膜炎和口干燥症；自身抗体：抗SS-A、抗SS-B（在 中有较高检出率），但在青少年型SS患者中抗患者中抗SS-A和抗和抗SS-B抗体却为阴性；抗 胞衬蛋白：检测SS的一个高灵敏度及特异性标记物 有助有SS早期发现 及与青少年SLE、RA的鉴别诊断的鉴别诊断，可先于抗SS-A、SS-B抗体检测到抗体检测到；抗腮腺抗体:对SS诊断具有较高的特异性诊断具有较高的特异性。抗SS-A、抗SS-B抗体抗腮腺抗体荧光模式:Hep-2细胞细胞:间期细胞核呈现细颗粒型荧光,核仁有部分不发荧光。分裂期细胞在染色体以外显示颗粒荧光,而染色体本身则不发荧光.灵长类肝组织切片:肝细胞核

35、及部分核仁可见细颗粒荧光,细胞浆不发荧光 在某些细胞（如淋巴细胞、巨噬细胞）中的荧光反应较强干燥综合征相关自身抗体其他自身免疫病相关自身抗体自身抗体ANA抗SSA抗体抗SSB抗体抗a-胞衬蛋白抗体抗M3受体抗体类风湿因子ANCA抗M2抗体ACA抗RNP抗体阳性率(%)60-8050-7030-6065-879260-8010-25硬皮病(PSS)皮肌炎/多肌炎(DM/PM)抗磷脂抗体综合征混合性结缔组织病(MCTD)Scl-70抗体抗着丝点抗体(ACA)抗核抗体(ANA)PM-1抗体Jo-1抗体抗核抗体(ANA)抗磷脂抗体(ACL)狼疮抗凝物质U1RNP抗体抗核抗体(ANA)8蛋白复合物自身抗

36、体家族，与抗内因子(IF)抗体(抗2-糖蛋白习惯性流产,血小板减少症心肌坏死等），以及多种神经症状；80%-(50%-PCA抗体的靶抗原为H+/抗磷脂抗体综合症（APS）抗磷脂或磷脂-蛋白复合物自身抗体家族，靶抗原高度异质性，其自身抗体成员包括：-狼疮抗凝因子抗胃壁细胞(PCA)(PCA)与抗内因子(IF)抗体-抗心磷脂抗体-抗磷脂酰丝氨酸抗体-抗 糖蛋白1抗体 抗2GPI)-抗Annexin抗体-抗凝血酶原抗体检测方法：ELISA法直接抑制凝血反应,导致凝血因子依赖性凝血时间延长APS相关的临床症候群相关临床症状：血小板减少症,复发性动静脉血栓形成（肺栓塞,心肌坏死等），以及多种神经症状；慢

37、怪萎缩性胃炎:胃壁细胞抗体(阳性率100%);内因子抗体(少见);恶性贫血:胃壁细胞抗体(阳性率80%-90%);内因子抗体(50%-70%);抗 抗体的靶抗原为H+/+ATP酶Fast and economic:-IgG(1:10)exocrine pancreas(PAb)goblet cells(GAb)慢性炎症性肠疾病（UCCD）诊断pANCA-IgG(1:1000)S.cerevisiae(ASCA)PAb,GAb,pANCAASCAOptimal:-IgG and IgA(all antigens)-1:10,1:100,1:1000猴胰腺组织猴小肠组织人中性粒细胞酿酒酵母细胞抗胰

38、岛细胞与抗胰岛素抗体Autoantibodies against pancreas islet cells（ICA）-Target antigens:(1)Glutamate decarboxylase(GAD):Stiff-Man syndrome,type I Diabetes mellitus,60-85%(2)Tyrosine phosphatase(lA2):Stiff-Man syndrome,type I Diabetes mellitus,48-80%Autoantibodies against insulin(lAA)Type I Diabetes mellitus unde

39、r 5 years of age the prevalence amounts to over 90%,while by the 12th year it decreases to 40%.Glutamate decarboxylase 谷氨酸脱羧酶;Tyrosine phosphatase 酪氨酸磷酸(酯)酶9受体():阳性率 ；（2 阳性率超过70%；（3 20%-：（1 100%（是风湿性疾病。才能作出风湿性疾病的最终检测与临床表现结合起来，我们鉴别这些数量众多的风湿性疾病，活动度进行ANA（）（）ANA（）结果的出现率取决于以下因素：滴度结果不能直接进行比较。（）与 选定的滴度值，的呈

40、阳性ANA反应独立的诊断条件之一。不相关，ANA（）（）可出现在多种情况下IIF法测定法测定阳性检出结果因病而异；治疗。AID经皮质激素或免疫抑制剂经皮质激素或免疫抑制剂肾病。而从肾脏丢失。自身免疫性甲状腺疾病Graevs 病：（1）抗TSH受体(TRAb):阳性率90%90%；（2）抗TP0:阳性率超过70%；（3）抗TG:阳性率20%-50%.桥本氏甲状腺炎：（1）抗TP0，阳性率100%（高滴度）,（2）抗TG：阳性率9%.多分泌腺疾病:（1）抗甲状旁腺抗体风湿病学中的自身抗体小结 单单出现自身抗体并不一定不一定是风湿性疾病。试验结果（）（）常常并不能除外某种风湿性疾病。必须要根据临床临

41、床才能作出风湿性疾病的最终诊断。将抗体检测与临床表现结合起来，能够帮助我们鉴别这些数量众多的风湿性疾病，同时抗体的检测也有助于对疾病的活动度进行监测。（）的原因Hyperthyroidism 甲亢；Hypothyroidism 甲减；hashimotos tyroiditis 甲状腺炎对ANA阳性结果的解释（）结果的出现率取决于以下因素：分析系统：由于不同厂家ANA检测系统的起始稀释度和稀释因子不同，因而其ANA滴度结果不能直接进行比较。区分血清（）与（）选定的滴度值，未加稀释的正常人血清可有1/3的呈阳性 反应。是SLE独立的诊断条件之一。筛查风湿病，敏感性高，尤其是高滴度ANA。滴度本身与

42、疾病活动度并不相关，没有评价预后的意义。（）可出现在多种情况下，特异性差。法测定ANA阴性的一些解释风湿性疾病SLE多发性肌炎干燥综合征硬皮病血管炎RA正常的健康人女性男性，出现率随年龄而增加风湿性疾病患者亲属？孕妇药物诱导慢性肝脏疾病慢性肺部疾病慢性感染血液系统异常恶性肿瘤技术方面：试剂来源、方法差异、操作因素等临床方面：疾病固有因素：ANA阳性检出结果因病而异阳性检出结果因病而异；经皮质激素或免疫抑制剂治疗。终末期肾病。隐蔽ANA：与循环中免疫复合物结合，沉积于组织局部。由于大量蛋白尿蛋白尿而从肾脏丢失。等等.10IIF筛查大撒网”；风湿性疾病的诊断、等等，筛查ANA与特异性抗体检出结果的

43、关系目前自身抗体检测过程中主要存在以下三个问题：1.检测方法的差异间接免疫荧光法（IIFA）阳性线性免疫印迹法（LIA）阳性 阴性882 266合 计11482.检测试剂盒不规范3.检测人员的知识水平差异阴性合 计20610885077737132026建议：统一检测方法以统一敏感性和特异性率的比较总体符合率一致性检验2=416.21,P0.0168.56%kappa值=0.472,P0.01胡朝军 等.中华临床免疫和变态反应杂志.2011;5(3):179-185统一所使用的检测试剂盒实验室操作人员应进行技术操作常规和风湿性疾病临床知识的培训自身抗体检测注意事项选择做哪些检查项目时要重点突出

44、：避免“大撒网；解释实验结果时应考虑以下几个问题 实验方法本身的敏感性、特异性；可靠性及实验室之间的差异性；结合临床：应把与之相关的一组实验结果放在一起考虑；自身抗体的检测对于风湿性疾病的诊断、病情评估、治疗和预后都及其重要。但影响其检测的因素很多，如检测方法、检测技术、操作人员、使用仪器等等，这些都会导致出现假阳性或假阴性，因此对自身抗体进行检测质量控制是非常必要的。自身抗体检测的质量控制要点微量加样器必须定期进行校准;荧光显微镜：其质量和荧光光源的强度是保证良好分辨率的基础（IIF）;酶标仪：应注意定期校准（ELISA）;自动化的结果扫描与分析软件（WB、ID法）;具有相关资质厂家提供的检

45、测用试剂盒;选择权威部门提供的自身抗体阳性与阴性质控品;建立完整的标准操作规程文件（SOP）;相对固定检测人员，并严格按照SOP文件要求进行检测;积极参加由国家或国际权威质控组织的室间质评。自身抗体检测的基本原则注意筛查试验与确诊性试验间的合理组合，切忌盲目地全面检测;如ANA、ANCA、肝抗原抗体谱筛查（IIFA）：若呈阳性或结果可疑，可进一步针对特异性靶抗原进行相关自身抗体检测（ELISA、WB/LIA）;最好能采用23种不同方法学原理的实验相互佐种不同方法学原理的实验相互佐证，以减少实验结果误差,如IIFA+WB/LIA或或IIFA+ELISA;南京军区南京总医院中心实验科中国人民解放军全军临床检验医学研究所，210002Tel：，E-mail：11