高三生物一轮复习学案:《蛋白质工程的崛起》(人教版选修3).doc
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1、教学无忧 教学事业!2012届高三生物一轮复习学案专题1 基因工程1.2 基因工程的应用、 蛋白质工程的崛起(人教版选修3)【高考目标导航】1、基因工程的应用2、蛋白质工程【基础知识梳理】一、基因工程的应用1、植物基因工程:抗虫、抗病、抗逆转基因植物,利用转基因改良植物的品质。2、动物基因工程:提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物,用转基因动物作器官移植供体3、基因工程药物4、基因治疗:把正常的外源基因导入病人体内,使该基因表达产物发挥作用。二、蛋白质工程1、崛起的缘由:生物的长期进化过程中形成的天然蛋白质、结构和功能符合特定物种生存的需要,却不一定完全符合人类生产和生活的需
2、要。2、目标:根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质的结构进行分子设计。3、操作手段:基因修饰或基因合成4、操作过程:从预期的蛋白质功能出发设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)【要点名师透析】一、基因工程的应用成果1.乳腺生物反应器与工程菌生产药物的比较(1)概念乳腺生物反应器是指将外源基因在哺乳动物的乳腺中特异表达,利用动物的乳腺组织生产药物蛋白。工程菌是指用基因工程的方法,使外源基因得到高效表达的菌类细胞株系。(2)两者的区别比较项目乳腺生物反应器工程菌基因结构动物基因的结构与人类基因的结构基本相同细菌或酵母菌等生物基因的结构与人类基因的结构有较大差
3、异基因表达合成的药物蛋白与天然蛋白质相同细菌细胞内没有内质网、高尔基体等细胞器,产生的药物蛋白可能没有活性受体细胞动物的受精卵微生物细胞导入目的基因的方式显微注射法感受态细胞法生产条件不需严格灭菌,温度等外界条件对其影响不大需严格灭菌,严格控制工程菌所需的温度、Ph、营养物质浓度等外界条件药物提取从动物乳汁中提取从微生物细胞中提取生产设备畜牧业生产,加提取设备工业生产、设备精良2、基因治疗的类型比较比较项目体外基因治疗体内基因治疗成果举例用腺苷酸脱氨酶基因治疗复合型免疫缺陷病用正常基因治疗遗传性囊性纤维化病过程取患者的淋巴细胞细胞培养将腺苷酸脱氨酶基因转入淋巴细胞中筛选将导入成功的淋巴细胞转入
4、患者体内用经过修饰的腺病毒作载体结合正常基因,构建基因表达载体导入患者肺组织中特点操作复杂,成功率高一些操作简单,成功率低3、植物基因工程的应用植物基因工程技术主要用于提高农作物的抗逆能力(如抗除草剂、抗虫、抗病、抗干旱和抗盐碱等)以及改良农作物的品质和利用植物生产药物等方面。(1)提高抗逆性常用抗虫基因:用于抗虫(杀虫)的基因主要是Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制剂基因、淀粉酶抑制剂基因、植物凝集素基因等。常用抗病基因:a.抗病毒基因有:病毒外壳蛋白基因和病毒的复制酶基因;b.抗真菌基因有:几丁质酶基因和抗毒素合成基因其他抗逆基因:环境条件对农作物的生产会造成很大影响,并且这些影响是多方面的,因此
5、,抗逆性基因也有多种多样,如:抗盐碱和干旱的调节细胞渗透压基因、抗冻基因、抗除草剂基因等等。(2)改良植物品质由于人们的食品含有的营养不平衡,不能满足人们对食品的要求,这样,可以通过转基因技术,使植物能够合成某些本来不能合成的物质。如科学家将必需氨基酸含量多的蛋白质编码基因导入植物中,或者改变这些氨基酸合成途径中某种关键酶的活性,以提高氨基酸的含量。(3)生产药物基因工程不但促进了传统技术的变革,也为人类提供了传统产业难以得到的许多昂贵药品,并已形成基因工程制药业的雏形。目前诸如人胰岛素、人生长激素、人脑激素、干扰素、乙肝疫苗、蛋白C、组织血纤维蛋白溶酶原激活剂等数十种基因工程药物已实现商品化
6、。此外,还有促红细胞生成素、白细胞介素2、肾素、心钠素等一大批珍贵药品正处于试用或临床试验阶段。4、动物基因工程的应用(1)用于提高动物生长速度:由于外援生长激素基因的表达可以使转基因动物生长得更快,将这类基因导入动物体内,以提高动物的生长速率。如:转基因绵羊和转基因鲤鱼。(2)用于改善畜产品的品质:基因工程可用于改善畜产品的品质。如:有些人对牛奶中的乳糖不能完全消化或食用后会出现过敏、腹泻、恶心等不适症状,科学家将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组,这样所获得的牛奶其成分不受影响,但乳糖的含量大大减低。(3)用转基因动物做器官移植的供体:目前,人体移植器官短缺是一个世界性的难题,用其它动物的器官替代
7、,又会出现免疫排斥现象,现在,科学家正试图利用基因工程方法对一些动物的器官进行改造,培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆器官。5、基因治疗(1)概念:基因治疗是把正常基因导入病人体内,使该基因的表达产物发挥功能,从而达到治疗疾病的目的,这是治疗遗传病的最有效的手段。(2)方法:体外基因治疗和体内基因治疗体外基因治疗:先从病人体内获得某种相关细胞,进行培养,然后在体外完成基因转移,再筛选成功转移的细胞扩增培养,最后重新输入患者体内,这种方法叫做体外基因治疗。体内基因治疗:直接向人体组织细胞中转移基因的治疗方法叫做体内基因治疗。说明:对于遗传病的治疗最根本的方法是进行基因替换或修复。基因治疗的最佳时
8、期理论上是受精卵时期,这样可以使个体的每个细胞都含有正常基因,但在现实生活中是不可能的,因为不可能人人在受精卵时期进行基因检查。其次是对患者进行相关细胞的基因替换,如:对于遗传性糖尿病患者,只对胰腺的B细胞进行基因替换,该个体就能正常分泌胰岛素,糖尿病得以治疗;但这种局部细胞的基因替换,并没有改变其它部位细胞的基因,如精原细胞,其后代很大可能还会患遗传性糖尿病。二、蛋白质工程和基因工程的关系蛋白质工程基因工程区别过程预期蛋白质功能设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列找到相对应的脱氧核苷酸序列获取目的基因构建基因表达载体将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定实质定向改造或生产人类所需的蛋
9、白质定向改造生物的遗传特性,以获得人类所需的生物类型或生物产品结果可产生自然界没有的蛋白质只能生产自然界已有的蛋白质结果(1)蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程(2)基因工程中所利用的某些酶需要通过蛋白质进行修饰、改造【感悟高考真题】1、(2011山东高考)(8分)人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示。(1)卵母细胞除从活体输卵管中采集外,还可从已处死的雌鼠 中获取。(2)图中的高血压相关基因作为 ,质粒作为 ,二者需用 切割后连接成重组载体,该过程与质粒上含有 有关。(3)子代大鼠如果 和 ,
10、即可分别在分子水平和个体水平上说明高血压相关基因已成功表达,然后可用其建立高血压转基因动物模型。(4)在上述转基因大鼠的培育过程中,所用到的主要胚胎工程技术是 、早期胚胎培养和胚胎移植。【解析】本题主要考查基因工程和胚胎工程技术。(1)获取卵母细胞的途径:从活体输卵管中采集,从已处死的雌鼠卵巢中获取。(2)题干中论述:利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠,所以推测目的基因为与高血压相关的基因,质粒为载体,两者必须用相同的限制性内切酶切割,有相同的黏性末端,才能连接,能被限制性内切酶切割,是因为具有限制性内切酶的切割位点。(3)如果检测到相应蛋白质,即可在分子水平进行检测目的基因是否表达,
11、如果检测已患高血压,即可在个体水平进行检测目的基因是否表达。 (4)在上述转基因大鼠的培育过程中,所用到的主要胚胎工程技术是体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植。【答案】(1)卵巢 (2)目的基因 载体 同一种限制性内切酶 限制性内切酶的切割位点(3)检测到相应蛋白质 出现高血压 (4)体外受精2、(2010天津高考)(26分) .(14分)下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉素抗性金银,BamHI、HindIII、SmaI直线所示为三种限制酶的酶切位点。据图回答:(1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用 限制酶同时酶切载体和人乳
12、铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含 的培养基上进行。(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是 (填字母代号)。A.启动子 B. tetR C.复制原点 D. ampR(3)过程可采用的操作方法是 (填字母代号)。A.农杆菌转化 B. 大肠杆菌转化 C.显微注射 D. 细胞融合(4)过程可采用的生物技术是 。(5)对早期胚胎进行切割,经过程可获得多个新个体。这利用了细胞的 性。(6)为检测人乳铁蛋白是否成功表达,可采用 (填字母代号)技术。A.核酸分子杂交 B. 基因序列分析 C.抗原抗体杂交 D. PCR【解析】I(1)据图,仅将人乳铁蛋白基因切割出来,需要在
13、人乳铁蛋白基因的左侧用BanHI切割,右侧用HindIII切割。当人乳铁蛋白基因和质粒连接成重组质粒后,TETR基因被人乳铁蛋白基因隔开,不是完整的,而anpR基因是完整的,所以筛选含有重组载体的大肠肝菌首先需要字含氨苄青霉素的培养基上进行。(2)基因表达的调控序列在启动子上。(3)将重组质粒导入动物细胞,常采用显微镜的方法。(4)过程的左侧是早期胚胎,右侧是代孕牛,过程采用的生物技术是胚胎移植。(5)将细胞培养为个体,利用了细胞的全能性。(6)检测目的基因在手提细胞中是否表达,常采用抗原-抗体杂交技术。【答案】.(1)Hind和BamH;氨苄青霉素(2)A(3)C(4)胚胎移植技术(5)全能
14、(6)C3、(2009重庆高考)下表有关基因表达的选项中,不可能的是基因表达的细胞表达产物A细菌抗虫蛋白基因抗虫棉叶肉细胞细菌抗虫蛋白B人酪氨酸酶基因正常人皮肤细胞人酪氨酸酶C动物胰岛素基因大肠杆菌工程菌细胞动物胰岛素D兔血红蛋白基因兔成熟红细胞兔血红蛋白【解析】抗虫棉叶肉细胞中存在细菌抗虫蛋白基因,细菌抗虫蛋白基因能够表达产生细菌抗虫蛋白;正常人皮肤细胞中含有人酪氨酸酶基因,人酪氨酸酶基因能够表达产生人酪氨酸酶;大肠杆菌工程菌细胞存在动物胰岛素基因,动物胰岛素基因能够表达产生动物胰岛素;兔成熟红细胞中无细胞核,所以无兔血红蛋白基因不能表达产生兔血红蛋白。此题为容易题,识记理解类。【答案】D4
15、、(2009天津高考)(30分)水稻种子中70的磷以植酸形式存在。植酸易同铁、钙等金属离子或蛋白质结合排出体外,是多种动物的抗营养因子,同时,排出的大量磷进入水体易引起水华。(1)磷元素除了形成植酸外,还可以出现在下列_分子或结构中(多选)。A.核糖B.ATPC.核糖体D.核膜(2)种植芦苇能有效抑制水华的发生,表明芦苇与引起水华的藻类关系是_。(3)植酸酶可降解植酸,在谷物类饲料中添加植酸酶可提高饲料的_ 利用率。(4)酵母菌中植酸的活性较高。下图是从不同类型酵母菌的发酵液中提取植酸酶的工艺流程。据图回答:植酸酶_(/)属于分泌蛋白。若植酸酶和的肽链组成不同,其差异体现在_。提纯的植酸酶需做
16、活性条件测定。右图为测定结果。图中的自变量可为_(答一种);因变量可以通过测定_来表示。(5)为从根本上解决水稻中的高植酸问题,可将植酸酶基因导入水稻,培育低植酸转基因水稻品种。下图是获取植酸酶基因的流程。据图回答:图中基因组文库_(小于/等于/大于)cDNA文库。B过程需要的酶是_;A、C过程中_(可以/不可以)使用同一种探针筛选含目的基因的菌株。目的基因和除从构建的文库中分离外,还可以分别利用图中_。和_为模板直接进行PCR扩增,该过程中所用酶的显著特点是_。(6)已获得的转植酸酶基因水稻品系植酸含量低,但易感病,下图为选育低植酸抗病水稻品种的过程。图中两对相对性形状分别由两对基因控制,并
17、独立遗传。采用上图育种过程,需从_代开始筛选,经筛选淘汰后,在选留的植株中低植酸抗病纯合体所占的比例是_。选留植株多代自交,经筛选可获得低植酸抗病性状稳定的品性。【解析】本题考查物质的元素组成、生物的种间关系、蛋白质、酶、基因工程、遗传定律的相关知识,涉及的知识点较多,综合性很强。(1)只有核糖中不含磷元素,ATP(磷酸基团)、核糖体(含RNA)、核膜(含磷脂)中均含有磷元素。(2)芦苇能抑制水华的发生,表明芦苇与水华的藻类关系是竞争。(3)植酸易同铁、钙等金属离子或蛋白质结合排出体外,是多种动物的抗营养因子,而植酸酶可降解植酸,因此在谷物类饲料中添加植酸酶可提高饲料的营养成分的利用率。(4)
18、分析图可知,植酸酶需要经过两次离心,因此植酸酶属于分泌蛋白。若植酸酶和的肽链组成不同,其差异体现在氨基酸的种类、数量和排列顺序的不同。从图的可看出,自变量可为温度或pH,因变量可以通过测定单位时间内植酸的降解量或植酸降解量产物的生成量来表示。(5)分析获取植酸酶基因的流程图可知,图中基因组文库大于cDNA文库。B过程需要的酶应该是逆转录酶,因为A、C过程都能获得含目的基因的菌株,所以可以使用同一种探针进行筛选。目的基因和除从构建的文库中分离外,还可以分别利用图中DNA和cDNA为模板直接进行PCR扩增,该过程中所用酶的显著特点是耐高温。(6)根据上图育种过程,所需性状在F2代中才开始出现,所以
19、应从F2代开始筛选。从图中可以看出,低植酸抗病是双显性(在F2中占9/16),经筛选淘汰后,在选留的植株中纯合体所占的比例是1/9。【答案】(1)BCD(2)竞争关系(3)营养成分(4)I 氨基酸的种类、数量和排列顺序不同 温度(或PH) 单位时间内植酸的降解量(或植酸降解产物的生成量)(5)大于逆转录酶 可以DNA cDNA耐高温(6)F2 1/95、(2009福建高考)(10分)转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有Pst、Sma、EcoR、Apa等四种限制酶切割位点。请回答: (1)构建含抗病基因的表达载体A时,应选用限制酶 ,对 进行切割。(2)培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织
20、细胞的生长,欲利用该培养筛选已导入抗病基因的香蕉细胞,应使基因表达载体A中含有 ,作为标记基因。(3)香蕉组织细胞具有 ,因此,可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中、依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的 。【解析】本题考查基因工程的有关知识。(1)从图可看出,只有Pst、EcoR两种酶能保持抗病基因结构的完整性,所以构建含抗病基因的表达载体A时,应选用限制酶Pst、EcoR两种酶,对抗病基因的DNA和质粒进行切割。(2)卡那霉素能抑制香蕉愈伤组织细胞的生长,欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞,应使基因表达载体A中含有抗卡那霉素基因,以此作为标记基因。(3)香
21、蕉组织细胞具有全能性,因此,可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中、依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的脱分化和再分化。【答案】(1)Pst、EcoR 含抗病基因的DNA 、质粒(2)抗卡那霉素基因(3)全能性 脱分化、再分化6、(2009重庆高考)(16分)小鼠基因敲除技术获得2007年诺贝尔奖,该技术采用基因工程、细胞工程、杂交等手段使小鼠体内的某一基因失去功能,以研究基因在生物个体发育和病理过程中的作用。例如现有基因型为BB的小鼠,要敲除基因B,可先用体外合成的突变基因b取代正常基因B,使BB细胞改变为Bb细胞,最终培育成为基因敲除小鼠。(1)基因敲除过程中外源
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