DB11∕T 1809-2020 实验动物 微生物检测.docx

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1、ICS65.020.30CCSB44DB11北京市地方标准DB11/T18092020代替DB11/T828.12011，DB11/T1053.12013，DB11/T1459.12017，DB11/T1459.22017，DB11/T1459.32017，DB11/T1459.42018，DB11/T1459.52018实验动物微生物检测LaboratoryanimalMicrobiologicaltesting2020-12-24发布2021-04-01实施北京市市场监督管理局发布DB11/T18092020目次前言.II1范围.12规范性引用文件.13术语和定义.44等级分类.45检测要

2、求.46检测程序.127检测方法.158检测规则.209结果判定.2110结论与报告.21附录A（规范性）猫泛白细胞减少症病毒PCR检测方法.23附录B（规范性）猫杯状病毒RT-PCR检测方法.24附录C（规范性）猫疱疹病毒I型PCR检测方法.26附录D（规范性）猫免疫缺陷病毒荧光PCR检测方法.27附录E（规范性）猫传染性腹膜炎病毒RT-PCR检测方法.29附录F（规范性）猫肠道冠状病毒RT-PCR检测方法.31附录G（规范性）猫白血病病毒荧光PCR检测方法.33附录H（规范性）巴尔通体荧光PCR检测方法.35附录I（规范性）空肠弯曲杆菌PCR检测方法.36附录J（规范性）鸽痘病毒荧光PCR

3、检测方法.37附录K（规范性）实验鱼4种分枝杆菌的区分鉴定方法.38附录L（规范性）实验鱼PCR检测方法.39参考文献.40IDB11/T18092020实验动物微生物检测1范围本文件规定了实验动物的微生物等级分类、检测要求、检测程序、检测方法、检测规则、结果判定、结论与报告。本文件适用于实验小型猪、实验猪、实验牛、实验羊、实验狨猴、实验长爪沙鼠、实验雪貂、实验猫、实验鸡、实验鸭、实验鹅、实验鸽、实验鱼（斑马鱼和剑尾鱼）的微生物检测。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新

4、版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB4789.7食品安全国家标准食品微生物学检验副溶血性弧菌检验GB4789.15食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数GB/T14926.1实验动物沙门菌检测方法GB/T14926.3实验动物耶尔森菌检测方法GB/T14926.4实验动物皮肤病原真菌检测方法GB/T14926.5实验动物多杀巴斯德杆菌检测方法GB/T14926.6实验动物支气管鲍特杆菌检测方法GB/T14926.8实验动物支原体检测方法GB/T14926.10实验动物泰泽病原体检测方法GB/T14926.11实验动物大肠埃希菌0115a,c:K(B)检测方法GB/T14926.1

5、2实验动物嗜肺巴斯德杆菌检测方法GB/T14926.13实验动物肺炎克雷伯杆菌检测方法GB/T14926.14实验动物金黄色葡萄球菌检测方法GB/T14926.15实验动物肺炎链球菌检测方法GB/T14926.16实验动物乙型溶血性链球菌检测方法GB/T14926.17实验动物绿脓杆菌检测方法GB/T14926.18实验动物淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒检测方法GB/T14926.19实验动物汉坦病毒检测方法GB/T14926.22实验动物小鼠肝炎病毒检测方法GB/T14926.23实验动物仙台病毒检测方法GB/T14926.24实验动物小鼠肺炎病毒检测方法GB/T14926.25实验动物呼肠孤病毒

6、III型检测方法1DB11/T18092020GB/T14926.28实验动物小鼠细小病毒检测方法GB/T14926.46实验动物钩端螺旋体检测方法GB/T14926.47实验动物志贺菌检测方法GB/T14926.48实验动物结核分枝杆菌检测方法GB/T14926.49实验动物空肠弯曲杆菌检测方法GB/T14926.56实验动物狂犬病病毒检测方法GB/T14926.57实验动物犬细小病毒检测方法GB/T14926.59实验动物犬瘟热病毒检测方法GB/T14926.60实验动物猕猴疱疹病毒I型（B病毒）检测方法GB/T14926.62实验动物猴免疫缺陷病毒检测方法GB/T14926.63实验动物

7、猴T淋巴细胞趋向性病毒I型检测方法GB/T14926.64实验动物猴痘病毒检测方法GB/T16551猪瘟诊断技术GB/T17999.1SPF鸡微生物学监测第1部分：SPF鸡微生物学监测总则GB/T17999.5SPF鸡微生物学监测第5部分：SPF鸡琼脂扩散试验GB/T17999.6SPF鸡微生物学监测第6部分：SPF鸡酶联免疫吸附试验GB/T18089蓝舌病病毒分离、鉴定及血清中和抗体检测技术GB/T18090猪繁殖与呼吸综合征诊断方法GB/T18637牛病毒性腹泻/粘膜病诊断技术规范GB/T18638流行性乙型脑炎诊断技术GB/T18641伪狂犬病诊断方法GB/T18646动物布鲁氏菌病诊断

8、技术GB/T18652致病性嗜水气单胞菌检验方法GB/T18653胎儿弯曲杆菌的分离鉴定方法GB/T18935口蹄疫诊断技术GB/T19915.7猪链球菌2型荧光PCR检测方法GB/T21674猪圆环病毒聚合酶链反应试验方法GB/T27517鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性与经典毒株复合RT-PCR方法GB/T27528口蹄疫病毒实时荧光RT-PCR检测方法GB/T27530牛出血性败血病诊断技术GB/T27539动物流感检测A型流感病毒通用荧光RT-PCR检测方法GB/T27637副结核分枝杆菌实时荧光PCR检测方法GB/T27639结核病病原菌实时荧光PCR检测方法GB/T27981牛传

9、染性鼻气管炎病毒实时荧光PCR检测方法GB/T27982小反刍兽疫诊断技术GB/T34750副猪嗜血杆菌检测方法GB/T36789动物狂犬病病毒核酸检测方法2DB11/T18092020NY/T536鸡伤寒和鸡白痢诊断技术NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范NY/T543牛流行热微量中和试验方法NY/T544猪流行性腹泻诊断技术NY/T546猪传染性萎缩性鼻炎诊断技术NY/T548猪传染性胃肠炎诊断技术NY/T550动物和动物产品沙门氏菌检测方法NY/T560小鹅瘟诊断技术NY/T561动物炭疽诊断技术NY/T562动物衣原体病诊断技术NY/T563禽霍乱（禽巴氏杆菌病）诊断技术

10、NY/T566猪丹毒诊断技术NY/T576绵羊痘和山羊痘诊断技术NY/T1186猪支原体肺炎诊断技术NY/T1244接触传染性脓疱皮炎诊断技术NY/T1247禽网状内皮增生病诊断技术NY/T1468丝状支原体山羊亚种检测方法NY/T3072禽结核病诊断技术SC/T7201.2鱼类细菌病检疫技术规程第2部分：柱状嗜纤维菌烂鳃病诊断方法SC/T7201.3鱼类细菌病检疫技术规程第3部分：嗜水气单胞菌及豚鼠气单胞菌肠炎病诊断方法SC/T7201.4鱼类细菌病检疫技术规程第4部分：荧光假单胞菌赤皮病诊断方法SN/T1087Q热检疫技术规范SN/T1171山羊关节炎-脑炎和绵羊梅迪-维斯纳病检疫技术规范

11、SN/T1172鸡白血病检疫技术规范SN/T1173鸡病毒性关节炎检疫技术规范SN/T1207猪痢疾检疫技术规范SN/T1315牛地方流行性白血病检疫技术规范SN/T1447猪传染性胸膜肺炎检疫技术规范SN/T1554鸡法氏囊病检疫技术规范SN/T1869食品中多种致病菌快速检测方法PCR法SN/T1919猪细小病毒病检疫技术规范SN/T2439鱼鳃霉病检疫技术规范SN/T2552.8乳及乳制品卫生微生物学检验方法第8部分：普通变形杆菌和奇异变形杆菌检验SN/T2702猪水泡病检疫技术规范SN/T2744鸭病毒性肠炎检疫技术规范SN/T2847水貂阿留申病检疫技术规范3DB11/T180920

12、20SN/T3392国境口岸莱姆病螺旋体检验规程SN/T3464鸭病毒性肝炎I型检疫技术规范SN/T3484绵羊肺腺瘤病检疫技术规范SN/T3724进出口食品中幽门螺杆菌的检验方法SN/T4556鸭疫里默氏菌病检疫技术规范3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1实验动物laboratoryanimal经人工饲育，对其携带的微生物和寄生虫实行控制，遗传背景明确或者来源清楚，用于科学研究、教学、生产和检定以及其他科学实验的动物。来源：GB149252010，3.13.2普通级实验动物conventional(CV)laboratoryanimal不携带所规定的人兽共患病病原、动物烈性传染病病

13、原以及对科学实验有重大干扰的病原的实验动物。3.2.1无特定抗原抗体普通级实验动物specificantigen&antibody-freeconventional(CV)laboratoryanimal普通级实验动物中未免疫特定的疫苗，且经检测不携带实验要求排除的特定病原微生物抗原抗体的实验动物。3.3无特定病原体级实验动物specificpathogenfree(SPF)laboratoryanimal除普通级实验动物应排除的病原外，不携带主要潜在感染或条件致病和对科学实验干扰大的病原的实验动物。3.4无菌级实验动物germfree(GF)laboratoryanimal无可检出的一切生命

14、体的实验动物。4等级分类根据对微生物和寄生虫控制的程度，实验动物分为普通级实验动物、无特定病原体级实验动物和无菌级实验动物三个等级。5检测要求4动物等级病原微生物实验猪检测要求实验小型猪检测要求普通级日本脑炎病毒（Japaneseencephalitisvirus）猪链球菌2型（Streptococcussuisserotype2）-口蹄疫病毒（Foodandmouthdiseasevirus）猪瘟病毒（Classicalswinefevervirus）高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（Highlypathogenicporcinereproductiveandrespiratorysyndro

15、mevirus）-布鲁氏菌（Brucella）钩端螺旋体（Leptospira）红斑丹毒丝菌（Erysipelothrixrhusiopathiae）-猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus）-皮肤病原真菌（Pathogenicdermalfungi）-无特定病原体级日本脑炎病毒（Japaneseencephalitisvirus）猪链球菌2型（Streptococcussuisserotype2）口蹄疫病毒（Foodandmouthdiseasevirus）猪瘟病毒（Classicalswinefevervirus

16、）高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（Highlypathogenicporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus）-布鲁氏菌（Brucella）钩端螺旋体（Leptospira）红斑丹毒丝菌（Erysipelothrixrhusiopathiae）-伪狂犬病病毒（Pseudorabiesvirus）猪圆环病毒2型（Porcinecircovirus2）猪细小病毒（Porcineparvovirus）猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus）猪胸膜肺炎放线杆菌（Actinob

17、acilluspleuropneumoniaes）猪肺炎支原体（Mycoplasmahyopneumoniae）猪痢疾短螺旋体（Brachyspirahyodysenteriae）传染性胃肠炎病毒（Transmissiblegastroenteritisvirus）DB11/T180920205.1外观检查对待检实验动物的精神状态、行为、被毛、天然孔分泌物进行外观检查。5.2微生物检测项目5.2.1实验猪和实验小型猪各等级病原微生物检测项目按照表1的规定执行。表1实验猪和实验小型猪各等级病原微生物检测项目5动物等级病原微生物实验牛检测要求实验羊检测要求普通级口蹄疫病毒（Foodandmouth

18、diseasevirus）布鲁氏菌（Brucella）牛分枝杆菌（Mycobacteriumbovis）-炭疽芽胞杆菌（Bacillusanthrac）钩端螺旋体（Leptospira）伯氏疏螺旋体（Borreliaburgderferi）-贝氏柯克斯体（Coxiellaburnetii）小反刍兽疫病毒（Pestedespetitsruminantsvirus）-绵羊/山羊痘病毒（Sheep/Goatpoxvirus）-无特定病原体级口蹄疫病毒（Foodandmouthdiseasevirus）布鲁氏菌（Brucella）牛分枝杆菌（Mycobacteriumbovisis）-炭疽芽胞杆菌（B

19、acillusanthrac）钩端螺旋体（Leptospira）伯氏疏螺旋体（Borreliaburgderferi）-贝氏柯克斯体（Coxiellaburnetii）牛病毒性腹泻-粘膜病毒（Bovineviraldiarrheavirus）-牛传染性鼻气管炎病毒（Infectiousbovinerhinotracheitisvirus）-副结核分枝杆菌（Mycobacteriumparatuberculosis）胎儿弯曲杆菌（Campylobacterfetus）多杀性巴氏杆菌（Pasteurellamultocida）-牛白血病病毒（Bovineleukemiavirus）-动物等级病原微

20、生物实验猪检测要求实验小型猪检测要求无特定病原体级猪流行性腹泻病毒（Porcineepidemicdiarrheavirus）-支气管败血波氏杆菌（Bordetellabronchiseptica）多杀性巴氏杆菌（Pasteurellamultocida）副猪嗜血杆菌（HaemophilusParasuis）-皮肤病原真菌（Pathogenicdermalfungi）-猪水泡病病毒（Swinevesiculardiseasevirus）-沙门氏菌（Salmonellaspp.）-无菌级任何可检出的生命体注：“”表示必检项，普通级实验动物可以免疫，无特定病原体级实验动物和无特定抗原抗体普通级实验

21、动物不可免疫；“”表示必检项，要求阴性；“”表示需要时检测项目，要求阴性；“-”表示不检项目。表2实验牛和实验羊各等级病原微生物检测项目6DB11/T18092020表1实验猪和实验小型猪各等级病原微生物检测项目（续）5.2.2实验牛和实验羊各等级病原微生物检测项目按照表2的规定执行。动物等级病原微生物实验牛检测要求实验羊检测要求无特定病原体级衣原体（Chlamydia）蓝舌病病毒（Bluetonguevirus）牛流行热病毒（Bovineephemeralfevervirus）-小反刍兽疫病毒（Pestedespetitsruminantsvirus）-绵羊/山羊痘病毒（Sheep/Goat

22、poxvirus）-伪狂犬病病毒（Pseudorabiesvirus）-山羊支原体（Mycoplasmacapricolum）-口疮病毒（Orfvirus）-a梅迪-维纳斯病毒（Maedi-visnavirus）-b山羊关节炎-脑炎病毒（Caprinearthritisencephalitisvirus）-a绵羊肺腺瘤病毒（Ovinepulmonaryadenomatosisvirus）-无菌级任何可检出的生命体注：“”表示必检项，普通级实验动物可以免疫，无特定病原体级实验动物和无特定抗原抗体普通级实验动物不可免疫；“”表示必检项，要求阴性；“”表示需要时检测项目，要求阴性；“-”表示不检项目

23、。a仅适用于实验绵羊；b仅适用于实验山羊。动物等级病原微生物检测要求普通级猕猴疱疹病毒I型(B病毒)（CercopithecineHerpesvirusType1）淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒（LymphocyticChoriomeningitisVirus）沙门氏菌（Salmonellaspp.）皮肤病原真菌（Pathogenicdermalfungi）志贺菌（Shigellaspp.）结核分枝杆菌（Mycobacteriumtuberculosis）无特定病原体级猕猴疱疹病毒I型(B病毒)（CercopithecineHerpesvirusType1）淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒（Lymphocy

24、ticChoriomeningitisVirus）沙门氏菌（Salmonellaspp.）皮肤病原真菌（Pathogenicdermalfungi）志贺菌（Shigellaspp.）结核分枝杆菌（Mycobacteriumtuberculosis）仙台病毒（Sendaivirus）猴免疫缺陷病毒（Simianimmunodeficiencyvirus）猴T淋巴细胞趋向性病毒1型（SimianTlymphotropicvirustype1）猴痘病毒（Simianpoxvirus）小肠结肠炎耶尔森菌（Yersiniaenterocolitica）DB11/T18092020表2实验牛和实验羊各等级

25、病原微生物检测项目（续）5.2.3实验狨猴各等级病原微生物检测项目按照表3的规定执行。表3实验狨猴各等级病原微生物检测项目7动物等级病原微生物检测要求普通级汉坦病毒（Hantavirus）淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒（LymphocyticChoriomeningitisVirus）沙门氏菌（Salmonellaspp.）皮肤病原真菌（Pathogenicdermalfungi）无特定病原体级汉坦病毒（Hantavirus）淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒（LymphocyticChoriomeningitisVirus）沙门氏菌（Salmonellaspp.）皮肤病原真菌（Pathogenicderma

26、lfungi）仙台病毒（SendaiVirus）小鼠肝炎病毒（MouseHepatitisVirus）小鼠肺炎病毒（PneumoniaVirusofMice）呼肠孤病毒III型（Reovirustype）小鼠细小病毒（MinuteVirusofMice）绿脓杆菌（Pseudomonasaeruginosa）泰泽病原体（Tyzzersorganism）支原体（Mycoplasmaspp.）多杀巴斯德杆菌（Pasteurellamultocida）支气管鲍特杆菌（Bordetellabronchiseptica）嗜肺巴斯德杆菌（Pasteurellapneumotropica）幽门螺杆菌（Heli

27、cobacterpylori）金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）肺炎链球菌（Streptococcuspnemoniae）乙型溶血性链球菌（Betahemolyticstreptococcus）鼠棒状杆菌（Corynebacteriumkutscheri）产酸克雷伯杆菌（Klebsiellaoxytoca）大肠埃希菌（Escherichiacoli）肺炎克雷伯杆菌（Klebsiellapneumoniae）无菌级任何可检出的生命体注：“”表示必检项，要求阴性；“”需要时检测项目，要求阴性。动物等级病原微生物检测要求无特定病原体级空肠弯曲菌（Campylobacterje

28、juni）奇异变形杆菌（Proteusmirabillis）无菌级任何可检出的生命体注：“”表示必检项，要求阴性；“”表示需要时检测项目，要求阴性。DB11/T18092020表3实验狨猴各等级病原微生物检测项目（续）5.2.4实验长爪沙鼠各等级病原微生物检测项目按照表4的规定执行。表4实验长爪沙鼠各等级病原微生物检测项目8动物等级病原微生物检测要求普通级沙门氏菌（Salmonellaspp.）皮肤病原真菌（Pathogenicdermalfungi）志贺菌（Shigellaspp.）阿留申病毒（Aleutiandiseasevirus）犬瘟热病毒（Caninedistempervirus）犬

29、细小病毒（Canineparvoviurs）狂犬病毒（Rabiesvirus）无特定病原体级沙门氏菌（Salmonellaspp.）皮肤病原真菌（Pathogenicdermalfungi）志贺菌（Shigellaspp.）阿留申病毒（Aleutiandiseasevirus）支原体（Mycoplasmaspp.）乙型溶血链球菌（Beta-hemolyticstreptococcus）支气管鲍特杆菌（Bordetellabronchiseptica）肺炎克雷伯杆菌（Klebsiellapneumoniae）弯曲杆菌（Campylobacterspp.）多杀巴斯德杆菌（Pasteurellamu

30、ltocida）肺炎链球菌（Streptococcuspneumoniae）奇异变形杆菌（Proteusmirabilis）金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）绿脓杆菌（Pseudomonasaeruginosa）A型流感病毒（InfluenzaA）犬瘟热病毒（Caninedistempervirus）犬细小病毒（Canineparvoviurs）狂犬病毒（Rabiesvirus）汉坦病毒（Hantavirus）无菌级任何可检出的生命体注：“”表示必检项，普通级实验动物可以免疫，无特定病原体级实验动物和无特定抗原抗体普通级实验动物不可免疫；“”表示必检项，要求阴性；“”表

31、示需要时检测项目，要求阴性。动物等级病原微生物检测要求普通级猫泛白细胞减少症病毒（Felinepanleukopeniavirus）猫杯状病毒（Felinecalicivirus）猫疱疹病毒I型（Felineherpesvirustype1）DB11/T180920205.2.5实验雪貂各等级病原微生物检测项目按照表5的规定执行。表5实验雪貂各等级病原微生物检测项目5.2.6实验猫各等级病原微生物检测项目按照表6的规定执行。表6实验猫各等级病原微生物检测项目9动物等级病原微生物检测要求普通级狂犬病毒（Rabiesvirus）沙门氏菌（Salmonellaspp.）皮肤病原真菌（Pathogen

32、icdermalfungi）无特定病原体级猫泛白细胞减少症病毒（Felinepanleukopeniavirus）猫杯状病毒（Felinecalicivirus）猫疱疹病毒I型（Felineherpesvirustype1）狂犬病毒（Rabiesvirus）沙门氏菌（Salmonellaspp.）皮肤病原真菌（Pathogenicdermalfungi）猫免疫缺陷病毒（Felineimmunodeficiencyvirus）猫传染性腹膜炎病毒（Felineinfectiousperitonitisvirus）猫肠道冠状病毒（Felineentericcoronavirus）猫白血病病毒（Fel

33、ineleukemiavirus）支气管败血波氏杆菌（Bordetellabronchiseptica）多杀巴斯德杆菌（Pasteurellamultocida）小肠结肠炎耶尔森菌（Yersiniaenterocolitica）巴尔通体（Bartonella）衣原体（Chlamydia）空肠弯曲杆菌（Campylobaceterjejuni）螺杆菌（Helicobacter）乙型溶血性链球菌（hemolyticStreptococcus）无菌级任何可检出的生命体注：“”表示必检项，普通级实验动物可以免疫，无特定病原体级实验动物和无特定抗原抗体普通级实验动物不可免疫；“”表示必检项，要求阴性；“

34、”表示需要时检测项目，要求阴性。动物等级病原微生物实验鸡检测要求实验鸭检测要求实验鹅检测要求实验鸽检测要求普通级禽流感病毒（AvianInfluenzaVirus）新城疫病毒（NewcastleDiseaseVirus）马立克氏病病毒（MareksDiseaseVirus）-传染性支气管炎病毒（InfectionBronchitisVirus）-传染性喉气管炎病毒（InfectionLaryngotracheitisVirus）-传染性法氏囊病病毒（InfectionBursalDiseaseVirus）-禽呼肠孤病毒（AvianReovirus）-禽腺病毒III群（AvianAdenovirusGroupIII）-DB11/T18092020表6实验猫各等级病原微生物检测项目（续）5.2.7实验鸡、实验鸭、实验鹅、实验鸽各等级病原微生物检测项目按照表7的规定执行。表7实验鸡、实验鸭、实验鹅、实验鸽各等级病原微生物检测项目10动物等级病原微生物实验鸡检测要求实验鸭检测要求实验鹅检测要求实验鸽检测要求普通级禽