第五章-发酵过程控制与优化ppt课件.ppt
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1、病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程发酵过程控制与优化发酵过程控制与优化第五章第五章病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程什么是发酵过程?什么是发酵过程?发酵过程:发酵过程:是指由生长繁殖的细胞是指由生长繁殖的细胞所引起的生物反应过程。它不仅包括了所引起的生物反应过程。它不仅包括了以往以往“发酵发酵”的全部领域,而且还包括的全部领域,而且还包括固定化细胞的反应过程、生物法废水处固定化细胞的反应过程、生物法废水处理过程和细菌采矿等过程。理过程和细菌采矿
2、等过程。病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程本章讲述的内容本章讲述的内容第一节第一节发酵过程技术原理发酵过程技术原理第二节第二节发酵条件的影响及其控制发酵条件的影响及其控制第三节第三节泡沫对发酵的影响及其控制泡沫对发酵的影响及其控制第四节第四节发酵终点的判断与自溶监测发酵终点的判断与自溶监测第五节第五节发酵染菌的防治及其处理发酵染菌的防治及其处理病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程5.1 5.1 发酵过程技术原理发酵过程技术原理 代谢变化代谢变化:
3、就是反映发酵过程中菌体的生长,发酵就是反映发酵过程中菌体的生长,发酵参数(培养基,培养条件等)和产物形成速率三者间参数(培养基,培养条件等)和产物形成速率三者间的关系。的关系。目的:目的:了解生产菌种在具有合适的培养基、了解生产菌种在具有合适的培养基、pHpH、温度和通气搅拌等环境条件下对基质的利用、细胞的温度和通气搅拌等环境条件下对基质的利用、细胞的生长以及产物合成的代谢变化,有利于人们对生产的生长以及产物合成的代谢变化,有利于人们对生产的控制。控制。病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程发酵过程按进行过程有三种方式:发
4、酵过程按进行过程有三种方式:分批发酵分批发酵(Batchfermentation)补料分批发酵补料分批发酵(Fed-batchfermentation)连续发酵连续发酵(Continuousfermentation)病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程1 1.分批发酵的定义分批发酵的定义 是指在一封闭系统内含有初始限量基质的发酵是指在一封闭系统内含有初始限量基质的发酵方式。在这一过程中,除了氧气、消泡剂及控制方式。在这一过程中,除了氧气、消泡剂及控制pHpH的酸或碱外,不再加入任何其它物质。发酵过程中的酸或碱外,不再加入
5、任何其它物质。发酵过程中培养基成分减少,微生物得到繁殖。培养基成分减少,微生物得到繁殖。一、一、分批发酵分批发酵病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程2.分批发酵的特点分批发酵的特点 微生物所处的环境在发酵过程中不断微生物所处的环境在发酵过程中不断变化,其物理,化学和生物参数都随时间而变化,其物理,化学和生物参数都随时间而变化,是一个不稳定的过程。变化,是一个不稳定的过程。病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程优点优点操作简单;操作简单;操作引起染菌的
6、概率低。操作引起染菌的概率低。不会产生菌种老化和变异等问题。不会产生菌种老化和变异等问题。缺点缺点非生产时间较长、设备利用率低。非生产时间较长、设备利用率低。3.分批发酵的优缺点分批发酵的优缺点病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程4 4.分批发酵的生长曲线分批发酵的生长曲线单细胞微生物病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程5.分批发酵的类型分批发酵的类型Piretsfermentationclassification(按照产(按照产物生成与菌体生长是
7、否同步物生成与菌体生长是否同步)q生长关联型生长关联型(第一类型)第一类型)q生长无关联型(第二,三类型)生长无关联型(第二,三类型)病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程二、补料分批发酵二、补料分批发酵1.定义定义:补料分批发酵又称半连续发酵或流加分补料分批发酵又称半连续发酵或流加分批发酵,是指在分批发酵过程中,间歇或连续地批发酵,是指在分批发酵过程中,间歇或连续地补加新鲜培养基的发酵方式。补加新鲜培养基的发酵方式。病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理
8、过程2.补料分批发酵的优缺点补料分批发酵的优缺点n优点优点q使发酵系统中维持很低的基质浓度;使发酵系统中维持很低的基质浓度;q不会产生菌种老化和变异等问题。不会产生菌种老化和变异等问题。n缺点缺点q存在一定的非生产时间;存在一定的非生产时间;q和分批发酵比,中途要流加新鲜培养基,增加和分批发酵比,中途要流加新鲜培养基,增加了染菌的危险。了染菌的危险。病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程3.补料分批发酵的类型补料分批发酵的类型n补料方式补料方式q连续流加连续流加q不连续流加不连续流加q多周期流加多周期流加n补料成分补料成分
9、q单一组分流加单一组分流加q多组分流加多组分流加n控制方式控制方式q反馈控制反馈控制q无反馈控制无反馈控制病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程三、连续发酵三、连续发酵 1 1.定义定义 :培养基料液连续输入发酵罐,并同时放出含有产培养基料液连续输入发酵罐,并同时放出含有产品的相同体积发酵液,使发酵罐内料液量维持恒定,微生品的相同体积发酵液,使发酵罐内料液量维持恒定,微生物在近似恒定状态(恒定的基质浓度、恒定的产物浓度、物在近似恒定状态(恒定的基质浓度、恒定的产物浓度、恒定的恒定的pHpH、恒定菌体浓度、恒定的比生长速率)
10、下生长恒定菌体浓度、恒定的比生长速率)下生长的发酵方式。的发酵方式。病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程2.连续发酵的优缺点连续发酵的优缺点n优点优点q能维持低基质浓度;能维持低基质浓度;q可以提高设备利用率和单位时间的产量;可以提高设备利用率和单位时间的产量;q便于自动控制。便于自动控制。n缺点缺点q菌种发生变异的可能性较大菌种发生变异的可能性较大;q要求严格的无菌条件。要求严格的无菌条件。病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程3.连续发酵的类型连
11、续发酵的类型n恒化培养:恒化培养:使培养基中限制性基质的浓度保持恒定。使培养基中限制性基质的浓度保持恒定。n恒浊培养:恒浊培养:使培养基中菌体的浓度保持恒定。使培养基中菌体的浓度保持恒定。病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程4.连续发酵的代谢曲线连续发酵的代谢曲线从分批培养出发,无论在哪从分批培养出发,无论在哪个时候开始加入新鲜培养基过渡个时候开始加入新鲜培养基过渡到连续操作,达到一定的菌体浓到连续操作,达到一定的菌体浓度及限制基质浓度则培养系统一度及限制基质浓度则培养系统一定能成为稳定状态。定能成为稳定状态。病原体侵入
12、机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程5.2 5.2 发酵条件的影响及其控制发酵条件的影响及其控制发酵条件控制的目的:就是要为生发酵条件控制的目的:就是要为生产菌创造一个最适的环境,使我们所需产菌创造一个最适的环境,使我们所需要的代谢活动得以最充分的表达。要的代谢活动得以最充分的表达。病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程一、温度对发酵的影响及控制一、温度对发酵的影响及控制1.影响发酵温度的因素影响发酵温度的因素产热因素:生物热,搅拌热。产热因素:生物热,搅拌热
13、。散热因素:蒸发热,辐射热。散热因素:蒸发热,辐射热。发酵热:发酵过程中释放出来的净热量。Q发酵=Q生物+Q搅拌-Q蒸发-Q辐射病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程 生物热:生物热:生物热是生产菌在生长繁殖时产生的大量热量。生物热是生产菌在生长繁殖时产生的大量热量。培养基中碳水化合物,脂肪,蛋白质等物质被分解为培养基中碳水化合物,脂肪,蛋白质等物质被分解为CO2,NH3时释放出的大量能量。时释放出的大量能量。用途:用途:合成高能化合物,合成高能化合物,供微生物生命代谢活动供微生物生命代谢活动热能散发热能散发影响生物热的因
14、素:影响生物热的因素:生物热随菌株,培养基,发酵时期生物热随菌株,培养基,发酵时期的不同而不同。生物热的大小还与菌体的呼吸强度有对的不同而不同。生物热的大小还与菌体的呼吸强度有对应关系。应关系。病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程实验发现抗生素高产量批号的生物热高于低实验发现抗生素高产量批号的生物热高于低产量批号的生物热。说明抗生素合成时微生物的产量批号的生物热。说明抗生素合成时微生物的新陈代谢十分旺盛。新陈代谢十分旺盛。1、抗生素相对活性为12、抗生素相对活性为0.5发酵过程中生物热的变化发酵过程中生物热的变化病原体侵
15、入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程搅拌热:搅拌热:通风发酵都有大功率搅拌,搅拌的机械运动通风发酵都有大功率搅拌,搅拌的机械运动造成液体之间,液体与设备之间的摩擦而产生的热造成液体之间,液体与设备之间的摩擦而产生的热。蒸发热:蒸发热:通入发酵罐的空气,其温度和湿度随季节及控通入发酵罐的空气,其温度和湿度随季节及控制条件的不同而有所变化。空气进入发酵罐后,就和发制条件的不同而有所变化。空气进入发酵罐后,就和发酵液广泛接触进行热交换。同时必然会引起水分的蒸发;酵液广泛接触进行热交换。同时必然会引起水分的蒸发;蒸发所需的热量即为蒸发热
16、。蒸发所需的热量即为蒸发热。辐射热:辐射热:由于发酵罐内外温度差,通过罐体向外辐射的由于发酵罐内外温度差,通过罐体向外辐射的热量。辐射热可通过罐内外的温差求得,一般不超过发热量。辐射热可通过罐内外的温差求得,一般不超过发酵热的酵热的5%。病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程发酵热的测定发酵热的测定(1)通过测定一定时间内冷却水的流量和冷却水进出)通过测定一定时间内冷却水的流量和冷却水进出口温度,由下式求得这段时间内的发酵热。口温度,由下式求得这段时间内的发酵热。病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性
17、,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程(2)通过罐温的自动控制,先使罐温达到恒定,再)通过罐温的自动控制,先使罐温达到恒定,再关闭自控装置测得温度随时间上升的速率关闭自控装置测得温度随时间上升的速率S,按下式按下式可求得发酵热:可求得发酵热:病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程影响各种酶的反应速率和蛋白质性质影响各种酶的反应速率和蛋白质性质n影响发酵液的物理性质影响发酵液的物理性质n影响生物合成的方向。影响生物合成的方向。q例如,四环素发酵中金色链霉菌同时能产生金霉素。在低例如,四环素发酵中金色链霉菌同时能产
18、生金霉素。在低于于30 30 温度下,该菌种合成金霉素能力较强。当温度提温度下,该菌种合成金霉素能力较强。当温度提高,合成四环素的比例也提高。在温度达高,合成四环素的比例也提高。在温度达3535则只产生四则只产生四环素而金霉素合成几乎停止。环素而金霉素合成几乎停止。2温度对发酵的影响温度对发酵的影响病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程 最适发酵温度与菌种,培养基成分,培养条件和最适发酵温度与菌种,培养基成分,培养条件和菌体生长阶段有关。菌体生长阶段有关。最适发酵温度的选择最适发酵温度的选择在发酵的整个周期内仅选一个最适培
19、养温度不一定好。在发酵的整个周期内仅选一个最适培养温度不一定好。温度的选择要参考其它发酵条件。温度的选择要参考其它发酵条件。温度的选择还应考虑培养基成分和浓度温度的选择还应考虑培养基成分和浓度3 3 最适温度的确定最适温度的确定病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程发酵罐:夹套(发酵罐:夹套(10M3以下以下)盘管(蛇管)盘管(蛇管)(10M3以上以上)4温度的控制温度的控制病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程二、二、pH对发酵的影响及控制对发酵的影
20、响及控制发酵过程中培养液的发酵过程中培养液的pH值是微生物在一定环境值是微生物在一定环境条件下代谢活动的综合指标,是一项重要的发酵参数。条件下代谢活动的综合指标,是一项重要的发酵参数。它对菌体的生长和产品的积累有很大的影响。它对菌体的生长和产品的积累有很大的影响。尽管多数微生物能在尽管多数微生物能在34个个pH单位的单位的pH范围内范围内生长,但是在发酵工艺中,为了达到高生长速率和最生长,但是在发酵工艺中,为了达到高生长速率和最佳产物形成,必须使佳产物形成,必须使pH在很窄的范围内保持恒定。在很窄的范围内保持恒定。病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁
21、殖,引起不同程度的病理生理过程1.pH值对微生物的生长繁殖和产物合成的影响值对微生物的生长繁殖和产物合成的影响npH影响酶的活性影响酶的活性npH影响微生物细胞膜所带电荷的状态影响微生物细胞膜所带电荷的状态npH影响培养基某些组分和中间代谢产物的离解影响培养基某些组分和中间代谢产物的离解npH不同,往往引起菌体代谢过程的不同,使代谢产物的不同,往往引起菌体代谢过程的不同,使代谢产物的质量和比例发生改变质量和比例发生改变病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程2.发酵过程中发酵过程中pH的变化的变化v生长阶段生长阶段v生成阶段
22、生成阶段v自溶阶段自溶阶段病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程v碳源过量碳源过量v消泡油添加过量消泡油添加过量v生理酸性物质的存在生理酸性物质的存在3引起引起pH下降的因素下降的因素病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程v氮源过多氮源过多v生理碱性物质的存在生理碱性物质的存在v中间补料,碱性物质添加过多中间补料,碱性物质添加过多4引起引起pH上升的因素上升的因素病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不
23、同程度的病理生理过程 原则:有利于菌体生长和产物的合成。一般根据实原则:有利于菌体生长和产物的合成。一般根据实验结果确定。验结果确定。最适最适pHpH与菌株,培养基组成,发酵工艺有关。应与菌株,培养基组成,发酵工艺有关。应按发酵过程的不同阶段分别控制不同的按发酵过程的不同阶段分别控制不同的pHpH范围。范围。5最适最适pH的选择的选择病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程v调节基础培养基的配方调节基础培养基的配方v调节碳氮比(调节碳氮比(C/NC/N)v添加缓冲剂添加缓冲剂v补料控制补料控制q直接加酸加碱直接加酸加碱q补加
24、碳源或氮源补加碳源或氮源6pH的控制的控制病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程n大多数发酵过程是好氧的,因此需要供氧。如果考虑呼吸大多数发酵过程是好氧的,因此需要供氧。如果考虑呼吸的化学计量,则葡萄糖的氧化可由下式表示:的化学计量,则葡萄糖的氧化可由下式表示:C6H12O6十十6O26H2O十十6CO2n只有当这两种反应物均溶于水后,才对菌体有用。只有当这两种反应物均溶于水后,才对菌体有用。n氧在水中的溶解度比葡萄糖要小约氧在水中的溶解度比葡萄糖要小约6000倍左右倍左右(氧在水中氧在水中的饱和度约为的饱和度约为l0mg
25、/L)。许多发酵的生产能力受到氧利用许多发酵的生产能力受到氧利用限制,因此氧成为影响发酵效率的重要因素。限制,因此氧成为影响发酵效率的重要因素。三、氧对发酵的影响三、氧对发酵的影响病原体侵入机体,消弱机体防御机能,破坏机体内环境的相对稳定性,且在一定部位生长繁殖,引起不同程度的病理生理过程1发酵过程的溶氧变化发酵过程的溶氧变化发酵前期:发酵前期:由于微生物大量繁殖,需氧量不断大幅度增加,此时由于微生物大量繁殖,需氧量不断大幅度增加,此时需氧超过供氧,溶氧明显下降。需氧超过供氧,溶氧明显下降。发酵中后期:发酵中后期:溶氧浓度明显地受工艺控制手段的影响,如补料的溶氧浓度明显地受工艺控制手段的影响,
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