动物细胞培养 优秀课件.ppt

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1、动物细胞培养 第1页，本讲稿共17页问题讨论 烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人？取该患者的皮肤进行细胞培养取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的获得足量的细胞后再移植细胞后再移植第2页，本讲稿共17页 请同学们预习课本，完成导预习课本，完成导学案，尝试学案，尝试简述动物细胞培养的基本过程？第3页，本讲稿共17页第4页，本讲稿共17页动物动物胚胎胚胎或或幼龄幼龄动动物的组织、器官物的组织、器官胰蛋白酶胰蛋白酶剪碎剪碎单个细胞单个细胞加培养液加培养液制成制成细胞悬浮液细胞悬浮液原代培养原代培养细胞增殖细胞

2、增殖部分细胞无部分细胞无限传代限传代去掉组织间蛋去掉组织间蛋白白动物细胞培养不能动物细胞培养不能最终培养成生物体最终培养成生物体传代培养传代培养动物细胞培养动物细胞培养第5页，本讲稿共17页思考题1、植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗？、植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗？、动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的吗？、动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的吗？、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的呢？、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的呢？、如何将动物组织分散成单个的细胞呢？、如何将动物组织分散成单个的细胞呢？、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是、胰蛋白

3、酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？什么成份？没有没有是是成块的组织细胞靠在一起成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长和增殖彼此限制了细胞的生长和增殖先用剪刀剪碎先用剪刀剪碎,后用蛋白酶处理后用蛋白酶处理胰蛋白酶水解蛋白质胰蛋白酶水解蛋白质细胞间的成份是蛋白质细胞间的成份是蛋白质第6页，本讲稿共17页思考题、细胞膜的主要成份是什么？、细胞膜的主要成份是什么？、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？细胞要注意什么问题呢？、能够用胃蛋白

4、酶代替胰蛋白酶吗？为什么？、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？、动物细胞培养取材时，一般是取胚胎组织或幼龄动物的、动物细胞培养取材时，一般是取胚胎组织或幼龄动物的组织或器官，请解释原因？组织或器官，请解释原因？蛋白质和磷脂蛋白质和磷脂能能注意时间的控制注意时间的控制不能，因为两的最适不能，因为两的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适与胰蛋白酶的最适PH较接近较接近胚胎组织或幼龄动物的组织或器官分裂、增殖旺盛胚胎组织或幼龄动物的组织或器官分裂、增殖旺盛第7页，本讲稿共17页思考题11、动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒？、动物细胞培养瓶内表面

5、为何要光滑、无毒？12、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖？、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖？13、如此时细胞数量并未达到人们的需求，应该怎样办？、如此时细胞数量并未达到人们的需求，应该怎样办？易于培养细胞贴壁，进行生长增殖易于培养细胞贴壁，进行生长增殖当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞分裂就会当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞分裂就会停止分裂增殖，这种现象叫接触抑制。停止分裂增殖，这种现象叫接触抑制。将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理，然后继续增殖。将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理，然后继续增殖。这样的过程叫做传代培养这样的过程叫做传代培养第8页，本讲稿共1

6、7页思考题14、如何理解原代培养和传代培养？、如何理解原代培养和传代培养？15、传代培养的细胞能一直传代下去吗？、传代培养的细胞能一直传代下去吗？16、有些为何能一直传下去吗？、有些为何能一直传下去吗？17、动物细胞培养就是为了得到这些细胞吗？、动物细胞培养就是为了得到这些细胞吗？18、人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？、人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？上述过程中，在第一培养瓶中培养就是原代培养，之后转上述过程中，在第一培养瓶中培养就是原代培养，之后转移到其它培养瓶中培养就是传代培养移到其它培养瓶中培养就是传代培养不都能不都能发生突变，朝着癌细胞方向发展发生突变，朝着癌细胞方向发展不是不

7、是保存保存10代以内的细胞，因为代以内的细胞，因为1050代部分细胞的细胞代部分细胞的细胞核型可能发生变化，有少部分还发生突变向癌细胞核型可能发生变化，有少部分还发生突变向癌细胞方向发展方向发展第9页，本讲稿共17页动物动物胚胎胚胎或或幼龄幼龄动动物的组织、器官物的组织、器官胰蛋白酶胰蛋白酶剪碎剪碎单个细胞单个细胞加培养液加培养液制成制成细胞细胞悬浮悬浮液液原代培养原代培养细胞增殖细胞增殖部分细胞无部分细胞无限传代限传代去掉组织去掉组织间蛋白间蛋白动物细胞培养不能动物细胞培养不能最终培养成生物体最终培养成生物体传代培养传代培养第10页，本讲稿共17页请总结出动物细胞培养的定义动物细胞培养就是从

8、动物机体内取出相关动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。殖。第11页，本讲稿共17页思考题多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的知识，认为体培养细胞应该模拟内环境的哪些内容呢？第12页，本讲稿共17页无菌、无毒无菌、无毒全部的营养物质全部的营养物质适宜的温度和适宜的温度和PH值值必要的气体条件必要的气体条件第13页，本讲稿共17页动物细胞培养条件：动物细胞培养条件：1、无菌、无毒的环境、无菌、无毒的环境（添加一定量的抗生素，定期更换培养

9、液）（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）2、营养、营养（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。）3、温度和、温度和PH 36.5+（-）0.5度,7.2-7.44、气体环境：、气体环境：O2和和CO2（95%空气和空气和5%CO2）保证细胞顺利的生保证细胞顺利的生长增殖长增殖第14页，本讲稿共17页获得细胞获得细胞细胞的全能性细胞的全能性植物体植物体培养结果培养结果或细胞产物或细胞产物快速繁殖、培育快速繁殖、培育无病毒植株等无病毒植株等培养目的培养目的葡萄糖、动物葡萄糖、动物血清血清蔗糖、植物激蔗糖、植物激素素培养基特有成分培养基特有成分液体

10、培养基液体培养基固体培养基固体培养基培养基性质培养基性质细胞增殖细胞增殖原理原理动物细胞培养动物细胞培养植物组织培养植物组织培养比较项目比较项目植物细胞和动物细胞培养的比较植物细胞和动物细胞培养的比较细胞群体细胞群体第15页，本讲稿共17页请举出动物细胞培养应用的实例第16页，本讲稿共17页动物细胞培养应用动物细胞培养应用大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体）克隆抗体）作为基因工程中的受体细胞作为基因工程中的受体细胞培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种物培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性质的毒性为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据第17页，本讲稿共17页