医学专题—植物细胞有丝分裂的制片和观察36488.ppt
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1、植物细胞(xbo)有丝分裂的制片与观察第一页,共二十七页。一、实验(shyn)目的1.掌握植物根尖细胞有丝分裂制片技术2.观察植物细胞有丝分裂过程(guchng)中染色体的形 态特征第二页,共二十七页。二、实验(shyn)原理1.植物根尖、茎尖等分生区细胞能进行有丝 分裂2.在有丝分裂过程中,染色体发生规律性动 态变化3.染色体可被碱性染料着色,便于观察4.根据显微镜下观察到的染色体特点可识别(shbi)有丝分裂不同时期 第三页,共二十七页。三、实验(shyn)仪器和药品1.仪器:显微镜、恒温箱、水浴锅、计时器、烧杯、载玻片、盖玻片、剪刀、镊子、滴管、刀片、玻璃(b l)皿2.材料:大蒜3.药
2、品:诺卡氏固定液 1mol/L的HCl作为解 离液、卡宝品红作为染色液第四页,共二十七页。四、实验(shyn)流程1.大蒜(d sun)根尖培养及固定:实验前3-4d,将大蒜掰成蒜瓣摆在铺有四层纱布的托盘里放入温度为25,一定(ydng)湿度的培养箱中培养,每天换水两次待根长到12cm将根剪下用吸水纸吸干水分,将其放入诺卡氏固定液(乙醇:冰醋酸=3:1)固定424小时。固定的作用固定的作用:杀死细胞,固定细胞形态,维持染色体的完整性,提 高染色效果第五页,共二十七页。四、实验(shyn)流程 1.大蒜(d sun)根尖培养及固定 2.装片制作(zhzu)(1 1)解离)解离目目 的:的:使使组
3、织中的中的细胞分离开胞分离开操作:先用95%的酒精漂洗,在HCL中60水浴5min左右(c)解离时,细胞已死亡(a)解离充分是实验成功的必备条件注意:注意:(b)解离过度,细胞结构被破坏解离液:1mol/L的HCl第六页,共二十七页。四、实验(shyn)流程 1.大蒜(d sun)根尖培养及固定 2.装片制作(zhzu)漂洗液:清水(先置于清水中浸泡2min左右)目的:目的:洗去解离液,便于染色洗去解离液,便于染色次数:2-3次注意:若不漂洗解离过度(HCl作用)影响染色(HCl与碱性染料反应)(1)解离(2 2)漂洗)漂洗备注备注:将漂洗好的根尖放入盛有清水的培养皿中将漂洗好的根尖放入盛有清
4、水的培养皿中第七页,共二十七页。四、实验(shyn)流程 1.大蒜根尖培养(piyng)及固定 2.装片制作(zhzu)(1)解离(2)漂洗(3 3)取材)取材部位:根尖2-3mm注意:注意:要去除根尖乳白色根冠(根尖分生区)根尖分生区)第八页,共二十七页。成熟成熟(chngsh)区区伸长伸长(shn chn)区区分生区分生区根冠根冠(n un)根根尖尖的的结结构构第九页,共二十七页。第十页,共二十七页。第十一页,共二十七页。第十二页,共二十七页。第十三页,共二十七页。第十四页,共二十七页。四、实验(shyn)流程 1.大蒜(d sun)根尖培养及固定 2.装片制作(zhzu)(1)解离(3)
5、取材(2)漂洗(4 4)染色)染色操作:用镊子尖把大蒜根尖弄碎(或者将根尖均匀切成三份),用卡宝品红染色,68分钟后,盖上盖玻片,再盖上一个载玻片,用拇指轻压载玻片,随即用一次性筷子进行敲片。目的:使细胞分散开,有利于观察注意:染色时敲片的力度要适中染色剂:卡宝品红染液时间:6-8min(使染色体(质)着色)染色时间过长染色时间过长细胞全被染色,细胞全被染色,无法观察无法观察染色时间过短染色时间过短染色体颜色过浅,染色体颜色过浅,影响观察影响观察第十五页,共二十七页。第十六页,共二十七页。第十七页,共二十七页。第十八页,共二十七页。四、实验四、实验(shyn)流程流程 1.大蒜根尖培养(piy
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