安全输血(2)课件.pptx

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1、红细胞血型免疫分子生物学研究和临床应用：红细胞血型免疫分子生物学研究和临床应用：红细胞血型免疫分子生物学研究和临床应用：红细胞血型红细胞血型ISBTISBT规范分类、命名及表述规范分类、命名及表述 组织血型和器官血型组织血型和器官血型 ABOABO血型、基因、表型亚型血型、基因、表型亚型 RHRH血型：基因结构、表型血型：基因结构、表型 输血前血型检测输血前血型检测输血前血型血清学检测程序输血前血型血清学检测程序人类红细胞血型学实用理论与实验技术人类红细胞血型学实用理论与实验技术人类红细胞血型学实用理论与实验技术(P125-163)P125-163)P125-163)血型检测:ABO血型RH血

2、型不规则抗体检测和鉴定:交叉配血:$常规检测$正反定型不符及原因$ABO血型亚型$获得性B、T多凝集$检测原则及结果处理$常规方法$试剂常规检测抗体鉴定$常规要求$基本试验技术$一般程序及简单鉴定$复杂抗体鉴定盐水交叉配血试验不完全抗体配血试验抗体筛检和交叉配血试验结果分析血型检定血型检定人类红细胞血型学实用理论与实验技术人类红细胞血型学实用理论与实验技术人类红细胞血型学实用理论与实验技术(P126P126P126表表表15-1)15-1)15-1)正反定型不符及原因实验者操作错误红细胞标本问题血清标本血型检定血型检定人类红细胞血型学实用理论与实验技术人类红细胞血型学实用理论与实验技术人类红细

3、胞血型学实用理论与实验技术(P126P126P126表表表15-1)15-1)15-1)实验者操作错误假阳性假阳性：离心速度时间过 试剂或细胞标本盐水污染 不干净试管 .假阳性假阳性：未加入抗体 不认识溶血-为阳性反应 试剂失效或不合格试剂 抗体与细胞比例少 .血型检定血型检定人类红细胞血型学实用理论与实验技术人类红细胞血型学实用理论与实验技术人类红细胞血型学实用理论与实验技术(P126P126P126表表表15-1)15-1)15-1)红细胞标本问题 相容但不同型输血或骨髓移殖后，弱抗原性:亚型、恶性肿瘤、老年人 获得性和遗传性多收集T/Tn，血清标本ABOAg-中和抗体试剂，自身凝集素包被

4、自身红细胞 .血型检定血型检定人类红细胞血型学实用理论与实验技术人类红细胞血型学实用理论与实验技术人类红细胞血型学实用理论与实验技术(P126P126P126表表表15-1)15-1)15-1)纤维蛋白凝块 不规则抗体 规则抗体:免疫抑制病、免疫抑制 6月婴儿、老年人 骨髓移植，大量输血浆 .血清标本治疗病人、老人ABOABO血型血型血清学亚型及抗原变化血型血型血清学亚型及抗原变化.分类主要根据.血清学特征：表15.2、P131.新的ABO亚型或变异型B（A）.多凝集红细胞：表14-1、P119.获得性B红细胞ABOABO血型血型血型血清学亚型及抗原变化血型血清学亚型及抗原变化 分类主要根据:

5、1.1.抗原性弱抗原性弱2.2.正反定型正反定型-血清抗体反应强度血清抗体反应强度3.3.红细胞红细胞H H抗原性强度抗原性强度4.4.唾液中唾液中ABHABH血型抗原量和中和能力血型抗原量和中和能力5.5.凝集状况：混和凝集或弱凝集凝集状况：混和凝集或弱凝集6.6.红细胞吸收放散抗红细胞吸收放散抗A A、抗抗B B能力能力临床有意义抗体和无意义抗体临床有意义抗体和无意义抗体完全抗体和不完全抗体完全抗体和不完全抗体血型检测血型检测不完全抗体的检测不完全抗体的检测交叉配血交叉配血输血前血型血清学检测输血前血型血清学检测要点要点1.检测程序：2.抗体性质：3.检测技术和方法：对完全抗体的检测对不完

6、全抗体的检测（或应用完全抗体的检测、应用不完全抗体的检测）1、ABO血型由血型由Ag-Ab两者决定两者决定-不能只检不能只检“一半血型一半血型”2、病理和生理情况、病理和生理情况-ABO血型正反检测结果不一致血型正反检测结果不一致3、单抗试剂质量要求和安全输血关系：多凝集、单抗试剂质量要求和安全输血关系：多凝集-获得性获得性B4、血型定型只是输血前血型血清学检测程序一部分、血型定型只是输血前血型血清学检测程序一部分血型血清学检测和安全输血血型血清学检测和安全输血要点要点ABO血型1、D弱型弱型-产生抗产生抗D2、D抗原阳性抗原阳性-献血员和病人为献血员和病人为D阳性或阴性？阳性或阴性？3、抗、

7、抗D试剂要求：效价？识别表位？试剂要求：效价？识别表位？4、血型血清学结果和分子生物学结果与安全输血关系？、血型血清学结果和分子生物学结果与安全输血关系？血型血清学检测和安全输血血型血清学检测和安全输血要点要点RH血型血型血清学检测和安全输血血型血清学检测和安全输血要点要点ABO血型RH血型结论1、规范化、标准化检测程序重要性！2、目前临床问题：忽视对不完全抗体的检测3、血型基础研究成果、新技术促进安全输血1、研究和认识RhD抗原的结构2、高特异性的血型试剂3、用于细胞流式仪检测胎母出血（FMH）4、用于ELISA对预防性抗D定量检测5、用于新生儿溶血病的抗D预防性制剂 BRAD-3（IgG3

8、),BRAD-5(IgG1)6、engineered-“null”“antibody”“block”functional active maternal antibodies.基因工程制备的“无效”抗体一对“功能”活性的母体抗体的阻断 (a McAb-Anti-D engineered by altering in the Fc region to render it incapable of reacting with effect cells.such a“null”antibody molecule could protect against RhHDN by binding to fe

9、tal red cells and blocking the binding of functionally active maternal antibodies.)应用抗应用抗D D单克隆抗体的意义单克隆抗体的意义RHDRHD基因基因RCRRCR定型定型Vox Sang 2000;78(suppl 2):083-089Vox Sang 2000;78(suppl 2):083-089Site Directed Mutagenesis of the Human RhD Antigen:Molecular Basis of D Epitopes.Neil D.Avent.Wendy Liu.Do

10、uglas Voak.D-negative phenotypes_two major mecharisms_at the genomic level.RHD gene deletionRHD(psendogene):37bp insertion and nonsense mutation in RHDgene.All weak D phenotypes-:caused by coding region regions in the RHDgene.allered D antigen expression(lack some D epitopes)(previous dogma that wea

11、k D phenotype individuals have merely quartitative but not qualitative differerces in RhD antigon is incorrect.)Partial D phenotypes-1.majority of partial D phenotypes are“Knockonts”where loss of epitopes.2.few partial D phenotypes involve just one amino acid change.3.RoHar phenotype-small number of

12、 D epitopes.RHCE gene exon 5 is replaced with an RHD equivalent.Recent work has concluded that the terms weak and pmtial D phenotypes should be reploced by the term”ABERRANT-D”,as all weak D phenotypes investigated illustrate a unique D phenotype.Wagner Blood 2000 95:2699-2708.Vox Sang 2000;78(suppl

13、):079-082Vox Sang 2000;78(suppl):079-082Monoclonal Antobodies to RhD-Development and used.Marion L Scott.Donglas Voak.The last work-shop clustered the 103 anti-D monoclonal antibodies studied into 24 specificity(epitope)gwaps.No one anti-D monoclonal antibody has been found that is capable of reacti

14、ng with all partial D type.IN DLAGNOSTICSFor DORNOR typing:1.Type all presentations of RhD that could cause immunization in a D negative individual as D positive.2.Use afasingle monoclonal auti-D is therefore not acceptable.3.The most common stuategy is to use one high avidity IgM monoclonal anto-D

15、that gives strong reactivity with normal D phenotype,D and Dbut does not react with Dalongside a polyclonal or other monoclonal reagent that has been specifically selected for detection of D and very weak D.For PATIENT typing:1.Weak D and partial D individual are typing as D negative,as they will th

16、en safely be given D negative blood.2.Detection of weak D by antigloblm tests with an IgG anti-D.(poly or monocloual)is not recommened for patient testing.because of the risk of false positives.3.Reagents used for routine patient typing should not detedt D _for the reason that D individuals lack muc

17、h of the normal D antigen,and therefore readily make potent anti-D when transfused with D positive blood.For REFERENCE laboratorips:panel of monoclonal anti-D with different epitopet specificities are invaluable-samples with aberrant D typing resutls or individual who type as RhD positive but have a

18、nti-D in their seaum.Vox Sang 2000;78(suppl):079-082Vox Sang 2000;78(suppl):079-082McAb-anti-D in diagnostic labs to measure FMH by flow cytometry-more accurate than the Rleihauer Test-assay.ELLSA-biotinylated monoclonal IgG anti-D in a competitive A-European pharmacopoeia study-comparing this with

19、traditional auto-analyzer method for anti-D quantitation.Use of monoclonal anti-D for prophylaxis.1.depends not only on the specificity and avidity of the monoclonal antibody-via its Fv regions.2.but also its functional activity in interating with effector cells-via its Fc region.3.in UK two McAb-An

20、ti-D-clinical trials.BRAD-3,BRAD-5.(IgG3 and IgG1 respectively)4.“null”antibody:engineered by attering targeted residues in the Fc region to render it in capatle of reacting with effector cells.“null”antibody pratect against RRHDSMP1RHCETelomere CentromereRHCECHybridRh boxSMP1RHCE10 98765431SMP11098

21、765432210 9876543121BDownstreamRh boxRHDUpstreamRh box45RHD intron 4 deletion37bp insert in RHDA95bp32C320bp177bpRh C/c Intron 2 polymorphism498bp(+535)Figure 1cPartial DWeak DIntracellular21172761311341882072572643073333893703522862832382261691541109453321、有时候读书是一种巧妙地避开思考的方法。4月-234月-23Wednesday,Apr

22、il 26,20232、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。07:40:5707:40:5707:404/26/2023 7:40:57 AM3、越是没有本领的就越加自命不凡。4月-2307:40:5707:40Apr-2326-Apr-234、越是无能的人，越喜欢挑剔别人的错儿。07:40:5707:40:5707:40Wednesday,April 26,20235、知人者智，自知者明。胜人者有力，自胜者强。4月-234月-2307:40:5707:40:57April 26,20236、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏。26四月20237:40:57上午07:40:574

23、月-237、最具挑战性的挑战莫过于提升自我。四月237:40上午4月-2307:40April 26,20238、业余生活要有意义，不要越轨。2023/4/267:40:5807:40:5826 April 20239、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。7:40:58上午7:40上午07:40:584月-2310、你要做多大的事情，就该承受多大的压力。4/26/2023 7:40:58 AM07:40:5826-4月-2311、自己要先看得起自己，别人才会看得起你。4/26/2023 7:40 AM4/26/2023 7:40 AM4月-234月-2312、这一秒不放弃，下一秒就会有希望。26-Apr-2326 April 20234月-2313、无论才能知识多么卓著，如果缺乏热情，则无异纸上画饼充饥，无补于事。Wednesday,April 26,202326-Apr-234月-2314、我只是自己不放过自己而已，现在我不会再逼自己眷恋了。4月-2307:40:5826 April 202307:40谢谢大家谢谢大家