高考生物大一轮复习细胞工程苏教选修.pptx
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1、会计学1高考生物大一轮复习细胞工程苏教选修高考生物大一轮复习细胞工程苏教选修第1页/共85页提醒提醒 幼嫩的组织脱分化较为容易,如幼嫩的组织脱分化较为容易,如茎尖、根茎尖、根尖、尖、形成层细胞易脱分化,而植物的茎、叶和成熟形成层细胞易脱分化,而植物的茎、叶和成熟的组织则较难。的组织则较难。对外植体要进行对外植体要进行消毒消毒处理,而对各种器械要彻底处理,而对各种器械要彻底灭菌。灭菌。植物组织培养中用到的有机碳源一般为植物组织培养中用到的有机碳源一般为蔗糖蔗糖,用,用葡萄糖也可以,但后者的成本高。葡萄糖也可以,但后者的成本高。诱导愈伤组织再分化形成胚状体或丛芽及生根的诱导愈伤组织再分化形成胚状体
2、或丛芽及生根的过程中,要进行换瓶处理,以改变培养基中的激素过程中,要进行换瓶处理,以改变培养基中的激素配比及浓度。配比及浓度。第1页/共85页第2页/共85页2.2.脱分化和再分化的比较脱分化和再分化的比较比较内容比较内容脱分化脱分化再分化再分化过程过程外植体外植体愈伤组织愈伤组织愈伤组织愈伤组织幼苗幼苗形成体形成体特点特点有根、芽有根、芽需要需要条件条件a.离体离体b.适宜的营养适宜的营养c.生长素生长素/细胞分裂素细胞分裂素的比例适中的比例适中d.不需光不需光a.离体离体b.适宜的营养适宜的营养c.生长素生长素/细胞分裂细胞分裂素的比例高或低诱素的比例高或低诱导生根或生芽导生根或生芽d.光
3、照光照排列疏松、高度液泡化排列疏松、高度液泡化的薄壁细胞的薄壁细胞第2页/共85页第3页/共85页提醒提醒 愈伤组织再分化形成植物幼苗时,需光照愈伤组织再分化形成植物幼苗时,需光照处理,以便诱导处理,以便诱导叶绿素叶绿素的形成。的形成。生长素和细胞分裂素在植物体内含量很低,因此生长素和细胞分裂素在植物体内含量很低,因此植物组织培养中常用人工合成的生长素类似物和细植物组织培养中常用人工合成的生长素类似物和细胞分裂素类似物。胞分裂素类似物。细胞分裂素细胞分裂素/生长素的比例适生长素的比例适中,有利于外植体脱分化形成愈伤组织中,有利于外植体脱分化形成愈伤组织,比例升,比例升高高有有利于愈伤组织再分化
4、形成利于愈伤组织再分化形成丛芽丛芽,比例,比例降低降低则有利于则有利于生生根根。第3页/共85页第4页/共85页3.3.原理:细胞全能性原理:细胞全能性 (1 1)含义:生物体的细胞具有发育成完整个体的潜能。)含义:生物体的细胞具有发育成完整个体的潜能。(2 2)物质基础:)物质基础:(3 3)在生物体内细胞并没有表现出全能性的原因)在生物体内细胞并没有表现出全能性的原因 (4 4)全能性的实例)全能性的实例 花药的离体培养、植物的组织培养、克隆技术等。花药的离体培养、植物的组织培养、克隆技术等。生物的每一个细胞都包含有该物生物的每一个细胞都包含有该物 种所特有的种所特有的全套遗传物全套遗传物
5、质质,都有发育成完整个体,都有发育成完整个体 所必需的全部基因。所必需的全部基因。基因在特定的时间和空间条件下选择性表达基因在特定的时间和空间条件下选择性表达,细胞分化形,细胞分化形成不同的组织、器官。成不同的组织、器官。第4页/共85页第5页/共85页对位训练对位训练1.1.下面关于植物细胞工程的叙述,正确的是(下面关于植物细胞工程的叙述,正确的是()不同种植物叶肉细胞融合时,应先去掉细胞膜不同种植物叶肉细胞融合时,应先去掉细胞膜 叶肉细胞脱分化后,可形成无定形状态的薄壁叶肉细胞脱分化后,可形成无定形状态的薄壁 细胞细胞 叶肉细胞经过再分化过程,可形成愈伤组织叶肉细胞经过再分化过程,可形成愈
6、伤组织 叶肉细胞离体培养时,可以表现出细胞全能性叶肉细胞离体培养时,可以表现出细胞全能性 A.B.C.D.A.B.C.D.B第5页/共85页第6页/共85页2.2.下列属于植物组织培养的是下列属于植物组织培养的是 ()A.A.花粉培养成单倍体植株花粉培养成单倍体植株 B.B.芽发育成枝条芽发育成枝条 C.C.根尖分生区发育成成熟区根尖分生区发育成成熟区 D.D.未受精的卵发育成植株未受精的卵发育成植株A第6页/共85页第7页/共85页考点二考点二 植物体细胞杂交植物体细胞杂交1.1.技术流程技术流程2.2.考点解读考点解读 (1 1)植物体细胞杂交的障碍)植物体细胞杂交的障碍 植物细胞都有细胞
7、壁。植物细胞都有细胞壁。原生质体融合。原生质体融合。根据酶的专一性原理,用根据酶的专一性原理,用纤维素纤维素酶和果胶酶酶和果胶酶去除细胞壁去除细胞壁人工诱导方法包括人工诱导方法包括物理法物理法,如离,如离心、振动、电激;化学法,如心、振动、电激;化学法,如聚聚乙二醇乙二醇(PEG)等)等第7页/共85页第8页/共85页(2 2)杂种细胞的类型)杂种细胞的类型(3 3)杂种细胞)杂种细胞ABAB形成的标志:形成的标志:。(4 4)杂种植株遗传物质的变化:)杂种植株遗传物质的变化:(5 5)植物体细胞杂交的原理:)植物体细胞杂交的原理:有有三三种:种:AA、BB、AB,符合要求的只有,符合要求的只
8、有AB,需进行筛选,需进行筛选新的细胞壁的生成新的细胞壁的生成细胞融合属于细胞融合属于染色体变异染色体变异,杂种植株的染色体数通,杂种植株的染色体数通常是两亲本细胞染色体数目之和,形成异源多倍体。常是两亲本细胞染色体数目之和,形成异源多倍体。原生质体融合的过程利用了原生质体融合的过程利用了细胞膜的流动性细胞膜的流动性,杂,杂种细胞发育成杂种植株利用了种细胞发育成杂种植株利用了细胞的全能性细胞的全能性。第8页/共85页第9页/共85页3.3.该技术的目的该技术的目的 植物体细胞杂交的终点是培育成植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株杂种植株,而不,而不 是形成杂种细胞就结束。杂种植株特征:是形成杂
9、种细胞就结束。杂种植株特征:4.4.该技术在育种上应用时最大的优点该技术在育种上应用时最大的优点 5.5.未解决的问题未解决的问题 目前还不能让杂种植物完全按人们的需要去表达目前还不能让杂种植物完全按人们的需要去表达 亲代的优良性状,如番茄亲代的优良性状,如番茄马铃薯。马铃薯。克服远缘杂交不亲和的障碍克服远缘杂交不亲和的障碍具备具备两种植物两种植物的遗传特征,原因是杂种植株中含的遗传特征,原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。有两种植物的遗传物质。第9页/共85页第10页/共85页对位训练对位训练3.3.设计植物体细胞杂交实验时,如果期望获得性状设计植物体细胞杂交实验时,如果期望获得性状 优
10、良的作物新品种,不需要考虑的是优良的作物新品种,不需要考虑的是 ()A.A.亲本细胞的生殖隔离问题亲本细胞的生殖隔离问题 B.B.选择具有优良性状的亲本选择具有优良性状的亲本 C.C.亲本细胞的融合技术亲本细胞的融合技术 D.D.杂种细胞愈伤组织的诱导和再分化杂种细胞愈伤组织的诱导和再分化A第10页/共85页第11页/共85页4.4.植物体细胞杂交尚未解决的问题是植物体细胞杂交尚未解决的问题是 ()A.A.去掉细胞壁,分离出有活力的原生质体去掉细胞壁,分离出有活力的原生质体 B.B.将杂种细胞培育成植株将杂种细胞培育成植株 C.C.使杂种植物完全按照人们的需要表现出亲使杂种植物完全按照人们的需
11、要表现出亲本的性状本的性状 D.D.培养出属间的杂种植株培养出属间的杂种植株C第11页/共85页第12页/共85页考点三考点三 动物细胞培养技术动物细胞培养技术1.1.动物细胞培养的操作流程动物细胞培养的操作流程2.2.考点解读考点解读 (1 1)培养条件)培养条件 无菌、无毒的环境无菌、无毒的环境无菌处理、加抗生素杀菌、定无菌处理、加抗生素杀菌、定期更换培养液。期更换培养液。营养营养葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机 盐和微量元素盐和微量元素+血清或血浆血清或血浆等天然成分。等天然成分。温度和温度和pH(36.50.5)和(和(7.27.4)。)。气体环境气体环
12、境95%空气空气+5%CO2。第12页/共85页第13页/共85页提醒提醒 (2 2)原理:)原理:。(3 3)动物细胞培养时,一般选取)动物细胞培养时,一般选取,原因:,原因:(4 4)在在动动物物细细胞胞培培养养过过程程中中,一一般般情情况况下下1 10 0代代以以前前的的细细胞胞核核型型不不变变,1 10 0代代以以后后有有些些细细胞胞核核型型发发生生改改变变,5 50 0代以后的细胞可能发生癌变。代以后的细胞可能发生癌变。CO2作用作用调节培养基调节培养基pH;空气中空气中O2作用作用细胞细胞有氧呼吸有氧呼吸;细胞增殖细胞增殖其细胞的其细胞的分化程度较低分化程度较低,增殖能力强增殖能力
13、强,有丝分,有丝分裂旺盛,容易培养裂旺盛,容易培养幼龄动物的组织、器官或动物胚幼龄动物的组织、器官或动物胚胎胎第13页/共85页第14页/共85页 (5 5)在动物细胞培养过程中的作用包在动物细胞培养过程中的作用包 括将组织分散成单个细胞,以及将贴壁细胞从瓶括将组织分散成单个细胞,以及将贴壁细胞从瓶 壁上分离下来,这样做的目的是避免动物细胞的壁上分离下来,这样做的目的是避免动物细胞的 现象。现象。胰蛋白酶胰蛋白酶接触抑制接触抑制3.应用应用 (1)生产细胞产品:干扰素、疫苗、单克隆抗体。)生产细胞产品:干扰素、疫苗、单克隆抗体。(2)检测并判断某毒性物质毒性的大小。)检测并判断某毒性物质毒性的
14、大小。(3)临床医学研究。)临床医学研究。第14页/共85页第15页/共85页拓展提升拓展提升 动物细胞培养与植物组织培养的比较动物细胞培养与植物组织培养的比较项目项目动物细胞培养动物细胞培养植物组织培养植物组织培养相同点相同点都需无菌条件;都进行有丝分裂都需无菌条件;都进行有丝分裂不不同同点点原理原理培养培养基基目的目的细胞的增殖细胞的增殖细胞的全能性细胞的全能性液体培养基,液体培养基,动物血动物血清清及其他营养物质及其他营养物质固体培养基,固体培养基,植物激素植物激素及其他营养物质及其他营养物质获得细胞或细胞产获得细胞或细胞产物等物等快速繁殖、培育无病毒快速繁殖、培育无病毒植株等植株等第1
15、5页/共85页第16页/共85页对位训练对位训练5.5.关于动物细胞培养的有关叙述,正确的是关于动物细胞培养的有关叙述,正确的是()()A.A.细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡 过程中过程中 B.B.动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等无机盐、生长素和动物血清等 C.C.动物细胞培养的目的只是获得大量的细胞分泌动物细胞培养的目的只是获得大量的细胞分泌 蛋白蛋白 D.D.动物细胞培养前和培养过程中都要用胰蛋白酶动物细胞培养前和培养过程中都要用胰蛋白酶 处理处理D第16页/共85页
16、第17页/共85页6.6.回答下列有关动物细胞培养的问题:回答下列有关动物细胞培养的问题:(1 1)在动物细胞培养过程中,当贴壁细胞分裂生长)在动物细胞培养过程中,当贴壁细胞分裂生长到细胞表面到细胞表面 时,细胞会停止分裂增殖,这种现象时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的称为细胞的 。此时,瓶壁上形成的细胞层数是。此时,瓶壁上形成的细胞层数是 。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来,需要用酶处理,。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来,需要用酶处理,可用的酶是可用的酶是 。(2 2)随着细胞传代次数的增多,绝大部分细胞分裂停)随着细胞传代次数的增多,绝大部分细胞分裂停止,进而出现止,进而出现 的现象
17、;但极少数细胞可以的现象;但极少数细胞可以连续增殖,其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变连续增殖,其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成成 细胞,该种细胞的黏着性细胞,该种细胞的黏着性 ,细胞,细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)量膜表面蛋白质(糖蛋白)量 。相互相互接触接触接触抑接触抑制制单层单层胰蛋白酶胰蛋白酶衰老甚至死亡衰老甚至死亡不死性不死性降低降低减少减少第17页/共85页第18页/共85页(3 3)现用某种大分子染料,对细胞进行染色时,观察到)现用某种大分子染料,对细胞进行染色时,观察到死细胞被染色,而活细胞不染色,原因是死细胞被染色,而活细胞不染色,原因是 (4(4)检查某种毒物是否能改变
18、细胞染色体的数目,最好)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目,最好选用细胞分裂到选用细胞分裂到 期的细胞用显微镜进行观察。期的细胞用显微镜进行观察。(5 5)在细胞培养过程中,通常在)在细胞培养过程中,通常在 条条件下保存细胞。因为在这种条件下,细胞中件下保存细胞。因为在这种条件下,细胞中 的的活性降低,细胞活性降低,细胞 的速率降低。的速率降低。(6 6)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后,发生了)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后,发生了排斥现象,这是因为机体把移植的皮肤组织排斥现象,这是因为机体把移植的皮肤组织当作当作 进行攻击。进行攻击。由于活细胞的膜具有选择透过性,大分子染料不
19、能进入活细胞内,故活细胞不能着色由于活细胞的膜具有选择透过性,大分子染料不能进入活细胞内,故活细胞不能着色中中冷冻(或超低温、液氮)冷冻(或超低温、液氮)酶酶新陈代谢新陈代谢抗原第18页/共85页第19页/共85页考点四考点四 动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体1.1.单克隆抗体的操作流程单克隆抗体的操作流程第19页/共85页第20页/共85页2.2.考点解读考点解读 (1 1)诱导融合的两种细胞名称及作用)诱导融合的两种细胞名称及作用 免疫过的免疫过的B B淋巴细胞(效应淋巴细胞(效应B B细胞)细胞)产生抗体;产生抗体;骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞无限增殖。无限增殖。(2 2)诱导融
20、合与原生质融合的不同方法)诱导融合与原生质融合的不同方法 动物细胞诱导融合的特有方法动物细胞诱导融合的特有方法 。(3 3)两次筛选的目的及方法)两次筛选的目的及方法 这种杂种细胞的特点是这种杂种细胞的特点是灭活病毒诱导灭活病毒诱导在特定的选择性培养基上,未融合的亲本细胞(效应在特定的选择性培养基上,未融合的亲本细胞(效应B细胞和骨髓瘤细胞)和融细胞和骨髓瘤细胞)和融合的具有同种核合的具有同种核 的细胞(的细胞(BB融合细胞、瘤瘤融合细胞)都会死亡,只有融合的融合细胞、瘤瘤融合细胞)都会死亡,只有融合的杂种细胞(杂交瘤细胞)才能生长杂种细胞(杂交瘤细胞)才能生长既能迅速大量繁殖,又能产生单一的
21、特异性抗体。既能迅速大量繁殖,又能产生单一的特异性抗体。第20页/共85页第21页/共85页(4 4)两个培养提取场所)两个培养提取场所提醒提醒 取相应取相应B B淋巴细胞前必需先注射相应抗原,淋巴细胞前必需先注射相应抗原,形象地说先形象地说先“打针打针”,否则失败。,否则失败。(5 5)原理:)原理:经选择性培养的杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体经选择性培养的杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞(很多种杂交瘤细胞),需经克隆化培养和抗的细胞(很多种杂交瘤细胞),需经克隆化培养和抗体检测,经多次筛选后就可获得足够数量的体检测,经多次筛选后就可获得足够数量的能分泌所能分泌所需抗体的细胞。需抗体
22、的细胞。体外培养体外培养培养液提取。培养液提取。体内小鼠腹腔中培养体内小鼠腹腔中培养小鼠腹水中提取。小鼠腹水中提取。细胞膜的流动性和细胞增殖。细胞膜的流动性和细胞增殖。第21页/共85页第22页/共85页对位训练对位训练7.7.利用细胞工程方法,以利用细胞工程方法,以SARSSARS病毒核衣壳蛋白为抗病毒核衣壳蛋白为抗 原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是 ()A.A.用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内,产用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内,产 生的血清抗体为单克隆抗体生的血清抗体为单克隆抗体 B.B.体外培养单个体外培养单个B B淋巴细胞可以获
23、得大量针对淋巴细胞可以获得大量针对 SARSSARS病毒的单克隆抗体病毒的单克隆抗体 C.C.将等量将等量B B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合,经淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合,经PEGPEG诱诱 导融合后的细胞均为杂交瘤细胞导融合后的细胞均为杂交瘤细胞 D.D.利用该单克隆抗体与利用该单克隆抗体与SARSSARS病毒核衣壳蛋白特异病毒核衣壳蛋白特异 性结合的方法可诊断出病毒感染者性结合的方法可诊断出病毒感染者D第22页/共85页第23页/共85页解解 析析 用用 纯纯 化化 的的 核核 衣衣 壳壳 蛋蛋 白白 反反 复复 注注 射射 到到 小小 鼠鼠 体体 内内,小小 鼠鼠 血血 清清 中中 的的 抗抗
24、 体体 会会 有有 多多 种种,不不 能能 称称 为为 单单 克克 隆隆 抗抗体体。B B淋淋 巴巴 细细 胞胞 是是 高高 度度 分分 化化 的的 细细 胞胞,在在 体体 外外 培培 养养 的的条条 件件 下下 不不 能能 无无 限限 分分 裂裂,故故 不不 能能 获获 得得 大大 量量 针针 对对 S SA A R R S S病病毒毒 的的 抗抗 体体。将将 等等 量量 的的 B B 淋淋 巴巴 细细 胞胞 和和 骨骨 髓髓 瘤瘤 细细 胞胞 混混合合,经经 P PE EG G 诱诱 导导 融融 合合 后后 的的 细细 胞胞 有有 杂杂 交交 瘤瘤 细细 胞胞、B B淋淋巴巴细细 胞胞 自
25、自 身身 融融 合合 细细 胞胞 和和 骨骨 髓髓 瘤瘤 细细 胞胞 自自 身身 融融 合合 细细 胞胞 等等 多多种种 类类 型型。利利 用用 该该 单单 克克 隆隆 抗抗 体体 与与 S SA A R R S S病病 毒毒 核核 衣衣 壳壳 蛋蛋 白白特特 异异 性性 结结 合合 的的 方方 法法 诊诊 断断 出出 病病 毒毒 感感 染染 者者,是是 单单 克克 隆隆 抗抗体的重要应用。体的重要应用。答案答案 D第23页/共85页第24页/共85页考点五考点五 动物体细胞核移植技术与克隆动物动物体细胞核移植技术与克隆动物1.1.动物体细胞核移植技术操作流程动物体细胞核移植技术操作流程2.2
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