2023年药物分析考试表格版.pdf

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1、 药物分析 总结绪论1.【药物】（d r ug）是指用于预防、治疗、诊断人的疾病，有目的地调节人的生理机能并规定有适应症或者功能主治、用法用量的物质。【药品】(m e d i c i na l p r o d uc t s)指由药物经一定的处方和制剂工艺制备而成的制剂产品，是可供临床使用的产品。2.药物分析的任务：（1.制定药品质量标准、药品质量监督：研究、生产、供应、临床药学研发的工具、“眼睛”：运用物理、化学、物理化学等有关方法和技术研究。（3.直接参与解决要学发展中的重大问题（广义）3.GL P 药物非临床研究质量管理规范GCP 药物临床实验质量管理规范GM P 药品生产质量管理规范GS

2、 P 药品经营质量管理规范GAP 中药材生产质量管理规范（试行）4.人用药品注册技术要求国际 协调会（IQ I）有关的技术要求（Q）有1 1种第一章药品质量研究的内容与药典概况1.【药品标准】系根据药物自身的理化和生物学特性，按照批准的来源、处方、生产工艺、贮藏运输条件等所指定的，用来检测药品质量是否达到用药要求并衡量其质量是否均以稳定的技术规定。2.溶解度极易溶解1 g （m l）能在溶剂不到1 m l中溶解易溶l g （m l）能 在 溶 剂 中 溶 解溶解l g （m l）能在溶剂1 0 m l 3 0 m l中溶解略溶l g （m l）能在溶剂3 0 m l l 0 0 m l中溶解微

3、溶l g （m l）能在溶剂l O O m r i O O O m l中溶解极微溶解l g (m l)能在溶剂1 0 0 0 m l 1 0 0 0 0 m l中溶解几乎不溶或不溶l g （m l）能在溶剂1 0 0 0 0 m l中不能完全溶解3.检查方法和限度：原料药的含量（勃如未规定上限时，系 指不超过1 0 1.0%。制剂的含量限度一般范围是9 5.0k 1 0 5.0%4.【药品标准物质】指供药品标准中物理和化学测试和生物方法实验用，具有确定特性量值，用于校准设备、评价检验方法和给供试药物赋值的物质。其包括对照品、标准品、对照药材、参考品等。【标准品】指用于生物检定、抗生素和生化药品

4、含量或效价测定的标准物质，用国际单位（u g）计，以国际标准品进行标定。【对照品】用于鉴别、检查、含量测定和矫正检定仪器性能的标准物质，除另有规定，均按干燥 品（或无水物质）进行计算后使用的化学药品标准物质。【对照药材、对照提取物】主要为中药检验中使用的标准物质。5.精密称定称取重量应准确至所取重量的千分之一称定称取重量应准确至所取重量的百分之一精密量取量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求量取用量筒或按照量取体积的有效数位选用量具6 .【恒重】除另有规定，指供试品连续两次干燥或炽灼后重量差异在0.3 mg 一下的重量；干燥至恒重的第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续干燥

5、1 H 后进行；炽灼至恒重的第二次称重应在继续炽灼3 0 mi n后进行。7 .【空白实验】指在不加供试品或以等量溶剂替代供试液的情况下，按同法操作所得的结果。8 .酸碱度检查所用的水，均系指新沸放冷至室温的水。9 .药品质量研究内容：原料药质量研究在确证化学结构或组分的基础上进行，更注重于自身的理化与生物学特性、稳定性、杂质与纯度控制。制剂的质量研究在原料药研究的基础上进行，结合制剂处方工艺，更注重其安全性、有效性、均一性和稳定性。1 0 .中华人民共和国药典(C h P)】指国家对药品质量及检验方法所做的技术规定，是药品研制、生产、经营、使用和监督管理等均应遵循的法定依据。1 1 .中国药

6、典内容：【凡 例(g e ne r al not i c e)指对药典内容的说明、注解。【正 文(monog r aph s)指药典所收载的药物及其制剂的质量标准。【附 录(appe nd i c e s)主要收载制剂通则、通用检验方法和指导原则。【引 索(i nd e x)中文、英文都有1 2 .C h P 进 展:2 0 1 0 版第一部一一中药、中药饮片、植物油脂、成方单方制剂第二部一一化学药品、抗生素、生化药品、放射性药品。药用辅料第三部一一生物制品1 3 .国外主要药典U S P 一一美国药典。现 和 国家处方集合并出版，简称U S P-N FB P-英国药典E P 一一欧洲药典。又

7、简写为P h.E urJ P 一 日本药局方P h.I n t 国际药典第二章药物鉴别实验一、药物鉴别实验的定义与目的1 .【药物的鉴别实验】是根据药物的分子结构、理化性质，采用物理、化学或生物学的方法来判断药物的真伪。2 .意义：药物检验工作中的首要任务，只有药物在鉴别无误的情况下，进行药物的杂质检查、含量测定等分析才有意义3 .目地：证实贮藏在有标签的容器中的药物是否为其所标识的药物，而不是对未知物进行定性分析二、鉴别实验的项目(一)、性状(d i s c r i p t i o n)1 .【外观】：指药品的外表感官和色泽，包括药品的聚集状态、晶型、色泽及臭、味等2 .溶解度：分为极易溶解

8、、易溶、溶解、略溶、微溶、极微溶解、几乎不容或不溶3 .物理常数(1.)【熔 点(m e l t i n g p o i n t)：一种物质按规定方法测定，由固体融化成液体的温度、熔融同时分解的温度或在融化时自初熔至全熔的一段温度。三种测定方法：第一法一一易粉碎固体药品；第二法一一不易碎的固体和脂肪酸；第三法一一凡士林(2.)【比旋度(s p e c i f i c r o t a t i o n):在一定波长和温度下，偏振光透过长1 d m 且 每 1 m l 中含有旋光性物质1 g的溶液时测得的旋光度。它是反映手性药物特性及纯度的主要指标。叫公式:ac*l(3.)【吸收系数】：在给定波长、

9、溶剂和温度等条件下，吸光物质在单位浓度】单位液层厚度时的吸收度。用途:考察原料的质量应用紫外分光光度法的定量依据7百分吸收系数:（单位是g/1 0 0 m l）(二)【一般鉴别实验(g e n e r a l i d e n t i f i c a t i o n t e s t)：依据某一类药物的化学结构或理化性质的特征，通过化学反应来鉴别药物真伪。只能证实是某一类药物，而不能证实是哪一种。只适用于纯品，混合物或有干扰时不适用。有机氟化物1 .氧瓶燃烧法进行有机破坏2 .用茜素氟蓝试液和硝酸亚铀试液进行滴定，呈蓝紫色有机酸盐水杨酸盐方法一：滴加三氯化铁试液一滴呈紫色方法二：加稀盐酸，沉淀在醋

10、酸镂试液中溶解酒石酸盐加氨制硝酸银试液数滴，置水浴中加热，生成银镜芳香伯胺类加稀盐酸、亚硝酸钠、碱 性 蔡 酚 试 液，生成橙黄到猩红色沉淀托烷生物碱类V i t a l i 反应：加固体氢氧化钠，显深紫色无机金属盐钠、钾、钙、领盐的焰色反应钠离子一一鲜黄色；钾离子一一紫色；钙离子一一砖红色；领离子一一黄绿色，绿色玻璃透视显蓝色铁盐加过量N a O H 后加热，发生氨臭。使水湿的红色石蕊试纸变蓝、被硝酸亚汞湿润的滤纸变黑无机酸根氯化物方法一：滴加硝酸银试液，生成乳白色沉淀。沉淀滴加氨试液即溶解，再滴加硝酸酸化后沉淀复生成。方法二：加等量二氧化镒，加硫酸湿润，缓缓加热产生氯气，能使水湿润的碘化钾

11、淀粉试纸变蓝硫酸盐方法一：滴加氯化钢试液生成白色沉淀，在盐酸、硝酸中均不溶解方法二：滴加硫酸铅试液，生成白色沉淀方法三:加盐酸不产生沉淀（与硫代硫酸盐区别）硝酸盐方法一：加等量硫酸后沿管壁加硫酸亚铁试液，分层，界面呈棕色方法二：加硫酸与铜丝加热，产生红棕色蒸汽方法三：滴加高镒酸钾试液，紫色不退去。（与亚硝酸区别）（三）专属鉴别实验三、鉴别方法1.化学鉴别方法2.光谱鉴别法呈色反应鉴别法如玮三酮反应、v a t a l i 反应、重氮化-偶合反应沉淀生成反应鉴别法如氯化银、银镜反应荧光反应鉴别法1.药物本身可以发射荧光2.药物与适当试剂反应后发射荧光气体生成反应鉴别法可生成氨气、碘蒸气或硫化氢的

12、药物使试剂褪色的鉴别法如维生素c的二氯靛酚反应测定生成物的熔点应用较少3.色谱鉴别法：薄层色谱法和高效液相色谱法紫外光谱鉴别法有共甑双键，在紫外-可见光区有特征吸收光谱红外光谱鉴别法（用滨化钾、氯化钾制备）试样制备方法：压片法、糊法、膜法、溶液法T L C 法比移值:基线至展开中心的距离基线至展开前沿的距离第三章药物的杂质检查药物的杂质与限量1.【药物的 纯 度Purities】药物的纯净程度.要求：不断提高评价：药物的纯度需综合考虑药物的外观性状、理化常数、杂质检查和含量测定，综合评定。药物纯度与试机纯度共同点均规定所含杂质的种类和限量不同点药物纯度 从用药安全、有效和对药物稳定性等方面考虑

13、，只有合格品和不合格品试剂纯度是从杂质可能引起的化学变化对使用的影响以及试剂的使用范围和使用目的加以规定,它不考虑杂质对生物体的生理作用及毒副作用2 .【杂质(I m p u r i t i e s)】药物中存在的无治疗作用或影响药物的稳定性和疗效，甚至对人体健康有害的物质.1)来源：生产过程、贮藏过程2)杂质种类杂 质 的 种 类一 族 杂 质 和 持 殊 杂 质松 采 煤 分 类工 笆 杂 质、降 解 杂 质、反 应物 和 试 剂 中 混 八 的 杂 质按 毒 性 分 类毒 性 杂 质 和 信 号 杂 质按 理 化 性 质有为h芸泻天-底 留分 类谑L剂a.一般杂质：自然界分布广泛，在多种

14、药物的生产和贮藏过程中容易引入杂质，它们含量的高低与生产工艺水平密切相关。所以也常称为信号杂质。收藏于附录。b.特殊杂质：是指在特定的药物生产和贮藏过程中引入的杂质，也称有关物质。这类杂质随药物不同则不同。3 .【杂质的限量(人加药物中所含杂质的最大允许量。通常用百分之儿或百万分之几(parts per million,ppm)表示。药 物 的 杂 质 与 限 量对 照 法杂质限量控制限 量 检 查-灵 敏 度 法比较法定 量 测 定 杂 质 含 量注意平行原则(1.)对照法取一定量的被检测杂质标准液和一定量供试品溶液，在相同条件下处理，比较反应结果，以确定杂质含量是否超过限量.注意平行原则灵

15、敏度法在供试品溶液中加入一定量试剂，在一定条件下反应，不得有正反应出现。比较法取供试品一定量依法检查，测定特定的杂质参数，与规定的限量相比，不得更大。与对照法相比，无需对照品。(2.)计算杂质限量L标准溶液浓度C 标准溶液体积V供试品量S注意：单位统一二、杂质的检查方法1 .药物杂质检查的主要依据：药物与杂质在物理性质或化学性质上的差异。2 .杂质的命名：化学名，有关物质，检测方法。3 .杂质限度4.杂质的检查方法报告限度(reportingthreshold)超出此限度的杂质均应在检测报告中报告，并应报告具体的检测数据。鉴定限度(identification threshold)超出此限度的

16、杂质均应进行定性分析，确定其化学结构质控限度(qualificationthreshold)质量标准中一般允许的杂质限度，如制定的限度高于此限度。应有充分的依据。杂 质 的 检 查 方 法化 学 方 法色 谱 方 法光 谱 方 法热 分 析 法杂质检查方法显沆淀/产 气/滴 定TLC,HPLC,G CUVJR原子吸收TGA.DTA.DSCQ）化学方法显色当杂质与试剂产生颜色时，采用比色法控制杂志限量。沉淀当杂质与试剂产生沉淀时，采用比浊法控制杂志限量产气当杂质与试剂产生气体时，采用相应的气体检查方法来控制杂质的限量。滴定滴定剂只与杂质反应，以一定浓度的滴定液滴定药物中的杂质，可以定量检测杂质的

17、含量。（2.）色谱法一一杂志检查的首选方法A.薄层色谱法（TLC）：名称方法结果判断适用条件杂质对照品法方法：根据杂质限量，取供试品溶液和一定浓度的杂质对照品溶液，分别点样于同一薄层板上，展开、斑点定位。供试品溶液除主斑点外的其他斑点与相应杂质对照品溶液相应主斑点比较，进行判断。已知杂质并能制备杂质对照品供试品溶液自身稀释对照法配制一定浓度的供试品溶液，并按限度要求稀释至一定浓度做为对照溶液，将供试品溶液和对照溶液分别点样同一薄层板，展开并斑点定位。供试品所显杂质斑点与自身稀释对照液相应主斑点比较，不得更深。适用于杂质的结构不确定；或虽杂质结构确定，但无杂质对照品的情况。杂质的结构不确定；或虽

18、杂质结构确定，但无杂质对照品。杂质对照品与供试品溶液自身稀释对照并用法已知杂质有对照品，采用杂质对照品法检查；共存未知杂质或没有对照品的杂质，采用供试品溶液自身稀释对照法检查。药物中存在多个杂质对照药物法适用条件：无合适杂质对照品或供试品杂质斑点与主成分斑点颜色差异，难以判断限量时，采用与供试品相同的药物做为对照。B.HPLC 法名称方法结果判断适用条件杂质对照品 法（外标法）配制杂质对照品溶液和供试品溶液，分别取一定量注入色谱仪，测定杂质对照品溶液和供试品溶液中杂质峰的相应。按外标法计算杂质浓度。有杂质对照品，且进样量能精确控制。加校正因子 的 主 成分 自 身 对照法r AS/CS _ A

19、xAR/CR r C x./C s,T测量杂质的峰面积，分别乘以相应的校正因子后，与对照溶液主成份峰面积比较。己知杂质的控制。优点：省去杂质对照品，又考虑到杂质与主成分响应因子的不同而引起的测量误差。不加校正因子的主成分自身对照法没有杂质对照品面积归一化法供试品中结构相似、相对含量较高且限度范围较宽的杂质含量的粗略考察没有杂质对照品。（3.）气相色谱（G O 法：适用于挥发性杂质的检测（4.）【热分 析 法（Thermal analysis）:测定物质的物理化学性质与温度关系的仪器分析方法。热重分析法(Thermogravimetric Analysis,TGA)利用热天平在程序控温的条件下测

20、量物质的质量随温度变化的热分析技术，可计算出样品在相应温度范围内减失质量的百分率。本法可区分药物中所含水分是吸附水还是结晶水差热分析法(Differential Thermal Analysis,DTA)在程序控制温度下，测量供试品和惰性参比物（常用石英砂、煨 制 MgO）之间的温度差与温度（或时间）关系的热分析技术。定性和纯度检定一一根据峰的数目、形状、位置对供试品进行纯度判别差示扫描量热法(Differential Scanning Calorimetry,DSC)测量保持供试品和惰性参比物的温度相同，系统所需输给供试品或参比物的能量差随温度（或时间）变化的热分析技术。用于待测物质的鉴别、

21、晶型鉴别、纯度检查以及熔点和水分等的测定，更适合于测量物质在物理变化或化学变化中焰的变化。三、药物中一般杂质的检查1.氯化物检查法原理利用氯化物在硝酸酸性条件下与硝酸银反应，生成氯化银胶体微粒而显白色浑浊液，与一定量标准氯化钠溶液在相同条件下产生的氯化银浑浊程度比较，判定氯化物是否符合限量操作样品 水至25。/、稀 HN O JO m l、水）比较浑浊程度暗处放置5 min标准液（一定量）-结果暗处放置5min（避免AgCI分解）；自上而下的观察；黑色的背景上注思加稀硝酸的目的：a.避免产生碳酸银、氧化银、磷酸银沉淀。b.加速氯化银混浊的生成，产生较好的乳浊，50ml供试液含稀硝酸10ml为宜

22、.供试品溶液不澄清处理方法：供试品溶解后溶液不澄清，应过滤，过滤时的滤纸要先用含硝酸的水溶液（1-1 0 0）洗涤，除去滤纸中含有的氯化物.试品溶液有色时的处理方法：内消色法。2.硫酸盐检测方法原理硫酸盐与氯化钢在稀盐酸酸性条件下反应，生成硫酸钢的白色浑浊液，与一定量标准硫酸钾溶液与氯化钢在相同条件下生成的浑浊比较.操作嬖产40m l畀，25。譬 产,皿50ml标准溶液 2ml 5ml注意a.加稀盐酸的目的：防止碳酸电贝或磷酸电贝形成领盐沉淀对比浊的影响。但酸度过大可使硫酸钢溶解，降低检查灵敏度。b.供试品溶液不易溶解时：加入有机溶剂溶解C.供试品溶液有色时：内消色法3.铁 盎 继 查原理硫氨

23、酸盐法：ChP、USP铁盐在盐酸酸性溶液中与硫氟酸镂生成红色可溶性硫氟酸铁配离子，与一定量标准铁溶液用同法处理后所呈的颜色进行比色.茄基醋酸法：BPo筑基醋酸还原三价铁离子为二价铁离子，在氨碱性溶液中作用生成红色配位离子，比色测定操作样品H Q 产 a 3。%硫 鹤 安 上心/标准溶液2 4 m l 过硫酸镀灵敏度高，但试剂贵。4.重金属检查法结果比色管观察注意a.标准硫酸铁镀溶液含硫酸的原因：防止三价铁离子水解。b.过硫酸铉的作用：氧化供试品中二价铁变三价铁，防止硫氟酸铁降解C.某些药物（如葡萄糖）需要用硝酸作氧化剂处理，但须加热煮沸除去过量硝酸。因为亚硝酸与硫氟酸根反应生成红色的亚硝酰硫氟

24、化物d.过量的硫鼠酸镀，增加硫氟酸铁配离子稳定性，消除其他酸根离子的干扰e.色调不一致或颜色较浅时I须加正丁醇或异戊醇提取比较。f.某些有机药物特别是环状有机物需经炽灼破坏方法使用范围第一加硫代乙队胺族摩于水、稀酸.乙尊的药物弟二乐火为后的疏代乙酰胺击含笄环.杂环以及唯您于，K、神酸,乙醇的药物第三法磁化钠弟速于域性7K源波而维于濠于稀酸或在稀酸中生成浣度的药场第叩黑微孔遮膜成重金属含量低的药物（25 Ng）5.碑盐检查法原理硫代乙酰胺法：硫代乙酰胺在弱酸性（PH3.5醋酸盐缓冲液）条件下水解，产 生H2So与重金属离子（以Pb2+为代表）生成黄色到棕黑色的硫化物混悬液，与一定量标准铅溶液经同

25、法处理后所呈颜色比较，判定限量是否符合规定。适用于溶于水、稀酸、乙醇的药物，是最常用的方法炽灼后的硫代乙酰胺法:供试品先炽灼破坏后，使有机结合的重金属游离，再按第一法检查。适用于含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸及乙醇的有机药物硫 化 钠 法：在 碱 性 介 质 中，以N a2s为 显 色 剂,使Pb2+与S2-作 用 生 成PbS的混悬液，与一定量标准铅溶液经同法处理所呈颜色比较，不得更深。适用于溶于碱性水溶液而难溶于稀酸或在稀酸中即生成沉淀的药物.操作三支比色管：甲管标准铅溶液，乙丙管供试品。取供试品适量，加NaOH试液5ml和 水2 0 m l使溶解后，置纳氏比色管中，加Na2s试液5滴，摇

26、匀,与一定量标准铅溶液经同法处理所呈颜色比较.结果当丙管中显出颜色不浅于甲管时，乙管中显出的颜色与甲管比较，不得更深；当丙管中显出得颜色浅于甲管，按第二法重新检查注忌a.用硫代乙酰胺为显色剂。硫代乙酰胺在实验条件下水解产生H 2S,与重金属离子反应。b.溶液的pH对于金属离子与硫化氢呈色影响较大,pH在3.03.5时，呈色较完全。C.供试品溶液有颜色时的处理：1）外消色法I稀焦糖溶 液 调 节I I指示剂调节2）内消色法d.供试品中微量高价Fe3+存在:弱酸性溶液中Fe3+氧化H2S析出S,产生混浊影响检查.加入抗坏血酸或盐酸羟胺使Fe3+还原为Fe2+。e.供试品为铁盐（大量的Fe3+）:F

27、e3+在HCI溶液中能形成配位化合物用乙醛提取.水层加氨试液调至碱性，残存的Fe3+可用KCN掩蔽，按第三法检查.a.H N 03处理后，必须蒸干除尽NO.b.炽 灼 温 度 严 格 控制:500-600.C.控制酸中重金属的影响，对照品同法处理d.含钠盐或氟的有机药物在炽灼时改用伯用 烟 或 硬 质 玻 璃（玛瑙）蒸发皿.N a2s对玻璃有腐蚀性,久置产生絮状物,应临用新配.6.【干燥 失 重（loss on drying）指药品在规定的条件下，经干燥后所减失的量，以百分率表示。主要检查药物中的水分及其他挥发性物质。原理古 蔡（Gutzeit）氏法：金属锌与酸作用产生新生态的氢与药物中微量碑

28、盐反应生成具挥发性的神化氢,遇澳化汞试纸产生黄色至棕色的碎斑，与同条件下一定量标准种溶液所生成的碎斑比较，判断神盐的量.二乙基二硫代氨基甲酸银 法（Ag-DDC 法）白 田 道 夫法：SnCI2在H C I中能将碑盐还原为棕褐色的胶态碑次磷酸法：在盐酸酸性溶液中，次磷酸还原神盐为棕色的游离碑操作供试品K IT S“三ASH”加 心 今 棉 花标准液/酸性SnCl2Ts HC1 1遇HgBn试纸红 色 胶 态银：目视比色法或510nm 测定A值用于硫化物、亚硫酸盐以及含锦药物等碎盐检查；不受S2-,SO32-,Sb干扰；灵敏度较古蔡氏法低结果比较碑斑颜色深浅注思a.K I的作用还原剂:A s5+

29、-A s3+o五价碑生成AsH3的反应速度比三价碑速度慢，加 入K I使五价碑还原为三价碑后再与活泼氢反应，以增大AsH3的生成速度.b.酸性SnCI2的作用：还原齐IJ（表现 在2方面）I.将五价碑还原为三价碑1 1.将K I被氧化生成的12再还原为1-与K I还可抑制睇化氢生成。c.PbAc2棉花的作用：排除硫化物的干扰。d.供试品是硫化物，亚硫酸盐,硫代硫酸盐：加入浓硝酸处理e.供试品是铁盐：先加酸性SnCI2试液使Fe3+-Fe2+f.共价键结合的神化物：进行有机破坏一一酸破坏法或碱破坏法本法不仅用于神盐的限量检查，而且可用作微量碎盐的含量测定.含睇药物不干扰测定灵敏度高对含镶药物中碑

30、盐的检查不能用古蔡氏法，需用白田道夫法.优 点:不 受Sb干扰缺 点：灵敏度低恒重：试品连续两次干燥或炽灼后重量差异在0.3mg 一下的重量；干燥至恒重的第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续干燥1H后进行；炽灼至恒重的第二次称重应在继续炽灼30m in后进行。常用方法分类适用范围温度常压恒温干燥法受热稳定的药物1 0 5 C减压干燥法与恒熔点低或受热分解6 0 C温减压干燥法的供试品干燥剂干燥法受热分解或易升华的供试品常温热分析法7.水分测定法：水分包括结合水和吸附水。药典收载费休氏法和甲苯法。费休氏法可准确测定药物中的结晶水、吸附水和游离水。费休氏试法a.原理：利用碘将二氧化硫氧化为三氧

31、化硫时，需要一定量的水分参与反应，根据消耗碘的量来测定水分的含量。B.水与费休氏试液摩尔比：水：碘：二氧化硫：甲醇：口 比 噬=1：1：1：1：3供试品中水分的含量（）=（A：）F*j 0 0%c.W（A-供试品消耗的Fisher试液的体积；B空白消耗的Fisher试液的体积；F-每ImIFisher试剂相当于水的重量（mg）；W-供试品的重量）d.指示终点方法：Fisher试液颜色（淡黄色一一红棕色）永停法8.【炽灼 残 渣（residue on ignition）：有机药物经炭化或挥发性无机药物加热分解后，再经高温炽灼，所产生的非挥发性无机杂质的硫酸盐。用于控制有机药物经炭化或挥发性无机药

32、物中非挥发性无机杂质。原理：供试品置已炽灼至恒重的生瑞，精密称定，缓缓炽灼至完全炭化，放冷至室温，除另有规定外，加入硫酸使湿润，低温加热除尽硫酸蒸气后，于 高 温（700-800OC）炽灼至完全灰化，在干燥器内冷却至室温，精密称定后，再（700-800OC）炽灼至恒重。炽灼残渣（）=残渣及空母锅重-空母锅重供试品重xlOO%药典要求：ChP和 BP均要求恒重；USP和 JP 残渣在限度外时才要求恒重。ChP和 USP均先炭化后再加硫酸；BP和 JP 则加硫酸消化两次；温度：ChP 为 700-800OC；USP 为 80025oC；BP 为 8OO0C；JP 为 450-550oC注意事项：1

33、）供试品取用量由限量和称量误差决定。一般应使炽灼残渣量为l-2 m g,限量一般为0.1-0.2%；2）放入高温炉内之前，务必蒸发除尽硫酸，以免腐蚀炉膛；3）除尽硫酸蒸气，应低温加热，以防由于温度过高，影响测定结果；4）含氟样品采用伯蛆烟：5）炽灼残渣留作重金属检查是，温度控制在500-600OC；6）恒重的第二次称重在继续炽灼30min后进行。9.【易炭 化 物（readily carbonizable substances）：指药物中存在遇硫酸易炭化或氧化而呈色的微量有机物质。多为未知结构的化合物，用硫酸呈色的方法控制他们的含量。采用目视比色法。检查：甲管：加入各品种项下规定的对照溶液5m

34、l；乙管：加 硫 酸（94.5%-95.5%,g/g）5 m l,分次缓缓加入规定量的供试品，振摇使溶解。均静置15m in,甲乙管比较，乙管不得比甲管更深。对照液种类：1）同”溶液颜色检查项下“标准比色液；2）由比色用氯化钻、比色用重铝酸钾、比色用硫酸铜按规定配制的对照液；3）高锯酸钾液10.【残留溶剂（residual solvents）：合成原料药、辅料或制剂生产过程中使用的，但在工艺中未能完全除去的有机溶剂。分类毒性使用举例一类溶剂毒性较大，致癌，对环境有害避免使用苯、四氯化碳二类溶剂有一定毒性限量使用乙庸、三氯甲烷、二氯甲烷、毗咤、四氢吠喃、甲苯三类溶剂危险性较小推荐使用乙酸、乙酸、

35、乙酸乙酯、乙醇、甲酸药典规定：残留溶剂检查方法为气相色谱法（GC）。可采用填充柱，也可采用毛细管柱。检测器常为氢火焰离子化检测器（FID）,对含卤素的残留溶剂采用电子俘获检测器（ECD）。F ID 使用时，需加尾吹气，作用：提高灵敏度，消除检测器死体积的柱外效应。*色谱系统与系统适用性试验（System Suitability Tests;SSTs）：用待测物的色谱峰计算的N 应大于1000；内标物与待测物的两个色谱峰的R21.5；每个标准溶液进样5 次，所得待测物与内标物峰面积之比的RSDW5%；若以外标法测定，所得待测物峰面积的RSDW10%。分类适用范围给一注 毛细管柱顶空进样等第 法

36、温法筌一件 毛细管向空进样程弟一依 序升温法第三法 溶液直接进样法被检查的有机溶剂数量少且极性差异较小的情况被检查的有机溶剂数量多且极性差异较大的情况11.溶液颜色（color of solution）检查药物中有色杂质，ChP采取三种检查方法（P134）：标准比色液比色法；分光光度法；色差计法A.标准比色液比色法：将药物溶液与规定的标准比色液的颜色比较。标准比色液是比色用重铭酸钾、硫酸铜、氯化钻按规定的比例制备各种色调标准贮备液，然后用色调标准贮备液和水按规定的比例制备各种色调色号标准比色液。B.分光光度法检查有色杂质：配制一定浓度的供试品溶液，在规定波长测定吸收度，吸收度不得过规定值。C.

37、色差计法：色差计直接测定溶液的三刺激值，对溶液颜色进行定量表述和分析。目视法难以判断时使用。12.【澄清 度（clarity of solution）：检查药品溶液的混浊程度，可反应药物溶液中的微量不溶性杂质，主要用于制备注射剂的原料药或注射剂检查。ChP中澄清度的检查法为比浊法方法：暗室内垂直在伞棚灯下，检查供试品溶液和浊度标准液。浊度标准贮备液制备：1.0%的硫酸啡溶液与10%乌洛托品等容量混合，生成的甲醛腺在水中形成白色浑浊,以不同量的水稀释可得不同浊度的标准液。浊度标准贮备液制备温度：25土:TC澄清的定义：供试品溶液的澄清度相同于所用的溶剂，或不超过0.5号浊度标准液。注意事项：光线

38、，暗处浊度最高：温度251；溶剂多为水，有时用酸、碱、有机溶剂。水为新沸过的冷水四、特殊杂质的检查与鉴定方法（略）第四章药物的含量测定方法与验证一、药物的含量：药物所含主成分的量，用于评价药物的质量。1.原料药：多以表示（1.）按原料药本身形式计算其含量（2.）由于药物组成不定，需以另一种稳定形式计算含量2.制剂：（1.）按 标 示 量 计 算（2.）直接用含量规定范围（主药含量微）（3.）以重量规定含量范围（多为复方制剂）二、定量分析方法的分类与特点定量分析方法的分类与特点基于化学或物理学原理含量测定容量分析滴 定（直接、间接）光谱分析对黑晶法、吸收系致法、计算分光光度法、比&法色谱分析HP

39、LC（外标、内标）、G C（外标、内标、标淮加入）基于生物学原理1.容量分析（1.）容量分析的化学反应必须满足的条件：反应要有一定的化学计量关系，并且要能定量地完成反应速度要快，即反应在瞬间完成必须要有合适的确定滴定终点的方法（2.）滴定分析法：酸碱滴定法;沉淀滴定法；配位滴定法;氧化还原法；非水溶液滴定法等（3.）容量分析的特点：简便易行耐用性高结果准确：相对误差小于0.2%专 属 性 差 用于化学原料药的含量测定（4.）滴定度：指 每 1m l规定浓度的滴定液相当于被测物质的量，以 T 表示，中国药典以mg表示。T（mg/ml）=mxxMb（a、b一分别为被测物、滴定液的摩尔数;m一滴定液

40、的摩尔浓度，-待测物的毫摩尔质量（分子量）（5.）直接滴定法用滴定液直接滴定被测药物，计量滴定液消耗的量，计算供试品的含量药物的百分含量%q x i o o%含量%=上且 xl00%=.XT*X100%W W间接滴定法生成物滴定法供试品+试剂A f 化合物8化合物B+滴定液C-化合物D计量滴定液消耗的量，计算供试品的含量计算同直接滴定法回滴定法（剩余滴定法）原理：先在待测样品溶液中加定量、过量的滴定液 A,使它和样品反应，等反应结束后，再用另一种滴定液B 来回滴剩余的滴定液Ao不做空白的含量计算含量 =（匕一*100%W特点：A、B 两种滴定液均需标定做空白的含量计算方法含量%=迎二x wo%

41、W特点：仅需标定滴定液B 的浓度2.光谱分析法一一紫外-可见分光光度法 朗伯比耳定律（Lambert-Beer定律）:A=E*C*LE.1%（2）c m：一定波长下，溶液浓度为1%（W/V）,液层厚度为1cm时，物质的吸收度一定量依据对溶剂的要求:截止波长：使用范围不能小于截止使用波长.纯度：在检测波长处是否符合要求，以空气做空白，测定溶剂加吸收池的吸收值.含量测定测定要求:空白对照：配制供试品溶液的同批溶剂吸收池：1cm石英吸收池吸收波长：该品种项下规定波长2nm 之内吸收值：0.30.7对照品比较法供试品的浓度为：a含量 1 0 0%=&x 100%WArxW吸收系数法按规定方法配制供试品

42、，在规定的波长及吸收厚度下，测定吸收度，计算供试品的百分吸收系数。再按在相同条件下，标准对照品测到的百分吸收系数。含量=程4乂100%注意：此法对仪器要求高，必须注意校正和检定吸收系数100计算分光光度法一般不宜用作含量测定（当测定波长处于吸收曲线陡升或陡降部位时，对测定影响大）比色法供试品本身无吸收或有吸收但干扰大，可加入适当的显色剂后测定。此法影响因素较多，实验平行操作3.色谱分析法高效液相色谱法对仪器的一般要求：A.固定相种类:反相色谱系统使用非极性填充剂。（极性：流动相固定相）B.流动相组成：甲醇-水、乙睛-水C.检测器：紫外检测器注意：使用C18时，流动相中含有的有机溶剂比例应不低于

43、5%药典中规定的固定相种类、流动相组成及检测器类型不能随意改变系统适用性试验 试验指标：理论塔板数、分离度、重复性、拖尾因子A.色谱柱的理论塔板数（n）B.分离度（R）注意：峰宽的概念C.重复性：5次连续进样，RSD应不大于2.0%D.拖尾因子（T）测定法（大多数采用峰面积法）气相色谱法外标法按规定精密称取对照品和供试品，配制成溶液，分别精密取一定量，注入仪器，记录色谱图，测量对照品和供试品峰面积。=Q AA A 4AR特点：简单，但要求进样量准确；操作条件稳定。内标法按各品种项下的规定，精密称取（或量取）药物对照品和内标物质，分别配成溶液；精密量取各溶液适量，混合配成校正因子测定用的对照溶液

44、；进样，记录谱图，得 峰 高（H）或峰面积（A）配制含有内标的供试品溶液，进样，记录谱图，得峰面积（或峰高）A/校正因子/=彳 与AR/CR供试品浓度cx=于,r/7 c特点：可避免因样品前处理及进样体积误差对结果的影响。对仪器的一般要求A.色谱柱种类：毛细管柱或填充柱B.载气：氮气C.检测器：氢火焰离子化检测器，检测温度一般高于柱温，不得低于150度注意：药典中规定的固定液品种、检测器类型及特殊指定的色谱柱材料不能随意改变色谱系统适用性试验：照HPLC项下测定方法A.外标法测定供试品中主成分含量B.内标法测定供试品中主成分含量C.标准加入法测定供试品中主成分含量：精 密 称（量）取待测成分对

45、照品适量，配成对照品溶液，精密量取一定量加入到供试品溶液中，根据外标法或内标法测定含量。_ C 工+&C X _ MC X十丁、一G注意：自动进样内标法或外标法手动进样内标法定量顶空进样用标准加入法定量，可消除基质效应的影响4.含量分析方法的比较容量分析简便、准确、耐用性好相对误差在0.2%以下适用于对准确度和精密度要求高的供试品测定专属性差化学原料药的测定光谱简便、快速、灵敏药物制剂、溶出度、分析相对误差在2%5%适用于对灵敏度要求高、样本量大的供试品测定专属性稍差含量均匀度色谱分析灵敏度及专属性高适用于复杂的供试品测定定量时需要对照品药物制剂二、样品分析的前处理方法1.不经有机破坏的分析方

46、法(L)直接测定法适用：金属原子不直接与碳原子相连的含金属有机药物；某些C M键结合不牢固的有机金属药物(2)水解法：酸水解后测定法:用于水难溶的含金属的有机药物碱水解后测定法：用于含卤素有机药物结构中卤素原子结合不牢固的药物还原法：用于含碘有机药物2.经有机破坏的分析方法：适用于金属原子与碳原子结合牢固的有机金属药物，使有机结合状态的金属及卤素转变为可测定的无机化合物，再选用适当的方法测定。湿法破坏一一凯氏定氮法原理：将含氮药物与硫酸在凯氏烧瓶中共热，药物分子中有机结构被氧化分解(消解)成二氧化碳和水，有机结合的氮转变为无机氮，与过量硫酸结合成硫酸氢锈，经氢氧化钠碱化后释放氨气，随水蒸气储出

47、，用硼酸溶液或定量酸滴定液吸收后，滴定。操作：消解完全、蒸储完全、吸收完全、滴定完全(2)干法破坏高温炽灼法A.原理：将有机物灼烧灰化使有机结构分解而待测元素转化为无机元素或可溶性无机盐B.限制：对于含易挥发性金属(如汞、种等)有机药物不适用氧瓶燃烧法(Oxygen Flask combustion method)：A.原理：将有机药物在充满氧气的密闭的燃烧瓶中进行燃烧，有机结构分解为C 02和H 2 0,用适当的吸收液吸收待测元素(已转化为不同价态的氧化物)，以供待测元素的检查或定量测定用。B.操作：燃烧完全、吸收完全C.特点：a.适用于分析含卤素、硫、磷 等 有 机 药 物b.简便、快速、

48、破坏完全D.仪器装置:a.燃烧瓶:一般为不同体积的磨口、硬质玻璃锥形瓶，瓶塞严密、空心、底部熔封一根直径为1m m伯丝，柏丝下端是网状或螺旋状，长度约为瓶身长度的2/3.b.无灰滤纸-用于固体样品；纸袋-适用于液体样品c.吸收液：1 .作用-将样品经燃烧分解所产生的各种价态的卤素、硫、氮、硒等，定量地吸收并转变为便于测定的价态H.吸收液的选择待测元素燃烧产物吸收液氟氟化氢水氯氯化氢水一NaOH溶液漠单质澳、澳化氢水一Na0HS02饱和溶液碘单质碘、少 量15+、12+、1-1硝酸银法：1-1,水一NaOHS02饱和溶液间接碘量法：水一NaOH溶液硫三氧化硫浓H202水液硒Se02（少量 Se0

49、3）硝酸溶液E.操作方法：a.固定已称好样品的无灰滤纸或纸袋b.燃烧瓶中加入规定量及种类的吸收液c.用水把瓶口湿润，小心急速通入氧气，立即用表面皿盖好d.点燃滤纸或纸袋尾部，迅速放入装有吸收液的燃烧瓶中，拧紧瓶盖，用少量水封口 e.待燃烧完全、无黑色碎片后，充分混合，使生成的烟雾被完全吸收后，放 置15分钟，再用少量水冲洗瓶塞和伯丝，合并洗液和吸收液。f用同样的方法作空白试验F.注意事项：a.按规定方法操作:根据供试品的取用量选择不同的燃烧瓶(其目的在于：样品能在足够的氧气中燃烧分解完全；有利于将燃烧分解产物较快地吸收到吸收液中；防止爆炸的可能性)b.燃烧瓶要洁净，不能残留有机溶剂，不能用有机

50、润滑剂涂抹瓶塞c.要有防爆措施d.氧气要充足，确保燃烧完全，产物不能有黑色炭化物e.燃烧产生的烟雾要被完全吸收。充分振摇和放置都是为了保证吸收完全.f.测定含氟有机化合物时要用石英燃烧瓶G.应用：含卤素、硫、磷、氟及硒等有机药物的鉴别、杂质的检查及含量测定。三、药品质量标准分析方法验证1.准确度(1)定义：表示分析结果与真实值接近的程度。准确度一般以百分回收率表示.(2)含量测定方法的准确度原料药的含量测定回收率%=号xlOO%加入量制剂的含量测定：回收率=4%g x lO O%已知制剂各组分加入量回收率=测得底量Xi(x)%不能获得制剂各组分加入量杂质定量测定的准确度:可向原料药或制剂中加入