生化基础知识-比色法.ppt

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1、1比色法原理(分光光度法)2多么美丽五彩斑斓的春天啊多么美丽五彩斑斓的春天啊3L 为什么上述溶液呈现不同的颜色？4自然光自然光-赤橙黄绿青蓝紫赤橙黄绿青蓝紫5波长决定颜色波长决定颜色6光谱光谱-连续不同波长光的集合连续不同波长光的集合7物质对不同波长光的选择性吸收物质对不同波长光的选择性吸收8J由于物质对不同波长光的选择性吸收而引起，物质呈现的是被吸收颜色的互补色。单色光互补光复色光9J 现在知道她的秘密了吗？10l脑筋急转弯l1、红光照射红色溶液，看透过什么色？l2、红光照射绿色溶液，看透过什么色？11透光度 （透射比）Transmittance透光度定义：T 取值为0.0%100.0%全部

2、吸收全部吸收T=0.0%T=0.0%全部透过T=100.0%T=100.0%吸光度定义：12T、A与颜色的关系 透光率（T）吸光度（A）1 0.000 0.75 0.125 0.5 0.301 0.25 0.602 0.17 0.770 0.1 1.000 0.05 1.301 0.01 2.000 0.001 3.000？13测量物质光吸收的装置-比色计14 比色计或分光光度计15物质的光吸收曲线-定性分析16吸光度与光径的关系17吸光度与浓度的关系18l朗伯-比尔定律：A=-lgT=KCL19透光度（transmittance，T，透射率）TIt/I0吸光度（absorbance，A）光密度（optical density，D或OD）A-lgT lg I0/ItLamb-beer定律：AKCL K为吸光系数，C为浓度，L为光径cm摩尔吸光系数:当C1mol/L，L1cm，A=20比色定量与标准浓度物质溶液比较21目视比色法观察方向观察方向空白空白c1c2c3c422 比色计或分光光度计23l比色法成立的基础A.有色或有吸收B.单色光24比色法郎伯-比尔定律物质的选择性光吸收光美丽的大自然