（江苏专用）高考生物一轮复习 专题27 克隆技术课件-人教版高三全册生物课件.pptx

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1、专题27克隆技术高考生物高考生物(江苏专用)考点考点1 1植物细胞工程植物细胞工程五年高考A A组自主命题组自主命题江苏卷题组江苏卷题组1.(2019江苏单科,20,2分)为探究矮牵牛原生质体的培养条件和植株再生能力,某研究小组的实验过程如下图。下列叙述正确的是()A.过程获得的原生质体需悬浮在30%蔗糖溶液中B.过程需提高生长素的比例以促进芽的分化C.过程需用秋水仙素处理诱导细胞壁再生D.原生质体虽无细胞壁但仍保持细胞的全能性答案答案D过程将植物细胞的细胞壁去除后获得原生质体,若将其悬浮在30%蔗糖溶液中,原生质体会因溶液浓度过高而失水皱缩,A错误;过程需提高细胞分裂素的比例以促进芽的分化,

2、若提高生长素的比例,则会促进根的分化,而使芽的分化受到抑制,B错误;秋水仙素具有诱导细胞染色体数目加倍的作用,没有诱导细胞壁再生的作用,C错误;细胞的全能性依赖于细胞内遗传物质的完整性,原生质体虽无细胞壁但其遗传物质是完整的,因此原生质体保持细胞的全能性,D正确。素养解读素养解读本题通过植物组织培养的相关知识,考查考生实验探究和获取信息的能力;借助植物组织培养的过程图示,体现了对科学探究素养中的实验方案探讨要素的考查。易错辨析易错辨析在植物组织培养过程中,生长素和细胞分裂素是关键激素。当同时使用这两种植物激素时,两者的比例会影响植物细胞分化发育的方向。一般来说,当生长素用量与细胞分裂素用量比值

3、高时,有利于根的分化而对芽的形成有抑制作用;当生长素用量与细胞分裂素用量比值低时,有利于芽的分化而对根的形成有抑制作用;当生长素用量与细胞分裂素用量比值适中时,则能促进愈伤组织的形成。2.(2018江苏单科,8,2分)花药离体培养是重要的育种手段。下图是某二倍体植物花药育种过程的示意图,下列叙述正确的是()A.为了防止微生物污染,过程所用的花药需在70%乙醇中浸泡30minB.过程的培养基中需添加较高浓度的细胞分裂素以利于根的分化C.过程逐步分化的植株中可筛选获得纯合的二倍体D.过程应将炼苗后的植株移栽到含有蔗糖和多种植物激素的基质上答案答案C本题主要考查花药离体培养的相关知识。为了防止微生物

4、污染,过程所用的花蕾需在70%乙醇中浸泡30s,A错误;过程的培养基中,生长素与细胞分裂素的比值适中,且生长素含量高于细胞分裂素时,有利于根的分化,B错误;进行过程的愈伤组织经过了秋水仙素的处理,故其分化后的植株中可筛选获得纯合的二倍体,C正确;经炼苗后的幼苗是能进行光合作用且能独立进行代谢的植株,故幼苗的生长基质中不用添加蔗糖和多种植物激素,D错误。素养解读素养解读本题借助流程图,考查花药离体培养技术及应用。主要考查考生利用科学思维中的模型与建模、推理与判断等方法获得有效解题信息。规律总结规律总结激素杠杆生长素与细胞分裂素的协同调控作用在植物组织培养中非常重要,人们常把它们称为“激素杠杆”。

5、例如,当生长素的含量高于细胞分裂素时,主要诱导植物组织脱分化和根原基的形成;而当细胞分裂素的含量高于生长素时,则主要诱导植物组织再分化和芽原基的形成。考点考点2 2动物细胞工程动物细胞工程1.(2019江苏单科,23,3分)如图为杂交瘤细胞制备示意图。骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT-),在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA,无法生长。下列叙述正确的是(多选)()A.可用灭活的仙台病毒诱导细胞融合B.两两融合的细胞都能在HAT培养液中生长C.杂交瘤细胞需进一步筛选才能用于生产D.细胞膜的流动性是细胞融合的基础答案答案ACD灭活的仙台病毒具有诱导细胞融合的作用,A正确;两两

6、融合的细胞包括免疫B细胞免疫B细胞、骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞、免疫B细胞骨髓瘤细胞三种,只有免疫B细胞与骨髓瘤细胞的融合细胞能在HAT培养液中生长,B错误;与骨髓瘤细胞结合的免疫B细胞的种类不同,形成的杂交瘤细胞产生的单克隆抗体不同,因此需要进一步筛选才能用于生产,C正确;细胞融合的基础是细胞膜具有一定的流动性,D正确。素养解读素养解读本题通过动物细胞融合的知识,考查考生获取信息和实验探究的能力;试题借助基础判断的形式,体现了对科学探究素养中的实验方案探讨要素的考查。思路梳理思路梳理认真读题和看图回忆单克隆抗体制备的过程结合选项选出答案。2.(2018江苏单科,22,3分)如图为细胞融合的示意图,

7、下列叙述正确的是(多选)()A.若a细胞和b细胞是植物细胞,需先去分化再诱导融合B.a细胞和b细胞之间的融合需要促融处理后才能实现C.c细胞的形成与a、b细胞膜的流动性都有关D.c细胞将同时表达a细胞和b细胞中的所有基因答案答案BC植物细胞壁会阻碍细胞融合,故植物细胞融合前需先用酶解法除去细胞壁,A错误;细胞间的融合需在相应的诱导处理下才能完成(如离心、聚乙二醇等,动物细胞还可用灭活病毒诱导融合),B正确;细胞融合过程出现了膜的变形,故细胞融合过程与细胞膜流动性有关,C正确;c细胞中具有a、b细胞的全部基因,但这些基因不一定能全部表达,D错误。素养解读素养解读本题通过细胞融合相关知识,主要考查

8、了科学思维中的模型与建模、归纳与概括等。知识链接知识链接常用的人工诱导细胞融合的方法(1)人工诱导植物原生质体融合的方法:物理法离心、振动、电激等,化学法一般用聚乙二醇(PEG)诱导。(2)人工诱导动物细胞融合时常用的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电激等。3.(2016江苏单科,9,2分)下列有关细胞工程的叙述,正确的是()A.PEG是促细胞融合剂,可直接诱导植物细胞融合B.用原生质体制备人工种子,要防止细胞破裂C.骨髓瘤细胞经免疫处理,可直接获得单克隆抗体D.核移植克隆的动物,其线粒体DNA来自供卵母体答案答案D植物细胞融合前需先用酶解法去掉细胞壁,形成原生质体,再用PEG促进原生质体融合

9、,A错误;人工种子是以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料,经过人工薄膜包装得到的种子,不用原生质体为材料,B错误;骨髓瘤细胞需与经免疫过的B淋巴细胞融合,再经筛选培养才能获得单克隆抗体,C错误;动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核取出,移入已经去掉细胞核的卵母细胞中,核移植克隆动物的线粒体DNA来自供卵母体。解题关键解题关键仔细审读抓“关键词”及相关知识的掌握是解题的关键。如A项植物细胞需要去细胞壁,不能“直接”融合;“人工种子”是用组织培养得到的胚状体来制备的;C项“免疫处理”处理的不是骨髓瘤细胞。考点考点1 1植物细胞工程植物细胞工程B B组统一命题、省（区、市）卷题组组

10、统一命题、省（区、市）卷题组1.(2019课标全国,38,15分)植物组织培养技术在科学研究和生产实践中得到了广泛的应用。回答下列问题。(1)植物微型繁殖是植物繁殖的一种途径。与常规的种子繁殖方法相比,这种微型繁殖技术的特点有(答出2点即可)。(2)通过组织培养技术,可把植物组织细胞培养成胚状体,再通过人工种皮(人工薄膜)包装得到人工种子(如图所示),这种人工种子在适宜条件下可萌发生长。人工种皮具备透气性的作用是。人工胚乳能够为胚状体生长提供所需的物质,因此应含有植物激素、和等几类物质。(3)用脱毒苗进行繁殖,可以减少作物感染病毒。为了获得脱毒苗,可以选取植物的进行组织培养。(4)植物组织培养

11、技术可与基因工程技术相结合获得转基因植株。将含有目的基因的细胞培养成一个完整植株的基本程序是(用流程图表示)。答案答案(1)能保持植物原有的遗传特性,繁殖速度快(2)有利于胚状体进行呼吸作用矿质元素糖(3)茎尖(4)含目的基因的细胞愈伤组织小植株解析解析本题借助植物细胞工程实际应用的相关知识,考查综合运用能力。试题通过对比获得植物新个体的不同途径,体现了对科学探究素养中的结果分析要素的考查。(1)植物微型繁殖可以保持优良品种的遗传特性,还可以高效、快速、大量繁殖。(2)人工种皮具备透气性,可以保证胚状体进行有氧呼吸时对氧的需求;人工胚乳应该含有植物激素、矿质元素和糖等物质,保证胚状体的正常生长

12、。(3)植物分生区附近(如茎尖)的病毒极少,可以切取茎尖进行组织培养,获得脱毒苗。(4)获得转基因植株,首先要通过细胞的脱分化过程,培养出愈伤组织,对愈伤组织继续培养,诱导分化形成小植株。知能拓展知能拓展人工种皮中应该具有哪些有效成分?针对植物种类、土壤等条件,在人工种皮中可加入适量的养分、无机盐、农药、抗生素、有益菌等,为了促进胚状体、不定芽等的生长发育,还可以向人工种皮中加入一些植物生长调节剂。2.(2019课标全国,38,15分)培养胡萝卜根组织可获得试管苗,获得试管苗的过程如图所示。回答下列问题。(1)利用胡萝卜根段进行组织培养可以形成试管苗。用分化的植物细胞可以培养成完整的植株,这是

13、因为植物细胞具有。(2)步骤切取的组织块中要带有形成层,原因是。(3)从步骤到步骤需要更换新的培养基,其原因是。在新的培养基上愈伤组织通过细胞的过程,最终可形成试管苗。(4)步骤要进行照光培养,其作用是。(5)经组织培养得到的植株,一般可保持原品种的,这种繁殖方式属于繁殖。答案答案(1)全能性(或答:形成完整植株所需的全部基因)(2)形成层容易诱导形成愈伤组织(3)诱导愈伤组织形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的生长素和细胞分裂素的比例不同分化(或答:再分化)(4)诱导叶绿素的形成,使试管苗能够进行光合作用(5)遗传特性无性解析解析本题借助胡萝卜根组织块的组织培养的相关知识,考查考生理论联系

14、实际,综合运用所学知识解决生物学问题的能力;试题通过对组织培养流程的分析考查了科学思维素养。(1)植物细胞具有全能性,利用已分化的植物细胞通过植物组织培养可以培养成完整植株。(2)形成层细胞分化程度低,全能性较高,更容易诱导形成愈伤组织,进而获得完整植株。(3)愈伤组织的形成和试管苗的分化需要不同的生长素与细胞分裂素比例,因此诱导愈伤组织的形成阶段到分化阶段需要不同的培养基。愈伤组织通过再分化过程,最终可形成试管苗。(4)叶绿素的形成需要光,试管苗的发育也需要光,因此试管苗的诱导阶段需要光照。(5)通过植物组织培养获得植株,属于无性繁殖的一种,可以保持原品种的遗传特性。知识拓展知识拓展组织培养

15、得到植株的两种常见途径愈伤组织形成后经诱导发芽形成丛状苗,再生根形成植株;愈伤组织形成后经液体悬浮培养得到单个细胞,诱导形成胚状体再形成植株。1.(2015天津理综,6,6分)2015年2月3日,英国议会下院通过一项历史性法案,允许以医学手段培育“三亲婴儿”。三亲婴儿的培育过程可选用如下技术路线。据图分析,下列叙述错误的是()A.该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代B.捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给三亲婴儿C.三亲婴儿的染色体全部来自母亲提供的细胞核D.三亲婴儿的培育还需要早期胚胎培养和胚胎移植等技术考点考点2 2动物细胞工程动物细胞工程答案答案C分析图示可知:母亲只提供细胞核,因

16、而可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代,A正确;红绿色盲基因属于核基因,而捐献者提供的是去核卵母细胞,其红绿色盲基因不能遗传给三亲婴儿,B正确;三亲婴儿的染色体一半来自母亲提供的细胞核,一半来自精子,C错误;体外受精形成的受精卵需培养形成早期胚胎,而后经胚胎移植进入受体子宫内,D正确。2.(2018课标全国,38,15分)2018年细胞期刊报道,中国科学家率先成功地应用体细胞对非人灵长类动物进行克隆,获得两只克隆猴“中中”和“华华”。回答下列问题:(1)“中中”和“华华”的获得涉及核移植过程,核移植是指。通过核移植方法获得的克隆猴,与核供体相比,克隆猴体细胞的染色体数目(填“减半”“加倍”或

17、“不变”)。(2)哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植,胚胎细胞核移植获得克隆动物的难度(填“大于”或“小于”)体细胞核移植,其原因是。(3)在哺乳动物核移植的过程中,若分别以雌性个体和雄性个体的体细胞作为核供体,通常,所得到的两个克隆动物体细胞的常染色体数目(填“相同”或“不同”),性染色体组合(填“相同”或“不同”)。答案答案(1)将动物的一个细胞核,移入一个已去掉细胞核的卵母细胞不变(2)小于胚胎细胞分化程度低,恢复全能性相对容易(3)相同不同解析解析(1)核移植是指将动物的一个细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,并最终发育为动物个体

18、。克隆猴体细胞的染色体数等于重组细胞中的染色体数,等于供核细胞中的染色体数。(2)哺乳动物胚胎细胞分化程度低,恢复全能性相对容易,而哺乳动物体细胞分化程度高,恢复全能性十分困难,因此,动物体细胞核移植获得克隆猴的难度也就明显高于胚胎细胞核移植。(3)哺乳动物雌性个体和雄性个体的体细胞中常染色体数目相同,雌性性染色体组合为XX,雄性性染色体组合为XY,因此题中所得的两个克隆动物体细胞常染色体数目相同,性染色体组合不同。3.(2016课标全国,40,15分)下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物(二倍体)的流程。回答下列问题:(1)图中A表示正常细胞核,染色体数为2n,则其性染色体的组成可为

19、。过程表示去除细胞核,该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行,去核时常采用的方法。代表的过程是。(2)经过多次传代后,供体细胞中的稳定性会降低。因此,选材时必须关注传代次数。(3)若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同,从遗传物质的角度分析其原因是。(4)与克隆羊“多莉(利)”培育成功一样,其他克隆动物的成功获得也证明了。答案答案(15分)(1)XX或XY显微操作胚胎移植(2)遗传物质(3)卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响(4)动物已分化体细胞的细胞核具有全能性解析解析(1)因供体的性别不确定,故其细胞核内的性染色体组成为XX或XY;一般将卵母细胞培养到M中期,用显

20、微操作法将其细胞核去除;代表的过程是胚胎移植。(2)传代培养10代以内的细胞可以保持正常的二倍体核型,超过10代以后,供体细胞中遗传物质的稳定性会降低。(3)克隆动物细胞质中的遗传物质来自卵母细胞的细胞质,细胞质中的遗传物质对克隆动物的性状会产生影响。(4)克隆动物的成功可以证明动物已分化的体细胞的细胞核具有全能性。疑难突破疑难突破识记克隆动物的原理及过程是解答本题的关键。考点考点1 1植物细胞工程植物细胞工程C C组教师专用题组组教师专用题组1.(2013江苏单科,11,2分)某种极具观赏价值的兰科珍稀花卉很难获得成熟种子。为尽快推广种植,可应用多种技术获得大量优质苗,下列技术中不能选用的是

21、()A.利用茎段扦插诱导生根技术快速育苗B.采用花粉粒组织培养获得单倍体苗C.采集幼芽嫁接到合适的其他种类植物体上D.采用幼叶、茎尖等部位的组织进行组织培养答案答案B本题考查对获得大量优质苗的多种技术手段的分析。为了使优质苗的生物性状不发生性状分离,可采用茎段扦插诱导生根技术快速育苗,也可采用将幼芽嫁接到合适的其他种类植物体上的方法或用茎尖或幼叶等部位的组织进行植物组织培养获得大量优质苗;花粉粒是减数分裂的产物,利用花粉粒离体培养得到的是单倍体苗,其高度不育,且会发生性状分离,因此B项方案不能选用。2.(2011江苏单科,16,2分)下列有关植物组织培养的叙述,正确的是()A.愈伤组织是一团有

22、特定结构和功能的薄壁细胞B.二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株C.用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子D.植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选而获得答案答案D在普通培养基中添加适量的NaCl,制成选择培养基,可用来筛选植物耐盐突变体,故选项D正确。愈伤组织的细胞排列疏松而无规则,是一团没有特定结构和功能并处于旺盛分裂状态的薄壁细胞;二倍体植株的花粉经离体培养后得到单倍体植株,该单倍体高度不育,不能稳定遗传;用人工薄膜将胚状体等进行包装可制成人工种子,愈伤组织不能作为制作人工种子的材料,故选项A、B、C错误。3.(2014江苏单科,29,9分)为

23、了获得植物次生代谢产物,先用植物外植体获得愈伤组织,然后在液体培养基中悬浮培养。请回答下列问题:(1)外植体经诱导后形成愈伤组织的过程称为。(2)在愈伤组织悬浮培养时,细胞干重、蔗糖浓度和pH的变化如图所示。细胞干重在12d后下降的原因有;培养液中蔗糖的作用是、。(3)多倍体愈伤组织细胞产生的次生代谢产物量常高于二倍体。二倍体愈伤组织细胞经处理,会产生染色体加倍的细胞。为检测愈伤组织细胞染色体数目,压片前常用纤维素酶和酶解离愈伤组织。若愈伤组织细胞(2n)经诱导处理后,观察到染色体数为8n的细胞,合理的解释是、。(4)为了更好地获得次生代谢产物,生产中采用植物细胞的固定化技术,其原理与酵母细胞

24、固定化类似。下列说法正确的有(填序号)。选取旺盛生长的愈伤组织细胞包埋必须在光照条件下培养培养过程中需通空气固定化后植物细胞生长会变慢答案答案(1)脱分化(2)蔗糖浓度下降,pH降低提供能源调节渗透压(3)秋水仙素(低温)果胶经加倍到4n的细胞处于有丝分裂后期经加倍到8n的细胞处于有丝分裂中期(4)解析解析(1)外植体经脱分化可形成愈伤组织。(2)分析坐标曲线图,可见12d后培养液中的蔗糖浓度已降至较低,pH也由6降为4,因此使得细胞生命活动受阻,细胞干重减小。培养液中的蔗糖可为培养的细胞提供能源,又可调节培养液的渗透压。(3)二倍体愈伤组织经人工诱导如秋水仙素、低温等处理,可产生染色体加倍的

25、细胞。植物细胞之间除纤维素外,还存在果胶层,因此可利用纤维素酶和果胶酶解离愈伤组织。愈伤组织细胞(2n)经人工诱导后,细胞中染色体数目加倍成4n,染色体数为4n的细胞进行有丝分裂,处于有丝分裂后期的细胞中含有8n条染色体;若加倍到4n的细胞经诱导后继续加倍则形成染色体数为8n的细胞,这样的细胞再进行有丝分裂,在中期时会看到染色体数为8n的细胞。(4)通过愈伤组织获得次生代谢产物时,需选择生长旺盛的细胞,由于植物细胞进行有氧呼吸,培养过程需通入空气。愈伤组织细胞没有叶绿体,不进行光合作用,不需光照。植物细胞固定化后,与外界环境的物质交换能力降低,生长变慢。4.(2012江苏单科,31,8分)某研

26、究组对籼稻开展了组织培养及相关研究,请回答下列问题:(1)2,4-D常用于籼稻愈伤组织的诱导,对形态的发生有一定的抑制作用。为促进愈伤组织再分化,在配制分化培养基时需(填“升高”“保持”或“降低”)2,4-D的浓度。(2)当籼稻愈伤组织在只含有细胞分裂素的培养基上培养时,出现具有分生能力的绿色芽点,但不能继续出芽,通常在培养基中添加,以促进幼苗形成。(3)研究中用显微镜可以观察到的现象是(填下列序号)。绿色芽点细胞排列松散刚融合的籼稻和稗草杂交细胞发生质壁分离胚状体细胞中有叶绿体分化的愈伤组织内各细胞的形态大小一致(4)经组织培养筛选获得的籼稻叶绿素突变体,其叶绿素a与叶绿素b的比值显著大于对

27、照,叶绿素总量不变。某同学用(填序号:绿色红色蓝紫色黄色)光照射突变体和对照叶片,检测到两者光合放氧速率差异不大。若取等量色素提取液进行层析,会发现突变体第条色素带(自上而下)窄于对照组。(5)胚乳(3n)由一个精子与两个极核受精发育而成。若用籼稻种子的胚乳诱导愈伤组织,培育三倍体,需适时剔除胚,以免胚的存在影响愈伤组织细胞的,还可避免再生苗中混有。答案答案(8分)(1)降低(2)适量的生长素(3)(4)4(5)增殖与分化二倍体幼苗解析解析本题主要考查植物组织培养的相关知识。(1)因2,4-D能抑制形态的发生,所以在促进愈伤组织再分化时,分化培养基中应降低2,4-D的浓度。(2)添加适量的生长

28、素利于愈伤组织再分化出芽,促进幼苗的形成。(3)有分生能力的绿色芽点细胞排列紧密;刚融合的籼稻和稗草杂交细胞还没有再生细胞壁,不能发生质壁分离;愈伤组织由无定形状态的薄壁细胞构成,其内的细胞形态大小不一致;因胚状体细胞中有具有分生能力的绿色芽点,用显微镜可观察到胚状体细胞中有叶绿体。(4)因籼稻叶绿素突变体中叶绿素a与叶绿素b的比值增大而叶绿素总量不变,所以突变体中叶绿素a增加,叶绿素b减少,则自上而下第4条色素带变窄;因叶绿素a、b主要吸收红光和蓝紫光,对绿光和黄光吸收较少,所以用绿光和黄光照射突变体和对照叶片,检测到两者放氧速率差别不大。(5)胚由二倍体细胞组成,在培育三倍体时,需要剔除种

29、子中的胚,以免胚的存在影响愈伤组织细胞的增殖与分化,还可避免出现二倍体幼苗。考点考点2 2动物细胞工程动物细胞工程1.(2011江苏单科,14,2分)关于现代生物技术应用的叙述,错误的是()A.蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质B.体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体C.植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒D.动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育答案答案B克隆动物是核移植工程的应用;茎尖分生能力强,没有病毒侵染,以茎尖为外植体,通过植物组织培养可获得无病毒植株;导入目的基因的受体细胞,需通过动物细胞培养技术获得早期胚胎,才能进一步培育成转基因动物。2.(2018课标全国,38,15

30、分)某种荧光蛋白(GFP)在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光,这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白(L1)基因连接在GFP基因的5末端,获得了L1-GFP融合基因(简称为甲),并将其插入质粒P0,构建了真核表达载体P1,其部分结构和酶切位点的示意图如下,图中E1E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。启动子L1基因GFP基因终止子E1E2E3E4回答下列问题:(1)据图推断,该团队在将甲插入质粒P0时,使用了两种限制酶,这两种酶是。使用这两种酶进行酶切是为了保证,也是为了保证。(2)将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后,若在该细胞中观察到了绿色荧光,则说明L1基因在

31、牛的皮肤细胞中完成了和过程。(3)为了获得含有甲的牛,该团队需要做的工作包括:将能够产生绿色荧光细胞的移入牛的中、体外培养、胚胎移植等。(4)为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中,某同学用PCR方法进行鉴定,在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的(填“mRNA”“总RNA”或“核DNA”)作为PCR模板。答案答案(1)E1和E4甲的完整甲与载体正确连接(2)转录翻译(3)细胞核去核卵母细胞(4)核DNA解析解析(1)构建基因表达载体时,使用的限制酶不能破坏融合基因。选用产生不同黏性末端的两种限制酶,可以防止自身环化,并且保证融合基因和质粒正确连接。(2)在牛的皮肤细胞中观察到绿色荧光,说明

32、L1基因已经表达,即在该皮肤细胞中完成了转录和翻译过程。(3)培育转基因的克隆牛需将含目的基因的细胞的细胞核移入牛的去核卵母细胞中。(4)为检测克隆牛的不同组织细胞中是否含有融合基因,需提取不同组织细胞的核DNA作为PCR模板,用PCR方法进行鉴定。考点考点1 1植物细胞工程植物细胞工程三年模拟A A组组 20172019 20172019年高考模拟年高考模拟考点基础题考点基础题组组1.(2019江苏苏、锡、常、镇三模,14)研究发现,经水浴处理后再组织培养获得的草莓幼苗脱毒效果更好。下列叙述错误的是()A.病毒在植物体内的分布是不均匀的B.40水浴可能有利于减慢病毒增殖扩散速度C.剥取的茎尖

33、需要进行无菌处理D.脱毒苗具有病毒抗性,不会再感染病毒答案答案D根据题图可知,利用小叶尚未展开的匍匐茎通过植物组织培养可获得脱毒苗,可推测病毒在植物体内的分布不均匀,A正确;40水浴4h有利于减慢病毒增殖扩散速度,B正确;用于植物组织培养的外植体均需进行无菌处理,C正确;脱毒苗并不会因为脱毒而具有病毒抗性,仍会再感染病毒,D错误。名师点睛名师点睛本题中剥取的茎尖组织块需要保持它们的生物活性,因此不可对其进行彻底灭菌处理。2.(2019江苏泰州一模,24)如图为植物组织培养过程示意图,下列叙述正确的是(多选)()外植体试管苗A.外植体可以是植物体细胞、卵细胞或花药B.试管苗过程的基础是细胞的分裂

34、、分化C.将包上人造种皮即可获得人工种子D.赤霉素和脱落酸也可用于植物组织培养答案答案ABD分析题图可确定表示愈伤组织,表示胚状体(或不定芽等)。外植体可以是植物体细胞、卵细胞或花药,A正确;试管苗过程的基础是细胞的分裂、分化,B正确;人工种子的基本结构为胚状体(或不定芽等)、人工胚乳、人造种皮,C错误;不同植物所需的激素种类有所不同,植物组织培养中主要用到生长素和细胞分裂素,有时也会用到赤霉素和脱落酸,D正确。知识归纳知识归纳通过调节生长素和细胞分裂素的量的比例,可控制生根或生芽。一般来说,生长素和细胞分裂素的量的比值大于1生根、小于1生芽、等于1有利于形成愈伤组织。3.(2019江苏南京、

35、盐城二模,24)科学家将番茄和马铃薯细胞利用图示技术获得了“番茄马铃薯”植株。下列有关叙述正确的是(多选)()A.图示技术涉及的原理有细胞膜的流动性、植物细胞的全能性等B.过程可用电激、聚乙二醇或灭活的病毒诱导原生质体融合C.过程需提供无机营养成分、有机营养成分和植物激素等D.f培养基中生长素与细胞分裂素的配比与e培养基中的不同答案答案ACD如图为植物体细胞杂交的过程,纤维素酶和果胶酶去壁、原生质体融合、细胞壁的再生、脱分化、再分化。植物体细胞杂交过程中涉及原生质体的融合和植物组织培养,前者的原理是细胞膜的流动性,后者的原理是植物细胞的全能性,A正确;植物原生质体融合的方法有物理法和化学法,不

36、能用灭活的病毒诱导融合,B错误;脱分化、再分化需要营养成分和激素等条件,C正确;e中诱导形成愈伤组织,f中诱导分化出根、芽,需要调整培养基中生长素和细胞分裂素的比例,D正确。故选ACD。4.(2019江苏苏、锡、常、镇四市二模,16)组培苗在移栽前,一般需要炼苗,目的在于提高组培苗对外界环境条件的适应性。如图是不同炼苗方式组合对白兰地红枫组培苗移栽存活率的影响,以下叙述正确的是()A.炼苗初期应创设与室外环境相同的条件,促使组培苗适应环境B.闭盖炼苗期间应控制的环境条件为:无菌、无光,并保持一定的湿度C.白兰地红枫组培苗的最佳炼苗方式是闭盖炼苗6d后,再开盖炼苗3dD.白兰地红枫组培苗的移栽存

37、活率随着闭盖炼苗时间的增加先升高后降低答案答案D炼苗初期,应和培养时的环境条件相似,炼苗后期,则要与预计的栽培条件相似,从而达到逐步适应外界环境条件的目的,A错误;闭盖炼苗时需给予一定光照等,B错误;分析题图,白兰地红枫组培苗的最佳炼苗方式是闭盖炼苗6d后,再开盖炼苗2d,C错误;分析题图,白兰地红枫组培苗的移栽存活率随着闭盖炼苗时间的增加先升高后降低,D正确。解题思路解题思路分析题干,把握关键信息“炼苗,目的在于提高组培苗对外界环境条件的适应性”,然后作答即可。1.(2019江苏苏、锡、常、镇四市二模,25)下列有关哺乳动物核移植技术的叙述正确的是(多选)()A.受体细胞常用处于减数第二次分

38、裂中期的卵母细胞B.注入受体细胞的既可以是细胞核,也可以是细胞C.用物理或化学方法激活移植后的细胞,使其完成减数分裂过程D.核移植技术的成功率很低,仍有很多问题需要研究考点考点2 2动物细胞工程动物细胞工程答案答案ABD处于减数第二次分裂中期的卵母细胞体积大、易操作,含有核基因全能型表达的物质和环境条件,所以受体细胞常用处于减数第二次分裂中期的卵母细胞,A正确;注入受体细胞的可以是细胞核,为了保证供核不被破坏,使所得个体的性状更接近供体,注入受体细胞的也可以是细胞,B正确;用物理或化学方法激活移植后的细胞,使其完成有丝分裂过程,C错误;许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷、核移植技术的成功率很低等

39、,仍有很多问题需要研究,D正确。2.(2019江苏南通、连云港等七市二模,17)在单克隆抗体制备中,关于杂交瘤细胞制备的叙述,正确的是()A.可利用电激等物理方法直接诱导两个细胞的融合B.可利用细胞中染色体的数目和形态筛选出杂交瘤细胞C.利用了细胞膜的流动性和基因重组等原理D.用选择培养基筛选得到的杂交瘤细胞可直接用于生产单克隆抗体答案答案A诱导动物细胞融合的方法有物理法、化学法、生物法等,电激是常用的物理融合法,A正确;杂交瘤细胞的筛选需要使用特定的筛选培养基,观察细胞染色体数目和形态只能判断细胞是否融合,B错误;杂交瘤细胞的制备利用了细胞膜的流动性,但不涉及基因重组,C错误;经选择培养基筛

40、选出的杂交瘤细胞还需要进行克隆化培养和专一抗体检验,才能用于生产单克隆抗体,D错误。名师点睛名师点睛在单克隆抗体的制备过程中,在选择培养中有两次筛选,第一次筛选的目的是筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选的目的是筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。3.(2018江苏苏、锡、常、镇三模,20)下列关于动物细胞工程的叙述,正确的是()A.接触抑制的细胞经分散后继续培养,细胞将不再增殖B.动物细胞培养选用的培养材料大多是胚胎或幼龄动物的组织C.经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可直接生产特定的单克隆抗体D.常在培养基中添加一定种类和数量的抗生素以防止培养的细胞被病毒感染答案答案B接触抑制的细胞经分散后继续

41、培养,细胞仍能增殖,A错误;动物细胞培养通常选择胚胎或幼龄动物的组织作为培养材料,B正确;经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞需要检测其是否能产生特定的抗体,C错误;加抗生素的目的是消灭杂菌,防止污染,D错误。B B组组2017201920172019年高考模拟年高考模拟专题综合题组专题综合题组时间:35分钟分值:35分一、选择题(单选每题2分,多选每题3分，共13分)1.(2019江苏南京、盐城三模,16)下列有关动物细胞培养和植物组织培养的叙述,错误的是()A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基中的成分不同B.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶C.动物细胞培养可用于检测有毒物

42、质,茎尖组织培养可获得脱毒植株D.烟草叶片离体培养能产生新个体,小鼠杂交瘤细胞培养能得到细胞代谢产物答案答案B本题主要考查科学思维中的比较与归纳。动物细胞培养中要用到胰蛋白酶,而植物组织培养不需要。2.(2019江苏六合高级中学2月月考,24)下列有关细胞工程叙述正确的是(多选)()A.用原生质体制备人工种子,要防止细胞破裂B.乳腺癌细胞比乳腺细胞更容易进行离体培养C.生产单克隆抗体需要利用动物细胞培养技术D.动物细胞融合和植物体细胞杂交都能形成杂交个体答案答案BC通常人工种子是利用胚状体等(含完整细胞)制备而成的,不用原生质体制备,A错误;癌细胞具有无限增殖的能力,因此乳腺癌细胞比乳腺细胞更

43、容易进行离体培养,B正确;单克隆抗体的制备采用了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术,C正确;动物细胞融合无法培育出新的动物个体,D错误。3.(2019江苏南师附中、天一、海门、淮阴四校联考,15)细胞工程中,选择合适的生物材料是成功的关键。下列选择不合理的是()A.选择高度分化的动物体细胞进行培养有利于获得大量细胞B.选择胚胎细胞作为核供体进行核移植可提高克隆动物的成功率C.选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗D.选择植物的愈伤组织进行诱变处理可获得优质的突变体答案答案A考查考生理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力。高度分化的细胞分裂能力弱,应选用胚胎细胞或幼龄动物的组织细

44、胞进行培养,A错误;胚胎细胞分化程度低,作为核供体进行核移植可提高克隆动物的成功率,B正确;植物茎尖的病毒极少甚至无病毒,由其培养成的植株可能不带病毒,从而获得脱毒苗,C正确;植物组织培养的愈伤组织细胞具有分生能力,易受到环境影响而发生基因突变,D正确。名师点拨名师点拨用愈伤组织进行诱变处理易获得突变体的主要原因是愈伤组织具有旺盛的分裂能力。4.(2019江苏扬州一模,18)通过细胞工程技术,可利用甲、乙两种二倍体植物的各自优势,培育高产耐盐的杂种植株,实验流程如图所示。有关说法错误的是()A.是纤维素酶和果胶酶,是融合的原生质体B.到过程中高尔基体活动明显增强C.将愈伤组织包埋在人工种皮中,

45、就形成了人工种子D.长成的植株需要选择的原因是有耐盐高产和耐盐不高产两种答案C结合题干信息分析题图,表示用纤维素酶和果胶酶处理形成原生质体,为经过诱导融合后形成的原生质体,A正确;高尔基体参与植物细胞壁的形成,故到过程中高尔基体活动明显增强,B正确;人工种子的制备需要将愈伤组织培养到胚状体阶段与人工胚乳一起包上人工种皮,C错误;由于融合的细胞存在多种细胞的融合体,经过在高盐环境下的筛选过程,可能还存在耐盐高产和耐盐不高产个体,所以长成的植株还需进行选择,D正确。5.(2019江苏盐城中学模考,17)科研人员研究了马铃薯茎尖外植体大小对幼苗的成苗率和脱毒率的影响,结果如图。相关叙述错误的是()A

46、.培育脱毒苗所依据的原理有基因突变和细胞全能性B.培育脱毒苗的过程中涉及脱分化和再分化两个阶段C.实验结果表明茎尖越小脱毒率越高,成苗率越低D.根据本实验,培养脱毒苗时茎尖的适宜大小为0.27mm答答案案A马铃薯茎尖病毒极少甚至无病毒,因此可利用马铃薯茎尖进行组织培养形成脱毒苗,所依据的原理是细胞全能性,A错误;培育脱毒苗的过程中涉及脱分化和再分化两个阶段,B正确;由图可知,茎尖越小脱毒率越高,成苗率越低,C正确;本实验中,在茎尖外植体大小为0.27mm时,脱毒率和成苗率均较高,因此根据本实验,马铃薯脱毒培养中茎尖外植体的适宜大小为0.27mm,D正确。6.(2018江苏扬、通、泰、徐、淮、宿

47、二模,16)2018年1月国际顶尖学术期刊Cell杂志报道,我国科学家以一只雌性猕猴胎儿成纤维细胞为核供体成功克隆出两只猕猴。相关叙述错误的是()A.这项技术证明高度分化的动物体细胞具有全能性B.研究中需要使用成熟卵母细胞作为核移植的受体C.培育出的两只雌性猕猴的基因组成几乎完全相同D.克隆猕猴的成功为大量培育灵长类遗传病模型动物提供了可能答案答案A克隆的两只猕猴是以一只雌性猕猴胎儿成纤维细胞为核供体发育而来的,该过程经过了细胞核移植,只能说明分化的动物体细胞的细胞核具有全能性,A错误;卵母细胞含有丰富的营养物质,且体积比较大,容易操作,同时卵母细胞的细胞质中存在促进核基因表达的物质,因此研究

48、中通常使用成熟卵母细胞作为核移植的受体,B正确;克隆的两只猕猴以同一只雌性猕猴胎儿为核供体,同一个体的细胞核的基因组是相同的,因此培育出的两只雌性猕猴的基因组成几乎完全相同,C正确;克隆猕猴的成功为大量培育灵长类遗传病模型动物提供了可能,D正确。易错警示易错警示利用核移植技术培育动物体现的是动物细胞核的全能性,而不是动物细胞的全能性。7.(2018江苏无锡期末,31)(7分)多年生禾本科碱茅属草本植物。小花碱茅种子细小,外包被颖壳,研究人员以小花碱茅成熟种子为外植体,对种子脱颖处理,用不同浓度激素配比诱导愈伤组织形成及分化,成功建立了完整的小花碱茅组织培养植株再生体系。以下是部分研究数据,请分

49、析回答:二、非选择题(共7分)处理激素浓度(mg/L)愈伤组织诱导率/%2,4-D6-BA13052.12.225055.22.1330.142.41.9450.146.92.0570.138.6+1.4630.343.72.8(1)诱导小花碱茅愈伤组织最佳的激素配比浓度为。(2)诱导形成愈伤组织的过程称为,该过程在以MS+3%蔗糖+0.7%琼脂(pH78)为基本培养基、25左右的条件下无菌培养,基本培养基中加入蔗糖的目的是。(3)由图分析可知,种子脱颖后,发芽率、污染率的变化是,种子颖壳影响发芽率可能的原因有很多,其中之一是颖壳妨碍了种子和的接触,从而影响了种子细胞的有氧呼吸。(4)对脱颖种

50、子无菌处理的方法有(多选)。用75%的酒精处理5%的次氯酸钠处理无菌水冲洗高压蒸汽灭菌答案答案(1)5.0mg/L的2,4-D、不添加6-BA(2)脱分化避光提供营养物质,调节渗透压(3)种子发芽率显著提高,污染率降低培养基、O2(4)解析解析(1)表中信息显示:处理2的愈伤组织诱导率最高,因此诱导小花碱茅愈伤组织最佳的激素配比浓度为5.0mg/L的2,4-D和不添加6-BA。(2)诱导形成愈伤组织的过程称为脱分化,该过程在以MS+3%蔗糖+0.7%琼脂(pH78)为基本培养基、25左右的避光条件下无菌培养,基本培养基中加入蔗糖的目的是提供营养物质并调节渗透压。(3)分析柱状图可知:种子脱颖后