单向免疫琼脂扩散优秀课件.ppt

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1、单向免疫琼脂扩散第1页，本讲稿共15页第2页，本讲稿共15页第3页，本讲稿共15页2%离子琼脂；PBS（pH7.2，0.01M）；标准已知阳性血清；稀释的待测血清标本（浓度分别为1/30、51/40、1/50）；免疫琼扩阳性血清；已知标准琼扩抗原，诊断抗原；湿盒（容器内加湿纱布或泡沫塑料）；打孔器（孔径3mm）；打孔模板；微量加样器；第4页，本讲稿共15页第5页，本讲稿共15页10mm10mm3mm第6页，本讲稿共15页第7页，本讲稿共15页第8页，本讲稿共15页血浆血浆 的主要作用是运载血细胞，运输维持人体生命活动所需的物质和体内产生的废物等。的主要作用是运载血细胞，运输维持人体生命活动所需

2、的物质和体内产生的废物等。血浆相当于结缔组织的细胞间质。是血液的重要组成分，呈淡黄色液体（因含有胆红素）。血浆相当于结缔组织的细胞间质。是血液的重要组成分，呈淡黄色液体（因含有胆红素）。血浆的化学成分中，水分占血浆的化学成分中，水分占9092，溶质以血浆蛋白为主。血浆蛋白是多种蛋白质的，溶质以血浆蛋白为主。血浆蛋白是多种蛋白质的总称，用盐析法可将其分为白蛋白、球蛋白和纤维蛋白原三类。血浆蛋白质的功能有：维总称，用盐析法可将其分为白蛋白、球蛋白和纤维蛋白原三类。血浆蛋白质的功能有：维持血浆胶体渗透压；组成血液缓冲体系，参与维持血液酸碱平衡；运输营养和代谢物质，持血浆胶体渗透压；组成血液缓冲体系，

3、参与维持血液酸碱平衡；运输营养和代谢物质，血浆蛋白质为亲水胶体，许多难溶于水的物质与其结合变为易溶于水的物质；营养功能，血浆蛋白质为亲水胶体，许多难溶于水的物质与其结合变为易溶于水的物质；营养功能，血浆蛋白分解产生的氨基酸，可用于合成组织蛋白质或氧化分解供应能量；参与凝血和免血浆蛋白分解产生的氨基酸，可用于合成组织蛋白质或氧化分解供应能量；参与凝血和免疫作用。血浆的无机盐主要以离子状态存在，正负离子总量相等，保持电中性。这些离子疫作用。血浆的无机盐主要以离子状态存在，正负离子总量相等，保持电中性。这些离子在维持血浆晶体渗透压、酸碱平衡、以及神经在维持血浆晶体渗透压、酸碱平衡、以及神经-肌肉的正

4、常兴奋性等方面起着重要作用。肌肉的正常兴奋性等方面起着重要作用。血浆的各种化学成分常在一定范围内不断地变动，其中以葡萄糖、蛋白质、脂肪和激素等血浆的各种化学成分常在一定范围内不断地变动，其中以葡萄糖、蛋白质、脂肪和激素等的浓度最易受营养状况和机体活动情况的影响，而无机盐浓度的变动范围较小。血浆的理的浓度最易受营养状况和机体活动情况的影响，而无机盐浓度的变动范围较小。血浆的理化特性相对恒定是内环境稳态的首要表现。化特性相对恒定是内环境稳态的首要表现。第9页，本讲稿共15页血清血清:是指血液中既不含血细胞（血清不含红细胞和白细胞）也不含凝固因子凝固因子的成分；也就是除去纤维蛋白原的血浆 血液凝固析

5、出的淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出，放入试管中，不加抗凝剂，则凝血反应被激活，血液迅速凝固，形成胶冻。凝血块收缩，其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清，也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中，纤维蛋白原转变成纤维蛋白块，所以血清中无纤维蛋白原，这一点是与血浆最大的区别。而在凝血反应中，血小板释放出许多物质，各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化，如凝血酶原变成凝血酶，并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰，血液中许多化学成分的分析，都以血清为样品。人体的血液由有形成分和无形成分组成，白

6、血球、红血球、血小板是有形成分，血清是血液中的无形成分。用显微镜可以观察到血液中的白血球、红血球、血小板等有形成分，血清为去除纤维蛋白原后的无形成分，颜色微黄，透亮。血清的基本成分是水，水中溶有蛋白质、脂肪、糖、无机盐、维生素等营养成分，也溶有人体代谢产物。血清中有抗体，这是被称作免疫球蛋白的蛋白质。第10页，本讲稿共15页抗毒血清：因制作时是将蛇毒、病原菌产的毒等小量多次地注射到免子、马因制作时是将蛇毒、病原菌产的毒等小量多次地注射到免子、马血管内，每日慢慢加大注射量，一定时间后，因该动物体内产生血管内，每日慢慢加大注射量，一定时间后，因该动物体内产生抗体，经检测，达到一定效价后，就可以抽血

7、。血液分离血清后抗体，经检测，达到一定效价后，就可以抽血。血液分离血清后再经提纯，就成了抗毒血清。再经提纯，就成了抗毒血清。如蛇、白喉、破伤风、狂犬病抗毒血清等都是如此制备，用来治如蛇、白喉、破伤风、狂犬病抗毒血清等都是如此制备，用来治疗相应毒素反应。疗相应毒素反应。该生物制剂是异种血清，对人会有过敏反应，注射前均要做皮试。该生物制剂是异种血清，对人会有过敏反应，注射前均要做皮试。阴性可注射，阳性必需作脱敏疗法才行。阴性可注射，阳性必需作脱敏疗法才行。第11页，本讲稿共15页破伤风抗毒素是一种免疫马血清，对人体是一种异性蛋白，具有抗原性（过敏反应），因此在用药前先作过敏试验。试验结果为阴性可直

8、接注射破伤风抗毒素，试验结果为阳性者，则应进行脱敏注射，即小剂量分4-5次注射破伤风抗毒素。在用过破伤风抗毒素超过一周者，如再使用，还须重作皮肤试验。抗血清或抗体仍能产生可观察到的标准免疫反应时的稀释度。如抗血清的效价为1:1000，即抗血清稀释1000倍时仍能产生可观察到的免疫反应。效价 第12页，本讲稿共15页指抗体的物理状态及其在体内的滞留时间，以其与抗原指抗体的物理状态及其在体内的滞留时间，以其与抗原反应的多少来表示其免疫效果，称为抗体效价。反应的多少来表示其免疫效果，称为抗体效价。抗体效价测定 抗体效价测定是根据大分子颗粒抗原于其相应的抗体相结合，在适量的电解质存在及一定的温度下，经过一定时间可出现肉眼可见的凝集团块，医学称为凝集反应，一般均以标准抗原测定免疫血清或患者血清中抗体的效价。第13页，本讲稿共15页第14页，本讲稿共15页第15页，本讲稿共15页