实验二两栖类基本操作精品文稿.ppt

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1、实验二两栖类基本操作第1 页，本讲稿共15 页实验二 两栖类动物基本操作蟾蜍坐骨神经-腓肠肌标本制备蟾蜍坐骨神经-腓神经标本制备第2 页，本讲稿共15 页 实验目的：学习蟾蜍神经、肌肉标本制备方法。掌握两栖类动物基本操作技术。实验原理：两栖类动物的某些生理功能与哺乳类相似。但其离体组织体外存活环境要求较低，容易进行实验操作。第3 页，本讲稿共15 页 实验对象：蟾蜍实验对象：蟾蜍 实验器材和药品：手术器械实验器材和药品：手术器械11套套 任氏液第4 页，本讲稿共15 页实验步骤 破坏脑和脊髓 取蟾蜍一只，用自来水冲洗干净。找枕骨大孔：用探针由头端沿正中线向下滑动即可触及。用探针刺入：先向上损毁

2、脑，然后向下损毁脊髓。如蛙四肢松软，呼吸消失，表明脑和脊髓已完全破坏。第5 页，本讲稿共15 页Video第6 页，本讲稿共15 页 剪除躯干上部及内脏用用粗剪刀粗剪刀在骶髂关节水平以上在骶髂关节水平以上12cm12cm处剪断脊处剪断脊柱，（注意不要损伤腹侧面两侧的坐骨神经干），柱，（注意不要损伤腹侧面两侧的坐骨神经干），持粗剪刀沿脊柱两侧剪除一切内脏及头胸部。持粗剪刀沿脊柱两侧剪除一切内脏及头胸部。第7 页，本讲稿共15 页 剥皮、分离两腿一手捏住脊柱断端（注意不要触及神经），另一一手捏住脊柱断端（注意不要触及神经），另一只手捏住皮肤，用力向下剥掉全部后肢皮肤。只手捏住皮肤，用力向下剥掉全部

3、后肢皮肤。用用粗剪刀粗剪刀将脊柱沿正中线剪开分为两半，标本放将脊柱沿正中线剪开分为两半，标本放在盛有任氏液的培养皿中。在盛有任氏液的培养皿中。完毕洗净手及用过的器械。完毕洗净手及用过的器械。第8 页，本讲稿共15 页Video第9 页，本讲稿共15 页 坐骨神经-腓神经标本制备 将标本腹面朝上，用玻璃分针游离坐骨神经，于近脊柱处穿线结扎并剪断。再将标本背面朝上，手持结扎线将神经轻轻提起，剪断坐骨神经的所有分支，游离神经至腘窝处。剪断内侧的胫神经。在踝关节水平结扎腓神经并剪断。标本浸于任氏液中1020 分钟。第10 页，本讲稿共15 页 坐骨神经-腓肠肌标本制备将游离干净的坐骨神将游离干净的坐骨

4、神经搭于腓肠肌上，在经搭于腓肠肌上，在膝关节周围剪掉全部膝关节周围剪掉全部大腿肌肉并用粗剪刀大腿肌肉并用粗剪刀将股骨刮干净，将股骨刮干净，在股在股骨上中部剪去上段股骨上中部剪去上段股骨骨，即保留下，即保留下2/32/3股股骨。骨。将腓肠肌穿线结扎，将腓肠肌穿线结扎，剪断跟腱。仅保留腓剪断跟腱。仅保留腓肠肌起始点与骨的联肠肌起始点与骨的联系，其余剪除。系，其余剪除。第1 1 页，本讲稿共15 页Video第12 页，本讲稿共15 页 注意事项：制备坐骨神经干标本时应作钝性分离，动作须轻制备坐骨神经干标本时应作钝性分离，动作须轻柔细致，避免过度牵拉或金属器械、手捏碰神经柔细致，避免过度牵拉或金属器械、手捏碰神经干；干；制备标本时应随时对神经干滴加任氏液，以保持制备标本时应随时对神经干滴加任氏液，以保持神经湿润，并将暂不用的神经置于任氏液培养皿神经湿润，并将暂不用的神经置于任氏液培养皿中保存。中保存。第13 页，本讲稿共15 页 实验结果：测定神经兴奋性测定神经兴奋性 测定神经-肌肉标本的兴奋性第14 页，本讲稿共15 页思考题 用什么方法可以测定神经的兴奋性？剥去皮肤的神经或肌肉标本可以用自来水洗吗？第15 页，本讲稿共15 页