素材：PDA培养基与苹果树的胴腐病--高二下学期生物人教版选择性必修3.docx

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1、PDA培养基与苹果树的胴腐病高中生物学选择性必修三简单介绍了培养细菌的LB培养基，植物组织培养的MS培养基以及培养酵母的马铃薯葡萄糖琼脂培养基，即PDA培养基。在科研与生产上，它培是一种很重要的培养基，是研究苹果树胴腐病药效的培养基。PDA培养基是人们对的简称，即Potato Dextrose Agar，依次对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。该培养基用来培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌。培养基配方：马铃薯200克 葡萄糖20克 琼脂1520克 蒸馏水1000毫升自然pH（一般不用调pH）培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基，用于菌类的振荡培养。培养基也可以加入氯霉素或土霉素，加入量为0.2g

2、/L培养基，主要是为了抑制细菌的生长，减少干扰性配制步骤：先洗净去皮，再称取200g马铃薯切成小块，加水煮烂（煮沸2030分钟，能被玻璃棒戳破即可），用八层纱布过滤，加热，再据实际实验需要加15-20g琼脂，继续加热搅拌混匀，待琼脂溶解完后，加入葡萄糖，搅拌均匀，稍冷却后再补足水分至1000毫升，分装试管或者锥形瓶，加塞、包扎，（112、570g/cm2）灭菌30分钟左右后取出试管摆斜面或者摇匀，冷却后贮存备用。苹果树干腐病又称胴腐病，俗称黑膏药病，是由真菌贝氏葡萄座腔菌和葡萄座腔菌侵染所引起的、发生在苹果树上的病害。主要危害定植苗、幼树、老弱树的枝干和果实。幼树受害时，初期多在嫁接部位附近形

3、成暗褐色至黑褐色病斑，沿树干向上扩大，严重时会枯死，病斑上有很多突起的小黑粒点。大树受害时，多在枝干上散生湿润不规则暗褐色病斑，病部溢出浓茶色黏液。病斑在枝上纵向发展严重时会致整个枝干发病，病斑后期失水形成明显凹陷黑褐色干斑。病健交界处往往开裂，病皮翘起以致剥离，病斑表面出现许多小而密的隆起的小黑点。发病严重时，树皮组织死亡，最后可烂到木质部，整个枝干枯死。果实发病首先在树冠上部向阳面的果实上出现褐色小点，扩大后成为圆形或不定形淡褐色病斑，逐渐扩大成同心轮纹状病斑。在适宜条件下病斑扩展迅速，几天内可使全果腐烂。后期病斑表面可产生黑色粒点。例、果树的胴腐病是由某真菌引起的疾病，某中学的科研小组计

4、划分离出该真菌做药物防治实验，为胴腐病的防治提供合理的建议，实验时使用的PDA培养基配方如下表所示：的胴腐病是由某真菌引起的疾病，某中学的科研小组计划分离出该真菌做药物防治实验，为胴腐病的防治提供合理的建议，实验时使用的PDA培养基配方如下表所示：(该真菌在PDA培养基上生长时有特定的形态特征)（1）对该培养基进行高压蒸汽灭菌，一般建议采用的温度和压力分别是 ，除温度和压力之外，影响高压蒸汽灭菌效果的因素还有灭菌对象含菌量、灭菌对象pH、加热与散热速度以及 等(答出2点即可)。（2）为了观察菌落，还需加入到培养基中的成分是 ，培养基转移到三角瓶或试管时必须用 。（3）从染病枝条溃疡处剪取患病组

5、织， 后置于培养基中培养，待菌落形态特征稳定后，用 法将该菌转移至三个分别含有等量0.5%苦水碱剂、40%福美砷、清水的PDA培养基中进行抗药性实验，每隔24 h记录一次最后划线区域的菌落数目。选取菌落数目稳定的培养皿记录作为结果，这样可以防止 。记录结果如下：分析得出结论： 。答案：（1）90和500 g/cm2灭菌时间、灭菌对象的体积、灭菌锅内空气排除程度等（2）琼脂(或凝固剂)三角漏斗（3）消毒划线因培养时间不足而导致遗漏菌落数，计数误差较大0.5%苦水碱剂对该菌抑制效果最强，适合防治胴腐病(或0.5%苦水碱剂和40%福美砷都能抑制该菌生长，0.5%苦水碱剂抑制效果更强，最适合防治胴腐病

6、)解析：（1）由于对该培养基中有葡萄糖成分，为了防止葡萄糖碳化，故在进行高压蒸汽灭菌，一般建议采用的温度和压力分别是90和500g/cm2，除温度和压力之外，影响高压蒸汽灭菌效果的因素还有灭菌对象含菌量、灭菌对象pH、加热与散热速度以及灭菌时间、灭菌对象的体积、灭菌锅内空气排除程度等。（2）菌落在固体培养基上才能形成，故为了观察菌落，还需在该培养基中加入琼脂（或凝固剂）已获得固体培养基，通常用三角漏斗将培养基转移到三角瓶或试管中（3）从染病枝条溃疡处剪取患病组织经过消毒后置于培养基中培养，待菌落形态特征稳定后，用划线法将该菌转移至三个分别含有等量05%水碱剂、40%福美砷、清水的PDA培养基中进行抗药性实验。为了防止因培养时间不足而导致遗漏菌落数，通常选取菌落数目稳定的培养皿进行统计并记录作为实验结果，这样可以避免出现较大的计数误差。记录的实验结果显示，在加入05%水碱剂的培养皿中菌落数最少，40%美福砷次之，故此可得出如下结论：0.5%水碱剂对该菌抑制效果最强，适合防治胴腐病（或0.5%水碱剂和40%美福砷都能抑制该菌生长，0.5%水碱剂抑制效果更强，最适合防治胴腐病）。学科网（北京）股份有限公司