【课件】DNA是主要的遗传物质---噬菌体侵染实验及烟草花叶病毒转化实验课件高一下学期生物人教版(2019)必修2.pptx
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1、第三章 基因的本质第一节DNA是主要的遗传物质第二课时艾弗里艾弗里赫尔希赫尔希格里菲思格里菲思蔡斯蔡斯经典实验的探究过程“我们表示怀疑!”经典实验的探究过程肺炎链球菌体内转化实验肺炎链球菌体内转化实验肺炎链球菌体外转化实验肺炎链球菌体外转化实验噬菌体侵染细菌的实验噬菌体侵染细菌的实验烟草花叶病毒的转化实验烟草花叶病毒的转化实验(格里菲斯)(格里菲斯)(艾弗里)(赫尔希和蔡斯)(赫尔希和蔡斯)通过确凿的实验证据向遗传物质是蛋白质的观点提出挑战的对照原则、单一变量原则对照原则、单一变量原则肺炎链球菌的体外转化实验为什么 S 型菌的DNA 能使 型菌发生转化?这种转化的实质是什么?S 型菌的基因整合
2、到了 型菌的 DNA 中,并且表达出来。转化的实质是基因重组。总结:项目项目体内转化实验(体内转化实验(格里菲斯格里菲斯)体外转化实验(体外转化实验(艾弗里艾弗里)培养细菌培养细菌实验对照实验对照巧妙构思巧妙构思实验结果实验结果实验结论实验结论两者的联两者的联系系肺炎链球菌体内转化实验和体外转化实验的比较肺炎链球菌体内转化实验和体外转化实验的比较加热致死的加热致死的S S型细菌使型细菌使R R型细菌转化为型细菌转化为S S型型细菌细菌S S型细菌的型细菌的DNADNA使使R R型细菌型细菌转化为转化为S S型细菌型细菌R R型细菌与型细菌与S S型细菌的致病性对照型细菌的致病性对照体外培养基体
3、外培养基S S型细菌各组成成分的作用型细菌各组成成分的作用进行对照进行对照在小鼠在小鼠体内体内用加热杀死的用加热杀死的S S型细菌和型细菌和R R型活细菌混合注型活细菌混合注入小鼠体内,与用加热杀死的入小鼠体内,与用加热杀死的S S型细菌注射型细菌注射到小鼠体内作为对照实验到小鼠体内作为对照实验S S型细菌体内有型细菌体内有“转化因子转化因子”S S型细菌的型细菌的DNADNA是遗传物质是遗传物质而蛋白质不是而蛋白质不是所用材料相同所用材料相同体内转化实验是体外转化实验的体内转化实验是体外转化实验的基础基础,体外转化实验是体内转化实,体外转化实验是体内转化实验的验的延伸延伸两实验都遵循两实验都
4、遵循对照原则、单一变量原则对照原则、单一变量原则每个实验组用每个实验组用酶解法特异性地酶解法特异性地去除去除了一种物质,从而鉴定出了一种物质,从而鉴定出DNADNA是遗传物质是遗传物质噬菌体侵染细菌的实验赫尔希蔡斯 1952年,美国遗传学家赫尔希和蔡斯以T2噬菌体为实验材料,利用放射性同位素标记技术,完成了另一个有说服力的实验。PST2噬菌体的模式图噬菌体的模式图 T2噬菌体是一种专门寄生在大肠杆菌体内的病毒,它的头部和尾部的外壳都是由蛋白质构成的,头部含有DNA。实验材料:、大肠杆菌。T2噬菌体 哪一种物质进入了大肠杆菌体内?DNA和蛋白质不能直接看到,怎么办?放射性分别标记DNA和蛋白质
5、选择什么元素进行放射性标记?噬菌体如何进入大肠杆菌呢吸附吸附注入注入合成合成组装组装释放释放噬菌体吸附在细菌表面把DNA注入到细菌细胞利用细菌的化学成分和酶系统合成出噬菌体的DNA、蛋白质新合成的DNA、蛋白质组装成很多噬菌体细菌解体,释放出噬菌体噬菌体增殖的过程噬菌体侵染细菌的实验T2噬菌体的模式图DNA蛋白质(占40%,含C、H、O、N、P)(占60%,含C、H、O、N、S)如何将噬菌体的DNA和蛋白质区分开,单独进行研究?实验方法:放射性同位素标记法 用35S和32P分别标记噬菌体的哪一种组分?为什么?用35S标记蛋白质;用32P标记DNA,因为仅蛋白质分子中含有硫,磷几乎都存在于DNA
6、分子中。(P45相关信息)不能,因为C和O这两种元素在DNA和蛋白质中都存在,无法区分二者。用14C和18O等同位素可行吗,为什么?如何培养含放射性35S和32P的T2噬菌体?能否直接用含35S、32P的培养基来培养?实验思路实验思路科学方法科学方法 在同一元素中,质子数相同、中子数不同的原子为同位素,如16O与18O,14C与12C。同位素的物理性质可能有差异,但组成的化合物化学性质相同。用物理性质特殊的同位素来标记化学反应中原子的去向,就是同位素标记法。用位素标记可用于示踪物质的运行和变化规律。通过追踪同位素标记的化合物,可以弄清楚化学反应的详细过程。生物学研究中常用的同位素有的具有放射性
7、,如14C、32P、3H、35S等;有的不具有放射性,是稳定同位素,如15N、18O等。同位素标记法同位素标记法同位素标记法同位素标记法噬菌体侵染细菌的实验不能。因为T2噬菌体营寄生生活,无法独立生存。故应先培养细菌,再用细菌培养噬菌体。v先培养细菌含35S的培养基+大肠杆菌 含35S的大肠杆菌含32P的培养基+大肠杆菌 含32P的大肠杆菌v再培养噬菌体含35S大肠杆菌+T2噬菌体 含35S T2的噬菌体含32P大肠杆菌+T2噬菌体 含32P T2的噬菌体 如何培养含放射性35S和32P的T2噬菌体?能否直接用含35S、32P的培养基来培养?实验思路分析噬菌体侵染细菌的实验实验过程噬菌体侵染细
8、菌的实验标记细菌标记噬菌体噬菌体侵染未标记的细菌搅拌离心观察放射性的分布含35S的培养基+大肠杆菌 含35S的大肠杆菌含32P的培养基+大肠杆菌 含32P的大肠杆菌标记细菌标记噬菌体噬菌体侵染未标记的细菌搅拌离心观察放射性的分布实验过程噬菌体侵染细菌的实验v再培养噬菌体含35S大肠杆菌+T2噬菌体 含35S T2的噬菌体含32P大肠杆菌+T2噬菌体 含32P T2的噬菌体噬菌体侵染细菌的实验实验过程标记细菌标记噬菌体噬菌体侵染未标记的细菌搅拌离心观察放射性的分布用35S或32P 标记的T2噬菌体分别侵染未被标记的大肠杆菌,经过短时间的保温后,用搅拌器搅拌、离心。短时间保温原因:保温时间过短,部
9、分噬菌体还未侵染大肠杆菌;保温时间过长,部分子代噬菌体已经释放。侵染过程吸附注入合成组装释放标记细菌标记噬菌体噬菌体侵染未标记的细菌搅拌离心观察放射性的分布噬菌体侵染细菌的实验实验过程搅拌使吸附在细菌上的噬菌体与细菌分离离心让上清液中析出重量较轻的噬菌体颗粒,沉淀物中留下被侵染的大肠杆菌噬菌体侵染细菌的实验实验过程标记细菌标记噬菌体噬菌体侵染未标记的细菌搅拌离心观察放射性的分布检测上清液和沉淀物中的放射性物质含量搅拌搅拌后后离心离心沉淀物沉淀物放放射性射性很很低低上清液上清液放放射性射性很很高高与未标记的细菌混合与未标记的细菌混合细菌裂解细菌裂解离心后离心后3535S S标记标记子代噬菌体中无
10、35S噬菌体侵染细菌的实验注意:注意:该实验不能证明蛋白质不是遗传物质实验过程上清液放射性很高说明什么说明T2噬菌体中的蛋白质没有进入大肠杆菌搅拌不充分,有少量含35S的噬菌体蛋白质外壳吸附在细菌上,随细菌离心到沉淀物中噬菌体侵染细菌的实验实验过程搅拌搅拌后后离心离心沉淀物沉淀物放放射性射性很很高高上清液上清液放放射性射性很很低低与未标记的细菌混合与未标记的细菌混合细菌裂解细菌裂解离心后离心后3232P P标记标记子代噬菌体中有32P注意:注意:该实验能证明DNA是遗传物质保温时间过短,部分噬菌体还未侵染大肠杆菌;保温时间过长,部分子代噬菌体已经释放噬菌体侵染细菌的实验实验结论3535S S标
11、记的噬菌体标记的噬菌体3232P P标记的噬菌体标记的噬菌体上清液上清液沉淀物沉淀物子代噬菌体子代噬菌体结论结论放射性高无放射性无放射性放射性高放射性低有放射性蛋白质没有进入细菌细胞DNA进入到细菌的细胞中DNA才是噬菌体的遗传物质不能证明蛋白质不是遗传物质35S标记的实验发现沉淀物中也有放射性,可能是什么原因造成的?搅拌不充分导致部分蛋白质外壳吸附在细菌上,离心时随细菌到沉淀物中。32P标记的实验发现上清液中也有放射性,可能是什么原因造成的?保温时间过短,部分噬菌体还未侵染细菌;保温时间过长,部分子代噬菌体已经释放。噬菌体侵染细菌的实验问题问题问题问题1 1:艾弗里与赫尔希等人选用细菌或病毒
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