非发酵革兰阴性菌-课件.ppt

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1、 Department of Microbiology,Hebei North University教学目的 掌握非发酵菌的鉴定要点及铜绿假单胞菌的鉴定特征，熟悉不动杆菌属、产碱杆菌属的主要鉴定特征。第二十四章 非发酵革兰阴性杆菌nonfermentativeGram-negativebacilli Department of Microbiology,Hebei North University非发酵菌Nonfermenters概念：一大群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厌氧、无芽胞的革兰阴性杆菌。Department of Microbiology,Hebei North

2、University主要菌属：假单胞菌属(Pseudomonas)产碱杆菌属(Alcaligenes)不动杆菌属(Acinetobacter)莫拉菌属(Moraxella)黄杆菌属(Flavobacterium)丛毛单胞菌属(Comamonas)无色杆菌属（Achromobacter）艾肯菌属(Elikenella)土壤杆菌属(Agrobacterium)Department of Microbiology,Hebei North University第一节 假单胞菌属（Pseudomonas）-铜绿假单胞菌P.aeruginosa 广泛存在于自然环境，是引起医院内感染的常见病原菌，属于重点监

3、测菌株。为人体正常菌群的一部分，多数为条件致病菌。具有天然抗药性，常呈多重耐药,且耐药率逐年增加。常见菌有：铜绿假单胞菌P.aeruginosa 荧光假单胞菌P.fluorecence 恶臭假单胞菌P.Putide Department of Microbiology,Hebei North University Department of Microbiology,Hebei North University Department of Microbiology,Hebei North University Department of Microbiology,Hebei North Uni

4、versity3、生化反应：氧化酶阳性；在O/F培养基上，氧化分解葡萄糖；精氨酸双水解酶阳性；利用枸橼酸盐；液化明胶；还原硝酸盐为亚硝酸盐并产生氮气。Department of Microbiology,Hebei North University4、抗原构造与分型：外膜蛋白：具有属的特异性菌体(O)抗原 脂多糖：具有型特异性鞭毛（H）抗原 Department of Microbiology,Hebei North UniversityP A 对亚胺培南的耐药性 铜绿假单胞菌对内酰胺酶类抗生素的耐药性明显增加,尤其是耐碳青霉烯类 PA 所致感染已成为临床抗感染治疗的棘手问题。耐碳青霉烯类抗生

5、素 PA 的耐药机制较复杂：产生-内酰胺酶，如：金属-内酰胺酶特异性的孔蛋白OprD2缺失细菌主动外排系统。Department of Microbiology,Hebei North University2、所致疾病：条件致病菌：免疫力低下者易感。医院内感染：医院环境监测（水、物体表面、空气）；药物敏感性变迁指导临床用药。临床表现多样：化脓性细菌烧伤感染：绿色、恶臭脓液渗透过多层纱布。呼吸道感染：常见于免疫力低下者，肺感染者痰中带血。中耳炎：常见于慢性感染者。眼角膜炎：穿孔后失明。如果合并败血症者死亡率高 Department of Microbiology,Hebei North Univ

6、ersity院内感染的重要地位1、在院内感染比率仅次于大肠杆菌10%2、院内感染常见类型：下呼吸道或肺部感染 伤口感染 尿路感染 免疫功能低下者败血症 心脏术后 Department of Microbiology,Hebei North University2.检验程序血液脑脊液、胸腹水、脓液、痰、尿液粪便营养肉汤分离培养分离培养（血琼脂，麦康凯)涂片染色(SS，麦康凯)初步鉴定最后鉴定菌落；形态；色素；氧化酶生化反应分型血噬绿基清菌脓因型体素型 Department of Microbiology,Hebei North University非发酵菌生化编码鉴定结果记录表试验项目1O/F发

7、酵管4氧化酶2枸橼酸盐1麦芽糖4精氨酸双水解2甘露醇1木糖4硝酸盐还原2DNA1乙酰胺结果总值鉴定值 鉴定结果 鉴定者 Department of Microbiology,Hebei North University铜绿假单胞菌的鉴定要点及与其他假单胞菌的区别试验 铜绿假单胞菌荧光假单胞菌恶臭假单胞菌斯氏假单胞菌嗜麦芽假单胞菌鼻疽假单胞菌类鼻疽假单胞菌氧化酶+/-+荧光素+/青脓素+/+/动力+葡糖氧化+乳糖氧化+蔗糖氧化+木糖氧化+赖氨酸脱羧酶+精氨酸脱羧酶+硝酸盐还原+/-+明胶液化/+/+42 生长+/+/+Department of Microbiology,Hebei North

8、University铜绿假单胞菌的鉴定依据 Department of Microbiology,Hebei North University四、防治原则 铜绿假单胞菌可由各种途径传播，但主要是通过污染医疗器械、用具及带菌医护人员引起医源性感染。结合临床感染症状，如果无感染症状则作为正常菌群（住院患者带菌率20%）。临床治疗必须密切遵循药敏实验结果。Department of Microbiology,Hebei North University Department of Microbiology,Hebei North University Department of Microbiolo

9、gy,Hebei North University Department of Microbiology,Hebei North University 见下表二、致病性1、腐生菌、水中100%有、自来水清洗器械。2、产生青霉素酶。3、其感染多见于严重基础疾病、大量使用抗生素、激素、呼吸机使用者、透析患者：菌血症：静脉导管导致 伤口感染：蜂窝组织炎 胸外科术后易感 Department of Microbiology,Hebei North University试验 醋酸钙不动杆菌鲍曼不动杆菌溶血不动杆菌琼氏不动杆菌约翰逊不动杆菌洛菲不动杆菌葡糖氧化+/木糖氧化+/乳糖氧化+精氨酸双水解酶+/+

10、鸟氨酸脱羧酶+苯丙氨酸脱氨酶+丙二酸盐利用+/+柠檬酸盐利用+/+明胶液化+生长温度37+41+44+不动杆菌属主要菌种生化反应特征 Department of Microbiology,Hebei North University(3)初步鉴定 染色为革兰阴性球杆状菌，成对排列，氧化酶（-），O/F 试验为氧化型，动力（-），硝酸盐还原（-）。符合上述结果即可判定为不动杆菌属的细菌。与属内其他菌的鉴别：Department of Microbiology,Hebei North University不动杆菌属检验程序血液、脑脊液增菌培养血平板和MAC Department of Microb

11、iology,Hebei North University第三节产碱杆菌属Alcaligenes Department of Microbiology,Hebei North University Department of Microbiology,Hebei North University Department of Microbiology,Hebei North University Department of Microbiology,Hebei North University Department of Microbiology,Hebei North University D

12、epartment of Microbiology,Hebei North University窄食单胞菌 Department of Microbiology,Hebei North University生物学性状 Department of Microbiology,Hebei North University Department of Microbiology,Hebei North University Department of Microbiology,Hebei North University窄食单胞菌鉴定依据 Department of Microbiology,Hebei North University其他临床常见的非发酵菌黄杆菌属：1、氧化酶阳性、H2O2阳性2、细长杆菌，无鞭毛，专性需氧3、血平板上产生色素（黄）4、磷酸酶阳性5、O-F为氧化型 Department of Microbiology,Hebei North University其他临床常见的非发酵菌莫拉菌属：1、氧化酶阳性、H2O2阳性2、球杆菌，无鞭毛，专性需氧3、营养要求高，最适32-354、不分解任何糖类5、O-F为产碱型