（江苏专版）高考生物二轮复习 专题八 现代生物科技专题 主攻点之（一）基因工程和克隆技术课件-人教版高三全册生物课件.ppt

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1、专题复习 2个主攻点之（一）基因工程和克隆技术练 好 题研 考 向串 基 础030201研 考 向 高频考点 一包在内练 好 题 典题精选 一站通关串 基 础 主干知识 一网打尽01串 基 础主干知识 一网打尽（基稳才能楼高）方法方法具体操作具体操作直接直接分离分离从自然界已有的物种中分离，如从从自然界已有的物种中分离，如从 中获取中获取人人工工合合成成化学化学方法方法已知核苷酸序列的已知核苷酸序列的 ，直接利用，直接利用DNA合成仪用化合成仪用化学方法合成，不需要模板学方法合成，不需要模板逆转逆转录法录法以以RNA为模板，在为模板，在 作用下人工合成作用下人工合成PCR技术技术扩增扩增基因文

2、库基因文库较小基因较小基因逆转录酶逆转录酶DNA复制复制引物引物热稳定的热稳定的DNA聚合酶聚合酶植物细胞植物细胞动物细胞动物细胞微生物细胞微生物细胞常用常用方法方法 法、法、基因枪法、基因枪法、_ 法法_技术技术_法法受体受体细胞细胞受精卵、体细胞受精卵、体细胞_原核细胞原核细胞农杆菌转化农杆菌转化花粉花粉管通道管通道显微注射显微注射Ca2处理处理受精卵受精卵02研 考 向高频考点 一包在内（方向比努力更重要）考向（一）考向（一）基因工程的操作工具、原理及过程作用作用条件条件延伸：延伸：Taq DNA聚合酶催化子链合成聚合酶催化子链合成7075 复性：使解开的两条复性：使解开的两条DNA单链

3、分别与单链分别与相应的引物结合相应的引物结合5560 变性：使变性：使DNA片段双链解开片段双链解开9095 温度温度控制控制使使DNA聚合酶能够从引物的聚合酶能够从引物的3端开始端开始连接脱氧核苷酸连接脱氧核苷酸引物引物催化合成催化合成DNA子链子链Taq DNA聚合酶聚合酶作为作为DNA复制的模板复制的模板DNA母链母链作为合成作为合成DNA子链的原料子链的原料四种脱氧核苷酸四种脱氧核苷酸提供相对稳定的提供相对稳定的pH环境环境在一定的缓冲液中进行在一定的缓冲液中进行拓知识解读PCR技术5542DNA分子种类分子种类2n2n223602240212含与脱氧核苷酸链等含与脱氧核苷酸链等长的长

4、的DNA分子数分子数2n121424262322222共消耗的引物数量共消耗的引物数量2n2623222220212同时含引物同时含引物A、B的的DNA分子数分子数2n1723132211211含引物含引物A(或或B)的的DNA分子分子2n842含引物的含引物的DNA分子数分子数2n842DNA分子数分子数第第n轮轮第三轮第三轮第二轮第二轮第一轮第一轮循环数循环数限制酶限制酶BamHBclSau3AHind识别序识别序列及切列及切割位点割位点拓知识基因工程中的限制酶和DNA连接酶考向（二）考向（二）综合考查基因工程的应用缓冲液缓冲液50 mmol/LNa2HPO4KH2PO450 mmol/LTrisHCl50 mmol/LGlyNaOHpH6.06.57.07.57.58.08.59.09.09.510.010.5酶相对酶相对活性活性(%)25.440.249.863.270.195.599.585.368.163.741.520.8防易错基因工程操作中的易错点考向（三）考向（三）克隆技术及应用解析解析拓知识关注植物细胞工程的几个问题